陳申秒 ， 程小果 ， 王 慧 ， 何福慶

(山東濱州沃華生物工程有限公司 山東省動物病原微生物工程實驗室山東濱州博萊威生物技術(shù)研究所 ， 山東 濱州 256600)

新城疫病毒(NDV)的感染宿主范圍比較廣，因為養(yǎng)殖結(jié)構(gòu)和流行趨勢的變化，近些年來鴨群感染才開始引起重視。雞是NDV的主要宿主，水禽是天然儲存庫已是共識，然而鴨群對NDV強毒株是否具有堅強的抵抗力，鴨群感染強毒發(fā)病和死亡的情況如何？研究各有不同觀點?？梢钥隙ǖ氖牵琋DV出現(xiàn)了某些新的致病特點，在鴨等水禽表現(xiàn)出一定的致病性，鴨群NDV基因型出現(xiàn)新變化[1-2]，系統(tǒng)分析鴨NDV的生物學變化，研究感染宿主之間的關(guān)系，總結(jié)NDV在宿主范圍內(nèi)的流行和分布形式，對于整個家禽養(yǎng)殖業(yè)具有重要的意義。

1 鴨新城疫流行病學調(diào)查

有報道的鴨新城疫感染病例和統(tǒng)計數(shù)據(jù)很多，觀點不盡相同。可以肯定的是NDV在感染宿主方面的確發(fā)生了很多新的變化，對鴨、鵝等水禽的致病性有明顯的增強[2]，水禽通過帶毒并經(jīng)呼吸道和泄殖腔不斷排毒，為NDV的不斷變異和防控帶來一系列的問題。中國又是世界上鴨養(yǎng)殖量最大的國家，占出欄量的70%以上，在國內(nèi)部分省份養(yǎng)鴨成為主要的養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之一。因此，系統(tǒng)研究水禽，特別是鴨感染NDV在流行病學上有重要的意義。

健康鴨帶毒監(jiān)測是NDV流行病學調(diào)查需要非常重視的一環(huán)，健康鴨帶毒是難以避免的，在應(yīng)激條件下發(fā)病的規(guī)律、發(fā)病機制、流行特點等需要深入研究。目前的監(jiān)測機制和數(shù)據(jù)很不完善，胡北俠等[3]報道了規(guī)模化健康肉用種鴨場的監(jiān)測數(shù)據(jù)，其監(jiān)測的健康鴨攜帶的均屬于弱毒株；王玨等[4]對活禽市場和健康家鴨泄殖腔棉拭樣品進行了檢測，獲得23株分離株均符合弱毒F蛋白裂解位點模式，與流行的強毒株和疫苗株遺傳距離較遠。

然而從感染發(fā)病的鴨群中分離NDV并研究其致病性，卻是另外一種情況。有學者對我國NDV分子流行病學研究認為，感染并導致水禽發(fā)病死亡的NDV主要是基因Ⅶ型和Ⅸ型，又以基因Ⅶ型NDV強毒株占絕對優(yōu)勢[2，5]。問題可能比想象中的復(fù)雜，蔡麗麗等[6]從患病鴨分離NDV屬于基因Ⅵ型，與鴿源分離毒株親緣關(guān)系近，分析認為由鴿源NDV變異所產(chǎn)生的可能性很大；還有些研究發(fā)現(xiàn)，有些基因Ⅶ型NDV毒株對家鴨的致病力并不強，但是人工感染鵝或雞后卻能造成嚴重的發(fā)病和死亡[7]，還有些研究結(jié)果顯示，基因Ⅶ型NDV強毒株對鴨群并沒有明顯的致病性。

問題的關(guān)鍵是，我們對于鴨NDV的流行病學調(diào)查還太少，報道的健康帶毒監(jiān)測和感染發(fā)病的NDV血清型研究還不足以說明鴨NDV的主要問題。我們需要更多的系統(tǒng)數(shù)據(jù)，特別是規(guī)模化養(yǎng)殖區(qū)域內(nèi)的NDV病毒持續(xù)監(jiān)測，從固定的區(qū)域、鴨群、系統(tǒng)的養(yǎng)殖周期匯集數(shù)據(jù)，這樣對于系統(tǒng)分析NDV在鴨群的流行病學調(diào)查是有意義的，我們應(yīng)該通過水禽產(chǎn)業(yè)體系，建立NDV在水禽育種、養(yǎng)殖、屠宰等環(huán)節(jié)流行病學監(jiān)測的數(shù)據(jù)庫，這也是我們開展鴨NDV系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)。

2 鴨新城疫病毒致病性

NDV 是單股負鏈、不分節(jié)段的RNA 病毒，基因組全長有15 186、15 192 bp和15 198 bp 3種，組編碼6種結(jié)構(gòu)蛋白，分別為核衣殼蛋白(NP)、膜蛋白(M)、磷酸化蛋白(P)、血凝素-神經(jīng)氨酸酶蛋白(HN)、融合蛋白(F)和大分子蛋白(L)，排列方式為3'-NP-P-M-F-HN-L-5′[8]。目前，關(guān)于鴨NDV 的研究主要集中在F、NP 蛋白新型疫苗的開發(fā)等方面，而關(guān)于其他蛋白在致病性和免疫原性中的作用研究尚不多見。

2.1 鴨新城疫病毒致病性與基因型 NDV只有1個血清型，根據(jù)其F基因差異和基因組長度，分為Class I和ClassⅡ兩大譜系，ClassI基因組長度為15 198 bp，目前發(fā)現(xiàn)共10個基因亞型，主要為低毒力或無毒力毒株，一般由野生和家養(yǎng)水禽攜帶，沒有表現(xiàn)臨床感染發(fā)病的癥狀；ClassⅡ基因組長度有15 186 bp和15 192 bp兩種，分別包括基因Ⅰ—Ⅳ型和基因Ⅴ—Ⅸ型，包含了低毒、中等毒和強毒株[9]。

目前對NDV分離株的致病性研究集中于MDT、ICPI、IVPI指標和F基因裂解位點氨基酸序列，大部分從發(fā)病鴨腦組織中分離的NDV屬于強毒株，具有強毒株F基因裂解位點特征的氨基酸序列為112R-R-Q-K-R-F117，且多屬于基因VIId亞型，羅宇宏、翟文棟等[10-12]分別從貴州、河北、山東的不同品種鴨分離的NDV證實了同樣的結(jié)論。這方面的研究結(jié)果并非完全一致，路振香等[13]從鴨腦組織分離的NDV為中等毒力毒株，其1日齡雛鴨腦內(nèi)致病指數(shù)和13日齡鴨胚EID50分別為0.84、10-6.5/0.1 mL；張?zhí)璧萚14]在連續(xù)多批發(fā)病的鴨場分離的NDV分離株具有強毒株特征的F基因裂解位點氨基酸序列，根據(jù)高變區(qū)氨基酸推導疑似為基因II型。

用強毒特征的NDV分離株接種感染動物驗證對鴨的致病性，國內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)果也存在很多爭議。伊惠等[15]用2株鴨源基因Ⅶ強毒株感染鴨和SPF雞，SPF雞感染后3～6 d 100%發(fā)病死亡，而鴨沒有明顯的臨床癥狀，國外也有類似報道[16]，Y.Dai[17]等用JSD0812以5×108ELD50劑量通過腿部肌肉注射感染15日齡野鴨(Mallard)后4～6 d試驗鴨全部發(fā)病死亡，這可能是因毒株的不同特性而導致。

基因型分析對系統(tǒng)掌握鴨NDV流行的諸多方面具有重要意義，由于對NDV的致病性和基因型的研究不夠系統(tǒng)，研究結(jié)果有很大差異，因此NDV對鴨的致病性存在爭議，系統(tǒng)性的研究尚需深入[17]，掌握全球范圍內(nèi)不同宿主NDV流行的總體趨勢和演化規(guī)律需要更多的NDV基因型的研究信息。然而目前的基因型分析方法受毒株的區(qū)域、數(shù)量、宿主范圍影響很大，不同學者針對所掌握的信息數(shù)據(jù)進行分型，缺乏系統(tǒng)的、可以全球范圍內(nèi)統(tǒng)一的標準，導致相關(guān)研究結(jié)果報道的借鑒性大打折扣。因此，筆者認為應(yīng)該從多個方面開展工作：第一，NDV研究組織應(yīng)該建立公共的信息平臺，將現(xiàn)有的NDV全基因組信息共享；第二，要建立一套以“分值”作為參考標準的分型方法，對影響病毒分型的不同基因、非編碼區(qū)、關(guān)鍵變異位點等，按照所起的作用權(quán)重程度確立“分值”，以分值確立NDV的基因型，并體現(xiàn)NDV演化的可能性來源；此外，對于不同來源NDV的致病性要有相應(yīng)的參數(shù)信息，除了MDT、ICPI、IVPI指標以外，應(yīng)有將NDV回歸感染動物后的信息數(shù)據(jù)。

2.2 鴨NDV F基因 研究認為，F(xiàn)蛋白對鴨NDV致病性起主要作用[18]，其負責病毒與宿主細胞的融合，其融合能力的強弱，決定了病毒進入宿主細胞復(fù)制的能力的強弱，從而決定NDV的毒力。因此，F(xiàn)蛋白裂解位點的氨基酸殘基序列作為毒力強弱的判斷標準，并根據(jù)F基因序列進行基因型分析用于NDV毒力和基因型的研究。

F蛋白以惰性前體Fo形式存在，當轉(zhuǎn)運至高爾基體表面時，位于F蛋白112～117位氨基酸的裂解位點被宿主細胞內(nèi)的蛋白裂解酶識別，裂解成由二硫鍵橋聯(lián)的兩個亞單位F1、F2，從而轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘娜诤系鞍住Ｒ虼耍?12～117位氨基酸順序與F蛋白的裂解能力與致病力直接相關(guān)[2]，有致病性的NDV在細胞培養(yǎng)過程中，F(xiàn)蛋白就能被細胞內(nèi)蛋白裂解酶裂解。研究發(fā)現(xiàn)強毒株FO裂解位點為多個堿性氨基酸的連續(xù)排列，而弱毒株為中性氨基酸，這種排列導致了強毒株F蛋白可以被宿主多種組織細胞識別裂解，引發(fā)多組織感染，而弱毒株FO被裂解的能力大大降低，感染性很差或者不具有感染力。還有研究認為，強毒株NDV的F1蛋白C端有一對弱毒株沒有的二元堿性氨基酸，可以被宿主細胞內(nèi)普遍存在的蛋白酶識別，比如furin和pc6，無毒力的NDV因為該二元堿性氨基酸的缺失而只能被胰蛋白酶樣蛋白酶裂解，引起局部感染[18]。

研究發(fā)現(xiàn)F蛋白胞質(zhì)區(qū)位于FO第523～553位氨基酸，第540～550位氨基酸與合胞體的形成十分相關(guān)，其位點的改變對病毒形成合胞體的能力起著重要作用；疏水跨膜區(qū)位于第500～553位氨基酸殘基，主要作用是終止蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運和膜錨定。孫杰等[12]分析了10株鴨NDV基因Ⅶd強毒株F基因序列，發(fā)現(xiàn)流行毒株在52、71、176、272、314、402位和489位出現(xiàn)了比較一致的氨基酸替代，而且具有鵝源NDV所特有的973位和1 249位Rsa I位點，這是需要重視和更多分離株分析驗證的問題，在后面的NDV與感染宿主的關(guān)系中再詳細闡述。張?zhí)璧萚14]在連續(xù)多批發(fā)病的鴨場分離的NDV具有強毒株特征的F基因裂解位點氨基酸序列，然而推導疑似為基因II型， 而在F基因高變區(qū)4～121位氨基酸又與基因Ⅱ型不同， 其17位點氨基酸為I，而基因Ⅱ型為V。

NDV毒力的決定因素絕不僅僅限于F基因的差距，這需要更加深入的研究。有研究表明，病毒F蛋白的細胞融合作用需要HN蛋白的輔助作用，且對于HN蛋白有很強的特異性要求，只有F蛋白與同源性HN蛋白共表達，才能夠引起細胞融合反應(yīng)?？傮w而言，目前對F基因結(jié)構(gòu)功能的研究還太少，對于NDV基因型和致病性的很多研究基于F基因序列的變化，所以對于F基因序列氨基酸的變化、不同宿主NDV的F基因的比較、其他功能蛋白與F蛋白的協(xié)同作用機理研究十分關(guān)鍵，這方面無疑需要更為充分的數(shù)據(jù)。

2.3 HN基因 HN蛋白是一種四聚體寡聚糖蛋白，位于NDV囊膜外表面，具有血球凝集(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)活性，也就是兼具識別并結(jié)合細胞膜上的唾液酸受體以及破壞這種結(jié)合的活性[19]。HN基因開放閱讀框長度為1 716 bp，編碼571個氨基酸；HN和F基因是NDV基因組中變異最大的，這種改變被認為是造成免疫失敗的主要原因，也是目前研究HN基因的重要方面。

HN蛋白只有4個位點能被糖基化(119、341、433位和481位)，這些位點在所有NDV株中是保守的，而HN蛋白上的5個抗原區(qū)(191～201、345～353、513～521、494位和569位)及其鄰近氨基酸位點(203、342、494～495、508～509、514位和570位) 的變異是最為關(guān)鍵，特別是新近分離株與疫苗株的差異，這種差異會導致NDV與單抗反應(yīng)性下降，從而出現(xiàn)免疫逃避[20]。羅宇宏等[10]比較其分離株HN蛋白的變化發(fā)現(xiàn)，其分離株與基因Ⅶd亞型毒株一致而與疫苗株在抗原區(qū)494位和569位以及鄰近氨基酸位點發(fā)生變異。

HN蛋白第347位氨基酸E-K的變異是近年來NDV毒株的一個新特點，345～353位氨基酸是HN蛋白上的線性表位區(qū)，是重要的受體結(jié)合區(qū)域[21]，段志強等[22]對5株鴨源NDV強毒株的研究發(fā)現(xiàn)，HN蛋白功能性氨基酸位點均高度保守，其中3株出現(xiàn)線性表位區(qū)E347K的突變。還有其他研究引起鴨群發(fā)病的NDV毒株HN蛋白發(fā)生了V9M、N323D、E331K和V514I的氨基酸突變，這些突變位點與細胞膜融作用的影響以至于對鴨的致病性的變化需要進一步的研究證實；此外還有研究表明，F(xiàn)-HN和HN-L間隔區(qū)序列的長度與病毒致病力有相關(guān)性。

目前國內(nèi)已有構(gòu)建攜帶HN基因穩(wěn)定遺傳和表達的重組鴨腸炎病毒，然而這方面的報道還太少。對于HN蛋白的功能研究需要進一步驗證，在功能區(qū)作用驗證的基礎(chǔ)上研究這種變化帶來的影響，以及驗證與其他蛋白的協(xié)同作用，是對NDV防控的重要基礎(chǔ)研究。

2.4 NP蛋白 NP蛋白是由489個氨基酸殘基組成的單股多肽，是鴨NDV核衣殼結(jié)構(gòu)蛋白的主要成分，是病毒粒子中含量最豐富的蛋白，其N端結(jié)合RNA，高度保守，C端含有磷酸化位點和抗原決定簇位點。由于毒株間NP基因高度保守，且具有很好的免疫原性，可誘導機體產(chǎn)生抗體，用于新城疫的臨床診斷和疫苗免疫監(jiān)測。

研究認為，NP基因的tuRNA的合成對NDV的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制是必要的，但是對NP蛋白的研究并不深入。有報道以NP蛋白為免疫原，獲得2株雜交瘤細胞株，均可以識別NP蛋白的線性表位，MAb為IgG1型抗體的雜交瘤細胞株能與NP蛋白發(fā)生特異性反應(yīng)，而分泌MAb為IgM型抗體的雜交瘤細胞株卻不能[23]。因此，針對NP蛋白制備的單克隆抗體(MAb)特點的需要更多的研究，用MAb建立ELISA方法的應(yīng)用需要更多的數(shù)據(jù)驗證；同時NP蛋白不具有免疫保護作用，這對于我們從多個方面更為有效評價NDV的免疫效果提出要求。

2.5 其他基因 P基因轉(zhuǎn)錄的病毒mRNA編碼P、V和W 3種蛋白，在NDV感染過程中分別占68%、29%和2%，V蛋白和W蛋白雖然表達量不高，但在病毒的復(fù)制中發(fā)揮著不可替代的作用。V蛋白和W蛋白通過P基因在編輯過程中非模版G的插入，產(chǎn)生閱讀框位移+1和+2的mRNA而編碼，因此3種蛋白具有共同的N端部分和不同的C端部分[24]，這種結(jié)構(gòu)使其需要3種抗體區(qū)分其表達，而且mRNA的表達不穩(wěn)定性使各種基因型NDV表達的V蛋白和W蛋白氨基酸同源性低，從而難以獲得適用的檢測抗體，為V蛋白和W蛋白功能的研究帶來很大難度。

已有研究證實，麻疹病毒等副黏病毒的V蛋白具有介導病毒免疫逃逸的功能，在IFN信號抑制、雙鏈RNA信號抑制、凋亡抑制等方面發(fā)揮作用[25]。對NDV蛋白的研究證實了V蛋白是一種毒力因子，通過干擾IFN信號通路，拮抗宿主的抗病毒反應(yīng)，對病毒在細胞內(nèi)的復(fù)制和致病性發(fā)揮重要作用。研究認為，V蛋白的C端結(jié)構(gòu)域(CTD)介導了抗IFN活性，該區(qū)域為保守的半胱氨酸富集區(qū)，通過近年來的研究發(fā)現(xiàn)，NDV不同毒株的CTD氨基酸同源性差異很大[26]。此外還有研究發(fā)現(xiàn)，V蛋白的不同與毒株的宿主嗜性有一定關(guān)系，傅強等[27]報道不同NDV毒株V蛋白多克隆抗體在不同宿主細胞中的表達差異很大，宿主細胞對V蛋白的抑制，與NDV對細胞的噬性和感染能力有很大關(guān)系。

M蛋白位于病毒囊膜內(nèi)側(cè)面，是構(gòu)成囊膜的支架的組成部分，在病毒的裝配中、調(diào)節(jié)RNA 合成、抑制宿主細胞的免疫反應(yīng)等發(fā)揮作用[28]；有研究發(fā)現(xiàn)，基因起始、終止、基因間隔區(qū)完全相同，NP、P、M、F高度相似的NDV強毒株和疫苗株，差異集中于HN和L蛋白上。Subrat等(2008)用反向遺傳技術(shù)將強毒株替換為疫苗株LaSota的L基因，獲得的重組NDV病毒繁殖速度及致病性顯著高于替換前的強毒株。

3 鴨NDV與感染宿主之間的關(guān)系

我們最為關(guān)注的應(yīng)當是NDV的與宿主之間關(guān)系的變化，雖然流行病學數(shù)據(jù)顯示NDV在鴨群中的發(fā)病率上升，分子生物學顯示了基因VIId亞型在鴨群中的優(yōu)勢，我們還是要從更多的報道中梳理NDV與宿主之間的關(guān)系，并以此找到有效阻斷NDV流行的方法。普遍的觀點認為，水禽陸禽的雙向傳播和混合飼養(yǎng)是NDV難以防控的關(guān)鍵，鴨等水禽是NDV產(chǎn)生高致病性的重要環(huán)節(jié)，其長期帶毒、排毒為NDV提供了生存空間，病毒和宿主細胞之間的博弈改變著NDV的分子生物學結(jié)構(gòu)，并通過改變獲得逃避免疫的能力。

目前對于不同NDV分離株在鴨、雞群中的致病性研究基本一致，NDV強毒株對雞具有很高的致病性并在雞體呼吸、消化系統(tǒng)等多種組織器官中增殖并引起各種組織損傷，而在鴨體內(nèi)只是局限在幾個內(nèi)臟組織內(nèi)復(fù)制并不具備致病性；來源于雞和鴨的強毒NDV分離株對雛雞的致病性都非常高，而雞源分離株對雛鴨的致病性顯著高于鴨源分離株，很多毒株對鴨感染性低或無癥狀感染[29-30]。對這種致病性差異，普遍認為鴨源分離株是適應(yīng)了鴨體內(nèi)免疫系統(tǒng)而能在其體內(nèi)存活，當傳播到雞體內(nèi)時，又具備了感染性。Otim等研究發(fā)現(xiàn)，從鴨體內(nèi)分離的NDV強毒株可以感染雞并使雞群產(chǎn)生高致死率；于圣青等[18]研究發(fā)現(xiàn)，野生水禽中無毒力的毒株在雞群中傳播時，變?yōu)楦咧虏⌒远局辏@種變化是隨著不斷地傳代逐漸發(fā)生的，至第9代時，380位和392位發(fā)生兩個G-A突變，第112位和115位裂解位點發(fā)生Gly-Lys的變異，產(chǎn)生二元堿性氨基酸，從而完成F基因裂解序列由E-R-Q-E-R/L變?yōu)镵-R-Q-K-R/F的變化。其他對雞源、鴨源病毒F蛋白氨基酸變異的研究也驗證了這種致病性的變化。

對感染組織的研究認為，腦組織是決定NDV致病性的最重要器官，通過腦內(nèi)傳代引起F基因核苷酸的第397位點G-T的變化，導致F蛋白第117位點Leu-Phe的變化，研究發(fā)現(xiàn)，這種Fl蛋白N端的氨基酸變化會阻斷細胞內(nèi)蛋白酶的裂解反應(yīng)，從而發(fā)生致病性的改變。對NDV連續(xù)傳代研究發(fā)現(xiàn)，弱毒株經(jīng)腦內(nèi)傳代后，變成高致病性病毒?？傮w而言，我們?nèi)匀狈哊DV在規(guī)?；B(yǎng)殖中自然感染的數(shù)據(jù)，缺乏在鴨、雞兩種主要宿主之間的遷移規(guī)律方面的信息，鴨源NDV對雞群的致病性和雞源NDV對鴨群的致病性之間的關(guān)系需要更多的驗證，我們應(yīng)當從NDV的感染機制與宿主細胞之間的關(guān)系上探索。

在宿主和NDV之間的關(guān)系研究任重道遠，顯然鴨、鵝、雞具有先天性免疫基因的差異，鴨等水禽細胞具備抵抗NDV早期感染的能力，然而近年來發(fā)生的水禽感染率升高的原因亟待探索，有研究認為，鳥類是這種宿主轉(zhuǎn)變的媒介，由鳥類傳染到水禽的NDV發(fā)生15 186-15 192 nt的轉(zhuǎn)變和F基因101位K和121位V的變異，從而導致宿主致病性的變化，這種可能性需要進一步的研究證實。水禽與雞群使用同類疫苗免疫是否導致健康帶毒鴨群NDV發(fā)生變化，從而出現(xiàn)致病性的變化，還是鳥類等宿主的媒介作用，都需要更多的數(shù)據(jù)和研究證實。

4 鴨NDV研究重點與防治前景

雖然沒有證據(jù)證實高致病性毒株源于活疫苗的使用，但是對于無致病性NDV毒株的傳代發(fā)生的基因?qū)用娴淖儺愐约爸虏×Φ淖兓?，必須高度重視。F裂解位點突變株導致致病性變化以外，經(jīng)腦組織傳代而F裂解位點并未發(fā)生改變的情況下，也可以出現(xiàn)致病性的增強；病毒在感染靶動物體內(nèi)的增殖會不斷增加其致病力，甚至出現(xiàn)超強毒株，這對于副黏病毒來說并非難事。因此我們對于NDV的防治要重新考慮，特別是在水禽養(yǎng)殖中的免疫要系統(tǒng)考慮，一方面要保證鴨等水禽具有對NDV的抵抗力，選用適用于水禽的NDV毒株，使水禽不再成為儲存和改造病毒的基地；另一方面對于鴨群排毒的監(jiān)測要加強，特別是監(jiān)測鴨群排毒、雞群感染分離株、疫苗株的比較，對新城疫活疫苗的要特別加強標記和監(jiān)測。

NDV免疫的減負勢在必行，為追求免疫效果，商品代雞場，特別是商品代蛋雞場頻繁、高劑量免疫ND疫苗。而目前ND疫苗株與流行株抗原性差異造成了諸多問題，大量雞群處于高ND抗體水平，但持續(xù)向環(huán)境排毒[31]，當環(huán)境當中的病毒量達到一定程度以后，又出現(xiàn)非典型癥狀，然后再通過免疫提升抗體維持穩(wěn)定，因此，必須篩選與流行株的抗原性一致的毒株，使雞群維持在合理的抗體水平，并有效降低排毒量。

前文已敘述基因型分析存在的問題，對于NDV的免疫評價，更多的應(yīng)當回歸到傳染病和免疫學研究的基本原理，充分開展疫苗毒株的抗原性研究，應(yīng)當改變單純特異性免疫產(chǎn)生抗體水平的評價標準，轉(zhuǎn)變?yōu)榉翘禺愋悦庖叩谋O(jiān)測、排毒的監(jiān)測等多個方面的考慮，用大量的臨床數(shù)據(jù)證實，并歸入新獸藥質(zhì)量標準的審批中。

既然鴨對于NDV具有天然的抗感染能力，在宿主細胞與NDV感染機制之間的研究需要更多的關(guān)注。從分子生物學的角度，研究水禽對于NDV先天性免疫基因的功能機制，利用基因標記、反向遺傳技術(shù)揭示宿主細胞與NDV感染過程中關(guān)鍵基因的變化，以至于對于基因型的影響和宿主親嗜性的變化，綜合系統(tǒng)性的數(shù)據(jù)分析揭示不同宿主之間NDV的內(nèi)在關(guān)系，才能從根本上制定防控NDV的綜合措施。

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