李之鄉(xiāng), 王偉繼, 胡玉龍, 呂 丁, 吳歡歡, 欒 生, 孔 杰

?

養(yǎng)殖水體中氨氮對大菱鲆的急性毒性效應(yīng)研究

李之鄉(xiāng)1, 2, 3, 王偉繼2, 3, 胡玉龍2, 3, 呂 丁2, 3, 吳歡歡1, 2, 3, 欒 生2, 3, 孔 杰1, 2, 3

(1. 上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院, 上海 201306; 2. 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院 黃海水產(chǎn)研究所 農(nóng)業(yè)部海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展重點(diǎn)實(shí)驗室, 山東 青島 266071; 3. 青島海洋科學(xué)與技術(shù)國家實(shí)驗室 海洋漁業(yè)科學(xué)與食物產(chǎn)出過程功能實(shí)驗室, 山東 青島 266071)

為了評估大菱鲆()耐氨氮性狀的遺傳參數(shù)和為循環(huán)水養(yǎng)殖大菱鲆提供科學(xué)指導(dǎo), 作者研究了養(yǎng)殖海水中氨氮對4月齡和8月齡大菱鲆的急性毒性效應(yīng), 同時對比了氨氮對白化和正常個體、雌性和雄性個體的急性毒性效應(yīng)差別。結(jié)果表明: 非離子氨對4月齡大菱鲆的24、48、72、96 h LC50分別為2.19、1.94、1.80、1.72 mg/L, 對8月齡大菱鲆的24、48、72、96 h LC50分別為3.64、3.02、2.93、2.86 mg/L, 非離子氨對4月齡和8月齡大菱鲆的安全質(zhì)量濃度分別為0.17和0.29 mg/L; 氨氮對白化和正常大菱鲆以及雌性和雄性大菱鲆的急性毒性效應(yīng)均沒有顯著性差異, 研究結(jié)果為進(jìn)一步選育大菱鲆的耐氨氮品系提供科學(xué)依據(jù)。

大菱鲆(); 苗種; 氨氮; 急性毒性; 半致死濃度; 白化

大菱鲆()原產(chǎn)于歐洲, 自然分布于北起冰島、南至摩洛哥附近的海域, 屬于菱鲆科(Scophthalmidae)、菱鲆屬()[1], 具有生長快、肉質(zhì)細(xì)嫩、營養(yǎng)豐富、經(jīng)濟(jì)價值高和市場優(yōu)勢明顯等優(yōu)點(diǎn)[2]。1992年從英國引入中國, 并于1999年成功培育出第一批大菱鲆幼苗, 逐漸形成了“溫室大棚+深井海水”的流水式工廠化養(yǎng)殖模式。然而該養(yǎng)殖模式因大面積抽取地下水資源, 使地下水水位大幅度下降, 已造成嚴(yán)重浪費(fèi)[3-5]。

封閉式循環(huán)水養(yǎng)殖模式與“溫室大棚+深井海水”的養(yǎng)殖模式相比, 具有節(jié)水、環(huán)保和高產(chǎn)等優(yōu)勢, 因此, 發(fā)展封閉式循環(huán)水養(yǎng)殖是實(shí)現(xiàn)漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展的必然要求[6-7]。然而中國目前的循環(huán)水水處理工藝尚不成熟[8], 在循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中, 由于魚的排泄物、殘餌等有機(jī)物的長期積累, 極易導(dǎo)致水體中的氨氮含量過高。氨氮是水產(chǎn)養(yǎng)殖中制約魚類生長的主要環(huán)境因子之一, 高濃度的氨氮能夠抑制魚類生長和存活, 對魚的生理指標(biāo)和組織器官起到負(fù)面作用, 同時能夠誘發(fā)多種疾病, 對魚體造成傷害[9]。因而研究在循環(huán)水養(yǎng)殖條件下氨氮對大菱鲆的毒性效應(yīng), 選育大菱鲆耐氨氮品系非常重要。

在實(shí)際生產(chǎn)中, 大菱鲆一般3~4月齡進(jìn)行苗種培育, 14~18月齡達(dá)到上市規(guī)格[10]。此外, 大菱鲆在9~33月齡雌性個體體質(zhì)量普遍大于雄性個體, 并且隨著養(yǎng)殖時間的延長, 這種差異逐漸增大[11]。因此, 為保證實(shí)驗所用的雌雄大菱鲆個體規(guī)格一致, 并在解剖時能夠準(zhǔn)確辨認(rèn)性別, 本研究選擇4月齡(苗種期)和8月齡(養(yǎng)殖中期)大菱鲆為實(shí)驗材料。采用半致死濃度(Median lethal concentration, LC50)作為衡量水體中氨氮對大菱鲆急性毒性作用大小的參數(shù)[12], 并以存活時間為依據(jù), 比較白化和正常以及雌性和雄性大菱鲆的耐氨氮能力, 最后對大菱鲆的體長、體質(zhì)量、日齡以及氨氮耐受能力的相關(guān)性進(jìn)行分析。以期為大菱鲆的循環(huán)水養(yǎng)殖技術(shù)提供參考, 為下一步評估大菱鲆耐氨氮性狀遺傳參數(shù), 選育大菱鲆耐氨氮品系提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗材料

實(shí)驗在山東海陽黃海水產(chǎn)有限公司大菱鲆育苗車間進(jìn)行。實(shí)驗魚采用了180尾體質(zhì)量為(115.92± 20.39)g的8月齡大菱鲆和360尾體質(zhì)量為(6.53±1.14)g的4月齡大菱鲆。實(shí)驗在半徑為0.5 m、高0.7 m的圓形玻璃鋼(Fiber Reinforced Plastics, FRP)容器中進(jìn)行, 每個容器中加入240 L砂濾海水。實(shí)驗所需氨氮濃度使用NH4Cl分析純(天津北辰方正試劑廠)配制, 總氨氮濃度依據(jù)NH4Cl中N的含量計算求得。實(shí)驗時稱取所需要NH4Cl的量, 在海水中充分溶解后攪拌均勻。

1.2 實(shí)驗方法

正式實(shí)驗前先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗, 摸索氨氮對大菱鲆致死的大致濃度范圍。

實(shí)驗開始之前停食3 d, 排空大菱鲆體內(nèi)糞便, 最大限度地減少大菱鲆代謝對實(shí)驗結(jié)果所造成的影響。根據(jù)預(yù)實(shí)驗結(jié)果分別對4月齡大菱鲆和8月齡大菱鲆按等對數(shù)間距設(shè)置5個濃度組并設(shè)置對照(表1),每個濃度設(shè)3個重復(fù)。4月齡大菱鲆每個重復(fù)20尾, 其中10尾白化魚, 10尾正常魚。8月齡大菱鲆每個重復(fù)10尾, 其中2~3尾白化魚, 其余為正常魚。而4月齡大菱鲆解剖時辨認(rèn)性別比較困難, 故只解剖了8月齡大菱鲆, 記錄雌雄數(shù)據(jù)。

表1 氨氮對大菱鲆急性毒性實(shí)驗濃度設(shè)置

注: 表中NH3-Nm表示非離子氨濃度, NH3-Nt表示總氨氮質(zhì)量濃度, 單位: mg/L

實(shí)驗采用半靜水式生物測試法[13], 實(shí)驗水溫維持在22.5℃±1℃, pH8.0~8.1, 鹽度30, 溶解氧維持在5.5~7.0 mg/L。實(shí)驗過程中每24 h更換1次相應(yīng)NH4Cl濃度的海水, 每天的換水量為100%, 實(shí)驗期間不投餌。實(shí)驗開始第1天每1 h觀察1次, 后期每2 h觀察1次魚的死亡情況, 及時將死亡魚撈出, 解剖辨別雌雄并記錄死亡時間、體長、體質(zhì)量以及是否白化等數(shù)據(jù)。

最后根據(jù)4月齡大菱鲆的急性毒性實(shí)驗所計算出的72 h半致死濃度對954尾4月齡大菱鲆幼魚進(jìn)行氨氮脅迫實(shí)驗。實(shí)驗在半徑為1.2 m、高0.6 m的玻璃鋼容器中進(jìn)行, 并維持與上述相同的實(shí)驗條件, 直至所有個體全部死亡。

1.3 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

1.3.1 半致死濃度的計算

半致死濃度的計算采用改進(jìn)寇氏法[12]:

LD50的95%可信限=lg–1(lgLD50±1.96×x50) (3)

安全濃度(S)計算公式:S=96h LC50×0.1

1.3.2 非離子氨濃度的計算

總氨氮與非離子氨的濃度按如下公式換算[14]:

pa·T=9.245+0.002 949+0.032 4(298–) (6)

1.3.3 數(shù)據(jù)分析

將在相同實(shí)驗條件下大菱鲆的存活時間作為耐氨氮能力的指標(biāo)。分別將D、E、F組中的3個重復(fù)數(shù)據(jù)合并到一起, 白化用0表示, 正常用1表示。雌性用0表示, 雄性用1表示。使用SPSS19.0中的Kaplan-Meier生存分析模型分別對合并后的D、E、F組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析, 分別比較白化和正常以及雌性和雄性大菱鲆在相同氨氮條件下的中位生存時間是否具有差異性(<0.01, 差異極顯著,<0.05, 差異顯著)。

使用SPSS19.0對測得的4月齡大菱鲆體長、體質(zhì)量、日齡和存活時間進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析。

2 實(shí)驗結(jié)果與分析

2.1 氨氮對4月齡和8月齡大菱鲆的急性毒性作用

由氨氮對大菱鲆的急性毒性實(shí)驗結(jié)果可知(表2), 在相同的時間內(nèi), 氨氮濃度越高, 大菱鲆死亡數(shù)量越多; 在相同的NH4Cl濃度下, 隨著氨氮脅迫時間的延長, 大菱鲆死亡數(shù)量逐漸增多。各重復(fù)組之間的死亡情況基本一致, 采用各組的平均死亡率來計算半致死濃度。

通過計算得到4月齡大菱鲆和8月齡大菱鲆的半致死濃度如表3所示。隨著氨氮濃度的增加, 其毒性逐漸增強(qiáng)。非離子氨對4月齡大菱鲆的24、48、72、96 h LC50分別為2.19、1.94、1.80、1.72 mg/L。非離子氨對8月齡大菱鲆的24、48、72、96 h LC50分別為3.64、3.02、2.93、2.86 mg/L。非離子氨對4月齡和8月齡大菱鲆的安全濃度分別為0.17和0.29 mg/L, 8月齡大菱鲆非離子氨的安全濃度是4月齡大菱鲆的1.71倍。

表2 氨氮對4月齡和8月齡大菱鲆的急性毒性實(shí)驗結(jié)果

表3 氨氮對大菱鲆的半致死濃度(95%可信限)和安全濃度(mg/L)

注: 表中NH3-Nm為非離子氨; NH3-Nt為總氨氮

2.2 氨氮對正常和白化大菱鲆急性毒性作用的比較

分別選取死亡數(shù)量較多的D、E、F組4月齡和8月齡大菱鲆的死亡數(shù)據(jù), 比較白化魚和正常魚對氨氮的耐受能力。

圖1和圖2分別列出了所用實(shí)驗組4月齡、8月齡白化和正常大菱鲆存活時間的中位數(shù)、第一四分位數(shù)、第三四分位數(shù)、最小值、最大值和異常值。由圖1、圖2可見, 隨著氨氮濃度的升高, 其存活時間越短。其中在第D實(shí)驗組中白化與正常大菱鲆的存活時間箱線圖形態(tài)稍有不同, E、F組中基本一致。表4分別列出了4月齡、8月齡大菱鲆各分析組中白化和正常魚的數(shù)量以及平均體質(zhì)量。統(tǒng)計分析表明, 在相同的氨氮濃度條件下, 4月齡、8月齡的白化與正常大菱鲆, 其存活時間均沒有顯著性差異, 即白化大菱鲆和正常大菱鲆對氨氮的耐受能力沒有顯著性差異。

圖1 四月齡白化和正常大菱鲆存活時間的箱線圖

圖2 八月齡白化和正常大菱鲆存活時間的箱線圖

2.3 氨氮對雌雄大菱鲆急性毒性作用的比較

選取8月齡大菱鲆的D、E、F組數(shù)據(jù), 比較雌性和雄性大菱鲆對氨氮耐受能力的差異性。

從圖3可見, 在第D、F組實(shí)驗中雄性大菱鲆耐氨氮存活時間的下四分位數(shù)要明顯比雌性大菱鲆的低, 而E兩組中的盒形圖基本一致。表5分別列出了8月齡大菱鲆各分析組中雌性和雄性魚的數(shù)量以及平均體質(zhì)量, 統(tǒng)計分析結(jié)果表明, 8月齡雌性和雄性大菱鲆之間對氨氮的耐受能力并沒有顯著性差異。

2.4 體質(zhì)量、體長、日齡與大菱鲆耐氨氮的相關(guān)性比較

圖4給出了954尾大菱鲆在39.06 mg/L的氨氮質(zhì)量濃度下其存活時間與體質(zhì)量的關(guān)系。從圖4中可以看出, 大菱鲆的存活時間在60~128 h之間比較集中, 體質(zhì)量與存活時間沒有相關(guān)性。對大菱鲆的體質(zhì)量、體長、日齡和存活時間進(jìn)行相關(guān)性分析, 其結(jié)果如表6所示。由分析結(jié)果可知, 大菱鲆的體質(zhì)量和體長、體質(zhì)量和日齡、體長和日齡均呈極顯著正相關(guān)。而大菱鲆在氨氮脅迫下的存活時間和體質(zhì)量、存活時間和體長、存活時間和日齡均表現(xiàn)為不相關(guān)(||<0.3)[15]。

表4 不同濃度條件下4月齡、8月齡大菱鲆白化和正常個體的數(shù)量及平均體質(zhì)量

圖3 八月齡雌性和雄性大菱鲆存活時間的箱線圖

表5 不同濃度條件下8月齡大菱鲆雌性和雄性個體的數(shù)量及平均體質(zhì)量

圖4 大菱鲆耐氨氮存活時間與體質(zhì)量的關(guān)系

3 討論

3.1 氨氮的急性毒性效應(yīng)評價

表6 大菱鲆急性毒性實(shí)驗存活時間、體重、體長和日齡的相關(guān)性分析

**. 相關(guān)性在0.01的水平上有顯著性(雙尾)

不同的水生生物對非離子氨的耐受能力有較大的差異, 而同種水生生物的不同發(fā)育階段對非離子氨的耐受能力同樣差別比較明顯。已有研究表明, 羅氏沼蝦()[19]、黃顙魚()[20]、鯉魚()[21]、史氏鱘()[22]、斜帶石斑魚()[23]等水產(chǎn)動物對非離子氨的耐受能力均有所差別, 并且其規(guī)格越大, 對氨氮的耐受能力越強(qiáng)。在本實(shí)驗中得出8月齡大菱鲆的24、48、72、96 h等各時間段的半致死濃度均比4月齡大菱鲆的要高, 說明8月齡大菱鲆比4月齡大菱鲆對氨氮的耐受能力更強(qiáng)。這與上述水產(chǎn)動物其規(guī)格越大, 耐氨氮能力越強(qiáng)的研究結(jié)果相一致。而在本實(shí)驗中對954尾大菱鲆的急性毒性實(shí)驗結(jié)果得出, 大菱鲆的耐氨氮性狀與大菱鲆的體長、體質(zhì)量等生長性狀沒有相關(guān)性?？赡苁且驗椴捎玫?54尾4月齡大菱鲆規(guī)格差異相對較小, 對氨氮的耐受能力沒有表現(xiàn)出顯著性差異。

曲克明等[24]在水溫16℃±1℃的條件下研究了非離子氨對大菱鲆(體長2.0~2.4 cm)的96 h LC50值為1.14 mg/L, 其結(jié)果與本實(shí)驗在22.5℃±1℃條件下得出的非離子氨對大菱鲆(體長4~7 cm)的96 h LC50值(1.94 mg/L)有所差別?？赡苤饕脑蚴囚~的規(guī)格和實(shí)驗水體溫度不一樣導(dǎo)致的。因為氨氮的毒性與養(yǎng)殖水體的pH、溫度以及溶解氧等密切相關(guān)。離子氨轉(zhuǎn)化為非離子氨是一個吸熱的過程, 養(yǎng)殖水體溫度越高, 非離子氨所占的比例越大, 氨氮對水產(chǎn)動物的毒性越強(qiáng)[25]。

3.2 非離子氨的安全濃度評價

非離子氨對魚類的影響有急性毒性效應(yīng)和慢性毒性效應(yīng)。而在實(shí)際生產(chǎn)中比較常見的是慢性毒性效應(yīng)。在大菱鲆的長期養(yǎng)殖過程中, 海水中氨氮濃度過高, 會顯著降低大菱鲆的生長速度、成活率以及飼料利用率等[26]。Foss等[27]和Ruyet等[26]分別報道了當(dāng)非離子氨質(zhì)量濃度超過0.17和0.21 mg/L時, 會對大菱鲆幼魚的生長產(chǎn)生負(fù)面影響。這與作者研究的非離子氨對4月齡大菱鲆的安全質(zhì)量濃度(0.17 mg/L)基本一致。因此, 在大菱鲆的長期養(yǎng)殖過程中應(yīng)該對非離子氨的濃度進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測, 當(dāng)非離子氨的質(zhì)量濃度超過0.17 mg/L時應(yīng)該采取緊急措施, 降低水體中的氨氮含量, 避免水體環(huán)境對魚體造成傷害。

3.3 白化和正常以及雌性和雄性大菱鲆對氨氮的耐受性比較

白化病是大菱鲆海水養(yǎng)殖中的一種常見疾病, 有關(guān)大菱鲆白化病的機(jī)制目前尚不清楚[28]。白化魚被消費(fèi)者認(rèn)為是劣質(zhì)產(chǎn)品, 其市場價值遠(yuǎn)低于正常魚[29]。然而在實(shí)際養(yǎng)殖中, 部分從業(yè)人員根據(jù)直觀觀察, 認(rèn)為白化大菱鲆在生長速度和抗病方面均要優(yōu)于同批次的正常大菱鲆[30]。已有研究表明, 白化和正常大菱鲆個體在生長速度和總體營養(yǎng)成分方面并沒有顯著性差異[30-31]。而關(guān)于白化和正常大菱鲆的抗性比較, 目前還沒有研究。在本實(shí)驗中對正常和白化大菱鲆以及雌性和雄性大菱鲆的耐氨氮能力進(jìn)行了比較, 結(jié)果表明兩者之間均沒有差異顯著性。

本研究首次對白化和正常大菱鲆個體以及雌性和雄性大菱鲆個體的耐氨氮性狀進(jìn)行了比較, 并且計算了在22.5℃±1℃條件下氨氮對不同發(fā)育階段大菱鲆個體的半致死濃度和安全質(zhì)量濃度。研究結(jié)果為循環(huán)水養(yǎng)殖大菱鲆提供科學(xué)指導(dǎo), 并且對大菱鲆耐氨氮品種的選育具有重要參考價值。

[1] 雷霽霖. 大菱鲆的引進(jìn)和新型養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[J]. 中國漁業(yè)經(jīng)濟(jì), 2003, 5: 16. Li Jilin. Introducing intoand development of new patter of aquaculture[J]. Chinese Fisheries Economics, 2003, 5: 16-16.

[2] 門強(qiáng), 雷霽霖, 王印庚. 大菱鲆的生物學(xué)特性和苗種生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)[J]. 海洋科學(xué), 2004, 28(3): 1-4. Men Qiang, Lei Jilin, Wang Yingeng. Biology and critical breeding techniques of turbot,[J]. Marine Science, 2004, 28(3): 1-4.

[3] 王波, 雷霽霖, 張榭令, 等. 工廠化養(yǎng)殖的大菱鲆生長特性[J]. 水產(chǎn)學(xué)報, 2003, 27(4): 358-363. Wang Bo, Lei Jilin, Zhang Xieling, et al. Growth characteristics of intensively cultured[J]. Journal of Fisheries of China, 2003, 27(4): 358- 363.

[4] 雷霽霖, 門強(qiáng), 王印庚, 等. 大菱鲆“溫室大棚+深井海水”工廠化養(yǎng)殖模式[J]. 海洋水產(chǎn)研究, 2002, 23(4): 1-7. Lei Jilin, Men Qiang, Wang Yingeng, et al. Review of “green house+deep well seawater” industrialized culture pattern of turbot ()[J]. Marine Fisheries Research, 2002, 23(4): 1-7

[5] 米娜莎, 王棟. 中國大菱鲆產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢分析[J].海洋科學(xué), 2011, 36(6): 96-99. Mi Nasha, Wang Dong. Status of turbot industry and its development trend in China[J]. Marine Science, 2011, 36(6): 96-99.

[6] Martins C I M, Eding E H, Verdegem M C J, et al. New developments in recirculating aquaculture systems in Europe: A perspective on environmental sustainability[J]. Aquacultural Engineering, 2010, 43(3): 83-93.

[7] Summerfelt S T, Wilton G, Roberts D, et al. Developments in recirculating systems for Arctic char culture in North America[J]. Aquacultural Engineering, 2004, 30(1-2): 31-71.

[8] 陳軍, 徐皓, 倪琦, 等. 我國工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖發(fā)展研究報告[J]. 漁業(yè)現(xiàn)代化, 2009, 36(4): 1-7. Chen Jun, Xu Hao, Ni Qi, et al. The study report on the development of China industrial recirculating aquaculture[J]. Fishery Modernization, 2009, 36(4): 1-7.

[9] Foss A, Imsland A K, Roth B, et al. Effects of chronic and periodic exposure to ammonia on growth and blood physiology in juvenile turbot ()[J]. Aquaculture, 2009, 296(s 1-2): 45-50.

[10] 雷霽霖. 大菱鲆養(yǎng)殖技術(shù)[M]. 上海: 上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 2003: 13-15. Lei Jilin. Turbot farming techniques[M]. Shang Hai: Shanghai Scientific & Technical Publishers, 2003, 13-15.

[11] 王新安, 馬愛軍, 黃智慧, 等. 大菱鲆選育家系雌、雄群體的生長發(fā)育差異[J]. 水產(chǎn)學(xué)報, 2014, 38(4): 464-469. Wang Xinan, Ma Aijun, Huang Zhihui, et al. Developmental differences between female and male groups in turbot () breeding families[J]. Journal of Fisheries of China, 2014, 38(4): 464-469.

[12] 沈建忠. 動物毒理學(xué)[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2002: 83-93. Shen Jianzhong. Animal toxicology[M]. Beijing: China Agriculture Press, 2002: 83-93.

[13] 周永欣, 章宗涉. 水生生物毒性試驗方法[M]. 北京: 農(nóng)業(yè)出版社, 1989: 31-33. Zhou Yongxin, Zhang Zongshe. Toxicity tests with aquatic organisms[M]. Beijing: Agriculture Press, 1989: 31-33.

[14] GB 3097-1997. 中華人民共和國海水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)[S]. GB 3097-1997. Sea water quality standard[S].

[15] 楊艷萍. 統(tǒng)計學(xué)[M]. 鄭州: 河南人民出版社, 2005: 287-293. Yang Yanping. Statistics[M]. Zhengzhou: Henan People’s Publishing House, 2005: 287-293.

[16] 鄒玲媛, 承憲成. 非離子氨(UIA)水質(zhì)評價指標(biāo)及換算方法[J]. 水產(chǎn)科學(xué), 2002, 21(2): 42-43. Zou Lingyuan, Cheng Xiancheng. Water quality eveluation index and conversion method of UIA[J]. Fisheries Science, 2002, 21(2): 42-43.

[17] Armstrong D A, Colt J E. Interaction of ionized and unionized ammonia on short-term survival and growth of prawn larvae,[J]. Biological Bulletin, 1978, 154(1): 15-31.

[18] 殷蕊, 宮春光. 工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖中若干問題的探討[J]. 河北漁業(yè), 2013, 7: 62-64. Yin Rui, Gong Chunguang. Discussion on some issues of the circulating water aquaculture[J]. Hebei Fisheries, 2013, 7: 62-64.

[19] 陳佳毅, 孫龍生, 吳駿, 等. 氨氮和亞硝氮對不同發(fā)育階段羅氏沼蝦幼體的急性毒性研究[J]. 水產(chǎn)養(yǎng)殖, 2015, 36(10): 1-6. Chen Jiayi, Sun Longsheng, Wu Jun, et al. Acute toxic effects of NH3-N and NO2-N onLarvaat different developmental stages[J]. Journal of Aquaculture, 2015, 36(10): 1-6.

[20] 李波. 氨氮和亞硝酸鹽對黃顙魚的毒性研究[D]. 武漢: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2010: 7-19.Li Bo. Effects of ammonia and nitrite toxicity on yellow catfish[D]. Wuhan: Huazhong Agricultural University, 2010: 7-19.

[21] 鄭永華, 胡祥文, 劉忠東, 等. 氨對鯉魚苗的急性毒性[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報, 1998, 11(2): 80-85. Zheng Yonghua, Hu Xiangwen, Liu Zhongdong, et al. An acute toxicity of ammonia on fry of carp[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences, 1998, 11(2): 80-85.

[22] 劉建魁, 劉立志, 趙文, 等. 非離子氨和氨氮對不同規(guī)格史氏鱘幼魚的急性毒性及安全濃度評價[J]. 大連海洋大學(xué)學(xué)報, 2014, 29(2): 175-178. Liu Jiankui, Liu Lizhi, Zhao Wen, et al. Acute toxicity and safe concentration of non-ionic ammonia and ammonia nitrogen to juvenile Amur sturgeonwith different sizes[J]. Journal of Dalian Ocean University, 2014, 29(2): 175-178.

[23] 鄭樂云. 氨氮和亞硝酸鹽對斜帶石斑魚苗的急性毒性效應(yīng)[J]. 海洋科學(xué), 2012, 36(5): 81-86. Zheng Leyun. Acute toxic effects of ammonia and nitrite onfry[J]. Marine Science, 2012, 36(5): 81-86.

[24] 曲克明, 徐勇, 馬紹賽, 等. 不同溶解氧條件下亞硝酸鹽和非離子氨對大菱鲆的急性毒性效應(yīng)[J]. 海洋水產(chǎn)研究, 2007, 28(4): 83-88. Qu Keming, Xu Yong, Ma Shaosai, et al. Acute toxic effects of nitrite and non-ion ammonia on turbot ()at different DO levels[J]. Marine Fisheries Research, 2007, 28(4): 83-88.

[25] 劉娥. 草幼魚對氨氮脅迫的形態(tài)及生理學(xué)響應(yīng)[D]. 濟(jì)南: 山東大學(xué), 2013: 3-4. Liu E. Morphology and physiological response of juvenile grass carp to ammonia nitrogen stress[D]. Jinan: Shandong University, 2013: 3-4.

[26] Ruyet P L, Galland R, Roux A L, et al. Chronic ammonia toxicity in juvenile turbot ()[J]. Aquaculture, 1997, 154(2): 155-171.

[27] Foss A, Imsland A K, Roth B, et al. Interactive effects of oxygen saturation and ammonia on growth and blood physiology in juvenile turbot[J]. Aquaculture, 2007, 271(1): 244-251.

[28] 黃冰, 郭華榮, 張士璀. 魚類白化病的研究進(jìn)展[J]. 海洋科學(xué), 2003, 27(5): 11-14. Huang Bing, Guo Huarong, Zhang Shicui. Advances on the studies of fish albinism[J]. Marine Sciences, 2003, 27(5): 11-14.

[29] 馬愛軍, 雷霽霖, 陳四清, 等. 鲆鰈類白化機(jī)理的研究進(jìn)展[J]. 海洋水產(chǎn)研究, 2003, 24(3): 80-85. Ma Aijun, Lei Jilin, Chen Siqing, et al. Progress of research on albinism mechanisms of flatfish[J]. Marine Fisheries Research, 2003, 24(3): 80-85.

[30] 關(guān)健, 鄭永允, 劉洪軍, 等. 大菱鲆子二代家系白化與正常幼魚生長及形態(tài)學(xué)差異[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2011, 18(6): 1286-1292. Guan Jian, Zheng Yongyun, Liu Hongjun, et al. Growth and morphology of albino and normal F2juveniles from different families of turbot[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2011, 18(6): 1286-1292.

[31] 郭恩棉, 呂亮, 王鑫, 等. 白化大菱鲆與正常大菱鲆營養(yǎng)價值的比較[J]. 萊陽農(nóng)學(xué)院學(xué)報, 2006, 23(1): 34-36. Guo Enmian, Lü Liang, Wang Xin, et al. The comparison of nutritive value between normally pigmented and albinistic turbot[J]. Journal of Laiyang Agricultural College (Natural Science), 2006, 23(1): 34-36.

(本文編輯: 譚雪靜)

Acute toxicity of ammonia nitrogen on turbot ()

LI Zhi-xiang1, 2, 3, WANG Wei-ji2, 3, HU Yu-long2, 3, Lü Ding2, 3, WU Huan-huan1, 2, 3, LUAN Sheng2, 3, KONG Jie1, 2, 3

(1. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China; 2. Key Laboratory of Sustainable Development of Marine Fisheries, Ministry of Agriculture, Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shandong, Qingdao 266071, China; 3. Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology, Shandong, Qingdao 266071, China)

In this paper, we investigated the acute toxic effects of ammonia nitrogen on 4-month-old and 8-month- old turbot (), and compared the acute toxicity effects of ammonia nitrogen on albino and normal female and male turbot. The results showed that the median lethal concentrations (LC50) at 24, 48, 72, and 96 h for un-ionized ammonia on 4-month-old turbot were 2.19, 1.94, 1.80, and 1.72 mg/L, respectively. The LC50values at 24, 48, 72, and 96 h for un-ionized ammonia on 8-month-old turbot were 3.64, 3.02, 2.93, and 2.86 mg/L, respectively. The safe concentrations of non-ionic ammonia on 4-month-old and 8-month-old turbot were 0.17 mg/L and 0.29 mg/L, respectively. Although the 8-month-old turbot was more tolerant to ammonia nitrogen than the 4-month- old turbot, there was no significant difference in either the correlation between body weight and ammonia resistance or body length and ammonia resistance. A comparison of the ammonia nitrogen acute toxicity in albino and normal female and male turbot revealed no significant differences. The results obtained in this study provide scientific guidance for the circulation water farming of turbot and a theoretical basis for evaluating the genetic parameters of ammonia-resistant traits and further selection breeding of ammonia-nitrogen-resistant strains of turbot.

; fry; ammonia; acute toxicity; LC50; albino

Apr. 10, 2017

S931.3

A

1000-3096(2017)10-0109-08

10.11759//hykx2017041003

2017-04-10;

2017-04-28

[Taishan Scholar Program for Seed Industry, No. ZR2014CQ001; Key Research and Development Project of Shandong Province, No.2016ZDJS06A07; The National High Technology Research and Development Program of China, No.2012AA10A408-7]

泰山學(xué)者種業(yè)計劃專家項目(ZR2014CQ001); 山東省重點(diǎn)研發(fā)計劃項目(2016ZDJS06A07); 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863)(2012AA10A408-7)

李之鄉(xiāng)(1991-), 男, 山東臨沂人, 碩士研究生, 主要從事水產(chǎn)動物遺傳育種工作, E-mail: lizhixiang26@163.com; 王偉繼, 通信作者, E-mail: wangwj@ysfri.ac.cn