高 琳，黃燁禎，劉烈發(fā)，吳 浩，謝玉萍

（江西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江西南昌 300029）

蛋鴨場(chǎng)鴨坦布蘇病毒病的流行、診斷與防控

高 琳1，黃燁禎1，劉烈發(fā)1，吳 浩1，謝玉萍1

（江西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江西南昌 300029）

鴨坦布蘇病毒病是嚴(yán)重危害養(yǎng)鴨業(yè)的傳染病，給養(yǎng)鴨戶特別是蛋鴨養(yǎng)殖戶造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。本文結(jié)合江西省近年來的流行病學(xué)調(diào)查和國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究資料，對(duì)鴨坦布蘇病毒病的主要流行病學(xué)特征、江西省蛋鴨場(chǎng)流行概況以及診斷方法與防控措施等進(jìn)行了綜述，以期為該病防控提供參考。

鴨坦布蘇病毒；流行狀況；診斷方法；防控措施

鴨坦布蘇病毒病（Duck Tembusu virus disease，DTMUVD）是由鴨坦布蘇病毒（Duck Tembusu virus，DTMUV）引起的一種以蛋鴨產(chǎn)蛋大幅下降為主要特征的急性、烈性傳染病。該病具有發(fā)病急、傳播快、發(fā)病率高等特點(diǎn)，主要導(dǎo)致蛋鴨產(chǎn)蛋量迅速下降，甚至停產(chǎn)；發(fā)病前期持續(xù)高熱，后期出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)為癱瘓、翻滾、站立不穩(wěn)及共濟(jì)失調(diào)等，發(fā)病率可高達(dá)100%，但病死率低，為5%～15%[1-6]。

自2010年4月起，我國(guó)中東部地區(qū)浙江、福建、廣東、廣西、江蘇、江西、安徽、河南、河北、山東和北京等地的大部分鴨場(chǎng)相繼暴發(fā)DTMUVD。該病病程為1～2個(gè)月，耐過種鴨群可逐漸恢復(fù)產(chǎn)蛋，淘汰率一般為10%～30%，給養(yǎng)鴨業(yè)造成了嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。2011 年以后，該病發(fā)病率明顯降低，但仍存在暴發(fā)原因不明、傳播途徑不詳、動(dòng)物回歸試驗(yàn)難以進(jìn)行、缺乏有效的防控和治療措施等問題，為該病防控帶來挑戰(zhàn)[7-8]。本文擬通過對(duì)DTMUVD主要流行病學(xué)特征、江西省蛋鴨場(chǎng)流行概況，以及診斷方法與防控措施等的詳細(xì)綜述，為該病防控提供較為系統(tǒng)的資料。

1 鴨坦布蘇病毒病主要流行病學(xué)特征

DTMUV屬于黃病毒科（Flaviviridae）黃病毒屬（Flavivirus）恩塔亞病毒群（Ntaya virus group）中的坦布蘇病毒（Tembusu virus）。黃病毒屬的大多數(shù)病毒可引起腦炎、脊髓炎、全身性感染及明顯神經(jīng)癥狀的人獸共患自然疫源性疾病，如登革熱病毒、腦炎病毒、西尼羅病毒、黃熱病病毒等[9]。DTMUV也不例外，鴨感染后表現(xiàn)站立不穩(wěn)，臥地不起等神經(jīng)癥狀，但與其他黃病毒屬病毒不同的是該病毒可致蛋鴨卵巢病變，從而導(dǎo)致產(chǎn)蛋量下降[3]。

DTMUV幾乎可感染所有品種的鴨，其中對(duì)麻鴨的致病力最強(qiáng)，感染群主要以產(chǎn)蛋鴨群為主[2，10]。現(xiàn)有報(bào)道稱，在雞[11]、種鵝[12]和野鴨[2]體內(nèi)也分離到病毒，可見其致病范圍較廣。關(guān)于本病的流行病學(xué)，目前還沒有確切的研究報(bào)道。從臨床上看，一旦鴨舍中有1欄鴨發(fā)病，1～2 d內(nèi)疫病可迅速擴(kuò)展到整棟鴨舍，1周之內(nèi)將蔓延至同一地區(qū)的其他鴨場(chǎng)[13]。動(dòng)物試驗(yàn)驗(yàn)證，與病鴨同居的動(dòng)物也可感染發(fā)病，因此推斷病毒的主要傳播方式為水平傳播，尤其是經(jīng)呼吸道傳播，采食及飲水亦有傳播該病的可能[6，14]。黃病毒屬大部分成員為蚊蟲傳播，所以也不排除DTMUV經(jīng)蟲媒傳播的可能。但有數(shù)據(jù)顯示，在北方地區(qū)秋冬季節(jié)雖然蚊蟲活動(dòng)較少，但仍然有大面積的DTMUVD流行。蚊蟲和白蛉的飛行距離有限，疾病傳播的范圍也相對(duì)較小，這與短時(shí)間內(nèi)大范圍的疫情暴發(fā)特征不符。目前尚無蚊子體內(nèi)病毒的分離和動(dòng)物回歸試驗(yàn)的報(bào)道，且病毒傳播期間的溫度變化與其他節(jié)肢動(dòng)物傳播的其他黃病毒的發(fā)病時(shí)間也不一致，所以目前該病毒不一定是以節(jié)肢動(dòng)物為主要傳播媒介，一些鳥類也有可能是傳播媒介[9，15]。趙冬敏等[16]發(fā)現(xiàn)該病毒在種鵝中可通過鵝胚傳到下一代，說明該病毒可垂直傳播。

2 蛋鴨場(chǎng)鴨坦布蘇病毒病流行概況

在20世紀(jì)90年代就時(shí)有發(fā)生DTMUVD的報(bào)道。溫立斌等[17]在1997年從石家莊、邢臺(tái)等地出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降、神經(jīng)癥狀的康貝爾鴨子中分離到1種疑似黃病毒的有囊膜病毒，初步命名為“鴨病毒性腦炎”。2010年，該病在我國(guó)大規(guī)模暴發(fā)，僅幾個(gè)月的時(shí)間就蔓延至我國(guó)絕大多數(shù)養(yǎng)鴨地區(qū)。滕巧泱[2]、萬春和等[10]、曹貞貞等[1]相繼報(bào)道了種鴨和蛋鴨產(chǎn)蛋量下降的病例，并從中分離到1種黃病毒。蘇敬良[18]也從發(fā)病種鴨中分離出1種新型黃病毒，并將其命名為BYD病毒。起初，該病有多種命名，如鴨病毒性腦炎、鴨產(chǎn)蛋下降綜合癥、鴨出血性卵巢炎、鴨黃病毒感染、鴨坦布蘇病毒感染，等等。研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致鴨群發(fā)病的這種黃病毒在進(jìn)化關(guān)系上與1955年從馬來西亞庫蚊中分離到的坦布蘇病毒非常相近[14]。因此，2011年中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)在第一屆水禽疫病防控研討會(huì)上，將該病名稱統(tǒng)一為“鴨坦布蘇病毒病”。

2010年，DTMUVD傳入江西省并給養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。2011 年以后該病發(fā)病率明顯降低。但自2015年 9月份以來，江西省的樂平市、鄱陽縣、弋陽縣、新建區(qū)、豐城市等蛋鴨養(yǎng)殖集中區(qū)相繼暴發(fā)以產(chǎn)蛋鴨產(chǎn)蛋率突然大幅下降為特征的疾病，通過臨床癥狀和剖檢觀察、病毒分離、分子序列測(cè)定和動(dòng)物回歸試驗(yàn)等，確定病因是DTMUV[19]。2016年3—5月，調(diào)查了江西省蛋鴨養(yǎng)殖密集區(qū)的南昌、九江、吉安、鷹潭、景德鎮(zhèn)等5個(gè)地市的29個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)（含3個(gè)發(fā)病場(chǎng)），對(duì)625份采集的血清和棉拭子樣品進(jìn)行熒光定量RTPCR檢測(cè)。結(jié)果顯示：DTMUV感染率較高，有3個(gè)發(fā)病場(chǎng)均檢測(cè)出DTMUV感染；26個(gè)調(diào)查場(chǎng)中有21個(gè)場(chǎng)檢測(cè)出DTMUV陽性，場(chǎng)帶毒率高達(dá)80.77%。

3 鴨坦布蘇病毒病診斷方法

3.1 臨床診斷

感染的產(chǎn)蛋鴨主要臨床表現(xiàn)為釆食量大幅下降，嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)食欲廢絕，產(chǎn)蛋率亦隨之急劇下降，可由高峰期的90%～95%下降至5%～10%，發(fā)病率高達(dá)100%，死淘率為5%～15%，繼發(fā)感染時(shí)死淘率可達(dá)30%。流行初期病鴨體溫升高，排綠色稀糞，后期神經(jīng)癥狀明顯，表現(xiàn)為頭頸抽搐、共濟(jì)失調(diào)、雙腿后伸，甚至癱瘓，嚴(yán)重者死亡。病鴨所產(chǎn)種蛋的受精率降低10%左右。病程為1～1.5個(gè)月，可自行逐漸恢復(fù)。體質(zhì)好的鴨群，尤其是剛開產(chǎn)和處于產(chǎn)蛋高峰期的鴨群，可恢復(fù)到發(fā)病前的產(chǎn)蛋水平。蛋鴨恢復(fù)后期多數(shù)有一個(gè)明顯的換羽過程。商品肉鴨和育成期的種鴨一般在20～40日齡發(fā)病，以神經(jīng)癥狀為主，表現(xiàn)站立不穩(wěn)、倒地不起、行走不穩(wěn)，病鴨雖有飲食欲，但多數(shù)因飲水、釆食困難衰竭死亡，死淘率為10%～30%[1-2，10-11，20]。

3.2 病理學(xué)診斷

感染鴨的病變主要表現(xiàn)為卵巢出血，卵泡膜充血、出血，卵泡變形、萎縮、液化、破裂，嚴(yán)重者出現(xiàn)卵黃性腹膜炎，部分病鴨的輸卵管內(nèi)出現(xiàn)膠凍或干酪樣物；公鴨可見睪丸體積縮小，重量減輕，雙側(cè)減重明顯，輸精管萎縮。病死鴨肝臟腫大，多數(shù)顏色發(fā)黃；脾臟呈大理石樣，有的極度腫大、破裂；卵泡充血、壞死、液化；心肌蒼白，常見內(nèi)膜出血，有的外壁出血；腦膜出血、腦組織水腫、充血或出血；腸道、腎臟、胰腺、肺臟等也有不同程度的病變。病理組織學(xué)變化為：肝脂肪變性嚴(yán)重，毛細(xì)膽管擴(kuò)張，充滿膽色素，血管周圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；脾臟局部淋巴細(xì)胞減少；卵泡膜充血，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；心肌出血，心肌纖維壞死，散在大量炎性細(xì)胞；胰腺有局灶性壞死；輸卵管固有層水腫；腎小管上皮細(xì)胞腫脹；腦膜有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；小腦軟化壞死，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生；大腦皮質(zhì)部局部壞死，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生；腺胃黏膜上皮細(xì)胞變性、脫落，腺腔內(nèi)有大量炎性細(xì)胞[1，5，10，18，21]。

3.3 實(shí)驗(yàn)室診斷

實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要包括血清學(xué)方法、分子生物學(xué)方法和病毒的分離鑒定。常用的血清學(xué)方法有中和實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、間接免疫熒光法等。其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)由于具有簡(jiǎn)單、快速、靈敏、操作簡(jiǎn)便、適合于大規(guī)模檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，是較好的檢測(cè)鴨坦布蘇病毒的血清學(xué)方法。目前已經(jīng)有學(xué)者建立了檢測(cè)DTMUV的方法，但因病毒的純化和陰性血清的制備等存在一定難度，未能得到廣泛應(yīng)用[22-23]。

隨著DTMUV全基因組序列的公布，較多檢測(cè)抗原的分子生物學(xué)方法已成功建立，如反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）、套式RT-PCR、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法（RT-LAMP）、熒光定量RTPCR、核酸探針等。其中RT-PCR技術(shù)具有快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，其敏感性和特異性均很高，是目前實(shí)驗(yàn)室常用的分子生物學(xué)診斷技術(shù)，也是目前主要的快速診斷方法[24-28]。

病毒分離鑒定是經(jīng)典、準(zhǔn)確、可靠的DTMUV診斷方法。在發(fā)病鴨的卵泡膜、腦、肝臟、脾臟、輸卵管等病變組織均可分離到病毒，其中在卵泡膜和卵巢中最易分離到。目前常用乳鼠腦內(nèi)接種法和細(xì)胞接種分離法分離病毒，但操作繁瑣，試驗(yàn)周期長(zhǎng)，易出現(xiàn)假陰性結(jié)果[10-11，29]。

4 鴨坦布蘇病毒病的防控措施

DTMUV感染的途徑目前認(rèn)為是蟲媒傳播和空氣傳播兩種途徑。目前對(duì)于該病的預(yù)防，要做好以下幾點(diǎn)：一是做到的是改善鴨的飼養(yǎng)環(huán)境，搞好養(yǎng)殖場(chǎng)的環(huán)境衛(wèi)生，減少鴨場(chǎng)中的蚊蟲滋生現(xiàn)象；二是實(shí)行全進(jìn)全出飼養(yǎng)制度，不從疫區(qū)引進(jìn)種禽和購(gòu)買苗禽；三是及時(shí)對(duì)用具和設(shè)備、運(yùn)輸車輛、種蛋進(jìn)行消毒，根據(jù)病毒對(duì)酸、乙醚及去氧膽酸鹽、胰酶、熱敏感的特點(diǎn)，根據(jù)養(yǎng)殖場(chǎng)實(shí)際情況釆取可行的、有效的消毒措施；四是減少對(duì)鴨的各種應(yīng)激，疫苗接種時(shí)要慎重，注意天氣變化，及時(shí)采取防寒保溫等應(yīng)對(duì)措施；五是對(duì)未發(fā)病的鴨群可飼喂高質(zhì)量復(fù)合維生素和微量元素添加劑，以提高其抵抗力；六是對(duì)疑似病鴨應(yīng)做到及時(shí)隔離，對(duì)死亡鴨要進(jìn)行無害化處理，從而根除該病傳染源，防止疾病的大面積流行[8-9，21]。

目前還沒有DTMUV商品化疫苗上市，但李振華[9]報(bào)道，其研制的滅活疫苗在臨床中取得了理想的保護(hù)效果。鑒于目前用于黃熱病毒、乙型腦炎病毒預(yù)防的疫苗均為減毒活疫苗，因此研發(fā)DTMUV減毒疫苗是大勢(shì)所趨。筆者用某科研院校提供的DTMUV疫苗，在開產(chǎn)第1天和第28天，對(duì)種鴨進(jìn)行免疫，21 d后進(jìn)行攻毒。對(duì)照組攻毒后第4天，產(chǎn)蛋率降至0，免疫組攻毒后第6天，產(chǎn)蛋率降至0；對(duì)照組死亡率為27.78%（5/18），免疫組為5.56%（1/18）；攻毒后第17天，對(duì)照組卵巢仍嚴(yán)重萎縮或鈣化，免疫組卵巢已基本恢復(fù)正常。試驗(yàn)結(jié)果說明，疫苗雖不能有效控制疾病初期對(duì)產(chǎn)蛋量下降的影響，但是免疫過的鴨群死亡率更低，且卵巢能提前恢復(fù)正常，說明疫苗在保護(hù)鴨群抵抗病毒方面有一定效果。

該病尚沒有特效的治療藥物，通常在發(fā)病早期釆用DTMUVD卵黃抗體、康復(fù)鴨血清或高免血清進(jìn)行緊急預(yù)防或治療，使雛鴨獲得被動(dòng)免疫，從而減少死亡并防止疫情擴(kuò)散。應(yīng)避免盲目使用抗病毒藥物，只有在鴨群出現(xiàn)采食不振、產(chǎn)蛋量突然下降、拉稀、有共濟(jì)失調(diào)等癥狀出現(xiàn)時(shí)，才能使用抗病毒藥，同時(shí)適當(dāng)添加多維素及中藥，如清溫?cái)《旧?、黃苗多糖、雙黃連等，對(duì)癥治療，可以起到較好的防治效果[30]；也可以適當(dāng)添加抗生素藥物，防止其他細(xì)菌性疾病的感染，避免在產(chǎn)蛋恢復(fù)的過程中因其他疾病導(dǎo)致產(chǎn)蛋再次下降。筆者在攻毒后第2天開始用復(fù)方白龍散對(duì)病鴨進(jìn)行治療，治療組死亡率為0（0/18）；第5天產(chǎn)蛋率降至0，但卵巢的損傷程度較輕，卵巢上仍有卵泡發(fā)育；第9天開始逐漸恢復(fù)產(chǎn)蛋，產(chǎn)蛋率為5.56%。結(jié)果表明復(fù)方白龍散有較好的治療作用，可降低死亡率，提前恢復(fù)產(chǎn)蛋，但進(jìn)一步推廣應(yīng)用仍需要后續(xù)研究。

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（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

Review of Epidemiology，Diagnosis and Prevention of Duck Tembusu Virus in Laying Duck Farms

Gao Lin1，Huang Yezhen1，Liu Liefa1，Wu Hao1，Xie Yuping1
（Jiangxi Animal Disease Prevention and Control Center，Nanchang，Jiangxi 330029）

Duck Tembusu virus disease（DTMUVD） is an important infectious disease which caused serious damage to the duck industry. Based on the epidemiological investigation in Jiangxi Province and the data of scholars at home and abroad in recent years，the epidemiology characters，the epidemic status，the diagnostic methods and control techniques were reviewed in this paper，in order to provide good reference for the prevention and control of the disease.

duck tembusu virus disease；epidemic status；diagnostic methods；control measures

S852.65

：A

：1005-944X（2017）06-0082-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.06.024

江西省科技廳計(jì)劃農(nóng)業(yè)領(lǐng)域重點(diǎn)項(xiàng)目（20151BBF60049）

黃燁禎