楊永梅，陳 琦

（1.黃山學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，安徽 黃山245041；2.黃山出入境檢驗(yàn)檢疫局，安徽 黃山245000）

茶湯中啶蟲脒殘留及其安全性評(píng)估

楊永梅1，陳 琦2

（1.黃山學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，安徽 黃山245041；2.黃山出入境檢驗(yàn)檢疫局，安徽 黃山245000）

選擇啶蟲脒含量超出歐盟限量的茶葉為樣品，模擬人們?nèi)粘Ｅ莶柽^程，采用沸水浸泡的方法，討論茶葉浸泡的時(shí)間對(duì)農(nóng)藥溶出量的影響，以溶于茶葉水中啶蟲脒的最大濃度，計(jì)算出人通過飲用此類茶湯而進(jìn)入人體的最大農(nóng)藥殘留量，考察飲茶是否安全。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，啶蟲脒的計(jì)算數(shù)值為0.003mg/kg，遠(yuǎn)小于歐盟食品安全局對(duì)啶蟲脒的ADI數(shù)值（0.06mg/kg）。

茶湯；溶出濃度；農(nóng)藥殘留

0 前 言

茶葉作為一種飲品歷史悠久。近年來，茶葉對(duì)外貿(mào)易不斷擴(kuò)大，隨著生活水平的不斷提高，人們?cè)絹碓街匾暿称返馁|(zhì)量安全和衛(wèi)生，而茶葉作為出口量較大的食品，其安全性備受國(guó)外消費(fèi)者的關(guān)注。同時(shí)，茶葉進(jìn)口國(guó)家對(duì)茶葉農(nóng)藥殘留限量的要求日益增高[1]。中國(guó)、越南和日本等國(guó)茶葉欲出口到歐盟，受到其茶葉委員會(huì)的監(jiān)控也越來越嚴(yán)格。歐盟在2014年8月25日正式生效實(shí)施了法規(guī)EU87/ 2014。此法規(guī)把茶葉中的異丙隆和啶蟲脒等多種農(nóng)藥的殘留限量要求嚴(yán)格程度又增加了一倍。我國(guó)茶葉出口企業(yè)由于歐盟等國(guó)外市場(chǎng)不斷提高的要求而造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。數(shù)據(jù)顯示我國(guó)茶葉在2014年出口僅為30.1萬噸，而2013年為32.4萬噸。2015年各茶類出口繼續(xù)出現(xiàn)全面的下降趨勢(shì)[3]。這使得我國(guó)出口歐盟的茶葉量大幅度縮減，同時(shí)我國(guó)也會(huì)因?yàn)檗r(nóng)殘超出標(biāo)準(zhǔn)將被逼迫退出歐盟市場(chǎng)。茶葉是一種日常飲料，人們并不是將其全部食用入人體，而只是飲用其茶葉湯，只有在茶湯中的農(nóng)藥、重金屬及其他有害物質(zhì)才會(huì)真正危害人體健康，這是茶葉作為食品的特殊之處。所以在考察茶葉的安全性時(shí)就應(yīng)采取不同的方式，除了對(duì)其最終殘留量，消解動(dòng)態(tài)以及安全使用標(biāo)準(zhǔn)的研究外，還應(yīng)考察真正溶入茶湯中的農(nóng)藥量。目前，對(duì)于茶葉、土壤和水等基質(zhì)中農(nóng)藥殘留量的研究比較多，本文對(duì)人們沖泡茶的過程進(jìn)行模擬，研究茶湯中農(nóng)藥溶出濃度及其影響因素，并對(duì)飲用茶湯的安全性進(jìn)行評(píng)估，此類的報(bào)道相對(duì)還比較少。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品儀器

實(shí)驗(yàn)藥品見表1。

表1 藥品及純度

有機(jī)茶購(gòu)于安徽黃山茶城；實(shí)驗(yàn)用水為超純水。實(shí)驗(yàn)儀器見表2。

1.2 實(shí)驗(yàn)過程

1.2.1 茶葉樣品啶蟲脒前處理步驟

（1）提取

分析天平稱取2個(gè)茶葉樣品2.000g在稱量紙上，倒在80.0mL塑料帶塞子的離心管中，分別標(biāo)記為樣品1和樣品2。加入40.00mL乙睛，15000r/min振蕩提取1.0min，加人5.0g氯化鈉，再均勻攪拌提取1.0min，5000r/min離心機(jī)上離心分離5.0min，一次性吸管吸取上層澄清溶液20.00mL于潔凈塑料離心管中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中（40℃水?。┦谷芤簼饪s到大約1.0mL，備用。

表2 儀器及來源

（2）凈化

取兩只Sep-Pak Vac凈化柱，上部加入大約2.0g無水硫酸鈉，把凈化柱放在雞心瓶上，先用4.00mL乙腈：甲苯(3:1)溶液對(duì)柱子進(jìn)行活化，當(dāng)液面到達(dá)Na2SO4的最上部時(shí)，用一次性吸管把樣品1和2的濃縮液滴加到凈化柱上，再用新的雞心瓶接洗脫液。然后每次用2.00mL乙腈：甲苯(3:1)溶液洗滌3次，把洗滌液也轉(zhuǎn)移到柱中。柱子分別加上50.0mL儲(chǔ)液器，用25.00mL乙腈：甲苯(3:1)溶液提取農(nóng)藥等，將這些提取液都合并在雞心瓶里，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 （40℃水?。┥蠞饪s至溶液剩余約0.50mL。將濃縮液在氮吹至干燥，快速加入1.00mL的乙腈：水（3：2）的溶液溶解此提取物質(zhì)，振蕩均勻，過0.2μm有機(jī)過濾頭，用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)。

（3）測(cè)定條件

a.色譜柱：Agilent XDB-C18 4.6μm×50mm。

b.液相的洗脫程序見表3。

表3 液相洗脫程序

1.2.2 茶湯浸泡步驟

另取上述兩個(gè)茶葉樣品，分別稱取2.000g，倒在50.0mL帶塞子的塑料離心試管中，加入25.0mL沸水，放置1.0min，蓋上蓋子用5000轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)速在離心機(jī)上分離5min，移液槍吸取上層澄清液1.0ml，作為樣品1；茶渣中再用移液槍補(bǔ)加1.0ml沸水浸泡0.5h，5000轉(zhuǎn)/min離心分離5min，移液槍吸取上層清液1.0ml，作為樣品2；茶渣中再加入1.0ml沸水浸泡0.5h，5000轉(zhuǎn)/min離心分離5min，再用移液槍取上層清液1.0ml，作為樣品3；重復(fù)上述操作并放置過夜，作為樣品4。用0.22μm水相過濾頭過濾，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)。此實(shí)驗(yàn)均平行測(cè)定3次。

2 結(jié)果與討論

2.1 茶葉樣品的液相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果

圖1 樣品1液相色譜-質(zhì)譜圖

圖2 樣品2液相色譜-質(zhì)譜圖

通過觀察樣品的液質(zhì)譜圖可知，此2個(gè)樣品經(jīng)相同的前處理方法，在相同的色譜條件下同一批次檢測(cè)，其中啶蟲脒含量分別為207.08ng/ml，38.00ng/ ml，而歐盟對(duì)我國(guó)茶葉中啶蟲脒限量為0.05mg/kg[5]，檢測(cè)結(jié)果表明此兩個(gè)樣品中啶蟲脒含量均超出歐盟限量，不能出口。

2.2 茶葉的浸泡時(shí)間對(duì)溶于水中啶蟲脒量的影響

圖3 啶蟲脒濃度隨茶葉浸泡時(shí)間變化曲線圖

分別將樣品1、2、3和4以Aglient1200-6410B高效液質(zhì)檢測(cè)，察看不同浸泡時(shí)間的茶葉樣品茶湯中的啶蟲脒含量，并作圖3。由圖可知浸泡時(shí)間為1min時(shí)，茶湯中啶蟲脒的含量為11.014ng/ml和0.974ng/ml。浸泡時(shí)間小于0.5h時(shí)，啶蟲脒的含量有較明顯的增加，由于浸泡時(shí)間較少時(shí)還有農(nóng)藥未浸泡溶出。但農(nóng)藥殘留濃度總體都有隨浸泡時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低的趨勢(shì)，浸泡放置過夜之后茶湯中農(nóng)藥含量極低，這可能是啶蟲脒在沸水及長(zhǎng)時(shí)間浸泡的共同影響下發(fā)生了水解[6]。所以建議飲茶時(shí)初次30min浸泡的茶湯棄去不予飲用。

2.3 安全性評(píng)價(jià)

表4 茶葉安全性評(píng)價(jià)計(jì)算表

英國(guó)為世界茶葉日消費(fèi)量最高國(guó)家，按照其用量即每人每天飲茶13.0g計(jì)算，每天每人喝10杯茶，每杯250ml，以樣品茶湯中啶蟲脒最高溶出濃度為參考，計(jì)算出通過飲茶可能進(jìn)入人體的農(nóng)藥最大量（1人/日）。把數(shù)據(jù)再與歐盟食品安全局農(nóng)藥的毒性資料中每日允許攝人量（ADI值）進(jìn)行比較，則可以對(duì)飲用此種茶葉的安全性進(jìn)行評(píng)估。從表4可知啶蟲脒的計(jì)算數(shù)值為0.003mg/kg，遠(yuǎn)小于歐盟食品安全局對(duì)啶蟲脒的ADI數(shù)值（0.06mg/kg）[7]。

3 結(jié) 論

采用沸水浸泡的方法，模擬人們?nèi)粘Ｅ莶柽^程，考察了茶葉浸泡時(shí)間對(duì)溶出濃度的影響，以茶湯中啶蟲脒的最大溶出量，進(jìn)而計(jì)算出通過飲用茶湯而進(jìn)入人體的最大農(nóng)藥殘量。結(jié)果表明啶蟲脒的計(jì)算數(shù)值為0.003mg/kg，遠(yuǎn)小于歐盟食品安全局對(duì)啶蟲脒的ADI數(shù)值（0.06mg/kg）。因此，飲用此類茶葉是安全的，并且建議飲茶時(shí)初次30min浸泡的茶湯棄去不予飲用。

[1]陳宗懋,姜亞萍.歐食品安全局對(duì)吡蟲啉和啶蟲脒的新評(píng)價(jià)[J].中國(guó)茶葉,2014(2):1.

[2]馬維,劉樹興,等.茶葉中啶蟲脒殘留基體標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備及測(cè)定[J].食品科學(xué)，2016,37(2):182-186.

[3]項(xiàng)麗.茶湯中農(nóng)藥殘留及其安全性評(píng)估研究[D].合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué),2005:3-5.

[4]王運(yùn)浩,萬海濱,等.擬除蟲菊酯農(nóng)藥在茶葉中應(yīng)用的安全性評(píng)價(jià)[J].中國(guó)環(huán)境科學(xué)，1997，17（2）：176-179.

[5]Anoop Kumar Barooah.Pesticide Residues in Tea and TheirIntake AssessmentUsing Brew Factor[J].Tea Science,2011，31（5）：419-426.

[6]謝國(guó)紅,劉國(guó)光.啶蟲脒水解動(dòng)力學(xué)研究[J].Anhui Agri Sci. 2007,35(30):9629-9630.

[7]莊無忌.最新歐盟茶葉中農(nóng)藥最高殘留限量[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理,2000,21(4):24-28.

責(zé)任編輯：胡德明

Safety Assessment of Acetamiprid Residues in Tea

Yang Yongmei1,Chen Qi2
(1.School of Chemistry and Chemical Engineering,Huangshan University,Huangshan 245041,China; 2.Huangshan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Huangshan 245000,China)

In this paper,tea with an acetamiprid concentration beyond the detection limit of EU (European Union)is chosen as samples.The tea is soaked in water under the condition of 100℃,which is the same as daily tea making.The influence of the infusing time on the pesticide concentration is discussed.And based on the maximum concentration of acetamiprid dissolved in the tea,the maximum pesticide residue absorbed by the body is calculated to evaluate its safety.It is shown that the sum of acetamiprid is 0.003 mg/kg,and the amount is far less than acetamiprid’s ADI value (0.06mg/kg)set by European Food Safety Authority(EFSA).

tea;dissolution rate;pesticide residue

TS207.7

A

1672-447X(2016)05-0032-03

2016-05-27

黃山學(xué)院教學(xué)研究項(xiàng)目（2015JXYJ13）；安徽省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目（KJHS2016B05）

楊永梅（1979-），黑龍江五常人，碩士，黃山學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院講師，研究方向?yàn)榉治龌瘜W(xué)。