陳夢婷+楊蕓+魏艷麗+覃倩菲+杜泓+涂豪慧

摘 要：以紫草素作為研究對象，利用正交試驗法，以紫草的粉碎目數(shù)、乙醇用量、提取時間、提取溫度四因素安排實驗，選取超聲提取法的最佳條件。與傳統(tǒng)方法（回流提取，索氏提取，滲漉）提取紫草素進(jìn)行比較，超聲提取法紫草素的提取率提高了2倍，同時簡化了提取工藝，縮短時間且節(jié)省溶劑用量。

關(guān)鍵詞：提取工藝；紫草素；超聲波提取

紫草作為常用的傳統(tǒng)中藥，是食藥同源性植物，安全性高，國內(nèi)外對于其有效成分紫草素的研究逐漸深入。傳統(tǒng)的涉及加熱回流的提取方法，在提取過程中勢必會造成一部分紫草素的損失。本文通過正交實驗優(yōu)化超聲提取法的最佳條件，并與傳統(tǒng)提取方法進(jìn)行比較。

一、儀器與試藥

Agilent 1200高效液相色譜儀；超聲波清洗器（寧波金達(dá)超聲波儀器廠）；MILLI-Q超純水儀（MILLIPORE公司）；新疆紫草購自成都荷花池中藥材專業(yè)市場，經(jīng)鑒定為為紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma （Royle） Johnst.的干燥根；左旋紫草素對照品（中國食品藥品檢定所，批號110769-200405）；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

二、方法與結(jié)果

1.回流提取法

稱取10目的紫草粗粉10 g，加入無水乙醇100 mL，回流提取3 h，重復(fù)2次，合并提取液，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。乙醇回流提取法的平均提取率為0.545 mg/g，RSD = 2.03%。

2.索氏提取法

稱取10目的紫草粗粉10 g，裝入索氏提取器中，加入100 mL的無水乙醇，虹吸10次后收集提取液，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。乙醇索氏提取法的平均提取率為0.601 mg/g，RSD = 3.22%。

3. 滲漉法

稱取10目的紫草粗粉10 g，用100 mL的無水乙醇浸泡過夜，并以1 mL/min的流速進(jìn)行滲漉。24小時之后收集滲漉液，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。乙醇滲漉法的平均提取率為0.210 mg/g，RSD = 3.83%。

4. 超聲波提取法

運用正交實驗的方法，以紫草的粉碎目數(shù)、加乙醇量、超聲提取時間和提取溫度為四因素，三水平L9（34）正交實驗法安排實驗（表1、2），以提取物中主要的有效成分紫草素的含量作為綜合評分指標(biāo)優(yōu)選的最佳工藝條件進(jìn)行試驗。

稱取4 g的紫草粉末，將其置于錐形瓶中，加入無水乙醇后經(jīng)超聲提取2次。將2次得到的濾液合并，濃縮并定容至50 mL，采用HPLC法測定含量。

對表3數(shù)據(jù)進(jìn)行直觀分析可知，比較4個因素的極差，說明乙醇的用量對紫草素提取率的影響最大，而提取時間的影響最小。通過方差分析（表4），因素B和因素D的F比值大于1，表明各水平之間有顯著性差異，對紫草素提取率有明顯影響。因此可以確定紫草中紫草素的最佳提取工藝為A2B2C2D2。按此工藝條件進(jìn)行試驗，平行操作3次，平均提取率為1.01 mg/g，RSD = 1.52%。

二、結(jié)語

通過正交試驗確定了超聲波提取法提取工藝的最佳條件：紫草粉碎目數(shù)為40目，乙醇量為32 g，提取時間為40 min，提取溫度為50℃。將超聲波提取法與傳統(tǒng)提取工藝相比較，超聲波提取法大幅度簡化紫草中紫草素的提取工藝，時間縮短為傳統(tǒng)提取法耗時的四分之一，且溶劑的消耗量也只需傳統(tǒng)方法的三分之一，大大的提高了提取效率且方法重現(xiàn)性更好。