姜海峰++耿龍武++佟廣香++武鵬飛++李晨宇++徐偉

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.090

摘要：采用靜水水生生物測(cè)試方法研究5種常用漁藥對(duì)蒙古鲌（Chanodichthys mongolicus）魚苗和幼魚的急性毒性。結(jié)果顯示，硫酸銅、聚維酮碘、三氯異氰尿酸、敵百蟲、食鹽對(duì)蒙古鲌魚苗的安全質(zhì)量濃度分別為0.036、13.830、0.116、0.183、1 863 mg/L，對(duì)幼魚的安全質(zhì)量濃度分別為0.384、94.000、0.827、1.350、3 038 mg/L。5種漁藥對(duì)蒙古鲌魚苗和幼魚的毒性大小依次為：硫酸銅>三氯異氰尿酸>敵百蟲>聚維酮碘>食鹽。與生產(chǎn)常用質(zhì)量濃度進(jìn)行對(duì)比表明，硫酸銅不適用于魚苗階段的病害防治。

關(guān)鍵詞：漁藥；蒙古鲌；急性毒性；安全質(zhì)量濃度

中圖分類號(hào)： S941.91文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）10-0311-03

收稿日期：2015-08-26

基金項(xiàng)目：中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院科研基金（編號(hào)：2014A07XK04）。

作者簡(jiǎn)介：姜海峰（1987—），男，吉林梅河口人，碩士，助理研究員，主要從事水生動(dòng)物遺傳育種研究。E-mail：haifeng-2008@163.com。

通信作者：徐偉，研究員。E-mail：xwsc23@163.com。蒙古鲌（Chanodichthys mongolicus）別稱紅尾、紅梢子等，隸屬鯉科鲌亞科鲌屬，是一種常見的經(jīng)濟(jì)肉食性魚類，在我國(guó)各水系中均有分布，多棲息于有緩流的大型湖泊中[1]。蒙古鲌?jiān)呛邶埥饔蚝慈郝涞膬?yōu)勢(shì)種，在鏡泊湖湖區(qū)產(chǎn)量很高，在20世紀(jì)80年代達(dá)到150 t，占漁獲量的 45.9%～561%。近年來(lái)，由于環(huán)境破壞、過度捕撈等人為因素，野生資源量已嚴(yán)重下降，2000年左右年產(chǎn)量降低至 50 t，2001年至今平均年產(chǎn)量?jī)H為25 t左右[2]。為保護(hù)和恢復(fù)這一名特優(yōu)魚類資源，近年來(lái)，中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所開展了鏡泊湖蒙古鲌的苗種規(guī)模化培育和人工增殖放流，并取得了較好的效果[3]。然而，在蒙古鲌苗種的人工增養(yǎng)殖過程中，病害問題是限制其苗種培育的關(guān)鍵問題之一。已有學(xué)者對(duì)蒙古鲌的生物學(xué)特性[4]、營(yíng)養(yǎng)需求[5]、人工繁殖[3，6]等進(jìn)行了研究，而關(guān)于蒙古鲌病害防治的研究較少。本研究選用5種常用漁藥對(duì)蒙古鲌的魚苗和幼魚進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，以期為蒙古鲌苗種培育階段的病害防治和科學(xué)用藥提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

供試魚由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所呼蘭試驗(yàn)站提供。蒙古鲌魚苗為當(dāng)年繁育的仔魚經(jīng)3個(gè)月的池塘培育，規(guī)格為2.8～3.5 cm，平均體質(zhì)量為（0.28±0.08） g；幼魚為1冬齡個(gè)體，規(guī)格為4.6～5.5 cm，平均體質(zhì)量為（3.6±0.7） g。挑選體質(zhì)健壯、外觀正常的健康個(gè)體作為試驗(yàn)對(duì)象。試驗(yàn)前將魚置于水族箱中暫養(yǎng)1周，暫養(yǎng)期間正常投喂換水，試驗(yàn)前24 h停止投喂。試驗(yàn)所用藥物的規(guī)格見表1。

表1試驗(yàn)用藥物信息

藥物成分和含量生產(chǎn)廠家五水硫酸銅分析純南京甲乙信維化工有限公司聚維酮碘10%聚維酮碘溶液（水產(chǎn)用）廣州南方動(dòng)物保健藥廠敵百蟲80%（粉劑）廣州金水動(dòng)物保健品有限公司三氯異氰尿酸有效氯計(jì)30%（粉劑）廣州金水動(dòng)物保健品有限公司食鹽分析純南京甲乙信維化工有限公司

1.2急性毒性試驗(yàn)

試驗(yàn)用水為曝氣24 h的自來(lái)水，水溫為22.3～24.5 ℃，pH值為7.5±0.1，溶解氧為（6.0±0.5） mg/L。試驗(yàn)容器采用體積為7 L（29 cm×8 cm×20 cm）的PVC魚缸，每個(gè)魚缸加入5 L藥液。

試驗(yàn)前將藥品配成母液，按所需比例加入魚缸并混勻。綜合參照漁藥常用劑量及文獻(xiàn)報(bào)道進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，得到24 h 100%死亡的最低質(zhì)量濃度、96 h無(wú)死亡的最高質(zhì)量濃度。在此濃度范圍之間，按照等對(duì)數(shù)間距設(shè)置5個(gè)試驗(yàn)濃度梯度組和1個(gè)空白對(duì)照，每個(gè)梯度設(shè)2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放入10尾魚進(jìn)行正式試驗(yàn)。試驗(yàn)開始后8 h內(nèi)觀察并記錄試驗(yàn)魚的活動(dòng)狀況、中毒癥狀、死亡時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組24、48、96 h的死亡數(shù)。試驗(yàn)魚的鰓蓋不扇動(dòng)并對(duì)觸碰尾柄無(wú)反應(yīng)即判定該魚已死亡，將死魚及時(shí)剔除以保證水質(zhì)。試驗(yàn)采用靜水生物法[7]，每24 h更換50%的試驗(yàn)液。三氯異氰尿酸具有揮發(fā)性，為保證其有效濃度，該組換水頻率為12 h/次。試驗(yàn)期間不投喂，微充氣。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用寇氏法（Karder）[8]計(jì)算試驗(yàn)魚對(duì)各漁藥的半數(shù)致死質(zhì)量濃度（LC50），公式為：

lgLC50=Xm-d（∑p-0.5）。

式中：Xm為死亡組最大劑量的對(duì)數(shù)，d為相鄰組濃度對(duì)數(shù)差，p為各組的死亡率，∑p為各組死亡率的總和。

安全質(zhì)量濃度（SC）按下列公式[7]計(jì)算：

SC=LC50，48 h×0.3/（LC50，24 h/LC50，48 h）2。

2結(jié)果與分析

2.1中毒癥狀

試驗(yàn)開始后，各藥物低濃度組的試驗(yàn)魚活動(dòng)狀況均與對(duì)照組相似，大多靜臥于底部，游動(dòng)較緩。高濃度組反應(yīng)較為劇烈，其中，硫酸銅組魚沿魚缸迅速游動(dòng)，隨后游動(dòng)逐漸緩慢，腹面朝上，對(duì)外界刺激不敏感，魚苗、幼魚分別于試驗(yàn)開始2、7 h后開始死亡，死亡個(gè)體呈灰白色并漂于水面；聚維酮碘組魚急速竄游，隨時(shí)間的延長(zhǎng)失去平衡能力，魚體側(cè)翻，無(wú)法保持在水的上表層，魚苗、幼魚分別于6、10 h后開始死亡，死亡魚體體色發(fā)白，沉于水底；三氯異氰尿酸組魚在試驗(yàn)初期表現(xiàn)出游動(dòng)劇烈、呼吸頻率加快的現(xiàn)象，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)運(yùn)動(dòng)能力和平衡能力減弱，腹面向上漂浮于水面，魚苗、幼魚分別于1、2 h開始死亡，死亡個(gè)體鰓發(fā)白，表明高濃度三氯異氰尿酸對(duì)蒙古鲌的呼吸功能造成了影響；敵百蟲對(duì)蒙古鲌的毒性作用顯現(xiàn)較快，試驗(yàn)開始后便可見魚狂躁不安，浮于水面竄游，死亡前出現(xiàn)側(cè)翻、仰游等現(xiàn)象，魚苗、幼魚分別于2、6 h開始死亡，死亡后體表泛白、僵硬，口及鰓蓋張開；食鹽對(duì)蒙古鲌的毒性作用顯現(xiàn)較慢，可觀察到試驗(yàn)魚隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸失去平衡能力，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍，最后沉于缸底，僅見微弱的呼吸，魚苗、幼魚分別于8、12 h開始死亡。

2.2蒙古鲌?jiān)?種漁藥急性毒性試驗(yàn)中的死亡率

5種藥物對(duì)蒙古鲌魚苗和幼魚的累計(jì)死亡率見表2。隨著試驗(yàn)濃度的增加以及時(shí)間的延長(zhǎng)，5種漁藥對(duì)蒙古鲌的急性毒性效應(yīng)均明顯增強(qiáng)，死亡率呈明顯上升趨勢(shì)。除食鹽處理組于96 h開始死亡外，其余各藥物的最低濃度組在24、48、96 h的死亡率均為0%；除硫酸銅和三氯異氰尿酸在96、48 h的死亡率達(dá)到100%外，其余各藥物的最高濃度組在24 h的死亡率均為100%。從試驗(yàn)濃度以及5種漁藥處理的死亡率來(lái)看，蒙古鲌魚苗對(duì)5種漁藥的敏感性遠(yuǎn)高于幼魚，硫酸銅對(duì)魚苗、幼魚的毒性最大，氯化鈉的毒性最小。

2.35種漁藥的半致死濃度和安全質(zhì)量濃度

5種漁藥對(duì)蒙古鲌魚苗、幼魚的半致死濃度和安全質(zhì)量濃度見表3。由表3可知，5種漁藥對(duì)蒙古鲌魚苗和幼魚的LC50隨時(shí)間的延長(zhǎng)而減小，表明5種漁藥的毒性均隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。根據(jù)安全質(zhì)量濃度可知，5種漁藥對(duì)蒙古鲌魚苗和幼魚的毒性大小依次為：硫酸銅>三氯異氰尿酸>敵百蟲>聚維酮碘>食鹽。

3結(jié)論與討論

根據(jù)農(nóng)藥對(duì)魚類急性毒性等級(jí)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，可按LC50，48 h的大小將藥物劃分為劇毒（<0.1）、高毒（0.1～<1.0）、中毒（1.0～10.0）、低毒（>10.0）4個(gè)等級(jí)[9]。據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)， 對(duì)于蒙表35種漁藥對(duì)蒙古鲌魚苗、幼魚的半致死濃度和安全質(zhì)量濃度mg/L

藥物魚苗LC5024 h48 h96 h魚苗安全

質(zhì)量濃度幼魚LC5024 h48 h96 h幼魚安全

質(zhì)量濃度硫酸銅0.2310.1860.1550.036.9331.6851.5520.384聚維酮碘62.4856.4654.2213.8358647641494三氯異氰尿酸0.5280.4760.4070.1164.4003.7653.0580.827敵百蟲0.4730.4240.3740.18314.149.668.861.35食鹽7 8467 2576 4511 86312 22811 48310 5323 038

古鲌魚苗，硫酸銅、三氯異氰尿酸、敵百蟲為高毒藥物，聚維酮碘、食鹽為低毒藥物；對(duì)于蒙古鲌幼魚，硫酸銅、三氯異氰尿酸、敵百蟲為中毒藥物，聚維酮碘、食鹽為低毒藥物。藥物的毒性效應(yīng)與試驗(yàn)魚的種類、生長(zhǎng)階段、健康狀態(tài)、水質(zhì)理化指標(biāo)等因素密切相關(guān)，其中試驗(yàn)魚的生長(zhǎng)階段在很大程度上影響藥物的毒性[10]。本研究中，5種漁藥對(duì)蒙古鲌魚苗的毒性效應(yīng)遠(yuǎn)高于幼魚，表明魚苗對(duì)5種藥物的敏感程度高于幼魚。這與魚苗階段打網(wǎng)、運(yùn)輸?shù)炔僮魉劳雎屎芨叩默F(xiàn)象一致，可能是由于魚苗階段器官尚未發(fā)育成熟，抗應(yīng)激壓力能力及對(duì)藥物的代謝能力較弱。

硫酸銅是魚病防治中的常用藥物，游離的銅離子能夠破壞氧化還原酶系統(tǒng)的活性，阻礙代謝蛋白質(zhì)的合成，從而對(duì)指環(huán)蟲、纖毛蟲等原生動(dòng)物以及一些低等藻具有較強(qiáng)的殺滅作用。本研究中，蒙古鲌魚苗和幼魚對(duì)硫酸銅最為敏感，其安全質(zhì)量濃度相差近10倍，分別為0.036、0.384 mg/L，低于海南紅鲌魚苗（0.09 mg/L）[11]、翹嘴紅鲌魚苗（0.11 mg/L）[12]、黑尾近紅鲌魚苗（0.230 mg/L）[13]、厚頜魴魚苗（0.445 mg/L）[14]。生產(chǎn)中硫酸銅的常用潑灑濃度為0.5～0.7 mg/L，一般當(dāng)質(zhì)量濃度低于0.2 mg/L時(shí)對(duì)寄生蟲無(wú)殺滅效果[12]。本試驗(yàn)中，硫酸銅對(duì)蒙古鲌魚苗的安全質(zhì)量濃度為常用潑灑濃度的1/（13.9～19.4），質(zhì)量濃度在0.1 mg/L時(shí)即出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，因此不宜在魚苗階段使用硫酸銅消毒，以免造成魚苗大批量死亡；對(duì)幼魚的安全質(zhì)量濃度為常用潑灑濃度的1/（1.3～1.8），但當(dāng)質(zhì)量濃度為1 mg/L時(shí)，至96 h仍未出現(xiàn)死亡，表明該藥物可用于幼魚階段的消毒，但仍需謹(jǐn)慎使用，另外考慮到重金屬殘留等問題，建議盡量選用其他替代藥物。

聚維酮碘是聚乙烯吡咯烷酮與碘的絡(luò)合物，對(duì)大部分細(xì)菌、真菌、霉菌孢子及部分病毒均有一定的殺滅作用。聚維酮碘對(duì)蒙古鲌魚苗、幼魚的安全質(zhì)量濃度相差約6.8倍，分別為13.83、94.00 mg/L，高于黑尾近紅鲌幼魚（37.7 mg/L）[15]、唇幼魚（17.29 mg/L）[16]、斜帶石斑魚幼魚（14.27 mg/L）[17]。其安全質(zhì)量濃度遠(yuǎn)高于生產(chǎn)中的常用質(zhì)量濃度4.5～7.5 μg/L（以聚維酮碘計(jì)）[17]，且聚維酮碘具有無(wú)毒、無(wú)殘留的優(yōu)點(diǎn)，因此可安全應(yīng)用于蒙古鲌苗種培育階段的病害防治。

三氯異氰尿酸是一種極強(qiáng)的氧化劑和氯化劑，對(duì)于細(xì)菌、病毒、真菌、細(xì)菌芽孢均有較強(qiáng)的殺滅作用。試驗(yàn)結(jié)果表明，三氯異氰尿酸對(duì)蒙古鲌魚苗、幼魚的安全質(zhì)量濃度相差約 7.1 倍，分別為0.116、0.827 mg/L，接近于黑尾近紅鲌魚苗（0.165 mg/L）[15]、翹嘴紅鲌魚苗（0.136 mg/L）[18]、厚頜魴魚苗（0.190 mg/L）[14]，高于斜帶石斑魚幼魚（0.479 mg/L）[17]。三氯異氰尿酸的生產(chǎn)常用劑量為0.090～0.135 mg/L（以有效氯計(jì)）[18]，表明三氯異氰尿酸能夠應(yīng)用于防治魚苗階段的細(xì)菌性疾病，但使用時(shí)要控制用量，而在幼魚階段可安全使用。然而，三氯異氰尿酸在水體中的分解產(chǎn)物為氰尿酸，對(duì)人體具有致癌作用，且降解速度非常緩慢，應(yīng)降低使用頻率。

敵百蟲是一種低毒高效的有機(jī)磷酸酯類殺蟲劑，通過抑制膽堿酯酶活性從而殺滅病魚體表的甲殼動(dòng)物、吸蟲以及腸內(nèi)寄生的蠕蟲等寄生蟲。試驗(yàn)結(jié)果表明，敵百蟲對(duì)蒙古鲌魚苗的安全質(zhì)量濃度遠(yuǎn)低于幼魚，分別為0.183、1.350 mg/L，兩者相差約7.4倍，與黑尾近紅鲌魚苗（0.251 mg/L）[19]、厚頜魴魚苗（0.268 mg/L）[14]、海南紅鲌幼魚（1.56 mg/L）[11]相近，但與翹嘴紅鲌魚苗（6.32 mg/L）[12]相差較大。生產(chǎn)中敵百蟲的常用潑灑濃度為0.2～0.5 mg/L[12]，由于蒙古鲌?jiān)隰~苗階段對(duì)敵百蟲的敏感性較高，應(yīng)適當(dāng)控制敵百蟲的用量，而在幼魚階段可安全使用。

氯化鈉主要通過改變滲透壓實(shí)現(xiàn)在魚病防治中的應(yīng)用，高濃度（3%）可殺滅寄生蟲和微生物，低濃度（0.1%～0.3%）可降低打網(wǎng)、運(yùn)輸?shù)让{迫的應(yīng)激反應(yīng)，并具有促進(jìn)傷口愈合的作用[15]。試驗(yàn)結(jié)果表明，氯化鈉對(duì)蒙古鲌魚苗、幼魚的安全質(zhì)量濃度相差較小，分別為1 863、3 380 mg/L，高于黑尾近紅鲌幼魚（1 006 mg/L）[12]、翹嘴紅鲌魚苗（895.4 mg/L）[18]，低于海南紅鲌魚苗（3 000 mg/L）[11]，遠(yuǎn)高于常用劑量。試驗(yàn)表明，蒙古鲌具有較高的耐鹽性，可安全應(yīng)用于皮膚及鰓寄生蟲疾病、爛鰓病、水霉病等疾病的防治。

在蒙古鲌苗種培育階段的病害防治中，應(yīng)針對(duì)不同生長(zhǎng)階段合理使用藥物。對(duì)于蒙古鲌魚苗，食鹽、聚維酮碘可安全使用，三氯異氰尿酸、敵百蟲應(yīng)慎用，而硫酸銅不宜使用；對(duì)于蒙古鲌幼魚，食鹽、聚維酮碘、敵百蟲、三氯異氰尿酸均可安全使用，而硫酸銅應(yīng)慎用。此外，實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)中還應(yīng)考慮水溫、pH值、水中懸浮物等因素的影響，先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)觀察，以達(dá)到預(yù)防中毒、有效治療的目的。

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