沈 萍，金曉婷

上海兒童醫(yī)學(xué)中心，上海市，200127

全自動(dòng)免疫組化和原位雜交染色機(jī)染色失敗解決方案

【作 者】沈 萍，金曉婷

上海兒童醫(yī)學(xué)中心，上海市，200127

該文分析總結(jié)了Leica Bond Max 全自動(dòng)免疫組化和原位雜交染色機(jī)染色失敗的原因，以及對(duì)常見(jiàn)人員操作失誤與機(jī)器自身故障進(jìn)行了總結(jié)，并提供了對(duì)應(yīng)的解決方案。

全自動(dòng)免疫組化和原位雜交染色機(jī)；染色失敗

Leica Bond Max 全自動(dòng)免疫組化和原位雜交染色機(jī)[1]是一款將自動(dòng)化技術(shù)用于高級(jí)染色處理的機(jī)器，它包括免疫組織化學(xué)染色（IHC）和原位雜交（ISH）。它將病理科傳統(tǒng)的手工操作替換成機(jī)器操作，幾乎囊括了免疫組化手工操作的全過(guò)程，包括烤片、脫蠟、抗原阻斷、修復(fù)、滴加抗體、顯色、蘇木復(fù)染等一系列步驟，既減輕了病理技術(shù)員的工作量，又加快了病理醫(yī)生出報(bào)告的時(shí)間，極大地滿足了臨床的需求[2]。

我科至2014年8月使用該機(jī)器以來(lái)，碰到過(guò)幾次染色失敗事件，其中既有人員操作失誤，也有機(jī)器自身故障的因素?，F(xiàn)對(duì)我們常見(jiàn)人員操作失誤與機(jī)器自身故障進(jìn)行了總結(jié)，并提供了對(duì)應(yīng)的解決方案。

1 操作失誤

操作失誤是該類染色機(jī)染色失敗的主要原因之一。

（1）粘貼標(biāo)簽時(shí)位置偏移，探針掃不到條形碼，機(jī)器會(huì)顯示玻片故障。

（2）標(biāo)簽貼反，使得有組織的一面朝下，整個(gè)操作流程未經(jīng)需處理的組織，從而出現(xiàn)染色失敗。

（3）技術(shù)員把不同分配液量的玻片放置在同一排玻片架上，機(jī)器拒絕執(zhí)行命令。

（4）在做優(yōu)化玻片時(shí)，打印標(biāo)簽時(shí)未加修復(fù)方法，使得需修復(fù)處理的玻片未進(jìn)行修復(fù)處理，從而引起染色失敗。

（5）開(kāi)始啟動(dòng)前，應(yīng)先查看試劑瓶?jī)?nèi)抗體是否滿足染色需求量，并及時(shí)添加抗體，如忘記添加抗體，機(jī)器會(huì)拒絕執(zhí)行啟動(dòng)命令。同時(shí)應(yīng)注意試劑瓶的已使用容量，一個(gè)試劑瓶最多可添加7 mL的試劑，超出此容量后，此試劑瓶將不能再使用。

（6）技術(shù)員添加新的試劑瓶時(shí)未設(shè)置好試劑的信息、未掃描試劑瓶。

（7）加載玻片時(shí)covertiles未放置到位，會(huì)導(dǎo)致染液可能被滴在covertiles之上或外漏在間隙槽內(nèi)，引起染色失敗。

（8）機(jī)器操作過(guò)程中未及時(shí)添加消耗的試劑如修復(fù)液、蒸餾水、緩沖液以及未及時(shí)傾倒廢液桶而產(chǎn)生各種小故障，從而影響了機(jī)器的運(yùn)行。

2 機(jī)器自身故障

機(jī)器的常見(jiàn)故障主要有：

（1） 機(jī)器上的一塊或一排加熱板突發(fā)故障，放在該位置上的玻片就不會(huì)被正確地進(jìn)行染色處理，從而引起染色失敗。

（2） 因機(jī)器需定期關(guān)機(jī)保養(yǎng)，每次關(guān)機(jī)后，都需把DAB混合站取出來(lái)清洗，在下次開(kāi)機(jī)前放在機(jī)器上，一旦技術(shù)員忘了放置，機(jī)器開(kāi)機(jī)后自檢時(shí)，發(fā)現(xiàn)掃不到DAB混合站，它會(huì)給出提示，提醒你DAB混合站是否已歸位？一旦你沒(méi)注意按了確認(rèn)鍵后，機(jī)器會(huì)自動(dòng)認(rèn)為操作沒(méi)問(wèn)題而運(yùn)行下去，從而導(dǎo)致染色液漏于機(jī)器內(nèi)，染色失敗。

（3） 探針針管在清洗不完全或部分堵塞時(shí)，針管內(nèi)滯留的前一種抗體會(huì)影響下一個(gè)抗體的染色或吸入的抗體量減少，造成組織全部或部分“空染”，影響染色結(jié)果。

（4） 超過(guò)一定數(shù)量（800~1 200）張玻片后，機(jī)器需進(jìn)行大保養(yǎng)，如換探針、玻璃管注射器和針頭、機(jī)器后面的抽吸管道等耗材，否則會(huì)出現(xiàn)試劑瓶?jī)?nèi)的液體量因檢測(cè)錯(cuò)誤而在操作過(guò)程中出現(xiàn)試劑劑量不足，機(jī)器無(wú)法運(yùn)行下去。

3 討論與總結(jié)

Leica Bond Max 全自動(dòng)免疫組化和原位雜交染色機(jī)具有敏感性高、定位準(zhǔn)確、背景清晰等特點(diǎn)[2]，同時(shí)處理能力強(qiáng)，一臺(tái)機(jī)器10 h最多可處理90張玻片，因此一經(jīng)面世就受到積極推廣。

染色機(jī)的正確使用及維護(hù)保養(yǎng)的好壞直接影響到染色結(jié)果的好壞。作為病理技術(shù)員而言，要全面了解機(jī)器的運(yùn)行原理，注重機(jī)器的日常維護(hù)和保養(yǎng)，及時(shí)替換老化的耗材。每次關(guān)機(jī)后都需用清潔布沾著無(wú)水乙醇清潔機(jī)器；每次上機(jī)操作前都需認(rèn)真檢查試劑瓶?jī)?nèi)的試劑，清空廢液桶內(nèi)的廢液；認(rèn)真粘貼標(biāo)簽；添加新的試劑瓶時(shí)認(rèn)真設(shè)置試劑信息；認(rèn)真放置covertiles。操作過(guò)程中隨時(shí)關(guān)注機(jī)器的運(yùn)行情況，一旦出現(xiàn)異常情況或非人為因素的故障時(shí)，認(rèn)真觀察故障現(xiàn)象，及時(shí)與工程師取得聯(lián)系，及時(shí)替換壞了或老化了的輔件和耗材，才能準(zhǔn)確、快捷地將故障排除，以滿足病理科免疫組織化學(xué)工作量日益增加的需求。

[1] 顧霞, 魏明潔. 快速微波免疫組化染色技術(shù)在臨床病理中的應(yīng)用[J]. 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào), 2008, 29(1): 12-13．

[2] 于蘭, 何松, 陳亞麗. 全自動(dòng)免疫組化染色儀的應(yīng)用體會(huì)[J]. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2009, 25(2): 215-216．

Solution of Dyeing Failure of Fully Automatic Immunohistochemical and Hybridization in Suit Dyeing Machine

【Key words 】SHEN Ping, JIN Xiaoting
Shanghai Children’s Medical Center, Shanghai, 200127

fully automatic immunohistochemical and hybridization in suit dyeing machine, dyeing failure

R361.2

A

10.3969/j.issn.1671-7104.2017.03.021

1671-7104(2017)03-0233-02

2016-12-21

沈萍，E-mail: shenpingscmc@sina.com

【 Abstract 】To analysis the cause of dyeing failure of Leica Bond Max fully automatic immunohistochemical and hybridization in suit dyeing machine, we summarize people’s misoperating and own fault, then offer the corresponding solution.