肖 雪 李凱旋 袁 棟 占秀安

(浙江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，杭州310058)

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種母雞飼糧不同硒源及添加水平對后代肉雞生長性能、肉品質(zhì)、硒沉積和抗氧化功能的影響

肖 雪 李凱旋 袁 棟 占秀安*

(浙江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，杭州310058)

本試驗旨在研究種母雞飼糧不同硒源及添加水平對后代肉雞生長性能、肉品質(zhì)、硒沉積和抗氧化功能的影響。將540只48周齡的健康嶺南黃父母代肉用種母雞隨機分為6個組，每組3個重復(fù)，每重復(fù)30只雞。試驗采用3(硒源)×2(水平)雙因素隨機試驗設(shè)計，飼糧硒源分別為亞硒酸鈉(SS)、酵母硒(SY)、硒代蛋氨酸(SM)，硒添加水平分別為0.15和0.30 mg/kg(以硒計)。預(yù)試期4周，正試期8周。結(jié)果表明：1)與SS組相比，SM組顯著降低了1～21日齡后代肉雞的料重比(P<0.05)；SM和SY組顯著提高了1日齡后代肉雞肝臟、腎臟和肌肉的硒含量以及腎臟過氧化氫酶(CAT)活性(P<0.05)，顯著降低了肝臟丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。與SY組相比，SM組顯著提高了后代肉雞16 h胸肌的pH和腎臟、肌肉的硒含量(P<0.05)。2)0.30 mg/kg組的后代肉雞肝臟、腎臟和肌肉的硒含量顯著高于0.15 mg/kg組(P<0.05)。與0.30 mg/kg組相比，0.15 mg/kg組顯著提高了后代肉雞8 h胸肌Hunter a值及pH(P<0.05)，顯著降低了后代肉雞24、48 h胸肌滴水損失(P<0.05)，顯著提高了1日齡后代肉雞肝臟谷胱甘肽過氧化物酶、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和總抗氧化能力(T-AOC)及腎臟T-SOD、CAT活性和T-AOC(P<0.05)，顯著降低了1日齡后代肉雞腎臟MDA含量(P<0.05)。由此可見，在本試驗條件下，種母雞飼糧中添加0.15 mg/kg SM效果最佳。

硒源；硒水平；母體效應(yīng)；種母雞

母體效應(yīng)(maternal effect)是指生物的表現(xiàn)型不僅由其基因型和環(huán)境決定，還受雌性親本的影響[1]。由于后代發(fā)育所需的全部營養(yǎng)物質(zhì)都是母體通過胎盤、乳汁以及雞蛋傳遞給后一代，因此母體營養(yǎng)對后代發(fā)育、生產(chǎn)性能與健康至關(guān)重要。Rehfeldt等[2]報道，蛋中的養(yǎng)分決定了禽類的生長和發(fā)育，而蛋中的養(yǎng)分受母禽營養(yǎng)狀態(tài)的影響。

硒是人和畜禽動物的必需微量元素，能促進動物生長，提高抗氧化能力[3-4]。飼糧中添加的硒源有2類：無機硒和有機硒。與無機硒相比，有機硒具有生物活性強、吸收率高、環(huán)境污染小等特點[5-6]。在家禽中，母雞飼糧中的硒通過雞蛋轉(zhuǎn)移給后代[7]。Pappas等[8]研究發(fā)現(xiàn)，母源硒對后代肉雞的作用可以持續(xù)到出殼后第4周。為了研究飼糧中不同種類和添加水平的母源硒對后代肉雞生長性能、肉品質(zhì)、硒沉積和抗氧化功能的影響，本試驗以酵母硒(SY)、硒代蛋氨酸(SM)為有機硒源，以無機硒源亞硒酸鈉(SS)為對照，分別添加0.15、0.30 mg/kg 2個硒水平，試圖揭示硒的母體營養(yǎng)效應(yīng)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

SS(純度99%)、SM(純度99%)購自Sigma公司，SY由Alltech公司提供。

1.2 試驗飼糧

種母雞和后代肉雞分別飼喂粉料與顆粒料，除硒外，營養(yǎng)水平均滿足NRC(1994)推薦標準，種母雞和后代肉雞飼糧組成及營養(yǎng)水平分別見表和表2。預(yù)試期，種母雞飼喂不添加硒的基礎(chǔ)飼糧(硒含量實測值為0.04 mg/kg)。試驗期，后代肉雞飼喂商品配合飼料，硒(SS源)含量實測值為0.15 mg/kg。

表1 種母雞飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of the diet：Fe (as ferrous sulfate) 72 mg，Cu (as copper sulfate) 7 mg，Zn (as zinc sulfate) 72 mg，Mn (as manganese sulfate) 90 mg，I (as potassium iodide) 0.9 mg，VA 10 800 IU，VD32 160 IU，VE 27 IU，VK31.4 mg，VB11.8 mg，VB28 mg，VB64.1 mg，VB120.01 mg，煙酸 nicotinic acid 32 mg，葉酸 folic acid 1.08 mg，泛酸 pantothenic acid 11 mg，生物素 biotin 0.18 mg。

2)代謝能為計算值，其余均為實測值。ME was a calculated value, while the others were measured values.

1.3 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

本試驗采用3(硒源)×2(水平)雙因素隨機試驗設(shè)計，540只48周齡的健康嶺南黃父母代肉用種母雞隨機分為6個組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)30只雞。飼糧中硒源分別為SS、SY和SM，硒添加水平分別為0.15和0.30 mg/kg(以硒計)。種雞飼養(yǎng)于3層重疊式籠中，每籠飼養(yǎng)2只。預(yù)試期4周，正試期8周。試驗期間，人工授精每周1次，各組均使用同種精液。在最后1周收集種蛋，按組、重復(fù)分別存放和孵化。

種蛋孵化結(jié)束后，每組每個重復(fù)隨機選取60只初生雛雞飼養(yǎng)。所有后代肉雞均飼喂相同飼糧，分3個階段，即1～21日齡、22～42日齡、43～56日齡。

在整個試驗期間，種母雞與后代肉雞自由采食與飲水，常規(guī)管理，正常免疫。

1.4 樣品采集

種蛋孵化結(jié)束后，每組每個重復(fù)隨機選取5只初生雛雞，解剖取肝臟、腎臟和左側(cè)胸肌，置于-80 ℃冰箱保存。

在后代肉雞飼養(yǎng)試驗結(jié)束后(56日齡)，每組每個重復(fù)隨機選取4只，禁食12 h，屠宰，取樣。

1.5 指標測定及方法

1.5.1 后代肉雞生長性能

后代肉雞飼養(yǎng)期間，準確記錄各重復(fù)的給料重量、余料重量、死淘雞只數(shù)以及死淘雞的重量。分別于21和56日齡全群稱重，統(tǒng)計各個重復(fù)的耗料量、體增重、料重比和死淘率。

1.5.2 56日齡后代肉雞胴體組成

按照國家畜禽品種委員會規(guī)定的家禽屠宰測定標準，分析肉雞胴體組成。

活重：屠宰前停料12 h后的體重。屠體重：放血去羽毛后的重量。半凈膛重：屠體重去氣管、食道、嗉囊、腸、脾、胰、膽和生殖器官的重量。全凈膛重：半凈膛重去心、肝、腺胃、肌胃、脂肪及頭、腳的重量。計算公式如下：

屠宰率(%)=(屠體重/活重)×100；

半凈膛率(%)=(半凈膛重/活重)×100；

全凈膛率(%)=(全凈膛重/活重)×100；

腹脂率(%)=(腹脂重/活重)×100。

表2 后代肉雞飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of diets：Fe (as ferrous sulfate) 80 mg，Cu (as copper sulfate) 8 mg，Zn (as zinc sulfate) 60 mg，Mn (as manganese sulfate) 80 mg，I (as potassium iodide) 0.35 mg，Se (as sodium selenite) 0.15 mg，VA 5 000 IU，VD31 000 IU，VE 10 IU，VK30.5 mg，VB12 mg，VB23 mg，VB63 mg，VB120.01 mg，煙酸 nicotinic acid 25 mg，葉酸 folic acid 0.55 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 10 mg，生物素 biotin 0.15 mg。

2)代謝能為計算值，其余均為實測值。ME was a calculated value, while the others were measured values.

1.5.3 56日齡后代肉雞胸肌滴水損失

肉雞屠宰后，取左側(cè)胸肌的中間部分，修整成5 cm×2 cm×1 cm(長×寬×高)的肉塊，用濾紙吸去表面的水分，稱重并記錄(W0)。然后，用鐵絲固定肉樣的一端，使肌纖維垂直向下，裝入充氣的樣品袋中，肉樣不與袋壁接觸，扎好袋口，懸掛于4 ℃冰箱中，分別測定宰后24和48 h的肉樣重量(W1)，按以下公式計算不同時間胸肌的滴水損失[9]：

滴水損失(%)=[(W0-W1)/W0]×100。

1.5.4 56日齡后代肉雞胸肌肉色

在25 ℃的環(huán)境條件下，用SP60 Series肉色儀分別測定宰后8和16 h胸肌的Hunter a值[10]。每個樣本表面取3個不同位置，求其平均值。

1.5.5 56日齡后代肉雞胸肌pH

用準確校正后的Delta-320酸度計，測定左側(cè)胸小肌的pH。

1.5.6 1日齡后代肉雞肝臟、腎臟和胸肌硒含量

組織硒含量用AF-610A型原子熒光光譜儀測定，稱取樣品0.2 g左右，于微波消解罐中，加入1 mL H2O2后擰緊罐蓋，消解7 min左右，至溶液無色透明。冷卻，用超純水定容至10 mL。然后，取消化液2 mL，置于10 mL試管中，先加1 mL 50%(V/V)的鹽酸溶液，再加1 mL硫脲(5%)和抗壞血酸(5%)的混合液，反應(yīng)15 min，用超純水定容并混勻，上機?？瞻缀完栃詫φ辗謩e使用超純水和硒標準參照物[《豬肝成分分析標準物質(zhì)》(GBW08551)，國家商業(yè)局食品檢測科學(xué)院]。

1.5.7 1日齡后代肉雞肝臟、腎臟抗氧化性能

谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、過氧化氫酶(CAT)活性、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量和組織蛋白質(zhì)含量，均用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒測定，具體步驟參照說明書。

1.6 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行分析，并以“平均值±標準差”形式表示，采用GLM模型檢驗硒源和添加水平的主效應(yīng)及交互效應(yīng)。根據(jù)LSD法對差異顯著(P<0.05)的數(shù)據(jù)進行多重比較。

2 結(jié) 果

2.1 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對后代肉雞生長性能的影響

由表3和表4可知，與SS組相比，SM組顯著降低了1～21日齡后代肉雞料重比(P<0.05)；種母雞飼糧不同硒源和添加水平對22～56日齡后代肉雞生長性能無顯著影響(P>0.05)。

表3 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對1～21日齡后代肉雞生長性能的影響

同列數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same column, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對56日齡后代肉雞胴體組成和肉品質(zhì)的影響

由表5、表6和表7可知，種母雞飼糧不同硒源和水平對56日齡后代肉雞各胴體組成均無顯著影響(P>0.05)。與SS和SY組相比，SM組顯著提高了56日齡后代肉雞宰后16 h胸肌pH(P<0.05)。與0.30 mg/kg組相比，0.15 mg/kg組顯著提高了56日齡后代肉雞宰后8 h胸肌Hunter a值及pH(P<0.05)，顯著降低了56日齡后代肉雞宰后24、48 h胸肌滴水損失(P<0.05)。

2.3 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對1日齡后代肉雞組織硒沉積量的影響

由表8可知，與SS組相比，SM和SY組顯著提高了1日齡后代肉雞肝臟、腎臟和肌肉中的硒含量(P<0.05)；與SY組相比，SM組顯著提高了1日齡后代肉雞腎臟和肌肉的硒含量(P<0.05)。0.30 mg/kg組1日齡后代肉雞肝臟、腎臟和肌肉中硒含量顯著高于0.15 mg/kg組(P<0.05)。

表4 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對22～56日齡后代肉雞生長性能的影響

表5 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對56日齡后代肉雞胴體組成的影響

表6 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對56日齡后代肉雞胸肌Hunter a值和滴水損失的影響

表7 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對56日齡后代肉雞胸肌pH的影響

2.4 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對1日齡后代肉雞抗氧化功能的影響

由表9和表10可知，與SS組相比，SM和SY組顯著提高了1日齡后代肉雞腎臟CAT活性(P<0.05)，顯著降低了1日齡后代肉雞肝臟MDA含量(P<0.05)。與0.30 mg/kg組相比，0.15 mg/kg組顯著提高了1日齡后代肉雞肝臟GSH-Px、T-SOD活性和T-AOC及腎臟T-SOD、CAT活性和T-AOC(P<0.05)，顯著降低了1日齡后代肉雞腎臟MDA含量(P<0.05)。

表9 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對1日齡后代肉雞肝臟抗氧化功能的影響

續(xù)表9硒源Seleniumsource添加水平Supplementallevel/(mg/kg)谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px/(U/mgprot)總超氧化物歧化酶T-SOD/(U/mgprot)過氧化氫酶CAT/(U/mgprot)總抗氧化能力T-AOC/(U/mgprot)丙二醛MDA/(nmol/mgprot)添加水平Supplementallevel/(mg/kg)0.1536.01±3.93a144.70±17.35a34.88±6.080.76±0.09a3.09±0.550.3025.58±2.87b134.30±12.33b33.48±5.520.70±0.06b3.06±0.85P值P-value硒源Seleniumsource0.7190.2310.2400.2340.008添加水平Supplementallevel<0.0010.0330.4350.0360.917硒源×添加水平Seleniumsource×supplementallevel0.0210.0410.0170.1980.949

表10 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對1日齡后代肉雞腎臟抗氧化功能的影響

3 討 論

3.1 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對后代肉雞生長性能和肉品質(zhì)的影響

盡管遺傳選擇能夠主導(dǎo)親代基因傳遞給后代，但越來越多的證據(jù)表明母體營養(yǎng)效應(yīng)對后代肉雞具有重要影響。Cantor等[11]研究發(fā)現(xiàn)，母代飼喂加硒飼糧可以改善后代肉雞(14日齡)的生長性能。郭福存等[12]在種母雞飼糧中添加不同硒源，結(jié)果顯示，母源有機硒較無機硒能顯著提高后代雛雞的體長與體重。本試驗結(jié)果顯示，同SS和SY相比，SM能顯著提高21日齡后代肉雞的體重，降低料重比，但不同形式的母源硒對56日齡后代肉雞生長性能沒有顯著影響。其可能原因是：母源硒直接作用于雛雞，對其進行早期營養(yǎng)調(diào)控，而在生長中后期由于后代肉雞大量采食含硒商品飼糧，母源硒在后代肉雞上的直接作用逐漸消失，所以影響相對較小。

本研究結(jié)果還顯示，0.15 mg/kg硒較0.30 mg/kg硒顯著提高了后代肉雞宰后8 h胸肌Hunter a值及pH，降低了滴水損失，可能是因為過高的硒含量對機體有一定的副作用，具體機理有待進一步研究。

3.2 母雞飼糧不同硒源和添加水平對1日齡后代肉雞組織硒沉積量的影響

硒可通過母體轉(zhuǎn)移到蛋中，進而影響胚胎和1日齡后代肉雞組織中硒的含量，因此母代飼糧中硒含量對后代生長發(fā)育十分重要[11]。機體硒水平存在組織差異性，由血液進入組織的硒主要存儲在肝和腎中，只有少量蓄積在肌肉、骨骼以及腦中[13]。Invernizzi等[14]在蛋雞上的研究發(fā)現(xiàn)，SY組較基礎(chǔ)飼糧組顯著提高了胸肌和肝臟的硒含量；有機硒較無機硒顯著提高了1日齡后代肉雞組織中的硒沉積。本試驗結(jié)果顯示，與SS組相比，SM和SY組顯著提高了1日齡后代肉雞肝臟、腎臟和肌肉的硒含量；0.30 mg/kg組1日齡后代肉雞肝臟、腎臟和肌肉的硒含量顯著高于0.15 mg/kg組；這與Pappas等[8]的研究結(jié)果一致。我們還發(fā)現(xiàn)，與SY組相比，SM組能顯著提高1日齡后代肉雞腎臟和肌肉的硒含量，可能的原因是：SY作為一種發(fā)酵產(chǎn)物，雖然是以SM為主要成分，但是以酵母中蛋白質(zhì)結(jié)合態(tài)形式存在的，需要酵母破壁并降解蛋白質(zhì)后才能被吸收，而SM是單個氨基酸形式存在的，可被腸道直接吸收。

3.3 種母雞飼糧不同硒源和添加水平對1日齡后代肉雞抗氧化功能的影響

硒是重要的食源性抗氧化劑，機體缺硒會引起硒酶活性降低，阻礙氧自由基的清除，進而導(dǎo)致生物膜損傷以及解毒和免疫功能減退等一系列功能障礙，引發(fā)各類疾病。初生雛雞機體中硒是通過雞蛋從母體中獲得的。Surai等[15]研究發(fā)現(xiàn)，種母雞飼糧補硒提高了1日齡后代肉雞肝臟硒含量以及GSH-Px活性，增強初生雛雞抗氧化功能，這種母體效應(yīng)作用會持續(xù)至雛雞出生后5～10 d。Pappas等[8]的研究表明，母雞硒營養(yǎng)對于后代的影響可以持續(xù)至后代肉雞4周齡。本研究結(jié)果表明，種母雞飼糧添加有機硒(SM和SY)較無機硒(SS)顯著提高了1日齡后代肉雞腎臟CAT活性，降低了1日齡后代肉雞肝臟MDA含量。CAT是機體內(nèi)重要的抗氧化酶，能有效分解過氧化氫(H2O2)，清除機體氧自由基，提高機體抗氧化水平。

本試驗發(fā)現(xiàn)，在1日齡后代肉雞上，飼糧添加0.15 mg/kg硒較0.30 mg/kg硒更能提高1日齡后代肉雞組織T-SOD活性和T-AOC，這與Wilaison等[16]的研究一致。Wilaison等[16]在母代鵪鶉基礎(chǔ)飼糧中分別添加0、0.25、0.50和1.00 mg/kg水平的硒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.25 mg/kg硒劑量組雞胚中GSH-PxmRNA的表達量最高，0.50～1.00 mg/kg硒劑量組GSH-PxmRNA的表達量反而降低。這提示我們，過高的硒含量對雞胚和1日齡后代肉雞的發(fā)育可能存在一定的毒副作用。

4 結(jié) 論

① 在硒沉積上，SM優(yōu)于SY，SY優(yōu)于SS，0.30 mg/kg水平優(yōu)于0.15 mg/kg水平。

② 在抗氧化功能上，2種有機硒均優(yōu)于SS，但SM與SY效果基本一致。

③ 在提高后代肉雞生長性能上，SM較SS能顯著改善后代肉雞21日齡的料重比，而其他指標各組間均無顯著差異。

④ 在本試驗條件下，肉用種母雞飼糧以0.15 mg/kg SM表現(xiàn)出更好的母體營養(yǎng)效應(yīng)。

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*Corresponding author, professor, E-mail: xazan@zju.edu.cn

(責任編輯 武海龍)

Effects of Dietary Different Selenium Source and Supplemental Level of Broiler Breeders on Growth Performance, Meat Quality, Seleniun Retention and Antioxidant Function of Offspring Broilers

XIAO Xue LI Kaixuan YUAN Dong ZHAN Xiuan*

(CollegeofAnimalScience,ZhejiangUniversity,Hangzhou310058,China)

This study was conducted to investigate the effects of dietary different selenium source and supplemental level of broiler breeders on growth performance, meat quality, seleniun retention and antioxidant function of offspring broilers. A total of 540 healthy Lingnan yellow broiler breeders (48-week-old) were randomly assigned to 6 groups with 3 replicates per group and 30 birds per replicate. A 3×2 completely random design was employed in this trail, including 3 sources [sodium selenite (SS), selenium-enriched yeast (SY) and selenomethionine (SM)] and 2 levels (0.15 and 0.30 mg/kg) of Se. The feeding experiment lasted for 8 weeks after 4 weeks of pre-test. The results showed as follows: 1) compared with SS group, SM group significant reduced feed to gain ratio of offspring broilers aged from 1 to 21 days of age (P<0.05); SM and SY groups significant improved the content of seleniun in liver, kidney and muscle and kidney catalase (CAT) activity of offspring broilers at 1 day of age (P<0.05), and significant reduced liver malondialdehyde (MDA) content (P<0.05). Compared with SY group, SM group significant increased the breast muscle 16 h pH and the content of seleniun in kidney and muscle of offspring broilers (P<0.05). 2) The content of selenium in liver, kidney and muscle in 0.30 mg/kg group was significantly higher than that in 0.15 mg/kg group (P<0.05). Compared with 0.30 mg/kg group, 0.15 mg/kg group significant increased the breast muscle 8 h Hunter a value and pH of offspring broilers (P<0.05), and significant reduced the breast muscle drip loss at 24 and 48 h of offspring broilers (P<0.05), and significant increased the liver glutathione peroxidase activity, total superoxide dismutase (T-SOD) activity and total antioxidation capability (T-AOC), and kidney T-SOD activity, CAT activity and T-AOC of offspring broilers at 1 day of age (P<0.05), and significant reduced the kidney MDA content of offspring broilers at 1 day of age (P<0.05). The results suggest that under the conditions of this experiment, broiler breeders diet supplemented with 0.15 mg/kg SM works the best.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(12)：3792-3802]

selenium source; selenium level; maternal effect; broiler breeders

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.12.011

2016-06-13

國家肉雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-42-G19)；國家自然科學(xué)基金(31572422)

肖 雪(1991—)，女，山東淄博人，碩士研究生，從事動物營養(yǎng)與調(diào)控研究。E-mail: xiaoxuecgys@sina.com

*通信作者：占秀安，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: xazan@zju.edu.cn

S831

A

1006-267X(2016)12-3792-11