金文++陳靜波++胡新崗++賀生中++倪黎剛++卞桂華++Joo+H+S2

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.076

摘要：通過(guò)屠宰病變?cè)u(píng)估及病理組織學(xué)檢查對(duì)蘇姜豬新品種的肺病變發(fā)生情況、病變類型、季節(jié)性發(fā)病特點(diǎn)、肉眼肺病變的發(fā)病程度與病理組織學(xué)病變的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，360頭供試蘇姜豬中肺病變的發(fā)病率為75%，其中冬季發(fā)病率最高，達(dá)到81.1%，其次為春季、秋季、夏季。蘇姜豬的平均肺病變指數(shù)為1.12，病變程度較為輕微。肺病變比例在1%～10%區(qū)間內(nèi)最多，占31.9%（115/360）。在360份肺樣中，慢性型病變最多，占肺病變總數(shù)的 38.6%；但冬季急性型的發(fā)生率最高，達(dá)到40.8%。在病理組織學(xué)檢查中，慢性型肺病變中的支氣管淋巴組織增生更為廣泛。通過(guò)肉眼病變觀察得出的病變類型與通過(guò)病理組織學(xué)檢查得出的結(jié)論相類似，蘇姜豬的肺病變主要發(fā)生在感染后期和恢復(fù)階段。

關(guān)鍵詞：蘇姜豬；平均肺病變指數(shù)；支氣管淋巴組織增生

中圖分類號(hào)： S858.28文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）10-0274-04

收稿日期：2016-03-04

基金項(xiàng)目：江蘇省科技支撐計(jì)劃（編號(hào)：BE2009330-3）。

作者簡(jiǎn)介：金文（1976—），男，吉林汪清人，博士，講師，主要從事豬傳染病的研究與教學(xué)。E-mail：vet.jinwen@yahoo.com。蘇姜豬是以姜曲海豬、楓涇豬、杜洛克豬為親本，經(jīng)過(guò)6個(gè)世代繼代選育而成的新品種豬。該品種由江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院主持培育，聯(lián)合揚(yáng)州大學(xué)、江蘇省畜牧總站等單位和部門，結(jié)合傳統(tǒng)遺傳育種理論和現(xiàn)代育種技術(shù)，歷時(shí)17年共同培育，并于2013年順利通過(guò)國(guó)家品種審定，成為了我國(guó)畜禽新品種。

蘇姜豬含有2個(gè)產(chǎn)仔多、肉質(zhì)優(yōu)的地方豬種血統(tǒng)，姜曲海豬血統(tǒng)和楓涇豬血統(tǒng)各占18.75%；同時(shí)含有以體格強(qiáng)健、抗病力強(qiáng)著稱的杜洛克豬種血統(tǒng)，其血統(tǒng)占62.5%。在多年的繁育過(guò)程中，該品種不僅具有繁殖性能優(yōu)良、生長(zhǎng)速度較快、肉質(zhì)鮮美等優(yōu)點(diǎn)，還表現(xiàn)出了抗病力強(qiáng)的特點(diǎn)，尤其對(duì)豬肺炎支原體的敏感性較低[1]。

屠宰病變?cè)u(píng)估是通過(guò)對(duì)出欄豬的組織臟器進(jìn)行肉眼病變觀察，進(jìn)而對(duì)豬群的健康狀況進(jìn)行監(jiān)測(cè)的一種評(píng)估方法，同時(shí)又可對(duì)疾病的感染時(shí)期進(jìn)行回顧性判斷，是評(píng)價(jià)豬抗病力和疫苗效力的重要手段，在歐美養(yǎng)豬發(fā)達(dá)國(guó)家被廣泛采用[2]。目前，我國(guó)對(duì)豬群健康狀況的評(píng)估主要以豬群臨床癥狀觀察、現(xiàn)場(chǎng)剖檢、血清學(xué)監(jiān)測(cè)為主，屠宰病變?cè)u(píng)估尚未被有效應(yīng)用，對(duì)豬肺炎支原體發(fā)生情況的評(píng)估也是如此。

為對(duì)蘇姜豬新品種抗病力的特性、疾病發(fā)生特點(diǎn)和規(guī)律進(jìn)行科學(xué)系統(tǒng)的研究，本試驗(yàn)通過(guò)屠宰病變?cè)u(píng)估及病理組織學(xué)對(duì)蘇姜豬的疾病發(fā)生情況、病變程度、季節(jié)性發(fā)病特點(diǎn)、肺病變的發(fā)病類型、病理組織學(xué)特點(diǎn)等進(jìn)行研究，并將研究成果反饋至生產(chǎn)實(shí)踐，指導(dǎo)蘇姜豬的飼養(yǎng)管理，強(qiáng)化疫病監(jiān)測(cè)和控制，提升蘇姜豬產(chǎn)業(yè)化水平。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2013年6月至2014年5月進(jìn)行，以360頭蘇姜豬（出欄質(zhì)量100 kg）為對(duì)象，進(jìn)行屠宰病變?cè)u(píng)估及組織病理學(xué)檢查。供試豬出欄自泰州市的蘇姜豬育種場(chǎng)（江蘇省姜曲海種豬場(chǎng)）以及與其飼養(yǎng)環(huán)境和設(shè)施類似的2個(gè)擴(kuò)繁場(chǎng)（分別位于揚(yáng)州市、南通市）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1肺病變指數(shù)評(píng)估根據(jù)各肺葉體積占整個(gè)肺體積的比例對(duì)各肺葉定義百分?jǐn)?shù)：左右尖葉各10%、左右心葉各10%、左右膈葉各25%、副葉10%。將各肺葉實(shí)變的比例相加求和（圖1），確定總的實(shí)變組織百分率[3]。肉眼觀察實(shí)變組織表面積占該肺葉表面積的比例，并據(jù)此對(duì)流行性肺炎的嚴(yán)重程度進(jìn)行指數(shù)化評(píng)級(jí)。將0%記為0，1%～10%記為1，11%～20%記為2，21%～30%記為3，31%～40%記為4，>41%記為5，共分為6個(gè)病變等級(jí)。統(tǒng)計(jì)每頭屠宰豬的肺部病變指數(shù)，并將各個(gè)評(píng)級(jí)的頭數(shù)乘以該評(píng)級(jí)的指數(shù)，然后相加求和，再除以被評(píng)估豬的總數(shù)，即為全群的平均肺病變指數(shù)[4]。

屠宰病變?cè)u(píng)估依照季節(jié)施行，3—5月為春季，6—8月為夏季，9—11月為秋季，12月至翌年2月為冬季。每個(gè)季節(jié)進(jìn)

行1次，從而對(duì)蘇姜豬肺炎支原體季節(jié)性發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查。

1.2.2肺病變的發(fā)病類型依照觸診及肉眼病變觀察，將肺病變劃分為急性型、亞急性型、慢性型，并根據(jù)不同季節(jié)對(duì)病變進(jìn)行分類（圖2）[5]。

1.2.3病理組織學(xué)檢查取豬的肺病變組織，經(jīng)10%中性福爾馬林固定后石蠟包埋，制成3 μm厚的組織切片，進(jìn)行 hematoxylin and eosin（H&E）染色和鏡檢。對(duì)于無(wú)肉眼可見(jiàn)病變的肺臟，取右心葉進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。為比較肺病變的發(fā)病程度和組織病變的關(guān)聯(lián)性，對(duì)支氣管淋巴組織增生（bronchus-associated lymphoik tissue，簡(jiǎn)稱BALT）情況進(jìn)行分析。支氣管淋巴組織增生是包括氣管固有層在內(nèi)的支氣管、毛細(xì)支氣管、血管周圍淋巴細(xì)胞的增生和浸潤(rùn)情況，以及有無(wú)淋巴小結(jié)。支氣管、毛細(xì)支氣管、血管周圍無(wú)淋巴細(xì)胞的增生和浸潤(rùn)，則劃分為“無(wú)”；有輕微的淋巴細(xì)胞增生和浸潤(rùn)，則劃分為“輕微的”；有眾多數(shù)量的增生和浸潤(rùn)，或有少量淋巴小結(jié)出現(xiàn)，則劃分為“中等的”；淋巴小結(jié)明顯增多則劃分為“顯著的”；有大量淋巴小結(jié)存在則劃分為“廣泛的”（圖3）[5-6]。

1.2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用Chi-square檢驗(yàn)進(jìn)行肺病變發(fā)生率及發(fā)病進(jìn)程的分析，采用Cochran-Mantel-Haenszel檢驗(yàn)進(jìn)行支氣管淋巴組織增生與發(fā)病類型的關(guān)聯(lián)性分析。采用SAS version 9.1統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析計(jì)算。

2結(jié)果與分析

2.1肺病變指數(shù)評(píng)估

肺病變?cè)u(píng)估按照批次進(jìn)行，分別于3個(gè)豬場(chǎng)選取同一季節(jié)、同一批次出欄的30頭蘇姜豬，每個(gè)季節(jié)90頭，共360頭。結(jié)果顯示，所監(jiān)測(cè)的蘇姜豬不表現(xiàn)豬支原體肺炎特征性病變，其中88頭的肺臟保持健康狀態(tài)，占蘇姜豬總數(shù)的25%（88/360），即肺病變的發(fā)病率為75%。按照季節(jié)劃分，蘇姜豬的肺病變發(fā)病率由高至低依次為冬季81.1%（76/90）、春季 78.9%（71/90）、秋季70.0%（63/90）、夏季68.9%（62/90）（P<0.05）（表1）。蘇姜豬的平均肺病變指數(shù)為1.12，各季節(jié)的平均病變指數(shù)由高至低依次為冬季1.70、春季1.60、秋季1.17、夏季1.08。按照病變比例劃分，1%～10%比例區(qū)間有115頭（31.9%），11%～20%區(qū)間有105頭（29.1%），21%～30%區(qū)間有30頭（8.3%），31%～40%區(qū)間有21頭（5.8%），≥41%區(qū)間有1頭（表1）。

2.2肺病變的發(fā)病類型

對(duì)屠宰監(jiān)測(cè)的蘇姜豬進(jìn)行觸診和肉眼病變觀察。結(jié)果顯示，360頭蘇姜豬中有105頭被判定為慢性型，占存在肺病變頭數(shù)的比例（38.6%）最高，其后依次為急性型95頭（34.9%）、亞急性型72頭（26.5%）（P<0.05）。按照季節(jié)分類，冬季急性型的發(fā)生率（40.8%）最高，春季、夏季、秋季慢性型的發(fā)生率占多數(shù)，分別為38.0%、43.5%、39.7%（表2）。

2.3病理組織學(xué)檢查

將支氣管淋巴組織增生情況與發(fā)病類型進(jìn)行比較，結(jié)果表明，在無(wú)豬肺炎支原體特征性病變的50個(gè)肺樣中，無(wú)淋巴細(xì)胞增生和浸潤(rùn)的肺樣為29個(gè)，輕微、中等、顯著分別為17、3、1個(gè)，且沒(méi)有被判定為廣泛的肺樣本。在急性型的50個(gè)肺樣中，無(wú)增生和浸潤(rùn)的肺樣為11個(gè)，輕微、中等、顯著、廣泛分別為26、9、3、1個(gè)，被判定為中等的肺樣數(shù)量明顯增加。在亞急性型的50個(gè)肺樣里，無(wú)增生和浸潤(rùn)的肺樣為7個(gè)，輕微、中等、顯著、廣泛分別為9、18、13、3個(gè)。在50個(gè)慢性型病變的肺樣中，無(wú)增生和浸潤(rùn)的肺樣為5個(gè)，輕微、中等、顯著、廣泛分別為7、19、13、6個(gè)?？梢?jiàn)，隨著病變由急性型轉(zhuǎn)變?yōu)槁孕停馨托〗Y(jié)的數(shù)量隨之增多，體積隨之增大（P<0.05）（表3）。

3結(jié)論與討論

豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae，MH）可引發(fā)以慢性無(wú)痰干咳、高發(fā)病率、低死亡率為特征的豬支原體肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine，MPS），同時(shí)又是豬呼吸道綜合征的原發(fā)病原體之一，與繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環(huán)病毒2型、偽狂犬病毒、副豬嗜血桿菌、鏈球菌等致病因子協(xié)同作用，導(dǎo)致育肥豬的嚴(yán)重呼吸道疾病[7]。

在本試驗(yàn)中，蘇姜豬肺病變的發(fā)病率為75%，其中冬季發(fā)病率最高，達(dá)到81.1%，其次為春季、秋季，夏季發(fā)病率最低。Straw研究表明，冬季肺病變發(fā)生比率最高[3]，本研究結(jié)果與之一致。然而van Til等研究表明，在加拿大，豬肺炎支原體的發(fā)生與季節(jié)沒(méi)有關(guān)聯(lián)性[8]。在本試驗(yàn)中，冬季、春季肺病變的發(fā)病率高可歸結(jié)為冬季、春季密閉環(huán)境下?lián)Q氣不良，豬舍內(nèi)有害氣體濃度升高、空氣污濁、晝夜溫差過(guò)大等導(dǎo)致的環(huán)境應(yīng)激因素可誘發(fā)疾病。

蘇姜豬的肺病變比例在1%～10%區(qū)間內(nèi)最多（31.9%），其次為11%～20%區(qū)間（29.1%）。夏季、秋季、春季的肺病變比例在1%～10%區(qū)間內(nèi)最多，冬季在11%～20%區(qū)間內(nèi)所占比例最高，達(dá)到33.3%，表明肺病變發(fā)生比例受季節(jié)影響。本試驗(yàn)中，盡管總體肺病變發(fā)生率為75%，但平均肺病變指數(shù)為1.12，整體的病變程度相對(duì)較為輕微。各季節(jié)的平均病變指數(shù)中冬季最高（1.70），其次為春季（1.60），夏季最低（1.08）。季節(jié)性平均肺病變指數(shù)評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，冬季肺病變發(fā)生程度最為嚴(yán)重，其次為春季，夏季最為輕微。這可歸結(jié)為3個(gè)豬場(chǎng)均采用自然換氣的傳統(tǒng)豬舍，保溫、隔熱、換氣等設(shè)施相對(duì)薄弱，因此冬季、春季比夏季更易受到外界環(huán)境的不良影響。蘇姜豬在冬季的平均病變指數(shù)為1.70，明顯低于金文等報(bào)道的姜曲海豬病變指數(shù)[1]，進(jìn)一步表明蘇姜豬對(duì)豬肺炎支原體的抗病力明顯強(qiáng)于傳統(tǒng)地方豬種。

在360頭蘇姜豬的肺樣中，慢性型病變最多，占存在肺病變豬總數(shù)的38.6%；病變部位呈暗紫色，表面較周邊健康組織縮陷，界限分明（圖2）。冬季以急性型發(fā)生率為最高，達(dá)到40.8%；春季、夏季、秋季以慢性型發(fā)生率為最高，分別達(dá)到38.0%、43.5%、39.7%。據(jù)此推算，外界環(huán)境的應(yīng)激導(dǎo)致冬季豬支原體肺炎的新近感染增多，這是造成冬季急性型發(fā)病率升高的主要原因。

豬支原體肺炎的特征性病理組織學(xué)病變?yōu)椋涸诟腥境跗?，肺泡、支氣管周圍、管腔?nèi)的嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞增加，血管及氣管周圍的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，隨著感染的加重，支氣管、毛細(xì)支氣管周圍以及血管周圍的淋巴細(xì)胞開(kāi)始明顯增加；處于恢復(fù)階段時(shí)，增生的淋巴細(xì)胞和周圍組織間有明顯界限，存在廣泛的支氣管淋巴組織增生[3]。對(duì)支氣管淋巴組織增生情況的測(cè)定結(jié)果顯示，隨著病變由急性型轉(zhuǎn)變?yōu)槁孕?，淋巴小結(jié)的數(shù)量逐漸增多，體積逐漸增大。Hansen等通過(guò)病理組織學(xué)檢查判定病變的急性、亞急性、慢性型，并與支氣管淋巴組織增生情況進(jìn)行了比較[5]，本研究結(jié)果與其結(jié)論一致?？梢?jiàn)，通過(guò)肉眼病變觀察所判斷的病變類型，與通過(guò)病理組織學(xué)檢查所得出的結(jié)果類似。本試驗(yàn)中，病變肺樣慢性型的發(fā)生率最高，且淋巴小結(jié)數(shù)量增多、尺寸增大，由此可推斷出蘇姜豬的肺病變主要以感染后期和恢復(fù)階段的病變?yōu)橹鳌?/p>

豬肺炎支原體具有品種特異性，姜曲海、梅山豬等我國(guó)地方品種黑豬較易感染，而杜洛克、長(zhǎng)白、大白以及多元雜交配套系對(duì)豬肺炎支原體的感受性較低。蘇姜豬是以姜曲海豬為母本，導(dǎo)入杜洛克豬血統(tǒng)進(jìn)行培育的新品系豬種，現(xiàn)已進(jìn)入全面產(chǎn)業(yè)化推廣階段[9-11]。蘇姜豬具有抗病力強(qiáng)的特點(diǎn)，特別是對(duì)豬支原體肺炎的耐受性明顯強(qiáng)于其親本姜曲海豬。本試驗(yàn)通過(guò)屠宰病變?cè)u(píng)估和病理組織學(xué)檢查，對(duì)蘇姜豬的豬肺炎支原體發(fā)生情況、病變類型、常發(fā)的感染時(shí)機(jī)、支氣管淋巴組織增生與發(fā)病進(jìn)程的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行了研究，并將研究成果反饋至蘇姜豬核心育種場(chǎng)及擴(kuò)繁場(chǎng)，提出了改善飼養(yǎng)管理、調(diào)整豬肺炎支原體防控的建議。

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