●曹佳圓

現(xiàn)代色譜技術(shù)在中藥檢驗(yàn)中的運(yùn)用研究

●曹佳圓

近年來隨著科學(xué)技術(shù)以及相應(yīng)檢驗(yàn)設(shè)備的不斷更新發(fā)展，應(yīng)用于藥品檢驗(yàn)工作中的檢驗(yàn)技術(shù)也不斷的更新，各種藥品檢驗(yàn)技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中發(fā)揮著巨大的作用，為保證藥物治療以及藥物效果提供了科學(xué)依據(jù)，該文對(duì)此進(jìn)行了系統(tǒng)介紹。

中藥檢驗(yàn)；現(xiàn)代色譜技術(shù)；高效毛細(xì)管電泳技術(shù)；掃描電鏡技術(shù)

1 現(xiàn)代色譜技術(shù)在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用

現(xiàn)代色譜技術(shù)是目前應(yīng)用于各種樣品檢驗(yàn)中的常用方法，其可以分離、分析、純化幾乎所有的檢驗(yàn)樣品?，F(xiàn)代色譜技術(shù)在其應(yīng)用中具有靈敏度高、重現(xiàn)性好、檢驗(yàn)速度快等優(yōu)點(diǎn)。其檢驗(yàn)原理是將檢驗(yàn)的藥物通過應(yīng)用色譜柱分離得到不同的組分可以隨著流動(dòng)相直接進(jìn)入霧化器，在霧化器內(nèi)經(jīng)過處理后形成霧化微粒，霧化形成的溶劑微粒在狹窄光束的照射下出現(xiàn)不同的光束散射情況，被散射的光束信號(hào)被接收器接收后轉(zhuǎn)化成為電信號(hào)，通過相應(yīng)的電信號(hào)值可以分辨相應(yīng)成分質(zhì)粒的大小及數(shù)量，進(jìn)而可以分析到藥物中各種成分的含量。現(xiàn)代色譜技術(shù)在其應(yīng)用中具有應(yīng)用范圍較廣的優(yōu)點(diǎn)，由于中藥成分中會(huì)有多種不同類型的成分，各種成分的特性不一，既往傳統(tǒng)的檢驗(yàn)技術(shù)對(duì)于中藥中各種成分的檢驗(yàn)準(zhǔn)確性差別較大，導(dǎo)致其檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性較差?，F(xiàn)代色譜技術(shù)在其應(yīng)用中除了可以對(duì)揮發(fā)成分的含量進(jìn)行檢驗(yàn)以外，對(duì)于不能揮發(fā)的藥物成分，現(xiàn)代色譜技術(shù)通過應(yīng)用霧化技術(shù)使藥物成分可以經(jīng)過現(xiàn)代色譜技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)?？梢姡F(xiàn)代色譜技術(shù)在其應(yīng)用過程中具有操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確性高等優(yōu)點(diǎn)，但是現(xiàn)代色譜技術(shù)檢驗(yàn)也有一定的局限性，應(yīng)用現(xiàn)代色譜技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)的藥物成分必須有其準(zhǔn)確的色譜表，這樣在應(yīng)用中才能準(zhǔn)確測(cè)量其含量。因此，為能進(jìn)一步提高現(xiàn)代色譜技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值以及其準(zhǔn)確性，需要對(duì)各種藥物成分進(jìn)行進(jìn)一步完善其色譜資料。而且在應(yīng)用現(xiàn)在色譜檢驗(yàn)過程中應(yīng)用的藥物必須純度要高，原始藥物必須未經(jīng)過特殊的化學(xué)方式處理以及未變質(zhì)的中藥材。因此，現(xiàn)代色譜技術(shù)依賴于其準(zhǔn)確性高、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)會(huì)在科學(xué)檢驗(yàn)中取得更好的應(yīng)用。

2 高效毛細(xì)管電泳技術(shù)在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用

高效毛細(xì)管電泳技術(shù)又稱作為毛細(xì)管電泳，其主要技術(shù)原理為在高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的作用之下，以毛細(xì)管作為通道，根據(jù)所需檢驗(yàn)樣品中各不同成分之間淌度和分配行為上的差異從而將各種成分分離的技術(shù)。目前在重要的檢驗(yàn)研究中具有廣泛的應(yīng)用范圍。在其應(yīng)用中所需要的應(yīng)用裝備主要有：毛細(xì)管柱、進(jìn)樣系統(tǒng)、高壓系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)收集系統(tǒng)等各不同設(shè)施組成。由于中藥材種類繁多，不同中藥中的各種組成成分均不相同，而且由中藥制作的中藥制劑類型各不相同，為了能有效的將各種不同組分進(jìn)行分離，目前高效毛細(xì)管電泳技術(shù)是較為常用的手段之一。其主要的應(yīng)有范圍有：①有效地分離藥物中的蛋白成分：根據(jù)不同產(chǎn)期、產(chǎn)地中藥材中蛋白的含量各不相同，應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳技術(shù)可以有效地分離出藥材中蛋白的劑量，通過對(duì)分離所得的蛋白量進(jìn)行分析可以明顯區(qū)別不同藥材中蛋白含量，從而可以有效地檢驗(yàn)各藥材的相應(yīng)藥效；②中藥材中生物堿類物質(zhì)的檢驗(yàn)：生物堿作為中藥中天然存在的藥物成分，許多中藥的主要藥效成分為生物堿組成，但是天然的藥材與炮制之后藥物效果的差異并無明確的研究結(jié)果。隨著高效毛細(xì)管電泳技術(shù)的應(yīng)用，通過對(duì)藥材不同制劑前后其中生物堿的含量進(jìn)行分析可以發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過人工炮制之后其中生物堿的含量明顯降低。比如目前常用的馬錢子堿等中藥經(jīng)過炮制之后其生物堿含量降低90%左右；③對(duì)于中藥材中黃酮類、酚酸類中藥成分的鑒定：由于黃酮類、酚酸類藥物成分經(jīng)過處理之后會(huì)帶有一定的電荷，經(jīng)過電泳技術(shù)可以明顯地區(qū)分不同藥物成分的含量和分離鋒線進(jìn)而可以區(qū)別不同藥物中不同藥效成分的含量多少?？梢?，應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳技術(shù)可以高效、快速、簡(jiǎn)便的分離中藥制劑種不同藥效成分的含量，在中藥制劑的檢驗(yàn)工作中具有重要的應(yīng)用意義。

3 掃描電鏡技術(shù)在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用

掃描電鏡技術(shù)是指在應(yīng)用顯微鏡圓筒、電源線路、視頻控制裝置和真空系統(tǒng)等裝置對(duì)中藥材標(biāo)本進(jìn)行電鏡下觀察處理的檢驗(yàn)手段。目前掃描電鏡技術(shù)主要應(yīng)用于中藥材的微觀形態(tài)以及微觀結(jié)構(gòu)的觀察處理。其主要的技術(shù)手段是通過將需要觀察的標(biāo)本經(jīng)過干燥處理之后，將所需要檢驗(yàn)的樣品置于樣品臺(tái)之上，通過真空噴鍍儀器對(duì)樣品進(jìn)行噴鍍處理，處理后的樣品玻片直接在顯微電鏡下觀察，將觀察得到的圖像進(jìn)行分析，可以對(duì)中藥材的微觀形態(tài)、亞微觀形態(tài)進(jìn)行比對(duì)分析。目前掃描電鏡技術(shù)在重要的檢驗(yàn)過程中主要應(yīng)用于藥材真假鑒別。其主要的鑒別中藥材有種子、花粉以及藥材表皮等。許多關(guān)于應(yīng)用掃描電鏡技術(shù)進(jìn)行中藥鑒別的研究報(bào)告指出，應(yīng)用掃描電鏡技術(shù)在觀察中可以發(fā)現(xiàn)，許多真假中藥材其樣品的表面或斷面結(jié)構(gòu)存在著明顯的差異，在顯微鏡之下可以獲得較為清晰三維圖像，對(duì)于觀察具有更為直接的鑒別依據(jù)。可見，掃描電鏡技術(shù)在中藥材的真假鑒別觀察中具有明顯的應(yīng)用價(jià)值。

4 冷蒸汽原子吸收光譜法在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用

目前隨著環(huán)境的污染以及藥物制作過程中各種污染的影響，導(dǎo)致許多種中藥材以及中藥制劑中汞的含量明顯超標(biāo)。目前中藥檢驗(yàn)中常用的汞含量測(cè)定方法為冷蒸汽原子吸收光譜法。冷蒸汽原子吸收光譜法其主要的作用原理為應(yīng)用高價(jià)的還原劑將汞還原為汞蒸氣，根據(jù)汞蒸汽對(duì)其特征譜線(253.7nm)具有強(qiáng)烈吸收作用[16]。通過對(duì)色譜可以明顯觀察到其吸光度，根據(jù)其吸光度與汞含量呈一定比率便可以準(zhǔn)確地測(cè)定出其中汞的含量。在既往日本報(bào)道的水俁病中，其主要的致病原因便是汞中毒導(dǎo)致的。汞含量超標(biāo)后食用進(jìn)入體內(nèi)便會(huì)導(dǎo)致食用這種毒，出現(xiàn)聽力降低、四肢麻木、眼睛失明等嚴(yán)重的影響。因此，為了有效避免中藥材以及中藥制劑收到汞等重金屬元素的污染導(dǎo)致的不良后果，以及因?yàn)橹亟饘傥廴緦?dǎo)致的藥物效果受到影響，應(yīng)用冷蒸汽原子吸收光譜法可以有效地檢測(cè)出中藥材以及中藥制劑中汞等重金屬元素的含量，進(jìn)而降低用藥者重金屬中毒的可能以受收到的重金屬危害，有效地提高患者用藥的安全性。

5 超臨界流體萃取法在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用

超臨界流體萃取法是指在應(yīng)用各種超臨界CO2流體作為檢驗(yàn)所用的流體相，通過在流體相中加入改性劑然后達(dá)到調(diào)節(jié)溶解、洗脫能力以及改善峰形的目的。其中在其檢驗(yàn)過程中，超臨界CO2流體作為檢驗(yàn)應(yīng)用的流體相，在檢驗(yàn)過程中由于CO2的超臨界溫度為31℃，而且在其應(yīng)用過程中具有無毒害等優(yōu)點(diǎn)，可以有效地檢驗(yàn)各種不同類型中藥材以及中藥制劑中相應(yīng)成分的含量。其中目前常用的超臨界流體萃取法主要用于六應(yīng)丸中冰片以及丁香酚的含量關(guān)系，在檢驗(yàn)過程中具有應(yīng)用簡(jiǎn)便、操作迅速以及檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。而且超臨界流體萃取法對(duì)于檢驗(yàn)丹參中丹參酮的成分也具有較為準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果以及檢驗(yàn)成效。但是目前在大量的研究以及應(yīng)用中可以發(fā)現(xiàn)，超臨界流體萃取法在中藥的檢驗(yàn)過程中，其單獨(dú)使用時(shí)檢驗(yàn)效果較低，高檢驗(yàn)效果會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)成本大大提高，因此在目前的檢驗(yàn)中應(yīng)用超臨界流體萃取法多聯(lián)合配合與現(xiàn)代色譜法技術(shù)協(xié)調(diào)檢驗(yàn)相關(guān)中藥材以及中藥制劑中相應(yīng)成分的含量。因此，在上述的研究中可以發(fā)現(xiàn)，超臨界流體萃取法目前在中藥的檢驗(yàn)中也具有較為廣泛的應(yīng)用范圍，但是在其應(yīng)用效果以及相應(yīng)的檢驗(yàn)過程只能夠可以發(fā)現(xiàn)，超臨界流體萃取法常需要進(jìn)一步完善，以更好地應(yīng)用于中藥檢驗(yàn)工作中。

（作者單位：陜西國際商貿(mào)學(xué)院）

[1]楊棄塵.現(xiàn)代色譜技術(shù)本在中藥檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].醫(yī)學(xué)信息 ,2015(40)∶361-361.

[2]齊紅梅.中藥檢驗(yàn)中色譜技術(shù)的應(yīng)用實(shí)踐及研究進(jìn)展探析[J].醫(yī)學(xué)信息,2016,29(27).

曹佳圓，陜西國際商貿(mào)學(xué)院藥學(xué)B1302班。