（中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所，世界衛(wèi)生組織熱帶病合作中心，科技部國(guó)家級(jí)熱帶病國(guó)際聯(lián)合研究中心，衛(wèi)生部寄生蟲(chóng)病原與媒介生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200025）

旋毛蟲(chóng)病診斷方法研究綜述

翟鋮鋮，陳家旭，陳韶紅，吳秀萍

（中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所，世界衛(wèi)生組織熱帶病合作中心，科技部國(guó)家級(jí)熱帶病國(guó)際聯(lián)合研究中心，衛(wèi)生部寄生蟲(chóng)病原與媒介生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200025）

旋毛蟲(chóng)病對(duì)畜牧業(yè)及人類(lèi)健康造成了嚴(yán)重危害。本文對(duì)動(dòng)物及人類(lèi)旋毛蟲(chóng)病的診斷方法進(jìn)行了綜述，如病原學(xué)診斷方法（包括壓片鏡檢法和集樣消化法）、免疫學(xué)診斷方法（包括抗體檢測(cè)、循環(huán)抗原檢測(cè)和蛋白芯片技術(shù)）、分子生物學(xué)診斷方法（包括聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)）以及基因芯片技術(shù)，分析了現(xiàn)有研究方法的優(yōu)點(diǎn)和不足，為后續(xù)尋找更快速、高效、便捷、準(zhǔn)確的診斷方法提供理論參考。

旋毛蟲(chóng)；旋毛蟲(chóng)?。辉\斷方法

旋毛蟲(chóng)病是由旋毛形線蟲(chóng)引起的食源性人獸共患寄生蟲(chóng)病，呈世界性分布。該病的感染宿主可達(dá)150余種[1]，動(dòng)物及人類(lèi)主要通過(guò)食入含有感染性幼蟲(chóng)的肉類(lèi)及其制品而感染該病。自1835年首次發(fā)現(xiàn)以來(lái)，旋毛蟲(chóng)經(jīng)常引起突發(fā)性重大公共衛(wèi)生事件，是世界各國(guó)屠宰動(dòng)物首檢和強(qiáng)制性必檢的人獸共患病病種，也是目前世界范圍內(nèi)投入防控費(fèi)用較高的食源性人獸共患寄生蟲(chóng)病之一。目前，加強(qiáng)對(duì)該病的檢驗(yàn)與診斷，是控制該病的唯一有效途徑。

旋毛蟲(chóng)病的診斷方法主要分為病原學(xué)診斷、免疫學(xué)診斷和分子生物學(xué)診斷。動(dòng)物感染旋毛蟲(chóng)后幾乎沒(méi)有任何癥狀，因此宰后檢疫大多采用病原學(xué)診斷方法[2]。分子生物學(xué)方法是通過(guò)肌肉樣本進(jìn)行診斷的新興診斷方法。而人旋毛蟲(chóng)病因臨床表現(xiàn)癥狀不明顯，臨床診斷較為困難，易與其他傳染病混淆，所以主要通過(guò)肌肉活檢、發(fā)現(xiàn)幼蟲(chóng)或包囊來(lái)確診，但在感染早期往往不易檢出，且通過(guò)外科手術(shù)進(jìn)行治療導(dǎo)致的創(chuàng)傷較大，病人往往難以接受。因此，通過(guò)血清樣本進(jìn)行診斷的免疫學(xué)方法是最理想的診斷方法。然而，當(dāng)前每種診斷方法都存在一定的弊端，完善旋毛蟲(chóng)現(xiàn)有檢測(cè)方法以及尋找一種更合適的診斷技術(shù)，仍是眾多學(xué)者的研究熱點(diǎn)。本文對(duì)旋毛蟲(chóng)病的診斷方法進(jìn)行了綜述，為進(jìn)一步完善和研制有效的旋毛蟲(chóng)病診斷技術(shù)提供重要的理論參考。

1 病原學(xué)診斷方法

旋毛蟲(chóng)病的病原學(xué)診斷方法包括壓片鏡檢法和集樣消化法。這2種方法是我國(guó)豬旋毛蟲(chóng)病診斷的標(biāo)準(zhǔn)方法。

1.1 壓片鏡檢法

根據(jù)世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）的診斷檢測(cè)和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)，采集規(guī)定部位的28粒燕麥粒大小（2 mm×10 mm）肌肉組織樣品，總質(zhì)量約0.5 g。用2個(gè)載玻片將肌肉粒壓至接近透明，在傳統(tǒng)立體顯微鏡或旋毛蟲(chóng)檢查鏡下進(jìn)行檢查。OIE推薦方法適用于野豬、家豬和馬屬動(dòng)物中旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)的檢測(cè)[3]，而對(duì)于人體旋毛蟲(chóng)病的臨床確診，一般取腓腸肌的肌肉進(jìn)行壓片鏡檢。在檢驗(yàn)旋毛蟲(chóng)時(shí)，往往會(huì)發(fā)現(xiàn)住肉孢子蟲(chóng)和發(fā)育不完全的囊尾蚴，典型蟲(chóng)體較容易被辨認(rèn)，但如果其發(fā)生鈣化、死亡或溶解現(xiàn)象，則容易混淆，在檢查時(shí)需注意鑒別。

對(duì)于壓片鏡檢法，當(dāng)肌肉中蟲(chóng)體密度達(dá)到3條/g時(shí)方可檢出。該法對(duì)操作者的要求較高，且對(duì)早期感染、輕度感染及沒(méi)有包囊的蟲(chóng)種不易檢出，容易誤診和漏診。我國(guó)在動(dòng)物屠宰檢疫中多用目檢法和鏡檢法相結(jié)合的方法[4]，有的則采用壓片鏡檢法和免疫膠體金檢測(cè)相結(jié)合的方法[5]，需耗費(fèi)大量人力與時(shí)間。

1.2 集樣消化法

根據(jù)歐盟法令（77/96/EEC號(hào)令）規(guī)定的磁力攪拌器法[6]，取待檢動(dòng)物易感部位肌肉組織樣品約100 g于燒杯中，加入含1%胃蛋白酶和1%鹽酸的人工消化液，將其置于熱板磁力攪拌器，46～48 ℃下均勻攪拌30 min，用網(wǎng)篩（180目）過(guò)濾肉渣組織，靜置沉淀30 min，將10 mL下層沉淀液轉(zhuǎn)移至帶有網(wǎng)格的培養(yǎng)皿中，在旋毛蟲(chóng)檢查鏡或者立體顯微鏡（15～40×）下檢測(cè)樣品中是否存在旋毛蟲(chóng)。該法是國(guó)際旋毛蟲(chóng)病委員會(huì)的推薦方法，其敏感性為肉中蟲(chóng)體密度達(dá)到1條/g時(shí)即可被檢出，大多數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家采用此法對(duì)屠宰動(dòng)物進(jìn)行檢疫。但吳秀萍等[7]指出，對(duì)于不同種及基因型的旋毛蟲(chóng)，在不同溫度和沉降時(shí)間上，回收的肌幼蟲(chóng)百分比存在明顯差異，用現(xiàn)有國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的消化法檢驗(yàn)旋毛蟲(chóng)會(huì)有一定的偏差，且在感染率低或?qū)Ω腥?4～18 d的成囊前幼蟲(chóng)檢查時(shí)，可能會(huì)造成漏檢[8]。單個(gè)胴體檢驗(yàn)需要耗費(fèi)大量人力和時(shí)間，相比之下，集樣消化法可一次檢測(cè)胴體多達(dá)100余頭。雖然集樣消化法需要相對(duì)較多的科研技術(shù)和設(shè)備，但其更為廉價(jià)和有效，所以大多數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家仍采用消化法對(duì)屠宰動(dòng)物進(jìn)行例行檢驗(yàn)。

2 免疫學(xué)診斷方法

免疫學(xué)方法具有快速、簡(jiǎn)便、敏感性高等優(yōu)點(diǎn)，既解決了人體取材的局限性，又克服了臨床病癥易誤診的難題，并且人與動(dòng)物可通用，該法逐漸成為旋毛蟲(chóng)病診斷方法的研究熱點(diǎn)。目前，旋毛蟲(chóng)病診斷抗原主要有蟲(chóng)體粗抗原、表面抗原、排泄分泌（ES）抗原、桿細(xì)胞顆粒相關(guān)抗原、重組抗原和循環(huán)抗原等。然而，免疫學(xué)診斷方法所應(yīng)用的抗原存在特異性和敏感性差以及存在診斷盲區(qū)等弊端，因此僅能作為臨床輔助檢查方法。

2.1 抗體檢測(cè)

2.1.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。ELISA由于敏感性和特異性較高且具備早期應(yīng)用診斷價(jià)值，是目前檢測(cè)旋毛蟲(chóng)感染最常用的輔助方法之一。ELISA方法檢測(cè)的一系列實(shí)驗(yàn)或?qū)嵉匮芯浚驯粡V泛應(yīng)用于豬血清和肉汁樣品檢測(cè)，檢出率高于鏡檢法[9]。ELISA的敏感性和特異性很大程度上取決于應(yīng)用抗原的質(zhì)量，也與操作程序和宿主種類(lèi)有關(guān)。由于旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)的ES抗原較好制備，所以它是旋毛蟲(chóng)病最常用的診斷抗原。但其對(duì)IgG 抗體敏感性較高，往往假陽(yáng)性結(jié)果偏高，需用免疫印跡法來(lái)確認(rèn)。由于肌幼蟲(chóng)的ES抗原具有階段特異性[10]，所以IgG抗體一般可以在感染后12～60 d內(nèi)被檢測(cè)出來(lái)[11]，但因其對(duì)早期的IgE和IgM不敏感，所以利用單一肌幼蟲(chóng)期ES抗原檢測(cè)旋毛蟲(chóng)最佳感染期應(yīng)為感染45 d后[12]，因此不能用來(lái)做早期診斷。雖然肌幼蟲(chóng)易獲得，但因必須人工制備，會(huì)導(dǎo)致每批質(zhì)量不一，且交叉反應(yīng)嚴(yán)重，因而無(wú)法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，其特異性和程序標(biāo)準(zhǔn)化問(wèn)題也有待解決[13]。雖然ELISA方法使用廣泛，其試劑盒也在市場(chǎng)中全面推廣，但商業(yè)化的ELISA試劑盒還沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)化，大多數(shù)不穩(wěn)定，也未用健康人群和旋毛蟲(chóng)病確診人群的血清樣本進(jìn)行驗(yàn)證。由于肌幼蟲(chóng)ES蛋白有以上諸多弊端，因此敏感性和特異性更高、穩(wěn)定性更好、更容易制備、可用于早期診斷的抗原成為各國(guó)學(xué)者研究的焦點(diǎn)。隨著基因工程的發(fā)展，重組抗原有著廣闊的前景，如：旋毛蟲(chóng)腸道期6 h幼蟲(chóng)的ES蛋白[14]，旋毛蟲(chóng)成蟲(chóng)的ES抗原[15]，旋毛蟲(chóng)腸道期6 h幼蟲(chóng)的cDNA文庫(kù)篩選出的半胱氨酸蛋白酶抑制劑編碼基因表達(dá)出的重組Ts-CLP蛋白[16]，從肌幼蟲(chóng)ES蛋白中篩選出來(lái)的編碼31 kDa基因而后表達(dá)出的重組31 kDa蛋白[17]，以及旋毛蟲(chóng)成蟲(chóng)ES蛋白中定位于桿狀體的L20h-Ts3蛋白等[18]。

2.1.2 免疫印跡法（WB）。WB有著較高的特異性和敏感性，但其操作過(guò)程比較繁瑣，通常用來(lái)確認(rèn)ELISA檢測(cè)的陽(yáng)性血清。有研究稱(chēng)，采用ELISA與WB相結(jié)合的方法來(lái)檢驗(yàn)豬旋毛蟲(chóng)病，其敏感性是消化法的31.4倍[19]。另外，Gómez-Morales等[20]發(fā)現(xiàn)，所有旋毛蟲(chóng)病陽(yáng)性血清用WB檢測(cè)后都有1個(gè)三條帶模式，人血清在53～72 kDa之間，豬血清在48～72 kDa之間，這意味著WB可能會(huì)成為檢測(cè)旋毛蟲(chóng)病的金標(biāo)準(zhǔn)。

2.1.3 環(huán)幼沉淀試驗(yàn)（CPT）。CPT是旋毛蟲(chóng)特有的血清學(xué)試驗(yàn)，幼蟲(chóng)分泌的排泄物與特異性抗體結(jié)合，在幼蟲(chóng)的體表特別是口及肛門(mén)部位，產(chǎn)生具有折光性的團(tuán)塊狀或泡沫狀沉淀物，結(jié)果易于判斷，具有較高的敏感性和特異性，操作簡(jiǎn)單且無(wú)需特殊設(shè)備，適用于基層應(yīng)用。朱敬等[21]同時(shí)運(yùn)用斑點(diǎn)ELISA和CPT來(lái)檢測(cè)這2種方法對(duì)旋毛蟲(chóng)病的特異性與敏感性，結(jié)果陽(yáng)性率分別為97.5%和95%，且特異性較高，表明在臨床診斷時(shí)，用這2種方法同時(shí)檢測(cè)，可提高臨床診斷的準(zhǔn)確率。

2.1.4 免疫酶染色試驗(yàn)（IEST）。IEST的原理與ELISA基本相似。朱敬等[22]采用IEST和CPT相結(jié)合的方法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)感染旋毛蟲(chóng)的大鼠血清特異性抗體，其陽(yáng)性率分別為97.6%和95.1%，說(shuō)明IEST和CPT對(duì)旋毛蟲(chóng)特異性IgG抗體的檢測(cè)均有較好的敏感性和特異性。在診斷方法的評(píng)價(jià)方面，在診斷旋毛蟲(chóng)病時(shí)，IEST以含有旋毛蟲(chóng)幼蟲(chóng)的肌肉組織切片為抗原，具有敏感性高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，且抗原片可置于-20 ℃以下長(zhǎng)期保存，通過(guò)光學(xué)顯微鏡即可觀察結(jié)果，無(wú)需特殊設(shè)備。

2.1.5 膠體金免疫層析法。膠體金免疫層析法是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物，應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)，因其將免疫分子親和原理和免疫印記法、經(jīng)典的薄層層析技術(shù)相結(jié)合，操作簡(jiǎn)便、快速，日益受到重視。秦銀霞等[23]用膠體金標(biāo)SPA和旋毛蟲(chóng)排泄分泌抗原的免疫層析試紙條檢測(cè)，整個(gè)操作時(shí)間僅需15 min，操作簡(jiǎn)便，不需特殊儀器設(shè)備，檢測(cè)結(jié)果可長(zhǎng)期保存。李雁萍[24]利用免疫層析試紙條檢測(cè)經(jīng)5 000條旋毛蟲(chóng)感染的豬，并與鏡檢法做比較，結(jié)果表明試紙條有著很高的敏感性與特異性，在豬肉檢疫中有很好的應(yīng)用前景。

2.1.6 乳膠凝集試驗(yàn)。乳膠凝集試驗(yàn)是以乳膠顆粒作為載體的一種間接凝集試驗(yàn)，即吸附可溶性抗原于其表面，待特異性抗體與之結(jié)合之后，產(chǎn)生凝集反應(yīng)。這種方法簡(jiǎn)單、省時(shí)、客觀性強(qiáng)，但其敏感性主要取決于待檢查的肉制品，通常比人工消化法的敏感性要低，且這種方法不適用于腌制的肉制品檢測(cè)[25]。但伯樂(lè)公司生產(chǎn)的乳膠凝集試劑盒在經(jīng)過(guò)歐洲5個(gè)實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)證之后，證明該試劑盒的敏感性較高，特異性好，重復(fù)性和穩(wěn)健性也較好，可用于豬肉中的旋毛蟲(chóng)快速檢測(cè)[26]。

2.2 循環(huán)抗原檢測(cè)

宿主感染旋毛蟲(chóng)后，旋毛蟲(chóng)的排泄分泌物進(jìn)入血液中形成循環(huán)抗原，因此可以利用已知的抗體來(lái)檢測(cè)抗原。王中全等[27]利用IgY和單克隆抗體的夾心ELISA來(lái)檢測(cè)感染旋毛蟲(chóng)的鼠血清中的循環(huán)抗原，結(jié)果表明，這種方法可以檢測(cè)鼠血清中排泄分泌抗原的量為1 ng/mL，并且可以在500條旋毛蟲(chóng)感染小鼠的第3天就檢測(cè)到血清中的循環(huán)抗原。這種方法的敏感性可以用作檢測(cè)旋毛蟲(chóng)早期感染以及旋毛蟲(chóng)病的化學(xué)治療評(píng)價(jià)，但在特異性上仍存在不足。

2.3 蛋白芯片技術(shù)

陳家旭等[28]曾用蛋白芯片技術(shù)及5種不同的半純化粗抗原和人類(lèi)血清來(lái)檢測(cè)5種食源性蠕蟲(chóng)（豬囊尾蚴、廣州管圓線蟲(chóng)、并殖吸蟲(chóng)、旋毛形線蟲(chóng)和迭宮絳蟲(chóng)），結(jié)果顯示，此方法敏感、快速、通量高，可應(yīng)用于這5種蠕蟲(chóng)的大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查，為寄生蟲(chóng)病的大量樣品檢測(cè)提供了思路。另外，旋毛蟲(chóng)排泄分泌物質(zhì)表面的多糖抗原可作為ES抗原的替代抗原，成為芯片技術(shù)的檢測(cè)抗原，并顯示出較高的敏感性與特異性[29]，但因肌幼蟲(chóng)期ES抗原存在諸多弊端及該技術(shù)的局限性，仍無(wú)法在臨床上進(jìn)行推廣。

3 分子生物學(xué)診斷方法

隨著PCR技術(shù)和核酸序列技術(shù)的迅速發(fā)展，分子生物學(xué)技術(shù)逐步運(yùn)用于旋毛蟲(chóng)的研究。由于特異性強(qiáng)、敏感性高，分子生物學(xué)診斷方法也越來(lái)越被人們所關(guān)注，成為目前最為敏感的診斷方法。

3.1 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）

目前，PCR技術(shù)已應(yīng)用于旋毛蟲(chóng)的基因診斷、種屬鑒定等多個(gè)領(lǐng)域，且逐漸發(fā)展出常規(guī)PCR、實(shí)時(shí)PCR、多重PCR、熒光定量PCR等方法。這種方法的敏感性可達(dá)0.1條/g幼蟲(chóng)，比推薦的人工消化法的敏感性高5～10倍[30]，有的甚至能達(dá)到0.016條幼蟲(chóng)/g[31]，在旋毛蟲(chóng)病的診斷方面有著廣闊的前景。同時(shí)，食品監(jiān)管機(jī)構(gòu)和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室利用這種穩(wěn)定而簡(jiǎn)單的方法，可有效檢測(cè)肉中的旋毛蟲(chóng)。該法快速、敏感性高、特異性強(qiáng)，可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)肌肉樣本，并且節(jié)省人力和時(shí)間，適用于動(dòng)物群的流行病學(xué)調(diào)查，因此PCR方法有望成為旋毛蟲(chóng)病早期診斷的替代方法。但由于目前檢測(cè)儀器昂貴，且該法對(duì)操作環(huán)境和人員的要求較高，限制了其廣泛應(yīng)用。

3.2 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP）

LAMP技術(shù)是近年來(lái)發(fā)展的一種新的核酸擴(kuò)增技術(shù)，不需要PCR技術(shù)用的精確儀器，只需要恒溫水浴箱并且設(shè)計(jì)合適的引物，就可以在現(xiàn)場(chǎng)實(shí)現(xiàn)高通量快速檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果明顯直觀，通過(guò)肉眼即可辨認(rèn)，檢測(cè)成本低于傳統(tǒng)的ELISA方法，因此該法在食品安全方面日益受到重視[32]。現(xiàn)已發(fā)明出60 min內(nèi)進(jìn)行快速檢測(cè)的LAMP試劑盒，使其更適用于現(xiàn)場(chǎng)和基層醫(yī)療單位使用[33-34]。有研究人員曾以旋毛蟲(chóng)線粒體的大亞基蛋白DNA為目的基因，比較實(shí)時(shí)PCR、LAMP、常規(guī)PCR這3種方法對(duì)豬旋毛蟲(chóng)的檢測(cè)效果。結(jié)果表明：實(shí)時(shí)PCR是一種快速、特異性強(qiáng)、敏感性強(qiáng)的檢測(cè)工具；LAMP方法的敏感性比常規(guī)PCR高10倍，且有快速、易操作、花費(fèi)少等優(yōu)點(diǎn)[35]。LAMP技術(shù)比PCR技術(shù)更適合用于肉類(lèi)旋毛蟲(chóng)的快速檢測(cè)，但易出現(xiàn)假陽(yáng)性[36]，且無(wú)法鑒別旋毛蟲(chóng)的地理株。

3.3 基因芯片技術(shù)

與蛋白芯片不同，基因芯片技術(shù)利用旋毛蟲(chóng)的某個(gè)特異性基因可變區(qū)來(lái)設(shè)計(jì)引物及探針，點(diǎn)樣于玻片，制成基因芯片，旋毛蟲(chóng)的DNA經(jīng)過(guò)引物擴(kuò)增后與芯片上的探針雜交，然后通過(guò)掃描圖像判斷是否檢測(cè)到旋毛蟲(chóng)。張媛等[37]曾利用這種方法進(jìn)行3種寄生蟲(chóng)的檢測(cè)，結(jié)果顯示，探針特異性高，敏感度約為15 ng/mL，而旋毛蟲(chóng)的敏感性達(dá)1條/200 mg。另外，楊朋欣等[38]建立了一種基于雙重PCR的液相基因芯片檢測(cè)方法，來(lái)同時(shí)檢測(cè)食品中的弓形蟲(chóng)和旋毛蟲(chóng)，結(jié)果靈敏度和特異性較高，分別為65.6 ng/mL和39.06 ng/mL，重復(fù)性良好，為食源性寄生蟲(chóng)的檢測(cè)提供了新的思路與方法。

4 小結(jié)

旋毛蟲(chóng)的生存能力強(qiáng)、宿主范圍廣，引起的臨床特征不具特異性，其診斷方法也不夠完善，導(dǎo)致了旋毛蟲(chóng)病從首次發(fā)現(xiàn)至今180多年來(lái)，依然在全世界范圍內(nèi)流行。加強(qiáng)動(dòng)物檢疫，杜絕病肉流入市場(chǎng)，同時(shí)對(duì)人體旋毛蟲(chóng)病早診斷、早治療，對(duì)減少畜牧業(yè)損失、增進(jìn)人類(lèi)健康、減少人類(lèi)重大公共衛(wèi)生事件意義重大。對(duì)于屠宰動(dòng)物旋毛蟲(chóng)病的檢驗(yàn)，OIE法定的檢驗(yàn)方法為鏡檢法及集樣消化法，目前我國(guó)也在使用這2種方法，但這2種方法均存在一定的弊端：鏡檢法費(fèi)時(shí)、費(fèi)力且敏感性差；集樣消化法雖可提高檢出率，但操作復(fù)雜。可結(jié)合免疫學(xué)方法，提高結(jié)果的可靠性。分子生物學(xué)方法敏感性高、特異性強(qiáng)，有可能成為替代傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法的新型檢測(cè)手段。人體旋毛蟲(chóng)病仍通過(guò)肌肉活檢發(fā)現(xiàn)幼蟲(chóng)或包囊來(lái)確診，然而輕度感染及感染早期往往不易被檢出，且不易被人們接受。分子生物學(xué)診斷方法受樣本采集、儀器設(shè)備等因素的影響，也無(wú)法在臨床上得到有效應(yīng)用。免疫學(xué)方法，如ELISA，是最為敏感的方法，然而由于目前所采用抗原的局限性，如蟲(chóng)體及其排泄分泌物抗原不宜大量制備，來(lái)自肌幼蟲(chóng)期的抗原存在檢驗(yàn)盲區(qū)與非特異性等特點(diǎn)，致使免疫學(xué)方法始終未被納入法規(guī)方法。所以，尋找一種敏感性和特異性高、穩(wěn)定性好，可大量制備，可用于早期診斷且節(jié)省人力物力的重組抗原，是未來(lái)研究中亟待解決的問(wèn)題。

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（責(zé)任編輯：杜憲）

Research Progress of Diagnosis Methods about Trichinellosis

Zhai Chengcheng，Chen Jiaxu，Chen Shaohong，Wu Xiuping
（National Institute of Parasitic Diseases，Chinese Center for Disease Control and Prevention；WHO Collaborating Centre for Tropical Diseases；National Center for International Research on Tropical Diseases，Ministry of Science and Technology；Key Laboratory of Parasite and Vector Biology，Ministry of Health，Shanghai 200025）

Trichinellosis caused serious harm to human health and animal husbandry. Diagnostic methods of animal and human′s trichinellosis were introduced in this paper，including etiologic diagnosis methods（including compression microscopy and sample digestion method），immunological diagnostic methods（including antibody detection，detection of circulating antigen and protein chip technology），molecular diagnosis methods（including polymerase chain reaction and loop mediated isothermal amplif i cation）and gene chip technology. The advantages and disadvantages of existing research methods were analyzed，in order to provide a theoretical reference for a rapid，eff i cient，convenient and accurate diagnostic methods.

Trichinella spp.；Trichinellosis；diagnosis method

S852.73

：A

：1005-944X（2017）06-0068-06

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.06.021

國(guó)家科技重大專(zhuān)項(xiàng)（2012ZX10004220）