吳婷婷 韓 冰 聶彪彪 董偉偉 楊開倫*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，新疆肉乳用草食動物營養(yǎng)重點實驗室，烏魯木齊830052；2.新疆畜牧科學院生物技術研究中心，新疆維吾爾自治區(qū)動物生物技術重點開放實驗室，農(nóng)業(yè)部草食家畜遺傳育種與繁殖重點實驗室，烏魯木齊830000)

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補喂瘤胃液制備物對羔羊腸道黏膜及血漿中免疫球蛋白含量的影響

吳婷婷1韓 冰2聶彪彪1董偉偉1楊開倫1*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，新疆肉乳用草食動物營養(yǎng)重點實驗室，烏魯木齊830052；2.新疆畜牧科學院生物技術研究中心，新疆維吾爾自治區(qū)動物生物技術重點開放實驗室，農(nóng)業(yè)部草食家畜遺傳育種與繁殖重點實驗室，烏魯木齊830000)

本試驗旨在研究補喂瘤胃液制備物對羔羊腸道黏膜和血漿中免疫球蛋白含量的影響，探討瘤胃液制備物對新生羔羊腸道黏膜免疫及體液免疫的影響。選取50只初生體重接近的新生羔羊為模型動物，隨機分為5組，每組10只。試驗組羔羊1日齡開始補喂健康成年綿羊瘤胃液制備物[瘤胃液(Ⅰ)、滅菌瘤胃液(Ⅱ)、超聲波破碎瘤胃液(Ⅲ)和滅菌超聲波破碎瘤胃液(Ⅳ)]，對照組羔羊補喂等量生理鹽水，每天1次，連續(xù)5 d。在24日齡時每組選取3只羔羊屠宰，采集腸道黏膜；在羔羊14和28日齡時頸靜脈采血并分離血漿。測定腸道黏膜及血漿中免疫球蛋白含量。結果顯示：1)小腸黏膜蛋白質中，各試驗組免疫球蛋白A(IgA)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和免疫球蛋白G(IgG)總量均高于對照組。其中，試驗Ⅲ組IgA總量極顯著高于對照組(P<0.01)，顯著高于其他試驗組(P<0.05)；試驗組SIgA和IgG總量與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。總體來說，免疫球蛋白含量變化趨勢為回腸>十二指腸>空腸，試驗Ⅲ組免疫球蛋白總量較對照組增加較多。2)血漿中，羔羊28日齡時免疫球蛋白含量均高于14日齡。14日齡時試驗各組血漿中IgA含量差異不顯著(P>0.05)，但28日齡時試驗Ⅰ組顯著高于對照組(P<0.05)，極顯著高于其他試驗組(P<0.01)；試驗各組IgG含量在14和28日齡時差異均不顯著(P>0.05)。結果表明，給新生羔羊補喂不同處理的瘤胃液制備物均能提高羔羊腸黏膜免疫能力，補喂超聲波破碎瘤胃液效果最佳。

瘤胃液制備物；新生羔羊；腸道黏膜；血漿；免疫球蛋白

腸道黏膜免疫系統(tǒng)是機體免疫系統(tǒng)內最大也是最為復雜的部分。對于新生動物來說，腸道黏膜免疫系統(tǒng)的發(fā)育很大程度上依賴于微生物的接觸[1-3]，細菌微生物刺激機體產(chǎn)生大量的淋巴細胞和淋巴組織，促進黏膜免疫系統(tǒng)的正常發(fā)育并逐步成熟。動物出生后盡早通過口服接種有益菌(如來自健康動物胃腸道中的微生物制劑)或其成分可調節(jié)腸道黏膜免疫，新生動物早期腸道接種細菌后的早期刺激，能促使小腸黏膜免疫系統(tǒng)發(fā)育、成熟。早期的研究表明，瘤胃微生物或者瘤胃液接種物對犢牛和羔羊有積極作用，能增加動物體重[4-7]，減少腹瀉的發(fā)生[5-6]和增強瘤胃活力[8]等，但是研究者們未注意到瘤胃液或瘤胃細菌及其組分對新生羔羊、犢牛等機體免疫方面的可能作用。本試驗給新生羔羊補喂4種瘤胃液制備物，對羔羊腸道和血漿中免疫球蛋白含量進行測定，探討瘤胃液及其制備物對新生羔羊小腸黏膜免疫的影響，為成年反芻動物瘤胃微生物是否能作為一種合適的微生物抗原并促進羔羊腸道黏膜免疫系統(tǒng)的發(fā)育提供參考。

1 材料與方法

1.1 瘤胃液樣品的采集及處理

試驗選用安裝有永久性瘤胃瘺管的1.5歲中國美利奴羊(新疆型)公羊，飼喂精粗比(干物質基礎)為40∶60的飼糧(精料補充料組成為黃玉米64.5%、棉籽粕32%，食鹽1%、磷酸氫鈣0.5%，預混料2%；粗飼料主要是玉米秸稈)。在飼喂后6 h采集瘤胃液，60目尼龍袋過濾后收集濾液，再將濾液1 100×g，4 ℃離心5 min，除去瘤胃原蟲，收集含大量瘤胃細菌的上清液，作為試驗用瘤胃液并取一部分用來制備試驗所需其他瘤胃液制備物；滅菌瘤胃液參照Muscato等[6]報道方法進行：取部分瘤胃液使用高壓蒸汽滅菌鍋(121 ℃，30 min)使其滅菌，冷卻，用磁力攪拌器攪拌，分裝，制成滅菌瘤胃液；超聲波破碎瘤胃液參照翟衛(wèi)爽[9]報道的方法進行：取部分瘤胃液用超聲波破碎儀破碎(工作時間4 s，間隔時間2 s，工作次數(shù)90次，頻率400 W，重復3次)，用磁力攪拌器攪拌，分裝，制成超聲波破碎瘤胃液；取部分超聲波破碎瘤胃液使用高壓蒸汽滅菌鍋(121 ℃，30 min)使其滅菌，冷卻，用磁力攪拌器攪拌，分裝，制成滅菌超聲波破碎瘤胃液。

1.2 試驗動物與試驗設計

試驗在新疆畜牧科學院下屬的中澳綿羊繁育中心進行。選取初生體重接近的特克賽爾羔羊作為試驗羔羊，隨機分成對照組、試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組，共5組，每組10只，分別補喂生理鹽水、瘤胃液、滅菌瘤胃液、超聲波破碎瘤胃液和滅菌超聲波破碎瘤胃液。

每只羔羊在出生后24 h內(哺乳初乳后)根據(jù)分組分別補喂瘤胃液制備物和生理鹽水，每只羊每天補喂1次，每次5 mL瘤胃液制備物+5 mL煮沸商品牛奶，補喂前先溫熱樣品至37 ℃左右。補喂時人下蹲，用左手大臂輔助夾著羔羊，用左手手掌輔助固定讓羔羊頸頭部自然抬起，右手拿著奶瓶適當傾斜，把奶瓶的奶頭自然含到羔羊嘴中，讓羔羊自行吮吸，連續(xù)補喂5 d。除補喂瘤胃液制備物外，試驗羔羊其他飼養(yǎng)管理按照羊場規(guī)定管理方法進行。

1.3 樣品采集與處理

1.3.1 血液采集與處理

在羔羊14和28日齡時頸靜脈采血5 mL(肝素鈉抗凝)，4 ℃靜置2 h后3 500×g離心15 min，收集上清液，分裝于1.5 mL Eppendorf管中，放置-20 ℃冷凍保存。

1.3.2 羔羊屠宰及腸段收集

在24日齡時每個試驗組選取3只公羔，用抹脖法放血屠宰，在手術臺上保定，使腹部朝上，沿腹線用手術刀劃開腹腔，立即分離胃腸道各段，用預冷生理鹽水沖洗各腔段除掉殘渣，從每段的遠端取5 cm長，用液氮冷凍后-70 ℃保存，供測定黏膜中蛋白質、免疫球蛋白含量。

1.4 指標測定

1.4.1 羔羊腸道黏膜中蛋白質、免疫球蛋白A(immunoglobin A，IgA)、分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobin A，SIgA)和免疫球蛋白G(immunoglobin G，IgG)含量的測定

樣品從-70 ℃冰箱取出后，放入-20 ℃冰箱2 h后將樣品取出在4 ℃冰箱中緩慢融化，待樣品完全融解后將腸段鋪展在白瓷盤中，快速從中間剪開，用鈍玻片將腸道黏膜刮取到1.5 mL Eppendorf管中，稱重，然后按1∶4加入滅菌pH 7.2的0.01 mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)，混勻，4 ℃下13 800×g離心10 min，取上清液。蛋白質含量用Bradford[10]的方法測定，以牛血清白蛋白為標準蛋白質。用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)按照廠家使用說明書進行測定腸道黏膜中IgA、SIgA和IgG含量，試劑盒購置于上海華壹生物科技有限公司。

1.4.2 羔羊血漿中IgA和IgG含量的測定

用ELISA按照廠家使用說明書測定羔羊血漿中IgA和IgG含量，試劑盒購置于上海華壹生物科技有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析

試驗結果均以平均值±標準差(mean±SD)表示。試驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析均采用SPSS 16.0中單因素方差分析，用Duncan氏法進行多重比較，以P<0.05和P<0.01分別為差異顯著和極顯著的標準。

2 結果與分析

2.1 補喂瘤胃液制備物對新生羔羊腸道黏膜免疫球蛋白含量的影響

2.1.1 24日齡羔羊小腸黏膜蛋白質中IgA的含量

補喂瘤胃液制備物對24日齡羔羊小腸黏膜蛋白中IgA的含量見表1。十二指腸中，試驗Ⅱ組IgA含量最高，與試驗I組、試驗Ⅳ組和對照組差異顯著(P<0.05)，與試驗Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅲ組顯著高于試驗Ⅰ組(P<0.05)；空腸中，試驗Ⅲ組IgA含量最高，與試驗Ⅰ組、試驗Ⅳ組和對照組差異極顯著(P<0.01)，其他試驗各組IgA含量差異不顯著(P>0.05)；回腸中IgA含量較十二指腸、空腸中都有增加，其中試驗Ⅲ組回腸中IgA含量最高，對照組回腸中IgA含量最低，各組IgA含量差異不顯著(P>0.05)?？傮w來看，IgA含量在各腸段中分布趨勢為回腸>十二指腸>空腸。試驗Ⅲ組IgA總量極顯著高于對照組(P<0.01)，顯著高于其他各組(P<0.05)，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅳ組IgA總量比對照組高，但是差異不顯著(P>0.05)。

表1 24日齡羔羊小腸黏膜蛋白質中IgA含量

同行數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

2.1.2 24日齡羔羊小腸黏膜蛋白質中SIgA的含量

補喂瘤胃液制備物對24日齡羔羊小腸黏膜蛋白中SIgA的含量見表2。十二指腸中，試驗Ⅲ組中SIgA含量最高，試驗Ⅳ組SIgA含量最低，試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組間差異顯著(P<0.05)，而其他各組之間差異不顯著(P>0.05)；空腸中，各組SIgA含量有所不同，其中試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組含量較高，但各組間差異均不顯著(P>0.05)；回腸中，試驗組SIgA含量均高于對照組，但各組間差異不顯著(P<0.05)。總體來看，SIgA含量在各腸段中分布趨勢為回腸>十二指腸>空腸，其中試驗Ⅰ組和試驗Ⅳ組在回腸段增加較多。試驗組SIgA總量均比對照組高，但差異不顯著(P<0.05)，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組SIgA總量分別比對照組高了7.14%、23.70%、27.60%和14.29%。

表2 24日齡羔羊小腸黏膜蛋白質中SIgA含量

2.1.3 24日齡羔羊小腸黏膜蛋白質中IgG的含量

補喂瘤胃液制備物對24日齡羔羊小腸黏膜蛋白中IgG的含量見表3。十二指腸中，試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組IgG含量較高，試驗Ⅰ組含量最低，試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組與試驗Ⅰ組含量差異顯著(P<0.05)，其他各組差異不顯著(P>0.05)；空腸中，各組IgG含量也有所不同，但差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅰ組仍為最低，試驗Ⅲ組最高；回腸中，試驗Ⅳ組IgG含量最高，與試驗Ⅱ組和對照組差異顯著(P<0.05)，與其他各組差異不顯著(P>0.05)。總體來看，IgG含量在各腸段中分布趨勢為回腸>十二指腸>空腸，其中試驗Ⅰ組、試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組在回腸段增加較多。試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組IgG總量較高，但各組間差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組較對照組IgG總量分別增加了4.74%、23.81%、37.19%和38.66%。

表3 24日齡羔羊小腸黏膜蛋白質中IgG含量

2.2 補喂瘤胃液制備物對新生羔羊血漿中免疫球蛋白含量的影響

補喂瘤胃液制備物對14和28日齡羔羊血漿中IgA和IgG的含量見表4。血漿中IgA和IgG含量在28日齡時均高于14日齡。14日齡時各試驗組血漿中IgA含量差異不顯著(P>0.05)，其中對照組最高，試驗Ⅱ組最低；28日齡時試驗Ⅰ組中IgA含量最高，與對照組差異顯著(P<0.05)，與試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組差異極顯著(P<0.01),其他各組差異不顯著(P>0.05)。試驗各組血漿中IgG含量在14和28日齡時差異不顯著(P>0.05)，但試驗各組血漿中IgG含量在28日齡時比14日齡時增加。

表4 14和28日齡羔羊血漿中IgA和IgG含量

3 討 論

3.1 補喂瘤胃液制備物對新生羔羊腸道黏膜免疫的影響

Husband[11]和Peterson等[12]研究證實腸黏膜免疫系統(tǒng)中漿細胞產(chǎn)生的抗體主要是IgA，而IgA在漿細胞內合成后，與上皮細胞分泌成分結合，形成SIgA。SIgA是黏膜免疫反應中的重要效應因子，主要由黏膜固有層中的B細胞合成，而IgG則與機體抵抗疾病以及機體對疾病的易感性密切相關。黏膜免疫系統(tǒng)的發(fā)育在很大程度上依賴于微生物的接觸[1-2]。腸道中共生菌誘導機體產(chǎn)生的固有免疫反應對于黏膜和外周免疫系統(tǒng)的成熟和發(fā)育起到了重要性作用[13-14]。微生物暴露對黏膜免疫和腸道上皮細胞的發(fā)育的重要性[1-5]，能刺激腸相關淋巴組織中分泌更多的IgA+漿細胞等。新生兒和新生動物出生時，腸道是無菌的。在無菌小鼠體內，由于缺乏腸道菌群的刺激，SIgA的分泌量顯著降低，但血清中IgA含量只是下降至正常水平的1/2[15]，待給小鼠腸道定植一定量的共生菌后，SIgA分泌量升高；在無特定病原體(SPF)級小鼠中，腸道菌群中不含致病菌，腸腔仍然有SIgA的大量分泌，說明腸道共生菌能刺激SIgA的分泌。Perdigón等[16]報道益生菌能增加黏膜IgA含量。Dogi等[17]研究發(fā)現(xiàn)，革蘭氏陽性(G+)細菌，如乳酸桿菌屬(Lactobacillusacidophilus)CRL1462和A9，革蘭氏陰性(G-)細菌，如大腸桿菌屬(Escherichiacoli)129和13-7，作用于BALB/c小白鼠，能顯著增加IgA陽性B細胞的數(shù)量；車傳燕[18]用人源菌群口服接種到新生SFP仔豬中，細菌定植后使仔豬腸道中IgA和IgG分泌細胞數(shù)量增加。

長期以來，研究者大多偏重于對瘤胃微生物營養(yǎng)價值的研究，很少注意到瘤胃液或瘤胃細菌及其組分對新生羔羊、犢牛等機體免疫方面的可能作用。反芻動物瘤胃液中含有種類多樣的細菌和微生物，包含著成百種的細菌多聚糖分子[19-20]，新生羔羊在出生后24 h內補喂不同處理的成年綿羊瘤胃液制備物，此時小腸的通透性特別高，出生后的幾天內腸上皮發(fā)育不成熟，具有“開放性”，瘤胃液制備物中含有的細菌作為抗原物質進入仔畜腸道，被腸道吸收，可能改變了腸道內的微生物環(huán)境，引起腸道相關淋巴組織中黏膜免疫系統(tǒng)發(fā)生相應的變化。本試驗中，各試驗組腸道黏膜中IgA和SIgA含量均高于對照組，說明瘤胃細菌可能具有“益生菌”作用，能夠刺激新生羔羊腸道黏膜免疫的發(fā)育和成熟，釋放更多的IgA。補喂滅菌瘤胃液組比未滅菌瘤胃液組釋放更多的免疫效應分子，這與Muscato等[6]報道的滅菌的瘤胃液對犢牛具有更積極的作用一致，其可能原因一方面是經(jīng)過滅菌處理后的瘤胃液減少了瘤胃液中有害物質[6]，另一方面滅菌處理能使瘤胃液中部分細菌的結構破壞，從而釋放出更多的耐熱性免疫效應因子(如細菌細胞壁中的肽聚糖、脂多糖等)。尤其是試驗Ⅲ組的處理(即超聲波破碎瘤胃液)可使細菌細胞壁破裂，其中的肽聚糖、脂多糖和磷壁酸等物質釋放出來，而肽聚糖是免疫系統(tǒng)的激活劑，少量肽聚糖對于宿主重要生理功能的維持和促進是非常重要的[21]。

除了IgA，IgG也是反芻動物腸道黏膜免疫的重要效應分子。本試驗中，測得IgG是24日齡羔羊腸道黏膜中含量最高的免疫球蛋白，這與Cripps等[22]和Butler[23]測定結果一致，Bouvet[24]研究表明，早期仔畜腸道黏膜中的IgG部分是母體IgG通過乳汁進入仔畜血液，再經(jīng)仔畜肝臟、膽汁進入腸腔，被吸收而來，部分是由腸道黏膜局部B細胞產(chǎn)生，在自體未合成IgA前發(fā)揮免疫保護作用。新生哺乳動物在斷奶前的被動黏膜保護依賴于母源二聚體IgA和IgG1的連續(xù)供應[25]，并在體內起到抗感染的作用。而母乳中的SIgA，進入消化道后不易被破壞，保持其局部免疫性和抗感染能力，但由于腸道黏膜免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未完全，可能導致腸道中SIgA含量較少。

本試驗測得24日齡羔羊小腸黏膜中免疫球蛋白在腸段中的分布趨勢為回腸>十二指腸>空腸，免疫球蛋白在各個腸段中分布不同可能與腸道黏膜固有層中漿細胞分布有關，而不同腸段由于接觸的微生物抗原的不同也可能刺激腸道黏膜固有層中分泌的漿細胞增加。十二指腸處于小腸前端，最先接觸抗原，與外來抗原作用最早，也最直接，免疫反應劇烈，所以十二指腸中免疫球蛋白含量較高，而回腸黏膜和黏膜下層含有豐富的集合淋巴小結，其內B細胞數(shù)量較多[26]，具有產(chǎn)生漿細胞的巨大潛力，可能也是造成免疫球蛋白在回腸段較多的原因。

通過補喂不同處理的瘤胃液制備物，各試驗組羔羊小腸黏膜蛋白中免疫球蛋白含量均高于對照組，這可能是由于補喂的瘤胃液制備物中存在免疫活性物質，刺激腸道黏膜產(chǎn)生更多的免疫效應分子，也可能是由于瘤胃液中存在的部分細菌在腸道定植后，促進羔羊腸道相關淋巴組織的發(fā)育和局部體液免疫水平的提高，增強機體免疫力，但瘤胃液中存在的具體的免疫活性物質在本試驗中并沒有做進一步的分析、研究，這將在以后做進一步研究。而且有關低日齡羔羊的腸道內免疫球蛋白的含量和分布特點目前尚未見報道，這方面的研究尚需深入和積累。

3.2 補喂瘤胃液制備物對新生羔羊血漿中免疫球蛋白含量的影響

IgG是血清中的重要抗體，在體液免疫中發(fā)揮關鍵性作用。IgG能夠中和毒素和病毒、凝集顆?？乖?如細菌、病毒)等，以便于吞噬細胞的吞噬、激活補體，血清中的IgG抗體能夠阻止相應抗原穿透黏膜進入組織中[27]；IgA分血清型和分泌型2種，血清型多為單體，也有二聚體，分泌型的都是二聚體，且含有分泌片，僅占血清免疫球蛋白總量的10%～15%。羔羊出生后，自身沒有抵抗疾病的能力，需要在出生后24 h內從初乳中獲得足量的免疫球蛋白來獲得被動免疫，隨著日齡的增長這種被動免疫機制逐漸減弱，大約在4周齡后自身免疫能力逐漸建立。本試驗中，28日齡羔羊血漿中免疫球蛋白含量均高于14日齡，說明隨著日齡的增加，羔羊自身免疫機能逐漸增強。

補喂不同處理的瘤胃液制備物對羔羊血漿中IgG含量無顯著影響，這可能是由于早期幼畜血漿中IgG仍主要來自于母畜[24]，所以各試驗組間羔羊血漿中IgG含量差異不大。而在28日齡時各試驗組羔羊血漿中IgA含量差異較大，其中補喂瘤胃液組羔羊血漿中IgA含量最高，而補喂滅菌瘤胃液和超聲波破碎瘤胃液組羔羊血漿中IgA含量較低，這與腸道黏膜中IgA含量分布不一致。有研究報道表明，當健康機體黏膜或血管腔隙受到免疫刺激時，血清中單體IgA抗體響應，但是這些都不來源于腸道黏膜[28-30]。本試驗結果也說明羔羊血漿中IgA含量受到腸道黏膜中IgA的影響較小，而補喂瘤胃液在一定程度上能提高羔羊體液免疫水平，其原因有待進一步研究。

4 結 論

給新生羔羊補喂不同處理的瘤胃液制備物均能提高羔羊小腸黏膜中免疫球蛋白的含量，提高了羔羊腸黏膜免疫能力，其中補喂超聲波破碎瘤胃液效果最佳。

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*Corresponding author, professor, E-mail: yangkailun2002@aliyun.com

(責任編輯 王智航)

Effects of Oral Administration of Ruminal Fluid Preparations on Immunoglobulin Contents in Intestinal Mucosa and Plasma of Lambs

WU Tingting1HAN Bing2NIE Biaobiao1DONG Weiwei1YANG Kailun1*

(1.XinjiangKeyLaboratoryofMeat&MilkProductionHerbivoreNutrition,XinjiangAgricultureUniversity,Urumqi830052,China; 2.KeyLaboratoryofAnimalBiotechnologyofXinjiang,KeyLaboratoryofGenetics,BreedingandReproductionofGrass-FeedingAnimal,MinistryofAgriculture,BiotechnologicalResearchCenter,XinjiangAcademyofAnimalScience,Urumqi830000,China)

This experiment aimed to study the effects of oral administration of ruminal fluid preparations on immunoglobulin contents in the intestinal mucosa and plasma of lambs, to explore the effects of ruminal fluid preparations on intestinal mucosal and humoral immunity of neonatal lambs. Fifty newborn lambs with similar birth weight as model animal were divided into 5 groups with 10 lambs per group. Lambs in trial groups were fed different preparations of ruminal fluid [ruminal fluid (Ⅰ), autoclaved ruminal fluid (Ⅱ), ultrasonic processing ruminal fluid (Ⅲ) and autoclaved ultrasonic processing ruminal fluid (Ⅳ)] from healthy adult sheep since 1 day of age once a day over a period of 5 days, and those in control group were given the same volume of sterile saline. Three lambs per group were slaughtered to obtain small intestinal tissues on 24 days of age; plasma was collected at 14 and 28 days of age, respectively. Immunoglobulin contents in intestinal mucosa and plasma were determined. The results showed as follows: 1) in intestinal mucosal protein, the contents of immunoglobulin (IgA), secretory immunoglobin A (SIgA) and immunoglobulin G (IgG) in all trial groups were higher than those in control group. The total content of IgA in trial group Ⅲ was significantly higher than that in control group (P<0.01), as well as significantly higher than that in the other trial groups (P<0.05); there were no significant differences of the total contents of SIgA and IgG among groups (P>0.05). In generally, the contents of immunoglobulins showed ileum>duodenum>jejunum, and compared with control group, the total contents of immunoglobulins in trial group Ⅲ were greatly increased. 2) In plasma, immunoglobulin contents at 28 days of age were higher than those at 14 days of age. There was no significant difference of IgA content among groups at 14 days of age (P>0.05), however, at 28 days of age, the content of IgA in trial group Ⅰ was significantly increased compared with control group (P<0.05), and was significantly increased compared with the other trial groups (P<0.01); there was no significant difference of the content of IgG among groups at 14 and 28 days of age (P>0.05). In conclusion, orally administered different ruminal fluid preparations can improve intestinal mucosal immunity of newborn lambs, and ultrasonic processing ruminal fluid shows better effects than the other preparations.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(12)：3811-3818]

ruminal fluid preparation; newborn lamb; intestinal mucosa; plasma; immunoglobulin

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.12.013

2016-06-28

國家自然科學基金(31172233)

吳婷婷(1987—)，女，重慶人，博士研究生，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學。E-mail： 717557802@qq.com

*通信作者：楊開倫，教授，博士生導師，E-mail: yangkailun2002@aliyun.com

S826

A

1006-267X(2016)12-3811-08