汪翔 吳強(qiáng) 李慶中 李維平

(1安徽醫(yī)科大學(xué)附屬深圳市第二人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)院; 2深圳市神經(jīng)外科重點(diǎn)實(shí)驗室，廣東 深圳 518000)

·綜述·

*通訊作者：李維平，主任醫(yī)師，E-mail: liweiping60@yahoo.com.cn

LncRNA在惡性腦膠質(zhì)瘤中的研究進(jìn)展

汪翔1吳強(qiáng)1李慶中2李維平*

(1安徽醫(yī)科大學(xué)附屬深圳市第二人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)院;2深圳市神經(jīng)外科重點(diǎn)實(shí)驗室，廣東 深圳 518000)

長鏈非編碼RNA; 惡性腦膠質(zhì)瘤; 生物標(biāo)志物

一、背景

惡性腦膠質(zhì)瘤(malignant glioma, MG)是成人最常見的原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤，占中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)惡性腫瘤的近80%且預(yù)后很差，其在成人患者中的平均生存期只有14.6個月。全世界范圍內(nèi)每年約有20萬名患者被新診斷為惡性腦膠質(zhì)瘤，然而這一數(shù)據(jù)還有逐年上升的趨勢[1]。傳統(tǒng)治療惡性腦膠質(zhì)瘤的首選方法是手術(shù)切除，再輔以化療、放療或綜合放化療。然而，由于惡性膠質(zhì)瘤的侵襲性生長特性會與瘤周正常腦組織結(jié)合緊密，外科手術(shù)很難徹底的清除腫瘤。另一方面，雖然化療可以延長患者的生存期，但臨床上總體療效仍不理想[2-3]。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA, LncRNA)是近年研究人類基因組時被發(fā)現(xiàn)的一類長度大于 200個核苷酸的非編碼 RNA(Non-coding RNA, NcRNA)，他們沒有編碼蛋白質(zhì)的能力，而是以RNA的形式通過多種途徑調(diào)控基因的表達(dá)包括腫瘤基因。已發(fā)現(xiàn)有關(guān)LncRNA在惡性腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展過程中起到關(guān)鍵性的調(diào)節(jié)作用[4]。本文就LncRNA在惡性腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制及預(yù)后中可能起到的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行綜述。

二、LncRNA的生物學(xué)特征及與腫瘤的關(guān)系

NcRNA以不同類型如長鏈ncRNA(long ncRNA, LncRNA)和短鏈ncRNA (short ncRNA, SncRNA) 的形式廣泛存在于多細(xì)胞生物的基因組中，他們幾乎參與了所有的細(xì)胞進(jìn)程。其中LncRNA屬于一種新型異構(gòu)ncRNA類別,包括成千上萬的不同轉(zhuǎn)錄本。近年來,研究者們在24種組織和細(xì)胞類型中利用RNA高通量測序定量分析LncRNA的表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)在結(jié)構(gòu)上LncRNA可分為內(nèi)含子非編碼RNA(intronic ncRNA)與基因間ncRNA(lincRNA)，其中，內(nèi)含子非編碼RNA與編碼蛋白質(zhì)基因序列之間有交叉，其可以正性或負(fù)性的調(diào)節(jié)宿主編碼蛋白基因的轉(zhuǎn)錄方向，而lincRNA是指蛋白編碼基因位點(diǎn)之外的基因間ncRNA[5]。同時LncRNA的生成途徑與蛋白編碼基因也相似，他們有著相似的組蛋白修飾譜、剪接信號和長度相近的外顯子或內(nèi)含子。然而，與蛋白編碼基因不同的是，LncRNA更傾向于從包含有兩個內(nèi)含子的基因轉(zhuǎn)錄而來。這些 LncRNA主要坐落在核染色質(zhì),其中一小部分似乎更傾向于被加工成SncRNA。與以前對LncRNA功能認(rèn)識不同的是其不再被認(rèn)為是轉(zhuǎn)錄過程中的副產(chǎn)物，大量研究證實(shí)了他們在細(xì)胞生長、分化以及多能干細(xì)胞的維護(hù)和癌癥的發(fā)病過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用。同時，LncRNA與核結(jié)構(gòu)的互動中涉及眾多基礎(chǔ)的生物學(xué)機(jī)制，如劑量補(bǔ)償(dosage compensation)、基因組印跡(genomic imprinting)和組蛋白修飾(histone modification)等，以上這些生物學(xué)機(jī)制都是通過順式調(diào)節(jié)或反式調(diào)節(jié)基因表達(dá)來實(shí)現(xiàn)。雖然大多數(shù)的LncRNA功能仍有待確定[6]。但目前發(fā)現(xiàn)，LncRNA與腫瘤聯(lián)系密切且其在惡性腦膠質(zhì)瘤中是通過LncRNA的異常表達(dá)促進(jìn)該腫瘤的進(jìn)展[7]。

三、LncRNA在惡性腦膠質(zhì)瘤中的雙重作用

1.提高惡性腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生率及遷移、侵襲能力：核富集轉(zhuǎn)本1(nuclear enriched abundant transcript 1, NEAT1)是一種具有高度調(diào)節(jié)能力的LncRNA，對核體旁斑形成非常重要，已被證實(shí)NEAT1在人類惡性腫瘤包括白血病和卵巢癌可選擇性表達(dá)，并在腫瘤發(fā)生過程中發(fā)揮重要的作用，但在惡性腦膠質(zhì)瘤中還沒有完全被探索清楚[8]。于是Li等[1]對15例惡性腦膠質(zhì)瘤患者的病變組織進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染后，再通過實(shí)時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, RT-qPCR)分析發(fā)現(xiàn)NEAT1在惡性腦膠質(zhì)組織表達(dá)上調(diào)，敲除NEAT1可以減少腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力。免疫沉淀反應(yīng)測定RNA結(jié)合熒光素酶報告證實(shí)NEAT1上綁定著小RNA449b-5p (miRNA-449b-5p)并對其起著“分子海綿”(molecular sponge)樣作用，即可以負(fù)性調(diào)節(jié)miRNA-449b-5p的表達(dá)。眾所周知腫瘤促癌基因間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子基因(cellular-mesenchymal to epithelial transition factor gene, c-Met)是miRNA-449b-5p下游的一個直接作用位點(diǎn)，當(dāng)miRNA-449b-5p表達(dá)下調(diào)時c-Met的表達(dá)量就會升高，從而提高了惡性腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生率。由此可以得知NEAT1是通過miRNA-449b-5p/c-Met軸在MG細(xì)胞中表達(dá)而產(chǎn)生致癌性，這種調(diào)節(jié)機(jī)制提高了惡性腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生率。總的來說，NEAT1通過miRNA-449-5p在惡性腦膠質(zhì)瘤中扮演著致癌基因的角色，該基因可能為惡性腦膠質(zhì)瘤的治療和預(yù)后提供了一個潛在的靶點(diǎn)[9]。

另一方面Shi等結(jié)合膠質(zhì)瘤級別對158例腦膠質(zhì)瘤中基因間長鏈非編碼基因H19(long intergenic non-protein coding RNA H19, H19)的表達(dá)進(jìn)行了統(tǒng)計學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)H19在高級別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)明顯高于低級別膠質(zhì)瘤，同時H19的表達(dá)水平隨著膠質(zhì)瘤級別的升高而提升。為明確H19在惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的生物學(xué)作用，研究者通過體外培養(yǎng)惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87和U251，并構(gòu)建H19的小干擾RNA(siRNA)來抑制H19的表達(dá)。結(jié)果顯示siRNA抑制H19表達(dá)后，兩種惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和遷移能力都顯著降低[10]。他們因此認(rèn)為H19可能作為小非編碼RNA675(miR-675)的前體發(fā)揮促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲和遷移能力的作用。另外，在研究過程中還發(fā)現(xiàn)miR-675在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中也明顯高表達(dá)，且其在高級別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)量高于在低級別膠質(zhì)瘤，而且H19與miR-675在惡性腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)也呈正相關(guān)。當(dāng)抑制H19后miR-675的表達(dá)量也下降，并抑制了腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。為了進(jìn)一步探討miR-675抑制腫瘤細(xì)胞侵襲的分子學(xué)機(jī)制，研究人員應(yīng)用生物學(xué)軟件分析后初步選定鈣粘著蛋白13(cadherin 13)為其靶基因。深入研究發(fā)現(xiàn)miR-675與cadherin13在惡性腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)密切相關(guān)，熒光素酶試驗證miR-675對cadherin 13有直接調(diào)控作用[11]。另外，Jiang等[12]也做了類似的研究，他們利用30例惡性腦膠質(zhì)瘤患者中獲得的腫瘤和正常腦組織標(biāo)本以及這些患者的生存數(shù)據(jù),并通過RT-qPCR檢測兩種組織中的H19表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織中H19的表達(dá)顯著升高，且表達(dá)水平與患者生存期相關(guān)。隨后，研究者使用腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87和U373來探索H19在腫瘤細(xì)胞侵襲以及血管生成中的作用，在體外腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗中證實(shí)了H19過表達(dá)可以促進(jìn)腦惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和血管生成能力，該發(fā)現(xiàn)可能使H19成為未來膠質(zhì)母細(xì)胞瘤治療的一個靶點(diǎn)。

2.抑制惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖及遷移：X-無效的特異性轉(zhuǎn)錄物(X-inactive specific transcript, XIST)作為LncRNA的一種類型，源于xist基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，其對哺乳動物X染色體失活起到了重要的調(diào)節(jié)作用，其中XIST在活動的X染色體中能被廣泛的轉(zhuǎn)錄。有大量的證據(jù)表明XIST在人類細(xì)胞分化、增殖和基因組修復(fù)起著至關(guān)重要的作用，其異常表達(dá)推動著癌癥的進(jìn)展，這一作用可能與異染色質(zhì)的穩(wěn)定性改變以及基因表達(dá)的變化有關(guān)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在一些人類癌癥中如血液系統(tǒng)腫瘤，XIST表達(dá)異常。有研究表明XIST對造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell, HSC)的長期生存至關(guān)重要。然而XIST對膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(glioblastoma stem cell, GSC)的影響及其作用機(jī)理知之甚少[13]。因此Yao等[14]就人類惡性膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中XIST的功能和可能的致癌機(jī)制進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)XIST在惡性腦膠質(zhì)瘤組織和GSCs中表達(dá)上調(diào)。當(dāng)敲除XIST時腫瘤細(xì)胞可通過減少增殖和轉(zhuǎn)移以及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等途徑發(fā)揮著腫瘤抑制功能，從而達(dá)到抑制腫瘤生長和提高生存期的作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)XIST與miR-152可以相互抑制，XIST是miR-152的一個功能結(jié)合位點(diǎn)，而miRNA152是通過一種稱為RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RNA induced silencing complex, RISC)的核糖核蛋白復(fù)合物發(fā)揮基因沉默功能。當(dāng)XIST敲除后，miR-152將在惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的發(fā)揮腫瘤抑制作用。這也預(yù)示著LncRNA-miRNA的識別模塊將會成惡性腦膠質(zhì)瘤患者新的治療靶點(diǎn)，并可進(jìn)一步評估患者的預(yù)后。

四、LncRNA減緩惡性腦膠質(zhì)瘤惡性進(jìn)展

Loewer等[15]在誘導(dǎo)人類多能干細(xì)胞分化和識別過程中發(fā)現(xiàn)了大量多能性表達(dá)相關(guān)的大型基因間非編碼重組轉(zhuǎn)錄RNA(reprogramming-related long noncoding RNA, LincRNA-RoR)，即重編程相關(guān)LncRNA。細(xì)胞LincRNA-RoR的表達(dá)活化可以促進(jìn)細(xì)胞多能性的出現(xiàn)。因此LincRNA-RoR可以被當(dāng)做誘導(dǎo)多能干細(xì)胞形成的一個關(guān)鍵促進(jìn)因素，同時也可以是多能干細(xì)胞重組和分離的一個調(diào)節(jié)器。在此基礎(chǔ)上Feng等利用RT-qPCR分析26位MG患者LincRNA-RoR、SOX11和表皮鋅指因子4(kruppel-like factor 4, KLF4)的表達(dá)量并進(jìn)一步分析它們表達(dá)量之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)與鄰近正常組織相比MG組織的LincRNA-RoR表達(dá)量明顯下降。而通過siRNA敲除lincRNA RoR之后，細(xì)胞侵襲能力顯著提高并增強(qiáng)了CD133的表達(dá)，這導(dǎo)致膠質(zhì)瘤干細(xì)胞球面形成(sphere-forming)的能力顯著提高，這將增加該腫瘤發(fā)生的幾率[16]。但過度表達(dá)lincRNA-RoR反而會降低以上的效應(yīng)。另一方面LincRNA-RoR可通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)KLF4從而起到抑制癌細(xì)胞擴(kuò)散和膠質(zhì)瘤干細(xì)胞自我更新的作用。這暗示著LincRNA-RoR可能是作為惡性腦膠質(zhì)瘤的一個腫瘤抑制基因來抑制癌細(xì)胞的擴(kuò)散和膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的自我更新，這為未來臨床提供了一種新型生物標(biāo)志物。另一個能夠減緩MG惡性進(jìn)展的LncRNA是癌癥易感性候選2(casc2)，該基因位于染色體10q26的位置，現(xiàn)已被定性為子宮內(nèi)膜癌和結(jié)直腸癌的腫瘤抑制因子[17]。最近Wang等[18]確認(rèn)casc2在人惡性腦膠質(zhì)瘤組織中低表達(dá)。它的過表達(dá)將會抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力，以及促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)上調(diào)casc2會明顯抑制miR-21的表達(dá)，而miR-21已被證實(shí)在MG中高表達(dá)并起到促進(jìn)其惡性進(jìn)展的作用。此外生物信息學(xué)、熒光素酶報告分析和下拉實(shí)驗分析了casc2和miR-21內(nèi)在聯(lián)系，發(fā)現(xiàn)了miR-21是以序列特異性的方式結(jié)合在casc2上，casc2通過 miR-21來發(fā)揮負(fù)性調(diào)節(jié)作用。在MG中，casc2發(fā)揮腫瘤抑制作用是通過負(fù)調(diào)控miR-21，這為治療MG提供了一個新的方向。

五、LncRNA作為評估惡性腦膠質(zhì)瘤預(yù)后的指標(biāo)

肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄子1(metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1, MALAT1)作為肺癌轉(zhuǎn)移的預(yù)后因子已被人們所熟知。Ma等[19]對MALAT1在MG發(fā)病機(jī)制中所起的作用進(jìn)行了探索，他們在分析MALAT1表達(dá)量與MG臨床病理特征之間的關(guān)系時發(fā)現(xiàn)，與MG鄰近正常腦組織相比，該腫瘤組織中的MALAT1表達(dá)量明顯增加且其表達(dá)水平與MG的 WHO分級和體積正相關(guān)。因此發(fā)現(xiàn)MALAT1的過度表達(dá)可能會加速M(fèi)G的生長，并提高腫瘤細(xì)胞入侵和轉(zhuǎn)移的能力，其機(jī)制可能是MALAT1能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞轉(zhuǎn)移和細(xì)胞周期相關(guān)的基因表達(dá)。此外，MALAT1表達(dá)與惡性腦膠質(zhì)瘤患者總生存期呈逆相關(guān)關(guān)系：MALAT1表達(dá)量越高，MG患者的總體生存時間越短。因此，MALAT1可以作為MG患者的一個獨(dú)立不良預(yù)后因素。另一個與惡性腦膠質(zhì)瘤預(yù)后密切相關(guān)的LncRNA是同源異形框轉(zhuǎn)錄反義基因RNA(hox transcript antisense intergenic RNA, HOTAIR)，有研究發(fā)現(xiàn)HOTAIR的表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤級別和預(yù)后也密切相關(guān)。多變量Cox回歸分析顯示HOTAIR是MG患者的一個獨(dú)立預(yù)后因素，證實(shí)HOTAIR表達(dá)與MG分子亞型以及癌癥基因組圖譜密切相關(guān)，即MG細(xì)胞中HOTAIR表達(dá)與其惡性等級呈正相關(guān)，同時其惡性程度越高患者的預(yù)后就越差。另外HOTAIR的表達(dá)參與了MG細(xì)胞周期的進(jìn)程，其中HOTAIR的低表達(dá)會抑制MG細(xì)胞克隆增值，阻止細(xì)胞周期G0/G1的進(jìn)展，以及抑制了原位腫瘤的生長。反之HOTAIR的高表達(dá)會相對促進(jìn)MG生長，這將會使患者的生存期大大縮短，因此可以得出，HOTAIR可以作為MG的分子亞型標(biāo)志物，以及細(xì)胞周期的重要調(diào)節(jié)器，更重要的是可作為惡性腦膠質(zhì)瘤患者生存預(yù)后的評估因素[20]。與此研究不謀而合的是Ke等[21]利用定量PCR技術(shù)也證實(shí)了HOTAIR在惡性腦膠質(zhì)瘤組織細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，隨后他們證實(shí)HOTAIR的敲除在MG細(xì)胞中發(fā)揮著腫瘤抑制功能。其機(jī)制可能是miR-326是HOTAIR的一個作用靶點(diǎn)，當(dāng)HOTAIR低表達(dá)時會導(dǎo)致miR-326的表達(dá)上調(diào)，隨后激活 PI3K/AKT 和 MEK 1/2信號通路從而減少成纖維細(xì)胞生長因1(fibroblast growth factor 1, FGF1)的表達(dá)，而fgf1基因是MG的一個癌基因，在MG中扮演致癌的角色，即HOTAIR可通過miR-326介導(dǎo)MG細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。因此HOTAIR-miR-326-FGF1軸可能是惡性腦膠質(zhì)瘤發(fā)生的機(jī)制，這一研究成果為膠質(zhì)瘤臨床治療提供了一個新的策略。

六、展望

惡性腦膠質(zhì)瘤是迄今惡性程度最高的原發(fā)性腦腫瘤，目前膠質(zhì)瘤的發(fā)病機(jī)制仍不明確，還有待于進(jìn)一步探索。LncRNA的發(fā)現(xiàn)及其研究為該腫瘤的發(fā)病機(jī)制的研究帶來了新希望,腫瘤相關(guān)LncRNA的異常調(diào)節(jié)及表達(dá)量的改變預(yù)示著該LncRNA可以作為潛在的生物標(biāo)志物、治療靶點(diǎn)以及預(yù)后指標(biāo)。但是LncRNA在該領(lǐng)域的研究才剛剛起步，很多腫瘤相關(guān)LncRNA仍未被發(fā)現(xiàn)，其機(jī)制尚不明確還需要未來的進(jìn)一步探索。

1LI M, DENG H, PENG H, et al. Functional nanoparticles in targeting glioma diagnosis and therapies [J]. J Nanosci Nanotechnol, 2014, 14(1): 415-432.

2陳寶師, 晉強(qiáng), 張忠, 等. 聯(lián)合靶向治療復(fù)發(fā)惡性腦膠質(zhì)瘤的研究 [J]. 中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志, 2015, 14(7): 740-742.

3章露華, 林洪, 章翔, 等. 多形性腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤化療對預(yù)后的評價 [J]. 中華神經(jīng)外科疾病研究雜志, 2010, 9(1): 86-88.

4SERVISS J T, JOHNSSON P, GRANDER D. An emerging role for long non-coding RNAs in cancer metastasis [J]. Front Genet, 2014, 5: 234-240.

5DERRIEN T, JOHNSON R, BUSSOTTI G, et al. The gencode v7 catalog of human long noncoding RNAs: analysis of their gene structure, evolution, and expression [J]. Genome Res, 2012, 22(9):1775-1789.

6ZHOU S, WANG J, ZHANG Z. An emerging understanding of long noncoding RNAs in kidney cancer [J]. J Cancer Res Clin Oncol, 2014, 140(12): 1989-1995.

7PARK J Y, LEE J E, PARK J B, et al. Roles of long non-coding RNAs on tumorigenesis and glioma development [J]. Brain Tumor Res Treat, 2014, 2(1): 1-6.

8CHOUDHRY H, ALBUKHARI A, MOROTTI M, et al. Tumor hypoxia induces nuclear paraspeckle formation through HIF-2alpha dependent transcriptional activation of NEAT1 leading to cancer cell survival [J]. Oncogene, 2015, 34(34): 4546.

9ZHEN L, YUN-HUI L, HONG-YU D, et al. Long noncoding RNA NEAT1 promotes glioma pathogenesis by regulating miR-449b-5p/c-met axis [J]. Tumour Biol, 2016, 37(1): 673-683.

10SHI Y, WANG Y, LUAN W, et al. Long non-coding RNA H19 promotes glioma cell invasion by deriving miR-675 [J]. PLoS One, 2014, 9(1): e86295.

11朱晉, 萬虹, 姜濤, 等. SiRNA干擾技術(shù)觀察HDAC3對膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87-MG的影響 [J]. 中華神經(jīng)外科雜志, 2013, 29(10):1053-1057.

12JIANG X, YAN Y, HU M, et al. Increased level of H19 long noncoding RNA promotes invasion, angiogenesis, and stemness of glioblastoma cells [J]. J Neurosurg, 2016, 124(1): 129-136.

13YILDIRIM E, KIRBY J E, BROWN D E, et al. Xist RNA is a potent suppressor of hematologic cancer in mice [J]. Cell, 2013, 152(4): 727-742.

14YAO Y, MA J, XUE Y, et al. Knockdown of long non-coding RNA xist exerts tumor-suppressive functions in human glioblastoma stem cells by up-regulating miR-152 [J]. Cancer Lett, 2015, 359(1): 75-86.

15LOEWER S, CABILI M N, GUTTMAN M, et al. Large intergenic non-coding RNA-RoR modulates reprogramming of human induced pluripotent stem cells [J]. Nature genetics, 2010, 42(12):1113-1117.

16FENG S, YAO J, CHEN Y, et al. Expression and functional role of reprogramming-related long noncoding RNA (LincRNA-RoR) in glioma [J]. J Mol Neurosci, 2015, 56(3): 623-630.

17CAO L, ZHOU Y, ZHAI B, et al. Sphere-forming cell subpopulations with cancer stem cell properties in human hepatoma cell lines [J]. BMC gastroenterol, 2011, 11: 71-83.

18WANG P, LIU Y H, YAO Y L, et al. Long non-coding RNA casc2 suppresses malignancy in human gliomas by miR-21 [J]. Cell Signal, 2015, 27(2): 275-282.

19MA K X, WANG H J, LI X R, et al. Long noncoding RNA MALAT1 associates with the malignant status and poor prognosis in glioma [J]. Tumour Biol, 2015, 36(5): 3355-3359.

20ZHANG J X, HAN L, BAO Z S, et al. HOTAIR, a cell cycle-associated long noncoding RNA and a strong predictor of survival, is preferentially expressed in classical and mesenchymal glioma [J]. Neuro Oncol, 2013, 15(12): 1595-1603.

21KE J, YAO Y L, ZHENG J, et al. Knockdown of long non-coding RNA HOTAIR inhibits malignant biological behaviors of human glioma cells via modulation of miR-326 [J]. Oncotarget, 2015, 6(26): 21934-21949.

1671-2897(2017)16-078-03

深圳市科創(chuàng)委基礎(chǔ)研究基金資助項目(JCYJ20140414170821309)

汪翔，碩士研究生，E-mail: doctorwang126@126.com

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A

2015-10-27；

2015-11-25)