■陳 鵬 楊在賓 張 慶 姜淑貞

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東泰安 271018）

近年來，在對肉產(chǎn)品安全高度關(guān)注、實現(xiàn)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展以及抗生素負面作用的影響下，開發(fā)“安全、高效、穩(wěn)定、可控”的新型飼料添加劑成為國內(nèi)外研究的熱點。植物提取物以其安全高效、無殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點，在畜牧生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用，成為一種新型綠色抗生素替代品[1-2]。我國八角和杜仲資源豐富，且具有多種生物學(xué)功能。體外試驗表明，八角和杜仲葉提取物在抗菌[3-4]、抗氧化[5-6]和提高免疫力[7-8]方面具有顯著效果。目前，由于八角和杜仲葉提取物的研究主要集中在體外的研究，作為飼料添加劑對斷奶仔豬的研究尚少。本試驗旨在探討八角和杜仲葉提取物對里岔黑斷奶仔豬生長性能、養(yǎng)分消化率、血清代謝產(chǎn)物和盲腸微生物的影響，為八角和杜仲葉提取物在畜牧生產(chǎn)中替代抗生素的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

八角提取物：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究實驗室提取。提取方法：乙醇提取法，主要成分：反式茴香腦≥55.50%，草稿腦≥6.17%，茴香醛≥4.56%。

杜仲葉提取物：山東龍昌動物保健品有限公司提供。主要成分：杜仲多糖≥20.00%，黃酮≥8.00%，綠原酸≥5.00%。

抗生素：金霉素(山東雨澤銀豐動物藥業(yè)有限公司)。

1.2 試驗設(shè)計

采用單因子試驗設(shè)計，選取28日齡里岔黑斷奶仔豬48頭，隨機分為4個組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)4頭斷奶仔豬，組間體重差異不顯著（P＞0.05）。基礎(chǔ)飼糧參考中國肉脂型生長豬飼養(yǎng)標準[9]配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加八角提取物（500 mg/kg）、杜仲葉提取物（250 mg/kg）和金霉素（50 mg/kg）。試驗預(yù)試期7 d，正式期42 d，仔豬自由采食和飲水。

1.3 檢測指標

1.3.1 生產(chǎn)性能

每天記錄各組仔豬采食量，每周稱量各組仔豬體重，計算其平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。

1.3.2 血液的采集、處理與血清酶的測定

于試驗期結(jié)束后的次日晨飼前，每個重復(fù)隨機選取里岔黑仔豬1頭，使用真空促凝管采集血液15 ml。37℃水浴靜置10 min，3 000 r/min下離心10 min，分離血清，-20℃保存待測，采用全自動生化分析儀（COBAS MIRA Plus，瑞士羅士公司）測定血清中總蛋白(TP)、膽固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)和尿素氮(SUN)的含量。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3.3 盲腸微生物的測定

取盲腸食糜，通過細菌培養(yǎng)基培養(yǎng)，測定盲腸食糜中沙門氏菌（SS瓊脂培養(yǎng)基）、大腸桿菌（營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）、乳酸菌（MRS培養(yǎng)基）的數(shù)量，計算出每克樣品所含菌數(shù)（用每克盲腸內(nèi)容物中細菌個數(shù)的對數(shù)Lgcfu/g表示）。所取盲腸內(nèi)容物經(jīng)勻質(zhì)后在超凈工作臺無菌取樣0.5 g，加入到裝有4.5 ml稀釋液的試管中，在微型振蕩器上振蕩20 min，然后從試管中取0.5 g加入另一個試管振蕩5 min，依次稀釋到10-6。用移液槍取10 μl放到不同培養(yǎng)基平皿內(nèi)，然后置于37℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h后進行菌落計數(shù)，細菌數(shù)量采用平板菌落記數(shù)法進行統(tǒng)計，計算出每克樣品所含菌數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)使用SAS 9.3軟件進行統(tǒng)計。處理和仔豬品種間差異采用雙因素方差分析（Double factor variance analysis）進行統(tǒng)計分析，各平均數(shù)之間用Duncan's法進行多重比較。試驗數(shù)據(jù)用“x±SEM”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 對生長性能的影響（見表2）

表2 八角和杜仲葉提取物對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，各組間仔豬平均日采食量（ADFI）差異不顯著（P＞0.05）。與對照組相比，八角、杜仲葉組和抗生素三組斷奶仔豬平均日增重（ADG）顯著提高（P＜0.05）。各組間料重比（F/G）差異不顯著，但杜仲組有下降的趨勢（P＞0.05）。

2.2 對血清代謝產(chǎn)物的影響（見表3）

表3 八角和杜仲葉提取物對斷奶仔豬血清代謝產(chǎn)物的影響

由表3可見，飼糧添加八角組的總蛋白（TP）顯著高于對照組（P＜0.05）。八角組和杜仲葉組血清尿素氮（SUN）含量顯著低于對照組（P＜0.05），與抗生素組差異不顯著（P＞0.05）。各組間甘油三酯（TG）和膽固醇（TCHO）含量差異不顯著（P＜0.05）。

2.3 對盲腸微生物的影響（見表4）

表4 八角和杜仲葉提取物對斷奶仔豬盲腸微生物菌群的影響(lgcfu/g)

由表4可見，各組間的沙門氏菌數(shù)差異不顯著（P＞0.05），但杜仲、八角組和抗生素組有降低的趨勢（P＞0.05）。與對照組相比，八角組和抗生素組盲腸大腸桿菌數(shù)顯著降低（P＜0.05）。各組間乳酸菌數(shù)差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 對斷奶仔豬生長性能的影響

宋振帥[10]研究表明，八角粉（10 g/kg）對育肥豬日增重和采食量沒顯著影響，但可提高其飼料轉(zhuǎn)化率。李曉梅等[11]研究報道，在日糧中添加一定量的杜仲（250 mg/kg）有利于提高日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。本試驗中，飼糧中添加八角（500 mg/kg）和杜仲葉提取物（25 mg/kg）提高了仔豬生長性能（仔豬ADG提高）。八角和杜仲葉提取物具有抗菌消炎[12-14]的作用，通過抑制有害病菌與機體競爭營養(yǎng)物質(zhì)，提高機體中飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收實現(xiàn)[15]，這可能是八角和杜仲葉提取物提高生長性能的原因之一。八角和杜仲葉提取物中含有增強抗膽堿酯酶（AchE）的成分，通過其抗AchE的作用，興奮了胃腸道平滑肌，進一步促進胃腸蠕動及胃液分泌[16-17]，這可能是八角和杜仲葉提取物提高生長性能的另一個原因。但是，八角和杜仲提取物提高生長性能的分子機制尚需進一步證實。

3.2 對血清代謝產(chǎn)物的影響

動物機體的代謝過程是一個動態(tài)平衡的變化過程，血清生化指標是反映動物體內(nèi)物質(zhì)代謝和某些組織器官機能變化的重要特征，也可反映動物體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的沉積情況[18]。

血清總蛋白（TP）是由白蛋白和球蛋白組成，是血清固體成分中含量最多的一類物質(zhì)，含量越高，組織蛋白合成作用越強，越能促進組織器官的生長[19]；而且具有維持血管內(nèi)膠體正常滲透壓和酸堿度、運輸多種代謝物的功能[20]；此外血清中總蛋白含量也反映了機體對蛋白質(zhì)的吸收狀況以及與體液免疫的關(guān)系，是衡量機體免疫水平的一項指標[21]。本試驗中八角組血清總蛋白顯著高于對照組，說明八角具有促進組織器官生長和提高免疫力的作用，可能原因是八角提取物中的成分茴香腦具有促進骨髓組織的生長和白細胞的分泌[22]的功效，從而提高機體的免疫力。

尿素氮(SUN)是豬蛋白質(zhì)分解代謝的終產(chǎn)物，其含量與動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡及肌肉組織的增長狀況呈負相關(guān)性，氨基酸平衡良好血清尿素氮含量下降[23-24]。此外，SUN還與機體疲勞程度有關(guān)，體內(nèi)能源儲備糖原物質(zhì)消耗，就會開始消耗體內(nèi)蛋白質(zhì)，從而產(chǎn)生大量的SUN。機體對運動負荷的適應(yīng)性越低，形成的尿素就越多。本試驗表明添加杜仲和八角提取物的飼糧組血清尿素氮水平顯著低于對照組，說明在飼糧中添加八角和杜仲葉提取物在一定程度上增加仔豬體內(nèi)氮的沉積，有利于斷奶仔豬體內(nèi)蛋白質(zhì)合成和氨基酸的平衡，從而促進斷奶仔豬的生長和飼料蛋白的利用，與前面生產(chǎn)性能結(jié)果一致；并且飼糧中添加八角和杜仲葉提取物也具有抗疲勞的功效。有資料表明[25-26]，茶多酚和竹葉黃酮具有抗疲勞功效，這兩種成分分別屬于多酚類物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)，其抗疲勞的功效可能與八角和杜仲葉提取物成分中的山奈酚、榭皮素等黃酮類物質(zhì)有關(guān)。

3.3 對斷奶仔豬盲腸微生物菌群的影響

仔豬早期斷奶后受到各種應(yīng)激影響，腸道微生物菌群嚴重失調(diào)，斷奶后2 d內(nèi)回腸中乳酸桿菌的數(shù)量幾近消失，而大腸桿菌的數(shù)量顯著增加，且pH值越高，大腸桿菌的數(shù)量越多，而大腸桿菌是引起仔豬斷奶后腹瀉的主要病原菌[27]。植物精油能抑制多種細菌，如單核細胞李斯特屬菌、沙門氏菌、埃希式大腸桿菌屬、志賀氏大腸桿菌、芽孢桿菌、葡萄球菌。其作用機理主要通過其疏水性裂解細胞膜和線粒體的脂質(zhì)層，使其具有滲透性，最終導(dǎo)致細胞內(nèi)容物釋放出來從而達到抑菌目的[28]。鑒于以上機理，本試驗結(jié)果說明，八角提取物可通過抑制腸道有害微生物生長，進而提高消化道揮發(fā)性脂肪酸含量和消化吸收能力，有利于促進仔豬的健康生長。

4 結(jié)論

① 本研究條件下，八角（500 mg/kg）和杜仲葉（250 mg/kg）提取物能提高斷奶仔豬生長性能。

② 八角和杜仲葉提取物降低了血清尿素氮（SUN）含量及提高總蛋白（TP）含量，說明其具有提高蛋白利用率和免疫力的作用。

③八角提取物降低了盲腸有害菌的數(shù)量，說明其具有提高仔豬抗病和腸道消化吸收的能力。

④通過總體試驗結(jié)果可見，八角和杜仲葉提取物對抗生素具有一定的替代作用。