姚旋　虞偉　章瓊

[摘 要] 目的：檢測胚胎停育患者血清及組織中白細(xì)胞介素-6（IL-6）表達(dá)水平，探討IL-6對胚胎停育的影響。方法：將我院2014年5月～2016年5月收治的74例胚胎停育患者納入胚胎停育組，并選取同期50名正常早孕女性、50名健康未孕女性，分別納入早孕組、健康組，檢測各組受試者血清IL-6水平及絨毛、蛻膜組織IL-6表達(dá)水平。結(jié)果：胚胎停育組與早孕組年齡、停經(jīng)時間、孕次、孕囊直徑比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。胚胎停育組血清IL-6水平低于早孕組、健康組，早孕組血清IL-6水平高于健康組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；胚胎停育組絨毛組織、蛻膜組織IL-6表達(dá)水平均低于早孕組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：胚胎停育患者血清及組織中IL-6表達(dá)水平顯著下降，這可能是造成其早期胚胎停止發(fā)育原因之一。

[關(guān)鍵詞] 胚胎停育；血清；絨毛組織；蛻膜組織；白細(xì)胞介素-6

中圖分類號：R446 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：2095-5200（2016）06-035-03

DOI：10.11876/mimt201606013

Expression of IL-6 in serum and tissues of patients with diapause-destined embryo YAO Xuan1.2，YU Wei1，ZHANG Qiong3. （1. Department of laboratory，Jinling Hospital Affiliated to Medical College of Nanjing University，Nanjing 210002 China；2.Department of laboratory，Jiangsu Zhongshan Ganbu LiaoyangYuan，Zhongshan 210014 China；3. Department of gynaecology and obstetrics，Jinling Hospital Affiliated to Medical College of Nanjing University， Nanjing 210002 China）

[Abstract] Objective： This study was conducted to detect the expression of interleukin -6 （IL-6） in serum and tissues of patients with embryonic loss and to discuss the effect of IL-6 on the stop of embryo development. Methods： 74 cases of embryonic loss admitted to our hospital from May 2014 to May 2016 were included in the diapause-destined embryo group， and 50 normal pregnant women and 50 healthy non-pregnant women were selected into the early pregnancy group and the healthy group， respectively， the subjects of all three groups were detected the IL-6 expression levels in serum， villi and decidua tissues. Results： There was no statistically significant difference in age， duration of menopause， times of pregnancy， gestational sac diameter between embryo group and early pregnancy group. Serum IL-6 Level in diapause-destined embryo group was lower than in early pregnancy group and healthy group， and that in pregnancy group was higher than in healthy group， the difference was statistically significant （P<0.05）； IL-6 levels of villi and decidua tissues in diapause-destined embryo group were both lower than in normal pregnancy group， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusions： The level of IL-6 in serum and tissues of the embryo is significantly decreased， which may be one of the reasons for the early diapause of embryo development.

[Key words] embryo abortion； serum； chorionic villi； decidual tissues； interleukin-6

胚胎停育是一種常見的早期病理妊娠，B超檢查可發(fā)現(xiàn)孕囊內(nèi)胚芽或胎兒形態(tài)不規(guī)則、有胚芽無心管搏動或枯萎卵[1]。近年來胚胎停育發(fā)生率不斷上升，不僅對女性身心健康造成了負(fù)面影響，還可導(dǎo)致社會負(fù)擔(dān)增加，明確其發(fā)病機制與影響因素對臨床工作具有很大價值[2]。過往研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞介素-6（IL-6）對促進早期滋養(yǎng)細(xì)胞生長浸潤、胚泡著床及胎盤形成具有重要意義，但目前關(guān)于IL-6對胚胎停育影響的研究較為缺乏[3]。為此，本研究就胚胎停育患者血清及絨毛組織中IL-6表達(dá)進行了檢測。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2014年5月—2016年5月收治的74例胚胎停育患者，均參照文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)確診[4]，納入胚胎停育組，并選取同期50名正常早孕女性、50名健康未孕女性，分別納入早孕組、健康組，其中早孕組女性均可見胚胎原始心管搏動、既往無不良孕產(chǎn)史且自愿要求終止妊娠，胚胎停育組、早孕組均排除停經(jīng)>12周、合并嚴(yán)重內(nèi)科疾病、感染性疾病及生殖道器官疾病者。胚胎停育組年齡21～34歲，平均（25.26±3.57）歲，早孕組年齡22～32歲，平均（25.68±3.26）歲，健康組年齡20～34歲，平均（25.50±3.37）歲。三組受試者年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本臨床研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，受試者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

采集三組受試者入組次日空腹肘靜脈血3 mL，3000 r/min離心25 min，置于-80℃冰箱中，統(tǒng)一檢測其血清IL-6水平，檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法，試劑盒購自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司。采集胚胎停育組、早孕組受試者新鮮離體絨毛及蛻膜組織各2～5 g，使用生理鹽水清洗，使用免疫組織化學(xué)（SP）法，按照試劑盒說明書操作步驟進行，陽性表達(dá)定義為滋養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)胞膜或胞質(zhì)呈棕黃色或黃褐色[5-6]，以5個×400視野陽性區(qū)平均灰度值表示IL-6陽性水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

對本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0進行分析，計數(shù)資料以（n/%）表示，并采用χ2檢驗，計量資料以（x±s）表示，滿足方差齊性則采用獨立樣本t檢驗，若方差不齊，則采用校正t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胚胎停育組與早孕組臨床資料比較

胚胎停育組與早孕組年齡、停經(jīng)時間、孕次、孕囊直徑比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 血清IL-6水平比較

胚胎停育組血清IL-6水平低于早孕組、健康組，早孕組血清IL-6水平高于健康組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.3 胚胎停育組與早孕組組織IL-6 mRNA及蛋白表達(dá)

比較

胚胎停育組絨毛組織、蛻膜組織IL-6 mRNA及蛋白表達(dá)水平均低于早孕組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表3。

3 討論

胚胎停育是指早期胚胎發(fā)育自然終止、胚胎丟失的病理過程，患者妊娠結(jié)局多為稽留流產(chǎn)或不全流產(chǎn)[7]。作為一種常見的病理性妊娠，胚胎停育的發(fā)病機制與遺傳、解剖、內(nèi)分泌、感染、環(huán)境等多種因素有關(guān)，近年來亦有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，IL-6在妊娠及女性生殖內(nèi)分泌、胚泡著床與胚胎生長發(fā)育等環(huán)節(jié)扮演了重要角色[8-9]，本研究結(jié)果表明，胚胎停育患者血清IL-6水平，絨毛組織及蛻膜組織IL-6表達(dá)水平明顯低于早孕組，且早孕組血清IL-6水平高于健康組，說明妊娠早期IL-6分泌水平呈上升狀態(tài)，而IL-6水平的降低可誘發(fā)胚胎停育，其作用機制可能為：1）妊娠被認(rèn)為是一種特殊的同種移植、Th2現(xiàn)象，母-胎界面存在復(fù)雜的免疫應(yīng)答與調(diào)節(jié)，若Th1/Th2可達(dá)到平衡，則母體對胚胎產(chǎn)生免疫耐受，從而避免母體免疫系統(tǒng)對胚胎的排斥[10-11]，保證妊娠進程的延續(xù)。此時IL-6可直接調(diào)節(jié)胚泡穿過上皮基底層，并刺激子宮內(nèi)膜、軟骨硫酸多糖蛋白合成與分泌，故妊娠早期IL-6水平的上升對保證胚泡生長與成功著床具有重要意義[12]。2）IL-6主要由Th2分泌，其表達(dá)水平的降低表明Th1/Th2平衡向Th1偏移，此時母體免疫系統(tǒng)對胚胎的排斥作用逐漸增強，是造成胚胎停育的重要原因之一[13]；此外，趙嵐嵐等[14]指出，IL-6表達(dá)水平的下降往往伴隨著胚泡著床、胎盤絨毛血管生成能力的減弱，繼而造成滋養(yǎng)層細(xì)胞退化甚至壞死，最終導(dǎo)致胚胎停育甚至流產(chǎn)。

但是，由于IL-6水平受機體感染、應(yīng)激、內(nèi)分泌水平等多種因素影響明顯，故多數(shù)學(xué)者對IL-6預(yù)測胚胎停育的價值存在爭議[15-16]。Adhikari等[17]發(fā)現(xiàn)，正常妊娠狀態(tài)下，IL-6可調(diào)節(jié)胎盤人絨毛膜促性腺激素（HCG）合成，并與轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）一同作用，上調(diào)不對稱封閉抗體水平，降低父方抗原受母體免疫排斥的影響，而復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者血清IL-6水平大幅降低，可導(dǎo)致其細(xì)胞免疫激活，子宮局部免疫調(diào)節(jié)失常，不利于妊娠進程的良性發(fā)展。Zhao等[18]指出，IL-6下降多由感染侵犯宮腔所致細(xì)胞完整性下降、細(xì)胞通透性增加所致，提示胚胎停育患者血清及組織中IL-6表達(dá)可能存在先升高后下降的波動變化過程，關(guān)于IL-6水平動態(tài)變化的觀察，有待日后進一步研究予以補充。

綜上所述，作為一種多效性細(xì)胞因子，IL-6在維持胚胎正常發(fā)育過程中扮演了重要角色，因此，明確其表達(dá)水平降低的相關(guān)機制有望為胚胎停育的防治提供新的思路，值得進一步研究。

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