張緒新 梁 燕 李彥釗 任 剛 孫丕通 鄧東風(通訊作者)

大連大學附屬中山醫(yī)院 大連 116001

旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布在大鼠腦出血模型中的應用研究

張緒新 梁 燕 李彥釗 任 剛 孫丕通 鄧東風(通訊作者)

大連大學附屬中山醫(yī)院 大連 116001

目的 觀察旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布在大鼠腦出血模型中的止血效果。方法 選用健康成年Wistar大鼠，分為自凝組、止血紗布壓迫止血組、旱蓮草超微粉止血組及旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布止血組，每組12只，造成大鼠出血模型，觀察每組的止血時間及再出血率。結(jié)果 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布止血組的平均止血時間短于對照組，再出血率亦低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗止血效果優(yōu)于單一止血材料的應用。

旱蓮草超微粉；止血紗；聯(lián)合

旱蓮草是雙子植物菊科，又稱“墨旱草”，在臨床上是一種常用于治療出血癥的中草藥；止血紗是一類在手術中廣泛應用的生物醫(yī)學材料，其作用主要是加速傷口血液凝固，從而達到快速止血的目的。本實驗研究旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗對大鼠外傷腦出血模型止血效果影響。

1 材料與方法

1．1 實驗動物 Wistar大鼠48只，雌雄不限，體質(zhì)量300～350 g，由大連大學附屬中山醫(yī)院動物實驗中心提供，分籠喂養(yǎng)，每籠6只，保持籠內(nèi)清潔，動物房溫度控制在20～23 ℃。試劑：本實驗過程中止血紗由大連永興醫(yī)用材料有限公司制備，采用純棉纖維經(jīng)羥甲基化處理后滅菌制成，為不可吸收產(chǎn)品。主要結(jié)構(gòu)是羧甲基纖維素。止血紗布重金屬含量不應超過10 μg/g。止血紗布應無皮膚致敏反應，無皮膚刺激反應，細胞毒性反應不超過稍微細胞毒性。旱蓮草超微粉委托大連鴻峰生物科技有限公司制備。經(jīng)掃描電鏡檢測其粒徑5～1 0 μm，呈正態(tài)分布。

1．2 實驗方法 實驗前禁食12 h，自由飲水。10%水合氯醛(300 mg/kg)腹腔注射麻醉后，將大鼠固定在鼠板上，備皮，消毒后沿頭部中線縱行切開皮膚，在右側(cè)頂骨(距矢狀縫，冠狀縫各5 mm)處用磨鉆磨出一大小約5 mm×5mm的骨窗，保持硬膜完整。應用外科縫合針輕輕劃開硬膜，充分暴露腦組織，不傷及皮層，如硬膜出血，用濕鹽水棉片壓迫止血。應用神經(jīng)外科顯微取瘤鑷夾取大腦皮層約2 mm×2 mm×1 mm，造成外傷出血模型。

1．3 分組 Wistar大鼠分為4組，每組12只，A組為自凝組；B組為采用止血紗布壓迫止血組；C組為采用旱蓮草超微粉止血組；D組為采用旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗布止血組。

1．4 標本采集與觀察指標 大鼠造成腦出血模型，完全止血后縫合切口。術后給予大鼠正常進食，不能進食者糖水灌胃。于術后5 d、10 d、15 d分別處死大鼠。主要觀察止血效果，用秒表記錄完全止血時間，即創(chuàng)面彌漫滲血被吸凈后局部給予止血劑或未給予任何處理至創(chuàng)面無任何形式出血時所需的時間(計算各組平均止血時間)；另外，觀察不同組間術后再出血發(fā)生情況。

2 結(jié)果

2．1 各組大鼠平均止血時間比較 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗止血時間明顯小于其他3組對照組。見表1。

表1 各組大鼠平均止血時間比較

注：與A組比較，aP<0.01；與B組比較，bP<0.01；與C組比較，cP<0.05

2．2 各組大鼠再出血發(fā)生率比較 旱蓮草超微粉聯(lián)合止血紗術后大鼠再出血發(fā)生率低于其他3組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表2 各組大鼠再出血率比較 (n)

3 討論

顱腦手術術中的止血至關重要，止血除與手術技術密切相關外，還與所采用的局部止血材料有關。有效的止血材料不僅可以在術中迅速止血，減少手術時間，還可以降低術后再出血并發(fā)癥的發(fā)生。在顱腦手術中，目前大血管等一般性出血已有較好的止血方法，如用雙極電凝及動脈瘤夾夾閉等，但對腦組織表面及創(chuàng)面出血的治療仍是神經(jīng)外科領域面臨的難題[1-4]，常借助于外用止血裝置，如明膠海綿、止血酶、纖維蛋白粘膠、高分子粘合膠等。然而，各種止血材料各有其優(yōu)劣點，國內(nèi)外研發(fā)公司均致力于研究出新型止血材料，這種可吸收材料能對腦組織表面出血及創(chuàng)面滲血能迅速止血。美國Medafor公司研制的Arista止血粉，是用馬鈴薯為原料制備而成的淀粉微球，在臨床治療中雖然具有較好的止血效果，但其價格昂貴[5]，國際上認為理想的止血材料[6]需具備以下特點：不僅止血迅速，還可以體內(nèi)降解吸收；使用簡便，操作容易；質(zhì)量體積小，易于保存；無潛在的病源性；價格低；不增加感染風險；不影響組織愈合，甚至能促進組織愈合等。

旱蓮草是雙子葉植物菊科，又稱“墨旱蓮”，在我國分布極其廣泛且生長環(huán)境要求低。不僅來源廣泛，且安全可靠，因其止血效果顯著，被廣泛用于治療出血癥，現(xiàn)代藥理學研究表明，旱蓮草具有止血、抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等多種作用。

本研究設計大鼠腦出血模型，通過不同止血材料止血效果比較得出旱蓮草組平均止血時間及術后再出血發(fā)生率優(yōu)于其他組。王建[7]通過對不同劑量的墨旱蓮水煎劑對小鼠熱盛胃出血的止血作用進行研究表明，墨旱蓮止血機制與提高血小板數(shù)量、血小板聚集率、纖維蛋白原含量，縮短凝血酶原及部分凝血活酶時間有關。凝血酶原時間和部分凝血活酶時間的影響比血小板與纖維蛋白原的影響更顯著。劉世望等[8]將旱蓮草提取物溶液分為不同劑量后與抗凝兔血混合，測凝血時間，發(fā)現(xiàn)旱蓮草提取物濃度為0.5%時，有最強促凝血活性，凝血時間16 s，凝血時間縮短率99.6%，證明旱蓮草提取物有顯著的止血效果和促凝血活性，中溫水提取物在提取液用量0.03 mL/坑時凝血時間最短，促凝血活性最強，研究表明，天然黃酮類物質(zhì)可能是旱蓮草最主要的天然止血活性成分[9-12]。

止血紗的止血機制是以紗布網(wǎng)眼作為基質(zhì)，血小板遇到能迅速聚集，進而迅速凝結(jié)血塊，而達到止血目的，通過物理作用迅速使血液凝固，而不依賴于人體內(nèi)的凝血機制，研究表明，止血紗能有效控制微小、小血管出血[13-14]。本研究結(jié)果表明止血紗聯(lián)合旱蓮草超微粉效果優(yōu)于單一止血效果。

[1] Achneck HE，Sileshi B，Jamiolkowski RM，et al．A comprehensive review of topical hemostatic agents：efficacy and recommendations for use[J]．Ann Surg，2010， 25(1)：217-228．

[2] Gegel B，Burgert J，Cooley B，et al．The effects of Bleed Arrest，Celox and Trauma Dex on hemorrhage control in a porcine model[J]．J Surg Res，2010，16(4)：el25-el29．

[3] Recinos G，Inaba K，Dubose J，et al．Local and systemic hemostatics in trauma：a review[J]．Ulus Travma Acil Cerrahi Derg，2008，14(2)：175-181．

[4] Sondeen JL，Pusateri AE，Coppes VG，et al．Comparison of 10 different hemostatic dressings in an aortic injury[J]．J Trauma，2003，54(3)：280-285．

[5] Humphreys MR，Lingeman JE，Terry C，et al．Renal injury and the application of polysaccharide hemospheres：a laparoscopic experimental model[J]．J Endourol，2008，22(5)：1 371-1 381．

[6] Peng HT．Novel wound sealants：biomaterials and applications[J]．Expert Rev Med Devices，2010，7(5)：639．

[7] 王建．墨旱蓮對小鼠熱盛胃出血止血作用的研究[D]．錦州：錦州醫(yī)學院，2005．

[8] 劉世望，徐艷霞，徐霞玲，等．墨旱蓮葉水提物止血活性初探[J]．安徽農(nóng)業(yè)科學，2008，36(31)：13 673-13 674．

[9] 趙越平，湯海峰，蔣永培，等．墨旱蓮化學成分的研究[J]．中國藥學雜志，2002，37(1)：17-19．

[10] Le MK，Yang H，Sung SH，et al．Antiproliferative activity of triterpenoids from Ecliptaprostrate on hepatic stellate cells[J]．Phytomedicine，2008，15(10)：775-780．

[11] Zhang CF，Sun ZH，Zhang D，et al．Sulphur compounds from the aerialparts of Eclipta prostrate[J]．Biochem Syst Ecol，2010，38(6)：1 253-1 256．

[12] 袁繼承，蔣永和，沈志濱．旱蓮草化學成分的研究進展[J]．亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5(1)：125-127．

[13] Krizova P，Masova L，Suttnar J，et al．The influence of intrinsic coagulation pathway on blood platelets activation by oxidized cellulose[J]．J Biomed Mater A，2012，82(2)：274-280．

[14] 余雪松，黃赤兵，張艮甫，等．局部止血材料臨床應用現(xiàn)狀[J]．創(chuàng)傷外科雜志，2010，14(6)：23-26．

(收稿2016-10-09)

大衛(wèi)科教發(fā)[2015]1號，編號98

R-332

A

1673-5110(2017)03-0045-03