韓 瑾，張 蒙，許遵鵬，潘 敏，李東至，廖 燦

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心，廣東 廣州 510623)

孕早期血清胎盤生長因子在妊娠期高血壓疾病篩查中的應(yīng)用

韓 瑾，張 蒙，許遵鵬，潘 敏，李東至，廖 燦

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心，廣東 廣州 510623)

目的 探討孕早期母體血清胎盤生長因子(PLGF)與妊娠期高血壓疾病的關(guān)系。方法采用熒光免疫分析法檢測妊娠早期590例正常孕婦及118例妊娠期高血壓病孕婦PLGF血清濃度，其中重度子癇前期組45例，輕度子癇前期組37例，妊娠期高血壓組36例，應(yīng)用Logistic回歸分析和受試者工作特征(ROC)曲線評價(jià)PLGF應(yīng)用對妊娠期高血壓疾病的診斷價(jià)值。結(jié)果研究顯示正常孕婦血清PLGF濃度隨孕周增加而上升(b=0.40，P<0.0001)。經(jīng)孕周校正后的對數(shù)(Log)10PLGF中位數(shù)倍數(shù)(MoM)值分別是：正常對照組1.02(0.96～1.09)，重度子癇前期組0.86(0.77～0.93)，輕度子癇前期組0.97(0.89～1.03)，妊娠期高血壓組0.98(0.90～1.05)。重度子癇前期組PLGF濃度顯著降低，與正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組相比均有顯著性差異(H=18.5，P<0.0001)；輕度子癇前期組與對照組PLGF濃度也明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=14.6，P=0.001)，其余各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。當(dāng)妊娠早期孕婦血清PLGF≤31.40pg/mL時(shí)，預(yù)測重度子癇前期敏感度為82.20%，特異度79.30%。結(jié)論妊娠高血壓疾病孕婦孕早期血清PLGF濃度明顯降低，妊娠早期檢測PLGF對該病有重要預(yù)測價(jià)值。

妊娠期高血壓疾??；胎盤生長因子；孕早期；產(chǎn)前篩查

胎盤生長因子(maternal serum placental growth factor，PLGF)是血管生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族中成員，表達(dá)于胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞，通過特異結(jié)合受體VEGFR-1/Flt-1(fms-like tyrosine kinase-1)激活其生物學(xué)功效，對滋養(yǎng)層細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞功能有重要調(diào)節(jié)作用，從而對血管生成有產(chǎn)生作用。妊娠期高血壓疾病是妊娠特有疾病，其發(fā)病機(jī)制及病因不十分清楚，發(fā)病率約5%～12%，嚴(yán)重影響母嬰健康。近年來PLGF與妊娠期高血壓病關(guān)系受到廣泛關(guān)注，Chappell等[1]研究發(fā)現(xiàn)低濃度PLGF對在2周內(nèi)發(fā)展為子癇前期(pre-eclampsia，PE)的孕婦有很好預(yù)測作用，Boucoiran等[2]通過對妊娠11～14周、18～22周PLGF預(yù)測子癇前期分析發(fā)現(xiàn)，選擇早孕期篩查先兆子癇效果會明顯優(yōu)于孕中期篩查。但PLGF是否在我國妊娠高血壓病孕婦有預(yù)測作用并未見研究報(bào)道，作為唐氏篩查的早期標(biāo)記物PLGF已在國外開展臨床應(yīng)用，為早期篩查妊娠期高血壓疾病提供了適當(dāng)?shù)呐R床檢測時(shí)機(jī)。本研究旨在探討早孕期PLGF濃度對中國人群先兆子癇發(fā)生、嚴(yán)重程度的預(yù)測價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月至2014年1月在廣州市婦女兒童醫(yī)療中心產(chǎn)科住院分娩的妊娠高血壓疾病孕婦118例為研究研究對象，其診斷和分類標(biāo)準(zhǔn)參照《婦產(chǎn)科學(xué)》[3]，依據(jù)病情嚴(yán)重程度分為3組，其中輕度子癇組30例，孕周(37.50±2.20)周，年齡(30.30±4.30)歲；重度子癇前期組32例，孕周(32.60±4.30)周，年齡(30.50±4.20)歲；妊娠期高血壓組36例。選取符合條件的正常孕婦590例為對照組，平均孕周(39.20 ±2.10)周，平均年齡(29.50±3.50)歲。3個(gè)研究組和對照組均在孕期常規(guī)參加早期唐氏篩查，經(jīng)知情同意后，孕婦血清樣本貯存于-20℃的冰箱，各組孕婦均為單胎，孕前均無原發(fā)性高血壓、糖尿病、慢性腎炎、甲狀腺功能亢進(jìn)、肝炎及結(jié)核等急慢性疾病史，無煙酒不良嗜好，孕期隨訪如胎兒患有染色體異常、結(jié)構(gòu)畸形的孕婦均排除出組。所有患者均為漢族，自然受孕，各組孕婦年齡、孕周比較差異無顯著性差異(均P>0.05)。

1.2 方法

血清中PLGF的濃度水平測定采用時(shí)間分辨熒光免疫分析法。測量所用儀器、試劑和質(zhì)控品均為美國Perkin Elmer公司生產(chǎn)的Auto Delfial235全自動時(shí)間分辨熒光免疫分析儀和Delfia試劑，檢測前1天，將樣本移至4℃的冰箱初步復(fù)溶，測量當(dāng)日將樣本置于室溫(25～26℃)進(jìn)行再次復(fù)溶30min，待血清完全溶解，將血清從離心管移至取樣量杯內(nèi)，將樣本置于AutoDELFIA 1235自動免疫系統(tǒng)進(jìn)行濃度檢測和分析，操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將PLGF濃度經(jīng)對數(shù)(Log)轉(zhuǎn)換后，獲得測量數(shù)據(jù)的正態(tài)分布，所有的濃度測量值均轉(zhuǎn)換為中位數(shù)倍數(shù)(multiples of the median，MoM)，并用母親體重指數(shù)、孕齡對MoM值進(jìn)行校正，通過回歸重新獲得中位數(shù)方程，生成MoM值。采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，連續(xù)型變量應(yīng)用K-S法進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)；分類變量之間的差異轉(zhuǎn)換為頻數(shù)和百分比，用Chi-square檢驗(yàn)進(jìn)行分析比較；多組定量資料比較時(shí)，若變量為正態(tài)分布且方差齊時(shí)，應(yīng)用單因素方差分析法，若為非正態(tài)分布或方差不齊時(shí)用Kruskale-Wallis檢驗(yàn)法；行一元回歸分析評估血清PLGF與孕婦體重或體重指數(shù)、預(yù)產(chǎn)年齡、孕周是否相關(guān)；利用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic，ROC)對生化指標(biāo)診斷學(xué)價(jià)值進(jìn)行分析，同時(shí)計(jì)算曲線下面積及95%置信區(qū)間，通過Logistic回歸分析獲得各指標(biāo)聯(lián)合診斷價(jià)值。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究病例的一般資料比較

本研究共有708例孕婦作為研究對象，正常孕婦590例，妊娠期高血壓疾病118例，其中重度子癇前期45例，輕度子癇前期37例，妊娠期高血壓36例。4組孕婦預(yù)產(chǎn)年齡、孕周、樣本儲存時(shí)間、孕產(chǎn)次、孕婦體重比較，顯示4組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。體重指數(shù)(body mass index，BMI)在重度子癇前期組、輕度子癇前期組、妊娠期高血壓組及正常對照組分別為21.0(19.2～23.4)、22.1(19.6～23.8)、21.6(18.9～25.1)、20.3(18.7～22.0)kg/m2，4組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，見表1。

表1 病例組與對照組母體一般特征的比較

注：*為Kruskale-Wallis法進(jìn)行比較得出的H值，**為卡方檢驗(yàn)得出卡方值?！锱c正常對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2.2 組間妊娠結(jié)局的比較

重度子癇前期組、輕度子癇前期組、妊娠期高血壓組及正常對照組分娩孕周分別為35.60(33.90～38.00)、39.00(37.90～39.60)、39.4(38.00～40.10)、39.40(38.70～40.10)周。應(yīng)用Bonferroni法比較，重度子癇前期組分娩時(shí)間明顯早于其他3組(P值均為0.00)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，輕度子癇前期組低于正常對照組(P=0.001)。

重度子癇前期組、輕度子癇前期組、妊娠期高血壓組及正常對照組胎兒體重分別為2.17(1.45～2.83)kg、3.10(2.67～3.45)kg、3.11(2.78～3.38)kg、3.24(3.03～3.48)kg。重度子癇前期組低于正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組(均P=0.000)，余各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見表2。

表2 各組間妊娠結(jié)局的比較

注：統(tǒng)計(jì)值均為Kruskale-Wallis法進(jìn)行比較得出的H值?！餅榕c正常對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，▲為與輕度子癇前期組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，■為與妊娠期高血壓組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2.3 正常孕婦血清PLGF濃度的分布

經(jīng)K-S檢驗(yàn)對照組PLGF濃度呈非正態(tài)分布，將PLGF進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)換Log10 PLGF(pg/mL)為正態(tài)分布。采用一元線性回歸探討Log10 PLGF(pg/mL)的影響因素，從而避免混雜因素的存在導(dǎo)致分析數(shù)據(jù)的偏倚。孕婦血清PLGF濃度與孕周呈正相關(guān)(b=0.40，P<0.0001)，本研究中590例正常孕婦通過最佳擬合加權(quán)回歸曲線獲得PLGF中位數(shù)值水平，公式為：Log10 PLGF(pg/mL)=0.11+0.017×孕周，見圖1。

圖1 正常妊娠孕婦血清Log10 PLGF(pg/mL)在不同孕周(天)的分布

2.4 胎盤生長因子濃度在病例組與對照組的比較

正常孕婦血清PLGF濃度水平隨孕周而升高(b=0.40，P<0.0001)，經(jīng)孕周校正后的Log10PLGFMoM值在正常對照組為1.02(0.96～1.09)，重度子癇前期組為0.86(0.77～0.93)，輕度子癇前期組0.97(0.89～1.03)及妊娠期高血壓組0.98(0.90～1.05)，重度子癇前期孕婦血清PLGF濃度與正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組相比顯著降低(H=18.5,P<0.0001)；輕度子癇前期組較對照組顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=14.6,P=0.001)，其余各組無顯著性差異，見圖2。

圖2 PLGF濃度4組孕婦之間的比較

2.5 胎盤生長因子對重度的預(yù)測

重度子癇前期孕婦血清PLGF濃度顯著低于其他3組，PLGF在診斷重度子癇前期ROC曲線下面積為0.83，95%可信區(qū)間下限大于70.00%，其Log10PLGFMoM陽性判斷值為0.94，對應(yīng)的PLGF(pg/mL)為31.40 pg/mL。當(dāng)孕早期PLGF≤31.4pg/ml時(shí)，預(yù)測重度子癇前期的敏感度為82.20%，特異度79.30%，見圖3。

圖3 PLGF對重度子癇前期的診斷價(jià)值

3 討論

妊娠期高血壓疾病是全世界孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒死亡的重要原因之一，對母胎危害性較大，早孕期篩查高危人群可以應(yīng)用阿司匹林預(yù)防PE及降低并發(fā)癥發(fā)生，選擇合適的篩查指標(biāo)預(yù)測高血壓孕婦將對臨床結(jié)局改善有重大作用[4]。PLGF為同型二聚體糖蛋白，屬VEGF家族成員，通過特異性結(jié)合VEGFR-1/Flt-1受體來激活其生物學(xué)功能，對母體胎盤血管重鑄有重要作用，PLGF也是胎盤血管形成的重要條件，因此PLGF濃度的變化可間接反應(yīng)胎盤功能。

3.1 胎盤生長因子在正常孕婦與妊娠高血壓疾病的孕婦血液中濃度

PLGF在正常孕婦血清中濃度較高，而未孕女性及男性體內(nèi)PLGF極低甚至檢測不到，正常孕婦中早期血清PLGF濃度較低，15周后明顯上升，28～30周達(dá)到高峰后下降，而在妊娠小于30周PE孕婦，PLGF水平均呈較低水平。國外研究認(rèn)為通過比較孕早期子癇前期孕婦和正常對照組母體血清中妊娠相關(guān)蛋白-A、PLGF及母體相關(guān)指標(biāo)，如平均動脈壓(mean arterial pressure, MAP)、子宮動脈PI值等，發(fā)現(xiàn)PLGF濃度在子癇前期孕婦中明顯下降，尤其在早發(fā)型子癇前期孕婦，聯(lián)合應(yīng)用這些指標(biāo)可篩查出93.10%的早發(fā)型子癇前期、35.70%晚發(fā)型子癇前期及18.30%妊娠期高血壓孕婦，認(rèn)為妊娠早期PLGF濃度變化可預(yù)測子癇前期的發(fā)生[5]。

本研究顯示妊娠11～13+6周外周血PLGF濃度隨孕周上升，與國外研究相似，因此在進(jìn)行PLGF計(jì)算時(shí)需考慮進(jìn)行相關(guān)孕周矯正，本研究為避免混雜因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生偏倚，對病例組和對照組進(jìn)行嚴(yán)格匹配，3組病例組和對照組孕婦的采樣孕周、預(yù)產(chǎn)年齡、樣本貯存時(shí)間、孕產(chǎn)次及體重因素間均無顯著性差異，但發(fā)現(xiàn)體重指數(shù)(BMI)在各組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，通過一元線性回歸分析混雜因素對PLGF的影響，發(fā)現(xiàn)PLGF與體重指數(shù)無顯著相關(guān)，這一結(jié)論同Gullai等[6]學(xué)者研究結(jié)果相一致。重度子癇前期組分娩孕周顯著早于其他3組，胎兒的出生體重也低于正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組。

3.2 PLGF在妊娠期高血壓疾病的診斷價(jià)值

本研究顯示重度PE孕婦外周血PLGF濃度較其他3組顯著降低，輕度PE與妊娠期高血壓組比較也低于正常孕婦組，提示妊娠早期PLGF對妊娠期高血壓疾病有一定預(yù)測作用，這與我國張琳的研究結(jié)果類似[7]，尤其是對重度子癇前期預(yù)測意義較高，ROC面積為0.83，診斷靈敏度和特異度分別為82.20%和79.30%，結(jié)果顯示PLGF濃度切割值為31.40pg/mL。由于重度子癇前期與圍產(chǎn)兒病死率和母體并發(fā)癥關(guān)系更為密切，因此應(yīng)用PLGF預(yù)測重度子癇前期將有良好的臨床應(yīng)用前景。國外研究還發(fā)現(xiàn)低濃度PLGF對2周內(nèi)發(fā)展為PE的孕婦也有很好預(yù)測作用，而且較現(xiàn)行的常規(guī)檢查如血壓、尿蛋白定量等效果更好，因此妊娠中晚期檢測PLGF同樣可預(yù)測PE發(fā)生，當(dāng)假陽性率為5%時(shí)，檢出率達(dá)93.70%[8]。

綜上所述，妊娠早期孕婦血清PLGF下降對PE有重要預(yù)測價(jià)值，可以考慮常規(guī)用于臨床PE的孕早期及孕中晚期的人群篩查。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：楊文方]

Application of first-trimester serum placental growth factor in the screening for gestational hypertension

HAN Jin, ZHANG Meng, XU Zun-peng, PAN Min, LI Dong-zhi, LIAO Can

(GuangzhouWomanandChildren’sMedicalCenter,GuangdongGuangzhou510623,China)

Objective To investigate the correlation between first-trimester serum placental growth factor (PLGF) and gestational hypertension. Methods A total of 590 cases of healthy pregnant women and 118 cases of pregnant women diagnosed with gestational hypertension were chosen as research objects. Their serum concentrations of PLGF were measured by fluorescence immunoassay in their first-trimester pregnancy. The 118 cases of women with gestational hypertension were divided into severe preeclampsia group (n=45), mild preeclampsia group (n=37) and gestational hypertension group (n=36). Logistic regression analysis and receiver operating characteristic curve (ROC) were used to analyze the diagnostic value of PLGF for gestational hypertension. Results Research showed that serum concentration of PLGF grew with gestational weeks in healthy pregnant women (b=0.40,P<0.0001). The value of multiples of the median (MoM) of Log10PLGF after correction for gestational weeks was 1.02 (0.96-1.09) in the control group of healthy pregnant women, 0.86 (0.77-0.93) in severe preeclampsia group, 0.97 (0.89-1.03) in mild preeclampsia group and 0.98 (0.90-1.05) in gestational hypertension group, respectively. Significant decrease was identified in serum concentration of PLGF in severe preeclampsia group and when compared with control group, mild preeclampsia group and gestational hypertension group were significantly different (H=18.5,P<0.0001). Obvious drops in PLGF concentration were also seen in mild preeclampsia group and control group, and the difference was of statistical significance (H=14.6,P=0.001). No statistical difference was noted when other intergroup comparisons were made. When patients' serum concentration of PLGF was lower than or equal to 31.40pg/mL, its sensitivity and specificity for the prediction of severe preeclampsia reached 82.20% and 79.30%, respectively. Conclusion The concentration of PLGF decreases significantly in pregnant women with hypertension at their first trimester. The detection of PLGF at the first trimester can work as a valuable marker for the prediction of gestational hypertension.

gestational hypertension; placental growth factor (PLGF); first trimester; prenatal screening

2016-05-17

廣東省衛(wèi)計(jì)委資助項(xiàng)目(A2013515)；廣東省科技廳資助項(xiàng)目(2016A20218003)；廣州市衛(wèi)生局資助項(xiàng)目(201102A213089)

韓 瑾(1978-)，女，副主任醫(yī)師，碩士，主要從事產(chǎn)前診斷研究。

廖 燦，主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2016.06.009

R714.2

A

1673-5293(2016)06-0698-04