陳浩俊， 李從榮

·綜述·

鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展

陳浩俊， 李從榮

鮑曼不動(dòng)桿菌 ； 替加環(huán)素 ； 耐藥機(jī)制

鮑 曼 不 動(dòng) 桿 菌（A. baumannii） 屬 于 不 發(fā) 酵糖革蘭陰性桿菌。由于其天然和獲得性耐藥以及超強(qiáng)的適應(yīng)能力，使它已變成最常見的多重耐藥（MDR）細(xì)菌[1]。同時(shí)，由 MDR 鮑曼不動(dòng)桿菌所致感染極大地增加住院患者病死率和住院費(fèi)用[2]。目前，臨床上能用于治療MDR鮑曼不動(dòng)桿菌感染的抗生素有限。碳青霉烯類抗生素曾經(jīng)作為治療MDR 細(xì)菌感染的“最后一道防線”，隨著在臨床上廣泛使用，在全世界范圍內(nèi)已有多宗報(bào)道耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的出現(xiàn)[3]。面對(duì)有效抗生素嚴(yán)重缺乏的現(xiàn)狀，研發(fā)“新藥”和評(píng)估“老藥”是目前亟待解決的問題。

替加環(huán)素（tigecycline）是繼米諾環(huán)素后的另1個(gè)四環(huán)素衍生物，同時(shí)它也是新型甘胺酰環(huán)素家族中第 1 個(gè)被用于臨床的抗生素。2005 年 6 月，經(jīng)美國食品和藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)通過，替加環(huán)素被用于治療皮膚和軟組織感染，隨后在 2009 年，其被用于治療社區(qū)獲得性肺炎。比較于四環(huán)素和米諾環(huán)素，替加環(huán)素的殺菌活性更強(qiáng)：①替加環(huán)素有效地避免了致四環(huán)素耐藥的主動(dòng)外排泵，如Tet（A-E）和 Tet（K），這增加了替加環(huán)素在胞內(nèi)的藥物濃度 ；②替加環(huán)素對(duì) Tet（O）和 Tet（M）等四環(huán)素核糖體保護(hù)蛋白“免疫”[4]。然而隨著替加環(huán)素在臨床抗感染治療中使用頻繁，其耐藥率逐漸增加且以MDR鮑曼不動(dòng)桿菌最為嚴(yán)重?，F(xiàn)就鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 主動(dòng)外排泵介導(dǎo)替加環(huán)素耐藥

鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥機(jī)制復(fù)雜多種，外排泵為其中之一。主動(dòng)外排泵分布廣泛，包括所有真核細(xì)胞和原核細(xì)胞，其具有非常重要的生理作用。除了與細(xì)菌耐藥有關(guān)，外排泵還參與細(xì)菌代謝產(chǎn)物以及對(duì)自身有害的化合物的排泄；同時(shí)，細(xì)菌早期感染過程中的定植與毒力也與外排泵有關(guān)[5]。目前已知與MDR鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥相關(guān)的外排泵家族有 5 類，分別為耐藥結(jié)節(jié)細(xì)胞分化（resistancenodulation-cell division， RND） 家 族、 多 種 藥 物和毒性化合物外排（multidrug and toxic compound extrusion， MATE） 超 家 族、ATP 結(jié) 合 盒（the adenosine triphosphate-binding cassette， ABC） 超家族、小多重耐藥（the small multidrug resistance，SMR） 家 族 和 主 要 易 化 子（the major facilitator，MFS）超家族，其中 RND 家族外排泵過表達(dá)在MDR鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥中起著非常重要的作用[6]。

1.1 AdeABC 外排泵

AdeABC 是 RND 家族中第 1 個(gè)被發(fā)現(xiàn)和闡明的外排泵。在蛋白結(jié)構(gòu)方面，它是一個(gè)由染色體編碼的三聯(lián)泵，主要由 AdeA、AdeB 和 AdeC 3 種蛋白構(gòu)成。其中，AdeB 充當(dāng)三聯(lián)體最重要的運(yùn)載體，AdeA 與膜融合蛋白高度同源，AdeC 也與銅綠假單胞菌的外膜蛋白 OprM 非常相似。在基因結(jié)構(gòu)方面，由操縱子基因 AdeB 作為主導(dǎo)，3 個(gè)結(jié)構(gòu)基因AdeA、AdeB、AdeC 按順序排列并同時(shí)表達(dá)上述三聯(lián)體蛋白。在 AdeA 的上游，調(diào)節(jié)單元 AdeS 和AdeR 反向轉(zhuǎn)錄（transcribed in the opposite direction）并調(diào)節(jié) AdeABC 的表達(dá)。其中，AdeS 充當(dāng)細(xì)菌感受外界刺激的傳感器激酶，AdeR 充當(dāng)傳導(dǎo)刺激的反應(yīng)調(diào)節(jié)器并控制 AdeABC 表達(dá)[7]。大量研究表明，AdeABC-AdeRS 外排泵系統(tǒng)過表達(dá)會(huì)導(dǎo)致 MDR 鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素敏感性降低。

通過反轉(zhuǎn)錄 PCR（RT-PCR）和體外藥敏方法，可以定量研究某基因表達(dá)水平和細(xì)菌耐藥的相關(guān)性[8]。Peleg 等[9]選取了 3 株來自于臨床分離的血流感染菌株 A24（替加環(huán)素敏感）、B46、C75和 1 株實(shí)驗(yàn)室菌株 D54（全敏感）；通過不同濃度的替加環(huán)素體外誘導(dǎo)試驗(yàn)得到一系列 A24突變菌株，其中 A24D 的替加環(huán)素最低抑菌濃度（MIC）為 24 mg/L ；最 后 RT-PCR 結(jié) 果 顯 示， 相 比 較 于D54 的 AdeB 的 表達(dá) 量，A24D、B46 和 C75 分別約有 100 倍、50 倍、40 倍的高表達(dá)。這意味著 AdeB 與替加環(huán)素耐藥非常相關(guān)。同時(shí) AdeS 和AdeR 基因測(cè)序結(jié)果顯示，并沒有檢測(cè)到以往造成AdeABC 過表達(dá)的 AdeR（Pro116 → Leu）和 AdeS（Thr153 → Met）突變[7]。

相 較 于 Peleg 等[9]的 研 究，Ruzin 等[10]還 增設(shè)了一組通過基因同源重組方法敲除 AdeB 基因的對(duì)照組，結(jié)果顯示對(duì)照組的替加環(huán)素 MIC 顯著下降至 0.5 mg/L。測(cè)序結(jié)果顯示耐藥菌株的 AdeS 上存在插入序列 ISAba1，而 ISAba1 的插入突變往往與鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥相聯(lián)系[11]。然而 Ruzin 等[10]并沒有過多探討 ISAba1 與 AdeABC-AdeRS 外排泵系統(tǒng)之間的關(guān)系。

與此同時(shí)，中國臺(tái)灣的一個(gè)研究小組對(duì)此做了一系列深入研究。Sun 等[12]對(duì) 13 株臨床分離的 MDR 鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行 RT-PCR 測(cè)試，結(jié)果顯示所有的耐藥菌株 AdeB 高表達(dá)。遺憾的是與Marchand 等[7]結(jié)果一樣，并未發(fā)現(xiàn) AdeRS 氨基酸替換，提示 AdeB 過表達(dá)可能與其他機(jī)制有關(guān)。隨后，他們通過進(jìn)一步的研究闡明了 Ruzin 等[10]未能解釋清楚的 ISAba1 和 AdeABC-AdeRS 間的關(guān)系。盡管插入序列 ISAba1 使 AdeS 結(jié)構(gòu)不完整，但有趣的是在 ISAba1 上存在一種 Pout啟動(dòng)子，同樣可以轉(zhuǎn)錄生成另一種不完整的 AdeS 傳感器激酶[13]。為了評(píng)價(jià)究竟哪種類型的 AdeRS 氨基酸突變可使 AdeB 最大程度地表達(dá)，Sun 等[14]通過回補(bǔ) 5 種不同類型的 AdeRS 到已被敲除的鮑曼不動(dòng)桿菌菌株中發(fā)現(xiàn)，AdeS 的 Gly186 → Val氨基酸替換是替加環(huán)素耐藥最重要的因素。

除了雙組分系統(tǒng) AdeRS 外，另一個(gè)雙組分系統(tǒng) BaeRS 也對(duì) AdeABC 起調(diào)控作用。Lin 等[15]通過對(duì)比實(shí)驗(yàn)室誘導(dǎo)以及臨床分離的MDR鮑曼不動(dòng)桿菌和其敏感的野生型菌株發(fā)現(xiàn)，前者的 BaeRS與 AdeABC 轉(zhuǎn)錄表達(dá)量有所增加。進(jìn)一步研究表示，敲除 BaeR 基因可導(dǎo)致 AdeB 表達(dá)量大約減少70%，同時(shí)替加環(huán)素 MIC 降低為原來的 1/2。這意味著 BaeRS 正向調(diào)控 AdeB 的表達(dá)，完善了 AdeB的調(diào)控機(jī)制。

1.2 AdeIJK 外排泵

AdeIJK 是 RND 家族中第 2 個(gè)被發(fā)現(xiàn)與 MDR鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥相關(guān)的外排泵。與 AdeABC 類似，AdeIJK 由膜融合蛋白 AdeI、外膜蛋白 AdeK以及與載體蛋白 AdeJ 構(gòu)成，分別由 AdeI、AdeK、AdeJ結(jié)構(gòu)基因編碼而成。在 AdeI的上游，調(diào)節(jié)元件 AdeN 負(fù)性調(diào)節(jié) AdeIJK 的表達(dá)[16]。Damier-piolle等[17]研究顯 示，AdeABC 與 AdeIJK 對(duì) 替加環(huán)素耐藥起著協(xié)同作用 ；同時(shí)，固有的 AdeIJK 過表達(dá)一方面與鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥有關(guān)，另一方面會(huì)對(duì)宿主自身造成一定的傷害。最直接的證據(jù)來自于 Yoon 等[18-19]的研究，他們發(fā)現(xiàn) AdeIJK 的過表達(dá)會(huì)改變鮑曼不動(dòng)桿菌膜結(jié)構(gòu)，最終導(dǎo)致其生物膜形成障礙及適應(yīng)能力和毒力降低。這與鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多黏菌素E耐藥機(jī)制所付出的生物學(xué)代價(jià)類似[20]。

1.3 AdeFGH 外排泵

AdeFGH 是 RND 家族中第 3 個(gè)被闡釋的外排泵。3 個(gè)結(jié)構(gòu)基因 AdeF、AdeG、AdeH 分別編碼膜融合蛋白 AdeF、載體蛋白 AdeG、外膜蛋白AdeH。AdeF 上游的 AdeL 可負(fù)性調(diào)控 AdeFGH 的表達(dá)[21]。在上述 3 個(gè)外排泵中，盡管 AdeABC 占據(jù)MDR鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制的主導(dǎo)地位，然而卻不能忽略 AdeIJK 和 AdeFGH 過表達(dá)的作用[22]。

2 修飾酶介導(dǎo)替加環(huán)素耐藥

早在2005年，當(dāng)替加環(huán)素還處于Ⅲ期臨床試驗(yàn)時(shí)， Moore等[23]就發(fā)現(xiàn)在脆弱擬桿菌中存在一種由tet（X）基因編碼的黃素依賴性單加氧酶TetX可抵抗替加環(huán)素。在還原型輔酶Ⅱ（NADPH）、Mg2+、O2等條件下，替加環(huán)素通過羥基化作用被修飾為11α-羥基替加環(huán)素，從而使之失活。盡管此次研究的菌株為實(shí)驗(yàn)室科研菌株，然而這是首次提出酶參與替加環(huán)素耐藥的機(jī)制。隨后，Bartha等[24]報(bào)道在臨床菌株中也發(fā)現(xiàn)tet（X）及其同源基因tet（X1），同時(shí)他們還發(fā)現(xiàn)tet（X）和tet（X1）的流行率與替加環(huán)素敏感性有關(guān)。那么，對(duì)于臨床耐藥嚴(yán)重的鮑曼不動(dòng)桿菌是否也同樣存在這樣的耐藥機(jī)制呢？Deng等[25]發(fā)現(xiàn)經(jīng)過1個(gè)月前使用碳青霉烯類治療后的鮑曼不動(dòng)桿菌耐替加環(huán)素的概率大大提升，并且首次報(bào)道耐替加環(huán)素鮑曼不動(dòng)桿菌也存在tet（X1），占18.8%。遺憾的是并未通過相關(guān)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證tet（X1）與替加環(huán)素具體的耐藥機(jī)制。

盡管替加環(huán)素針對(duì)四環(huán)素的耐藥機(jī)制，被設(shè)計(jì)出可避免由四環(huán)素的特異性外排泵和核糖體蛋白介導(dǎo)的耐藥，但是越來越多的證據(jù)表明，四環(huán)素的某些耐藥蛋白也可能導(dǎo)致替加環(huán)素耐藥，特別 是 Tet（X） 或 Tet（X1）[26]。 更 多 的 研 究 有 待去解開 Tet蛋白與 MDR 鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥的疑點(diǎn)。

3 藥物作用靶點(diǎn)介導(dǎo)替加環(huán)素耐藥

和適應(yīng)環(huán)境一樣，細(xì)菌可以通過各種進(jìn)化方式去適應(yīng)抗生素。相比較于臨床藥物治療過程中產(chǎn)生耐藥，細(xì)菌通過體外誘導(dǎo)有高達(dá) 10～100 倍的突變率產(chǎn)生耐藥。為了更好地研究鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素的耐藥機(jī)制，體外抗生素誘導(dǎo)試驗(yàn)成為一種比較好的方法。在 Hammerstrom 等[27]實(shí)驗(yàn)中提到鮑曼不動(dòng)桿菌通過一系列的體外誘導(dǎo)進(jìn)化成為高水平替加環(huán)素耐藥的超突變體菌株，與野生型菌株相比，超突變體菌株有著成百上千的基因突變。通過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得到5組與替加環(huán)素最為相關(guān)的耐藥基因，它們分別是 AdeS、rpsJ、rrf、msbA、gna。除了上述已知的 AdeS 突變正性調(diào)節(jié) AdeB 過表達(dá)外，目前我們對(duì)其他可能相關(guān)的耐藥基因知之甚少。

3.1 rpsrpsJ 基因

rpsJ 基因位于靠近替加環(huán)素作用靶點(diǎn)旁的 30S核 糖 體 亞 基 上， 其 可 編 碼 一 種 10S 蛋 白。Villa等[28]提出了 rpsJ 基因突變可致替加環(huán)素耐藥。他們選取產(chǎn) KPC-3 型的肺炎克雷伯菌，通過對(duì)替加環(huán)素耐藥的菌株全基因組測(cè)序發(fā)現(xiàn)，rpsJ基因缺失突變是肺炎克雷伯菌對(duì)替加環(huán)素耐藥的原因。這一突變基因與以前報(bào)道的淋球菌對(duì)四環(huán)素耐藥基因相關(guān)[29]。不僅僅是肺炎克雷伯菌，隨后相繼報(bào)道糞腸球菌、金黃色葡萄球菌以及鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥也與 rpsJ 突變有關(guān)[30-32]。最近，Li等[33]發(fā)現(xiàn)經(jīng)替加環(huán)素治療后產(chǎn) NDM-5 型的大腸埃希菌易出現(xiàn)替加環(huán)素耐藥，外排泵抑制劑作用和全基因測(cè)序結(jié)果顯示，在沒有外排泵參與的情況下，rpsJ基因突變是替加環(huán)素耐藥的主要因素?？梢钥闯?，相比較于非特異性的主動(dòng)外排泵機(jī)制，rpsJ 基因缺失突變不依賴于細(xì)菌種類，其具有高度特異性耐藥。

3.2 trmtrm 基因

Chen 等[34]通 過 一 系 列 體 外 誘 導(dǎo) 最 終 得 到突 變 體 菌 株 19606-T8，RT-PCR 檢 測(cè) 結(jié) 果 發(fā) 現(xiàn)AdeABC、AdeIJK、AdeFGH 3 個(gè)外排泵都不存在過表達(dá)現(xiàn)象，然而對(duì) 19606-T8 全基因組測(cè)序發(fā)現(xiàn)，在 trm 基因上的一個(gè)缺失突變導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄生成和原來 trm 編碼 S-腺苷 -L-甲硫氨酸（SAM）依賴性的甲基轉(zhuǎn)移酶相關(guān)的結(jié)構(gòu)不完整的蛋白，即 trm 甲基化的減弱所致核糖體靶點(diǎn)不能發(fā)生甲基化，進(jìn)而介導(dǎo)替加環(huán)素耐藥。而且他們還發(fā)現(xiàn)3組非同義替換的基因 msbA、lolA、f i lC。質(zhì)?；匮a(bǔ)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)含有 trm 基因接合子菌株恢復(fù)了對(duì)替加環(huán)素和四環(huán)素的敏 感 性， 而 分 別含有 msbA、lolA、f i lC 基因的接合子并未恢復(fù)對(duì)替加環(huán)素敏感性，這表明trm 基因缺失突變是替加環(huán)素耐藥的機(jī)制之一 ；后3個(gè)基因突變與替加環(huán)素耐藥無關(guān)，根據(jù)這3個(gè)基因突變株在培養(yǎng)基上的菌落生長較小，推測(cè)突變可能與細(xì)菌的適應(yīng)能力相關(guān)。

4 細(xì)胞膜滲透性介導(dǎo)替加環(huán)素耐藥

4.1 plsplsC 基因C

在細(xì)菌中，PlsC（1-?；?-3 丙三醇磷脂酰轉(zhuǎn)移酶）是催化合成磷脂的重要酶之一；同時(shí)也是一種跨膜蛋白，參與細(xì)菌細(xì)胞膜滲透性功能[35]。Li等[36]同樣利用選擇性壓力獲得突變體菌株，通過對(duì)突變菌株進(jìn)行全基因組測(cè)序及應(yīng)用比較基因組學(xué)發(fā)現(xiàn)3個(gè)突變可能涉及替加環(huán)素耐藥的發(fā)生，包括編碼假設(shè)蛋白基因的同義突變，以及基因plsC 與 omp38 的移碼突變?；匮a(bǔ)野生型 plsC 基因可以恢復(fù)替加環(huán)素敏感性，證明 plsC 基因的移碼突變與替加環(huán)素耐藥相關(guān)。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，plsC 基因突變可導(dǎo)致菌株細(xì)胞膜通透性改變，而回補(bǔ)其基因后，細(xì)胞膜通透性也得到恢復(fù)。

4.2 AbrpAbrp 基因

Abrp 基因可編碼肽酶 C13 家族蛋白，這種蛋白常常與細(xì)菌生理調(diào)節(jié)有關(guān)，譬如：細(xì)菌生長、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，蛋白或者細(xì)菌之間的交互[37-38]。Li等[39]發(fā)現(xiàn)固有基因 Abrp 的存在可致鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)四環(huán)素家族耐藥，包括替加環(huán)素。透射電子顯微鏡與流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，該基因可導(dǎo)致鮑曼不動(dòng)桿菌細(xì)胞膜的改變。通過構(gòu)建 Abrp 基因缺失突變株發(fā)現(xiàn)，鮑曼不動(dòng)桿菌細(xì)胞膜滲透性增大且恢復(fù)對(duì)替加環(huán)素敏感性，從而證實(shí) Abrp 基因介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌細(xì)胞膜滲透性致替加環(huán)素耐藥的機(jī)制。

隨著MDR鮑曼不動(dòng)桿菌檢出率不斷升高，碳青霉烯類抗生素抗感染治療的失守，多黏菌素和替加環(huán)素已成為治療MDR鮑曼不動(dòng)桿菌感染的最后選擇。本文就國內(nèi)外鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制綜述發(fā)現(xiàn)，RND家族主動(dòng)外排泵是其主要的耐藥機(jī)制，rpsJ基因缺失突變可不依賴菌種而導(dǎo)致替加環(huán)素耐藥且具有高度特異性?？傊?，針對(duì)MDR鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)替加環(huán)素耐藥機(jī)制的深入研究，發(fā)現(xiàn)新的耐藥基因也可為改進(jìn)現(xiàn)有的抗生素提供新靶點(diǎn)。

[1] WOODFORD N ， TURTON JF ， LIVERMORE DM. Multiresistant Gram-negative bacteria ： the role of high-risk clones in the dissemination of antibiotic resistance[J]. FEMS Microbiol Rev， 2011， 35（5）： 736-755.

[2] DIJKSHOORN L， NEMEC A， SEIFERT H. An increasing threat in hospitals ： multidrug-resistant Acinetobacter baumannii[J]. Nat Rev Microbiol， 2007， 5（12）： 939-951.

[3] EVANS BA， AMYES SG. OXA β-Lactamases[J]. Clin Microbiol Rev， 2014， 27（2）： 241-263.

[4] TASINA E， HAIDICH AB， KOKKALI S， et al. Eff i cacy and safety of tigecycline for the treatment of infectious diseases ： a meta-analysis[J]. Lancet Infect Dis， 2011， 11（11）： 834-844.

[5] PIDDOCK LJ. Multidrug-resistance efflux pumps-not just for resistance[J]. Nat Rev Microbiol， 2006， 4（8）： 629-636.

[6] LI XZ， PLESIAT P， NIKAIDO H. The challenge of effluxmediated antibiotic resistance in Gram-negative bacteria[J]. Clin Microbiol Rev， 2015， 28（2）： 337-418.

[7] MARCHAND I， DAMIER-PIOLLE L， COURVALIN P，et al. Expression of the RND-type efflux pump AdeABC in Acinetobacter baumannii is regulated by the AdeRS twocomponent system[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2004， 48（9）： 3298-3304.

[8] RUZIN A， IMMERMANN FW， BRADFORD PA. RT-PCR and statistical analyses of adeABC expression in clinical isolates of Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii complex[J]. Microb Drug Resist， 2010， 16（2）： 87-89.

[9] PELEG AY， ADAMS J， PATERSON DL. Tigecycline Efflux as a mechanism for nonsusceptibility in Acinetobacter baumannii[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2007， 51（6）：2065-2069.

[10] RUZIN A， KEENEY D， BRADFORD PA. AdeABC multidrug efflux pump is associated with decreased susceptibility to tigecycline in Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii complex[J]. J Antimicrob Chemother， 2007， 59（5）：1001-1004.

[11] SEGAL H， GARNY S， ELISHA BG. Is IS（ABA-1）customized for Acinetobacter?[J]. FEMS Microbiol Lett， 2005，243（2）： 425-429.

[12] SUN JR， CHAN MC， CHANG TY， et al. Overexpression of the adeB gene in clinical isolates of tigecycline-nonsusceptible Acinetobacter baumannii without insertion mutations in adeRS[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2010， 54（11）：4934-4938.

[13] SUN JR， PERNG CL， CHAN MC， et al. A truncated AdeS kinase protein generated by ISAba1 insertion correlates with tigecycline resistance in Acinetobacter baumannii[J]. PLoS ONE， 2012， 7（11）： e49534.

[14] SUN JR， JENG WY， PERNG CL， et al. Single amino acid substitution Gly186Val in AdeS restores tigecycline susceptibility of Acinetobacter baumannii[J]. J Antimicrob Chemother， 2016，71（6）： 1488-1492.

[15] LIN MF， LIN YY， YEH HW， et al. Role of the BaeSR twocomponent system in the regulation of Acinetobacter baumannii adeAB genes and its correlation with tigecycline susceptibility[J]. BMC Microbiol， 2014， 14（1）：119.

[16] ROSENFELD N， BOUCHIER C， COURVALIN P， et al. Expression of the resistance-nodulation-cell division pump AdeIJK in Acinetobacter baumannii is regulated by AdeN， a TetR-type regulator[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2012， 56（5）： 2504-2510.

[17] DAMIER-PIOLLE L， MAGNET S， BREMONT S， et al. AdeIJK， a resistance-nodulation-cell division pump effluxing multiple antibiotics in Acinetobacter baumannii[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2008， 52（2）： 557-562.

[18] YOON EJ， CHABANE YN， GOUSSARD S， et al. Contribution of resistance-nodulation-cell division eff l ux systems to antibiotic resistance and biof i lm formation in Acinetobacter baumannii[J]. MBio， 2015， 6（2）： e00309-00315.

[19] YOON EJ， BALLOY V， FIETTE L， et al. Contribution of the Ade resistance-nodulation-cell division-type efflux pumps tofitness and pathogenesis of Acinetobacter baumannii[J]. MBio， 2016， 7（3）： e00697-00616.

[20] BECEIRO A， MORENO A， FERNANDEZ N， et al. Biological cost of different mechanisms of colistin resistance and their impact on virulence in Acinetobacter baumannii[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2014， 58（1）： 518-526.

[21] COYNE S ， ROSENFELD N ， LAMBERT T ， et al. Overexpression of resistance-nodulation-cell division pump AdeFGH confers multidrug resistance in Acinetobacter baumannii[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2010， 54（10）：4389-4393.

[22] YOON EJ， COURVALIN P， GRILLOT-COURVALIN C. RND-type efflux pumps in multidrug-resistant clinical isolates of Acinetobacter baumannii： major role for AdeABC overexpression and AdeRS mutations[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2013， 57（7）： 2989-2995.

[23] MOORE IF， HUGHES DW， WRIGHT GD. Tigecycline is modified by the flavin-dependent monooxygenase TetX[J]. Biochemistry， 2005， 44（35）： 11829-11835.

[24] BARTHA NA， SóKI J， URBáN E， et al. Investigation of the prevalence of tetQ， tetX and tetX1 genes in bacteroides strains with elevated tigecycline minimum inhibitory concentrations[J]. Int J Antimicrob Agents， 2011， 38（6）： 522-525.

[25] DENG M， ZHU MH， LI JJ， et al. Molecular epidemiology and mechanisms of tigecycline resistance in clinical isolates of Acinetobacter baumannii from a Chinese university hospital[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2014， 58（1）： 297-303.

[26] LINKEVICIUS M， SANDEGREN L， ANDERSSON DI. Potential of tetracycline resistance proteins to evolve tigecycline resistance[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2016， 60（2）：789-796.

[27] HAMMERSTROM TG， BEABOUT K， CLEMENTS TP， et al. Acinetobacter baumannii repeatedly evolves a hypermutator phenotype in response to tigecycline that effectively surveys evolutionary trajectories to resistance[J]. PLoS ONE， 2015， 10（10）： e0140489.

[28] VILLA L， FEUDI C， FORTINI D， et al. Genomics of KPC-producing Klebsiella pneumoniae sequence type 512 clone highlights the role of RamR and ribosomal S10 protein mutations in conferring tigecycline resistance[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2014， 58（3）： 1707-1712.

[29] HU M， NANDI S， DAVIES C， et al. High-level chromosomally mediated tetracycline resistance in Neisseria gonorrhoeae results from a point mutation in the rpsJ gene encoding ribosomal protein S10 in combination with the mtrR and penB resistance determinants[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2005， 49（10）：4327-4334.

[30] BEABOUT K， HAMMERSTROM TG， PEREZ AM， et al. The ribosomal S10 protein is a general target for decreased tigecycline susceptibility[J]. Antimicrob Agents Chemother，2015， 59（9）： 5561-5566.

[31] CATTOIR V， ISNARD C， COSQUER T， et al. Genomic analysis of reduced susceptibility to tigecycline in Enterococcus faecium[J]. Antimicrob Agents Chemother， 2015， 59（1）：239-244.

[32] NIEBEL M， QUICK J， PRIETO AM， et al. Deletions in a ribosomal protein-coding gene are associated with tigecycline resistance in Enterococcus faecium[J]. Int J Antimicrob Agents，2015， 46（5）： 572-575.

[33] LI X， MU X， YANG Y， et al. Rapid emergence of high-level tigecycline resistance in Escherichia coli strains harbouring blaNDM-5 in vivo[J]. Int J Antimicrob Agents， 2016， 47（4）：324-327.

[34] CHEN Q， LI X， ZHOU H， et al. Decreased susceptibility to tigecycline in Acinetobacter baumannii mediated by a mutation in trm encoding SAM-dependent methyltransferase[J]. J Antimicrob Chemother， 2014， 69（1）： 72-76.

[35] LU B， JIANG YJ， MAN MQ， et al. Expression and regulation of 1-acyl-sn-glycerol- 3-phosphate acyltransferases in the epidermis[J]. J Lipid Res， 2005， 46（11）： 2448-2457.

[36] LI X， LIU L， JI J， et al. Tigecycline resistance in Acinetobacter baumannii mediated by frameshift mutation in plsC， encoding 1-acyl-sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase[J]. Eur J Clin Microbiol Infect Dis， 2015， 34（3）： 625-631.

[37] WAITE RD ， ROSE RS ， RANGARAJAN M ， et al. Pseudomonas aeruginosa possesses two putative type I signal peptidases， LepB and PA1303， each with distinct roles in physiology and virulence[J]. J Bacteriol， 2012， 194（17）：4521-4536.

[38] PERSONNE Y， CURTIS MA， WAREHAM DW， et al. Activity of the type I signal peptidase inhibitor MD3 against multidrugresistant Gram-negative bacteria alone and in combination with colistin[J]. J Antimicrob Chemother， 2014， 69（12）： 3236-3243.

[39] Li X， Quan J， Yang Y， et al. Abrp， a new gene， confers reduced susceptibility to tetracycline， glycylcine， chloramphenicol and fosfomycin classes in Acinetobacter baumannii[J]. Eur J Clin Microbiol Infect Dis， 2016， 35（8）： 1371-1375.

Research updates on the mechanisms of tigecycline resistance in Acinetobacter baumannii

CHEN Haojun, LI Congrong.
（Department of Laboratory Medicine, Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, China）

R378

：A

：1009-7708 ( 2017 ) 03-0336-05

10.16718/j.1009-7708.2017.03.021

2016-08-01

2016-10-04

國家臨床重點(diǎn)?？平ㄔO(shè)項(xiàng)目（財(cái)社［2010］305）。

武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，武漢 430060。

陳浩?。?990—），男，碩士研究生，主要從事臨床病原微生物耐藥機(jī)制及檢測(cè)方法研究。

李從榮，E-mail：congrongLi33@hotmail.com。