侯偉偉，江 漣，李 冬

同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200065

2015年臨床分離病原菌分布及耐藥性分析

侯偉偉，江 漣，李 冬

同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200065

目的 了解同濟(jì)醫(yī)院分離病原菌的臨床特征及耐藥情況，為臨床醫(yī)師合理應(yīng)用抗生素提供依據(jù)。方法采用VITEK-2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀鑒定臨床菌株，采用WHONET 5.6分析軟件對(duì)2015年分離的病原菌進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果 2015年共檢出病原菌2 924株；其中，革蘭陰性菌占69.6%（2 036/2 924），革蘭陽性球菌占30.4%（888/2 924）。標(biāo)本種類以痰液、尿、血標(biāo)本和分泌物為主。病原菌主要分離自ICU，其次為門診、普外科、泌尿外科和呼吸科。在革蘭陰性菌中，鮑曼不動(dòng)桿菌和肺炎克雷伯菌對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥比較嚴(yán)重；大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株對(duì)抗生素耐藥率多高于非產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株。在革蘭陽性菌中，甲氧西林耐藥葡萄球菌對(duì)抗生素的耐藥率普遍高于甲氧西林敏感葡萄球菌。結(jié)論 2015年臨床細(xì)菌耐藥仍較嚴(yán)重；為控制感染和臨床合理應(yīng)用抗生素，耐藥監(jiān)測工作刻不容緩。

細(xì)菌；臨床特征；耐藥性；耐藥監(jiān)測

近年來，伴隨著抗菌藥物的濫用，細(xì)菌耐藥性問題日益嚴(yán)重。臨床上多重耐藥及廣泛耐藥病原菌給臨床的治療提出了難題。加強(qiáng)和開展細(xì)菌耐藥性監(jiān)測刻不容緩，其對(duì)減少細(xì)菌耐藥性、提高臨床治療水平及控制醫(yī)院感染具有重要意義。本研究對(duì)同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院2015年臨床分離病原菌臨床特征及耐藥性結(jié)果進(jìn)行分析總結(jié)，從而指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗生素。

1　資料與方法

1.1一般資料

剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株及呼吸道標(biāo)本中凝固酶陰性葡萄球菌后2015年同濟(jì)醫(yī)院全年菌株數(shù)共2 924株，統(tǒng)計(jì)未包括真菌、厭氧菌、腸道菌株、支原體、衣原體及淋球菌等。

1.2方法

參照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）[1]，采用VITEK-2Compact全自動(dòng)微生物鑒定藥敏分析儀進(jìn)行M IC藥敏試驗(yàn)，補(bǔ)充抗生素紙片擴(kuò)散法。判斷標(biāo)準(zhǔn)均依據(jù)CLSI2014年標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)控菌株為大腸桿菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析用WHONET 5.6軟件。

2　結(jié)果

2.1監(jiān)測細(xì)菌的基本情況

2.1.1菌種分布情況

2015年共從各類臨床標(biāo)本中分離出病原菌2 924株，排名前10位菌株（表1）。其中，革蘭陰性菌2 036株，占69.6%，排名前4位者為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌；革蘭陽性球菌為888株，占30.4%，排名前4位者為金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌。

表1　臨床分離菌株情況Tab.1 Clinicalbacteria strains

2.1.2臨床菌株標(biāo)本分布情況

細(xì)菌標(biāo)本分布以痰液為主，其次為尿液和血，具體菌株標(biāo)本分布見表2。

表2　細(xì)菌標(biāo)本分布Tab.2 Specim en distribution

2.1.3各類標(biāo)本中主要細(xì)菌分布

痰液標(biāo)本以肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌等醫(yī)院感染病原體為主，尿液和導(dǎo)管肺泡灌洗液標(biāo)本多以革蘭陰性桿菌為主，而外科分泌物、胸腹水、膽汁、腦脊液和膿液標(biāo)本以葡萄球菌為主要病原體（表3）。

表3　臨床標(biāo)本菌株分布Tab.3 Distribution of strains in clinicalspecim ens

2.1.4菌株病區(qū)分布情況

檢出病原菌以ICU、門急診、普外科、泌尿外科和呼吸科為主（表4）。

表4　細(xì)菌分離病區(qū)分布Tab.4 Departmentdistribution of strains

2.2主要臨床分離菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

2.2.1常見革蘭陰性桿菌耐藥性分析

2015年排名前4位的革蘭陰性菌的耐藥率統(tǒng)計(jì)中，以鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率最為嚴(yán)重，銅綠假單胞菌耐藥情況相對(duì)較好（表5）。

表5　革蘭陰性桿菌耐藥性分析Tab.5 The resistance of gram-negative bacilli(%)

2.2.2常見革蘭陽性球菌耐藥分析

2015年排名前4位的革蘭陽性菌的耐藥率統(tǒng)計(jì)中，溶血葡萄球菌對(duì)大部分抗生素的耐藥率高于金黃色葡萄球菌；同樣，屎腸球菌對(duì)大部分抗生素的耐藥率高于糞腸球菌（表6）。

表6　革蘭陽性球菌耐藥性分析Tab.6 The resistance of gram-positive coccobacteria(%)

2.2.3常見革蘭陰性桿菌碳青霉烯類耐藥情況

2015年排名前4位的革蘭陰性菌碳青霉烯類抗生素耐藥統(tǒng)計(jì)中，耐藥嚴(yán)重程度排序（表7）。

2.2.4多重耐藥分析

2015年分離多重耐藥菌株以大腸埃希菌最為多見，其次為銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯氏菌和鮑曼不動(dòng)桿菌（表8）。

2.2.5葡萄球菌甲氧西林耐藥情況

在2015年金黃色葡萄球菌菌株中，MRSA占44.7%，MSSA占55.3%，MRSA少于MSSA；且甲氧西林耐藥的葡萄球菌（包括金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌）對(duì)抗生素的耐藥率均高于甲氧西林敏感的葡萄球菌（表9）。

表7　革蘭陰性桿菌碳青霉烯類耐藥情況Tab.7 The carbapenem-resistance of gramnegative bacilli　(%)

表8　多重耐藥菌檢出情況Tab.8 The detection of pan-drug resistantbacteria

表9　葡萄球菌耐藥情況Tab.9 The resistance of staphylococcus　(%)

3　討論

2015年各類臨床標(biāo)本中分離出病原菌2 924株，革蘭陰性菌和革蘭陽性菌分別為2 036株（69.6%）和888株（30.4%）。標(biāo)本種類以痰液、尿、血標(biāo)本和分泌物為主；其中，痰液標(biāo)本送檢數(shù)量居多，占37.6%，因口腔正常菌群污染、定植菌污染和標(biāo)本留取等問題，痰液標(biāo)本臨床意義有待臨床評(píng)價(jià)，建議送檢下呼吸道抽吸液、支氣管肺泡灌洗液等標(biāo)本，以準(zhǔn)確判斷檢出細(xì)菌是否致病菌。血培養(yǎng)標(biāo)本臨床意義較大，建議臨床考慮繼發(fā)全身感染的情況下，盡早在抗生素使用前采集血培養(yǎng)標(biāo)本，并嚴(yán)格消毒。

病原菌科室分布以ICU、門急診、普外科、泌尿外科和呼吸科為主。痰液標(biāo)本以肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌等醫(yī)院感染常見病原體為主，尿液和導(dǎo)管肺泡灌洗液標(biāo)本多以革蘭陰性桿菌為主，而外科分泌物、胸腹水膽汁腦脊液和膿液標(biāo)本以葡萄球菌為主要病原體。

從2015年第1季度到第4季度的耐藥結(jié)果可知，肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥率呈下降趨勢(shì)。在4種常見革蘭陰性桿菌中，碳青霉烯類抗生素耐藥嚴(yán)重程度依次排序：鮑曼不動(dòng)桿菌＞肺炎克雷伯菌＞銅綠假單胞菌＞大腸埃希菌，鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥性雖有較大程度緩解但仍相對(duì)嚴(yán)重，2015年鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南耐藥率已達(dá)63%，肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南耐藥率為21.4%，銅綠假單胞菌和大腸埃希菌相對(duì)比較敏感（＜10%）。

研究顯示，外科送檢比較多的分泌物、胸腹水、膽汁、腦脊液和膿液標(biāo)本中葡萄球菌為主要病原菌，而金黃色葡萄球菌外科感染中的致病性和耐藥性更不可小覷。眾所周知，外科疾病中僅外科感染就占30%比例，而外科感染可引發(fā)炎性反應(yīng)，損害組織，嚴(yán)重可致患者危重癥發(fā)生。因此，首先必須嚴(yán)密監(jiān)測外科感染，以盡快預(yù)防和控制感染[2-3]。其次，監(jiān)測細(xì)菌耐藥趨勢(shì)，了解病原菌構(gòu)成，為經(jīng)驗(yàn)性抗感染提供依據(jù)，并最終指導(dǎo)外科合理的使用抗生素[4]。研究中，金黃色葡萄球菌中MRSA比例為44.7%，低于MSSA比例。除利福平耐藥率都比較低以外，甲氧西林耐藥葡萄球菌與甲氧西林敏感葡萄球菌抗生素耐藥率相差比較明顯。眾所周知，MRSA已成為院內(nèi)感染的重要病原菌，MRSA的監(jiān)測隔離是院感科工作的重要部分，這也是我院MRSA比例逐年下降的主要原因之一。2015年我院未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥的葡萄球菌。但國外已有耐萬古霉素金黃色葡萄球菌的相關(guān)報(bào)道[5-6]。這對(duì)現(xiàn)今抗生素耐藥形勢(shì)而言，無疑是雪上加霜。而臨床醫(yī)師可通過病原菌的臨床特征及耐藥情況進(jìn)行分析，并通過最終細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏鑒定結(jié)果，綜合有效的制定治療計(jì)劃。

[1]CLSI.Performance Standards for Antim icrobial Susceptibility Testing：Twenty-FourthInformationalSupplement.CLSI documentM 100-S24[M].Wayne：CLSI，2015.

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Distribution and drug resistance analysisof pathogenic bacteria isolated from clinicalspecimens in 2015

HOUWeiwei，JIANG Lian，LIDong
DepartmentofClinical Laboratory，TongjiHospital，TongjiUniversity SchoolofMedicine，Shanghai 200065，China

Objective To investigate the clinical characteristics and drug resistance of pathogenic bacteria in Tongji Hospital，and provide evidence for rational use of antibiotics in clinics.M ethods VITEK-2 Compact was used to identify the clinical strains.WHONET 5.6 software was adopted to retrospectively analyze the clinical isolates of pathogens in 2015.Resu lts A total of 2 924 non-repetitivemessages of bacteria were collected in 2015.The prevalence of gram-negative bacteriawas 69.6%（2 036/2 924），and thatof gram-positive bacteriawas 30.4%（888/2 924）.Mostof the bacteriawere isolated from sputum，urine，blood and secretion specimens.Departments of ICU was themain endem ic area of bacteria，followed by Department of Outpatient，Department of General Surgery，Department of Urology and Departmentof Respiratory Medicine.For gram-negative bacteria，the Carbapenem-resistace of Acinetobacter baumannii and K lebsiella pneumonia was still serious.For Escherichia coli and K lebsiella pneumoniae，the drug resistance of ESBLs-positive Escherichia coliand K lebsiella pneumoniaewasmore serious than the ESBLs-negative Escherichia coli and K lebsiella pneumoniae.For gram-positive bacteria，the resistance rate ofmethicillin-resistant staphylococcus was higher than that ofmethicillin-sensitive staphylococcus.Conclusion The bacterial drug resistance is still serious in the clinical setting in the year of 2015.Monitoring antim icrobial resistance has important significance to control infection and guide clinical rational drug use.

Bacteria；Clinical characteristics；Drug resistance；Resistance surveillance

R446

A

2095-378X（2016）02-0091-05

10.3969/j.issn.2095-378X.2016.02.007

侯偉偉（1983—），主管技師，碩士，從事微生物技術(shù)負(fù)責(zé)

李 冬，電子信箱：186ld@163.com

（2016-03-15）