余兆仲 萬小明* 丁雪勇 梁衛(wèi)東 劉峰

跌打軟膏治療急性閉合性軟組織損傷的實(shí)驗(yàn)研究※

余兆仲1萬小明1*丁雪勇2梁衛(wèi)東1劉峰1

（1江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院骨傷科，南昌330006；2江西中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生2013級(jí)，南昌330006）

目的本課題運(yùn)用現(xiàn)代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的方法，揭示跌打軟膏治療急性閉合性軟組織損傷的作用機(jī)制，為跌打軟膏的推廣提供理論依據(jù)。方法將45只普通級(jí)SD雄性大鼠，分為跌打軟膏高濃度組、低濃度組、青鵬膏組、模型組、空白組。對(duì)各組造模（除空白組外），分別對(duì)各組涂擦藥膏，其中模型組用酒精涂擦，空白組不給藥，治療1周。實(shí)驗(yàn)第一天、第三天、第五天、第七天進(jìn)行局部損傷大體觀察、處死SD大鼠進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察及損傷炎癥因子FGF-2、IL-6的含量測(cè)定。結(jié)果跌打軟膏高濃度組的FGF-2含量升高、IL-6含量下降的幅度較低濃度組、青鵬膏組、模型組，局部損傷大體觀察評(píng)分、病理組織評(píng)分比較有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論跌打軟膏具有加速急性閉合性軟組織損傷后水腫的吸收、瘀血的消散、組織的修復(fù)，值得推薦臨床醫(yī)師廣泛使用。

跌打軟膏；急性閉合性軟組織損傷；實(shí)驗(yàn)研究

急性軟組織損傷是一種常見的世界性疾病，其發(fā)病率僅次于感冒，其主要病理變化是由于毛細(xì)血管破裂、出血和血管壁通透性增加所致腫脹，以及進(jìn)一步導(dǎo)致炎癥反應(yīng)，刺激局部神經(jīng)末梢從而引起疼痛[1]。目前，西醫(yī)治療主要方法有制動(dòng)、包扎、局部封閉、藥物、理療等方法，不但療效欠佳而且還會(huì)產(chǎn)生不良反應(yīng)[2]。跌打外敷散為我院的院內(nèi)制劑，經(jīng)30多年臨床實(shí)踐，發(fā)現(xiàn)療效確切，創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益[3]，但缺乏理論研究；且使用不方便。本實(shí)驗(yàn)欲通過對(duì)跌打外敷散改為軟膏，本實(shí)驗(yàn)擬通過檢測(cè)跌打軟膏治療急性閉合性軟組織損傷動(dòng)物模型中損傷因子FGF-2、IL-6的含量以及觀察動(dòng)物的局部損傷和組織形態(tài)學(xué)的變化，從而明確跌打軟膏的作用機(jī)制，使用更為方便，并為臨床廣泛應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 動(dòng)物45只普通級(jí)SD雄性大鼠，體重（280±40） g，由江西中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。SD大鼠健康狀況良好，自由飲水、攝食，實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行適應(yīng)性喂養(yǎng)1周再用于造模實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 儀器自制大鼠軟組織損傷打擊器（包括200g柱形錘擊器，長(zhǎng)60 cm、半徑2 cm空心圓管，1 m長(zhǎng)棉線，20 cm×30 cm硬質(zhì)木板）；90-1雙向磁力攪拌器（上海亞榮生化儀器廠）；XK96-B快速混勻器（姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司）；TDL80-2B臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠制造）；Thermo Multiskan Ascent酶標(biāo)儀；若干載玻片、蓋玻片；HD-33D型攤片烤片機(jī)、HD-31D型生物組織自動(dòng)包埋機(jī)（湖北惠達(dá)儀器有限公司）；RM2016型切片機(jī)（上海徠卡儀器有限公司）；OLYMPUS CX21顯微鏡（上海天放實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）。

1.1.3 藥物與試劑跌打軟膏由澤蘭、紅花、桂枝、當(dāng)歸、黃芩、黃連、黃柏、赤芍、細(xì)辛、川烏（制）、草烏（制）、土鱉蟲、九香蟲、沒藥、梔子、乳香、大血藤、山萘等中藥組成，諸藥等量用水煎煮，煎液濃縮加入羊毛脂、凡士林等基質(zhì)，由江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室調(diào)配，依照人類臨床用藥劑量和動(dòng)物用藥

劑量換算，調(diào)配成低濃度跌打軟膏組1.4 g（生藥）/kg（臨床同效劑量）、高濃度跌打軟膏組2.8 g（生藥）/kg（臨床雙倍劑量）。

青鵬膏：甘肅奇正藏藥有限公司，20g/支，國(guó)藥準(zhǔn)字Z54020140。

大鼠FGF-2 ELISA檢測(cè)試劑盒：上海西塘生物科技有限公司。生產(chǎn)批號(hào)：1511101。

大鼠IL-6 ELISA檢測(cè)試劑盒：上海西塘生物科技有限公司。生產(chǎn)批號(hào)：1510271。

淋巴細(xì)胞屬于白細(xì)胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分，參與機(jī)體的體液免疫。試驗(yàn)藥渣中含有紅參，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LY及LYC數(shù)量有升高趨勢(shì)（都在正常范圍內(nèi)），提高了機(jī)體免疫力與黃寶亮等[16]報(bào)道紅參具有提高機(jī)體免疫力功效結(jié)果一致。本試驗(yàn)紅細(xì)胞數(shù)量（RBC）、血紅蛋白含量（Hb）和紅細(xì)胞積壓（HCT）都有升高趨勢(shì)（0.05＜P＜0.1)，說明飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣可以提高攜氧能力，具有改善血液循環(huán)的功能，與劉若軒等[17]報(bào)道，熟地黃具有補(bǔ)血功效結(jié)果一致。同時(shí)試驗(yàn)組WBC數(shù)量增加的結(jié)果與前期報(bào)道熟地黃增加外周血WBC數(shù)量的結(jié)果一致。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物造模與給藥參照以往文獻(xiàn)造模方法：將45只SD大鼠分為5組，分別為跌打軟膏高濃度組9只、跌打軟膏低濃度組9只、青鵬膏組9只、模型組9只、空白組9只。實(shí)驗(yàn)前一天各組SD大鼠剪去左后大腿根部肌肉豐厚處的外側(cè)毛(約3 cm×4 cm)，再用電動(dòng)剃毛機(jī)剃除干凈，在各組SD大鼠左耳內(nèi)編號(hào)。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天除空白組外，將其余各組SD大鼠全身麻醉后固定于硬質(zhì)木板上，將一長(zhǎng)60 cm、半徑2 cm空心圓管放于左后大腿脫毛處，貼近皮膚，使用200 g柱形錘擊器從空心圓管頂部自由落下，連續(xù)擊中同一部位20次，造成SD大鼠左后大腿明顯皮下瘀血、腫脹，且無骨折、皮緣破損的急性閉合性軟組織損傷模型。造模后跌打軟膏高濃度組、低濃度組局部涂擦兩種濃度的跌打軟膏，一日2次，面積為3 cm×4 cm；青鵬膏組局部涂擦青鵬膏（相當(dāng)于跌打軟膏低濃度組安全用量），1日2次，面積為3 cm×4 cm；模型組于同一部位涂擦75%酒精，1日2次；連續(xù)給藥7天。

1.2.2 監(jiān)測(cè)指標(biāo)與方法實(shí)驗(yàn)第1天、實(shí)驗(yàn)第3天、實(shí)驗(yàn)第4天、實(shí)驗(yàn)第7天，先對(duì)左后大腿軟組織進(jìn)行大體觀察，進(jìn)行評(píng)分，并于這四天的同一時(shí)間處死每一組2只SD大鼠（多備用的1只SD大鼠用于實(shí)驗(yàn)期間各組SD大鼠出現(xiàn)的意外死亡，如果無意外情況則最后一天處死各組剩下的3只），取下瘀血、腫脹處的皮下肌肉軟組織約為1.5 cm×1.8 cm，分為2份，一份用蒸餾水漂洗1 min，除去血液，濾紙拭干，用電子天平稱量0.5 g組織，按1∶9比例加入蒸餾水4.5 ml，用勻漿器均勻研磨20分鐘，使組織勻漿化，將制備好的勻漿液用離心機(jī)以3000 r/min離心10 min，保留上清液，置于-80℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆脺y(cè)FGF-2、IL-6的含量。另一份取約2 g組織于10%甲醛溶液中固定，1周后用HE染色，做病理組織觀察。

1.2.3 FGF-2測(cè)定及IL-6測(cè)定嚴(yán)格按FGF-2 ELISA試劑盒及IL-6 ELISA試劑盒使用說明書進(jìn)行操作，測(cè)定損傷肌肉組織中FGF-2及IL-6的含量。

1.2.4 大體觀察根據(jù)表1評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)在實(shí)驗(yàn)第1天、實(shí)驗(yàn)第3天、實(shí)驗(yàn)第5天、實(shí)驗(yàn)第7天對(duì)各組SD大鼠軟組織損傷程度進(jìn)行評(píng)分。

表1 損傷程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

表2 病理組織評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

1.3 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)（±s）標(biāo)準(zhǔn)差來表示，各組間的數(shù)據(jù)比較采用方差分析的方法進(jìn)行檢測(cè)，以P＞0.05認(rèn)為差異無顯著性；P≤0.05作為顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；以P≤0.01作為高度顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SD大鼠大體觀察損傷程度評(píng)分的結(jié)果由于空白組未造模，該組SD大鼠不會(huì)出現(xiàn)任何腫脹、瘀血情況，其他組SD大鼠在成功造模后，傷肢體即刻腫脹，皮下出現(xiàn)瘀血。治療初期，高、低兩個(gè)濃度跌打軟膏組傷處局部腫脹及肌肉、皮下瘀血癥狀較模型組輕；治療中后期，其消腫情況及皮下、肌肉瘀血消散明顯早于模型組。青鵬膏組第5天時(shí)腫脹已明顯消退，第7天仍有少許瘀血，但與高濃度跌打軟膏組相比，二者具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與空白組具有高度顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（見表3）

表3 SD大鼠大體觀察損傷程度評(píng)分統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s）

表3 SD大鼠大體觀察損傷程度評(píng)分統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s）

注：與空白組比較▲P＜0.01，△P＜0.05；與模型組比較◆P＜0.01，◇P＜0.05；與青鵬膏組比較★P＜0.01，☆P＜0.05

分組實(shí)驗(yàn)第1天實(shí)驗(yàn)第3天高濃度組低濃度組青鵬膏組模型組空白組5 . 5 0 ± 0 . 5 3▲◇☆5 . 6 0 ± 0 . 4 5▲◇5 . 7 0 ± 0 . 6 3▲◇5 . 8 0 ± 0 . 4 2 0 . 0 0 ± 0 . 0 0 4 . 1 0 ± 0 . 5 2▲◆☆4 . 4 0 ± 0 . 6 3▲◇4 . 8 0 ± 0 . 8 8▲◇5 . 2 0 ± 0 . 7 9 0 . 0 0 ± 0 . 0 0實(shí)驗(yàn)第5天2 . 0 8 ± 0 . 3 2▲◆☆2 . 1 0 ± 0 . 7 0▲◇2 . 4 0 ± 0 . 6 8▲◇2 . 8 0 ± 0 . 9 2 0 . 0 0 ± 0 . 0 0實(shí)驗(yàn)第7天總計(jì)0 . 8 0 ± 0 . 4 7▲◆☆1 . 0 0 ± 0 . 5 3▲◇1 . 5 0 ± 0 . 3 2▲◇1 . 8 0 ± 0 . 6 3 0 . 0 0 ± 0 . 0 0 9 9 9 9 9

SD大鼠病理組織評(píng)分的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)第1天，病理變化上基本可見肌纖維腫脹伴變性，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，橫紋肌纖維斷裂，肌纖維組織內(nèi)瘀血、水腫、出血灶。跌打軟膏高、低濃度和青鵬膏組的肌纖維水腫、中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)較模型組少見，空白組無病理變化。

實(shí)驗(yàn)第3天，病理變化上基本可見肌纖維腫脹減輕，纖維母細(xì)胞侵入，血管、膠原纖維增生活躍，周圍結(jié)締組織形成。跌打軟膏高濃度組（圖a）皮下血腫

被部分吸收，壞死的橫紋肌部位被結(jié)締組織所替代，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)范圍減少。青鵬膏組（圖b）病理形態(tài)學(xué)改變與跌打軟膏低濃度組（圖c）相近，低濃度組肌纖維間水腫、出血灶程度較高濃度量組嚴(yán)重，空白組（圖d）幾乎無病理變化。

實(shí)驗(yàn)第5天，病理變化上基本可見肌纖維部分排列紊亂，肌間質(zhì)仍有紅細(xì)胞積留，中性粒細(xì)胞呈現(xiàn)點(diǎn)散狀浸潤(rùn)。跌打軟膏高濃度組、青鵬膏組肌纖維的出血、腫脹進(jìn)一步減少，但低濃度組肌纖維浸潤(rùn)范圍較跌打軟膏高濃度組、青鵬膏組大，空白組未見明顯病理變化。

實(shí)驗(yàn)第7天，跌打軟膏高濃度組基本等同于空白組，青鵬膏組、低濃度組存有零星炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，較模型組少見。（見表4）

表4 SD大鼠病理組織評(píng)分統(tǒng)計(jì)結(jié)果（s）

表4 SD大鼠病理組織評(píng)分統(tǒng)計(jì)結(jié)果（s）

注：與空白組比較▼P＜0.01，▽P＜0.05；與模型組比較●P＜0.01，○P＜0.05；與青鵬膏組比較■P＜0.01，□P＜0.05

分組實(shí)驗(yàn)第1天實(shí)驗(yàn)第3天高濃度組低濃度組青鵬膏組模型組空白組1 . 4 0 ± 0 . 8 5▼●□1 . 0 0 ± 0 . 8 3▼○1 . 2 0 ± 0 . 9 5▼○0 . 4 0 ± 0 . 2 5 6 . 0 0 ± 0 . 0 0 2 . 6 0 ± 0 . 9 7▼●□1 . 6 0 ± 0 . 8 4▼○1 . 8 0 ± 0 . 9 8▼1 . 4 0 ± 0 . 9 7 6 . 0 0 ± 0 . 0 0實(shí)驗(yàn)第5天4 . 2 0 ± 1 . 4 8▼●□3 . 8 0 ± 0 . 9 5▼●4 . 0 0 ± 1 . 0 2▼●2 . 6 0 ± 0 . 9 7 6 . 0 0 ± 0 . 0 0實(shí)驗(yàn)第7天總計(jì)5 . 6 0 ± 0 . 8 4▼●□4 . 8 0 ± 1 . 0 3▼5 . 0 0 ± 0 . 6 3▼4 . 6 0 ± 0 . 9 7 6 . 0 0 ± 0 . 0 0 9 9 9 9 9

圖1 四組實(shí)驗(yàn)第三天的HE染色（10×10）

2.3 SD大鼠FGF-2含量的結(jié)果統(tǒng)計(jì)FGF-2的含量測(cè)定結(jié)果提示：除空白組外，其余4組在實(shí)驗(yàn)的第1、3天內(nèi)FGF-2的含量迅速增高，參與組織的修復(fù)，且跌打軟膏高濃度組與低濃度組、青鵬膏組相比，較模型組FGF-2的含量增高多，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)第5、7天，隨著組織修復(fù)的完成，F(xiàn)GF-2的含量開始下降，跌打軟膏高濃度組與青鵬膏組、模型組和空白組的FGF-2含量均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P＜0.05），低濃度組與青鵬膏組差異無顯著性（P＞0.05）。（見表5）

表5 SD大鼠FGF-2含量統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，pg/ml）

表5 SD大鼠FGF-2含量統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，pg/ml）

注：與空白組比較▲P＜0.01，△P＜0.05；與模型組比較◆P＜0.01，◇P＜0.05；與青鵬膏組比較★P＜0.01，☆P＜0.05

分組實(shí)驗(yàn)第1天實(shí)驗(yàn)第3天高濃度組低濃度組青鵬膏組模型組空白組2 3 1 . 2 7 ± 2 2 . 8 6▲◇☆2 2 5 . 8 5 ± 1 0 . 3 1▲◇2 2 7 . 9 8 ± 2 3 . 1 7▲◇2 1 6 . 5 1 ± 2 1 . 9 4 7 2 . 6 2 ± 2 8 . 6 9 3 0 6 . 7 1 ± 2 4 . 9 8▲◇☆2 7 7 . 4 3 ± 2 7 . 4 7▲◇2 8 5 . 1 4 ± 3 6 . 8 4▲◇2 3 7 . 7 0 ± 1 4 . 4 1 7 2 . 6 2 ± 2 8 . 6 9實(shí)驗(yàn)第5天2 7 0 . 6 6 ± 2 6 . 2 7▲◇☆2 4 8 . 6 0 ± 2 4 . 6 4▲◇2 5 9 . 1 3 ± 4 3 . 6 1▲◇2 0 1 . 0 6 ± 1 0 . 9 9 7 2 . 6 2 ± 2 8 . 6 9實(shí)驗(yàn)第7天總計(jì)2 2 2 . 6 0 ± 2 0 . 6 6▲◇☆2 0 5 . 2 0 ± 1 3 . 2 8▲◇2 1 3 . 6 4 ± 2 3 . 0 7▲◇1 7 3 . 1 8 ± 1 8 . 1 5 7 2 . 6 2 ± 2 8 . 6 9 9 9 9 9 9

2.4 SD大鼠IL-6含量的結(jié)果統(tǒng)計(jì)由表6可見四次統(tǒng)計(jì)的4個(gè)造模組均超過空白對(duì)照組的IL-6含量，有高度顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，于實(shí)驗(yàn)第3天達(dá)到各組的最大值。在實(shí)驗(yàn)第5天，各組IL-6含量開始下降，跌打軟膏高濃度組、低濃度組、青鵬膏組與模型組比較均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)第7天，跌打軟膏高濃度組組較低濃度組、青鵬膏組IL-6含量少，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表6 SD大鼠IL-6含量統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，pg/ml）

表6 SD大鼠IL-6含量統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，pg/ml）

注：與空白組比較▼P＜0.01，▽P＜0.05；與模型組比較●P＜0.01，○P＜0.05；與青鵬膏組比較■P＜0.01，□P＜0.05

分組實(shí)驗(yàn)第1天實(shí)驗(yàn)第3天高濃度組低濃度組青鵬膏組模型組空白組3 6 . 7 8 ± 1 . 2 9▼●□4 0 . 2 9 ± 1 . 7 4▼○3 8 . 5 9 ± 1 . 0 4▼○5 1 . 0 4 ± 4 . 9 4 3 . 0 6 ± 0 . 6 4 4 1 . 6 4 ± 1 . 9 2▼○□4 5 . 1 9 ± 1 . 7 3▼○4 3 . 3 7 ± 3 . 0 8▼○5 0 . 9 2 ± 3 . 1 5 3 . 0 6 ± 0 . 6 4實(shí)驗(yàn)第5天2 8 . 1 1 ± 0 . 6 9▼○□3 1 . 1 7 ± 1 . 0 9▼○3 0 . 6 7 ± 1 . 3 7▼○3 9 . 1 0 ± 2 . 3 2 3 . 0 6 ± 0 . 6 4實(shí)驗(yàn)第7天總計(jì)1 7 . 0 1 ± 2 . 3 5▼○□2 0 . 7 0 ± 1 . 3 8▼○1 9 . 2 8 ± 3 . 1 6▼○2 2 . 3 6 ± 1 . 5 5 3 . 0 6 ± 0 . 6 4 9 9 9 9 9

3 討論

3.1 跌打軟膏對(duì)軟組織損傷大體觀察損傷程度的實(shí)驗(yàn)討論肌肉、筋膜、韌帶、肌腱、滑膜、關(guān)節(jié)囊、骨膜等皮下組織參與構(gòu)成軟組織，本實(shí)驗(yàn)通過用柱形錘擊器擊中SD大鼠左后大腿造成其急性閉合性軟組織損傷后，組織下毛細(xì)血管破損出血，溢出脈外，形成瘀血，呈現(xiàn)青紫腫脹。血液中紅細(xì)胞、血小板簇集，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，形成類似人損傷后出現(xiàn)的張力性水泡。從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)角度分析為局部皮膚、軟組織損傷，嚴(yán)重者為肌纖維斷裂、小血管破裂、血管壁通透性增加、血管內(nèi)液體外滲致組織腫脹，生物活性物質(zhì)如組織胺、5-羥色胺、緩激肽等激活，產(chǎn)生了大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)致組織壞死，同時(shí)刺激神經(jīng)的疼痛[4]。

采用活血祛瘀、理氣止痛、涼血消腫法可促進(jìn)消散瘀血，清除腫脹[5，6]。模型組在實(shí)驗(yàn)第1天、第3天、第5天、第7天較空白組評(píng)分呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)，表明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成功造模。四次實(shí)驗(yàn)損傷程度的大體觀察，跌打軟膏高濃度組較低濃度組、青鵬膏組、模型組的分值均低，具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明跌打軟膏高濃度組治療急性閉合性軟組織損傷在大體觀察上藥效作用更

強(qiáng)。

3.2 跌打軟膏對(duì)軟組織損傷病理學(xué)的實(shí)驗(yàn)討論急性軟組織損傷主要表現(xiàn)為局部的變質(zhì)、滲出及增生，局部組織細(xì)胞形態(tài)有明顯變化[7]，何朝勇等[8]觀察奇正消痛貼膏對(duì)大鼠損傷性血腫局部軟組織形態(tài)學(xué)的改變，對(duì)比模型組的病理變化，奇正消痛貼膏和扶他林用藥組均有較好的改善病理?yè)p傷的作用，表現(xiàn)為皮下組織和肌肉組織損傷減輕、嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)減少、組織修復(fù)較快。損傷后的橫紋肌纖維發(fā)生變質(zhì)、斷裂，肌間隙增寬，滲入的壞死組織形成水腫，大量瘀血塊被肌化、吸收，充斥于肌纖維間，使肢體功能活動(dòng)受限。大量中性粒細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，產(chǎn)生炎性反應(yīng)，肌纖維發(fā)生透明樣變性、壞死。由本實(shí)驗(yàn)病理組織觀察可見，模型組的肌間隙、瘀血范圍較其他5組明顯變寬，橫紋肌纖維斷裂；其他5組在用藥周期內(nèi)血腫在不斷變小、吸收，橫紋肌的肌纖維也在不斷修復(fù)，肌纖維排列較為整齊，跌打軟膏高濃度組較低濃度組、青鵬膏組水腫、瘀血消散和功能恢復(fù)快，表明跌打軟膏高濃度組治療急性閉合性軟組織損傷在病理學(xué)觀察上更有利于組織修復(fù)、恢復(fù)活動(dòng)功能。

3.3 跌打軟膏中FGF-2、IL-6含量變化的實(shí)驗(yàn)討論堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor FGF-2)FGF-2也是一種重要的有絲分裂刺激原，它可刺激多種不同的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂、增殖和遷移，F(xiàn)GF-2在創(chuàng)傷愈合早期具有比較關(guān)鍵的作用，它能促進(jìn)非常早期的創(chuàng)傷修復(fù)反應(yīng)，這種作用與細(xì)胞肌動(dòng)蛋白和細(xì)胞骨架有關(guān)[9]；并且傷后FGF-2含量變化與巨噬細(xì)胞數(shù)量變化一致，提示巨噬細(xì)胞可通過產(chǎn)生FGF-2來影響創(chuàng)傷愈合過程，或者FGF-2不僅可影響組織修復(fù)細(xì)胞增殖、分化和遷移，而且也可吸引、趨化炎性細(xì)胞浸潤(rùn)[10]。此外白細(xì)胞介素6（IL-6）細(xì)胞來源主要由單核巨噬細(xì)胞、Th2細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞產(chǎn)生，它的主要作用之一是刺激肝細(xì)胞合成急性期蛋白，參與炎癥反應(yīng)[11]。FGF-2、IL-6作為兩種細(xì)胞因子，分別在組織修復(fù)和炎性反應(yīng)方面充當(dāng)著重要的角色。肌肉組織細(xì)胞損傷后會(huì)促進(jìn)FGF-2、IL-6兩種細(xì)胞因子的產(chǎn)生，是闡釋組織炎癥、受損程度、修復(fù)過程靈敏而重要的指標(biāo)。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在FGF-2含量上，模型組明顯高于空白組，有高度顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），跌打軟膏高濃度組高于低濃度組、青鵬膏組，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），跌打軟膏低濃度組與青鵬膏組比較無顯著性差異；在IL-6含量上，跌打軟膏高、低濃度組、青鵬膏組、模型組均高于空白組，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），治療周期內(nèi)跌打軟膏高濃度組低于低濃度組、青鵬膏組，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），跌打軟膏低濃度組、青鵬膏組比較的差異不顯著。表明跌打軟膏可以通過暫時(shí)提高血液中FGF-2的含量、降低IL-6的含量，以達(dá)到治療急性閉合性軟組織損傷的目的。

3.4 跌打軟膏的組方討論跌打外敷散為我院的院內(nèi)制劑，方中重用澤蘭、三棱、莪術(shù)、紅花、乳香、沒藥、土鱉蟲、九香蟲、天南星、梔子、大血藤活血破血，祛瘀消腫，功勞木、山萘理氣止痛，桂枝溫經(jīng)通絡(luò)，配以當(dāng)歸補(bǔ)血，消補(bǔ)并用。瘀血阻滯則氣機(jī)不暢，痰濕易聚，故用細(xì)辛、燥濕化痰。瘀而生熱，加用黃芩、黃連、黃柏、赤芍清熱燥濕，解毒散結(jié)，活血涼血。寒熱、消補(bǔ)并用，局部、整體并重，對(duì)外傷性腫痛有消腫止痛的作用。上述各藥作用于發(fā)病機(jī)制及治療的不同環(huán)節(jié)，相互協(xié)同、補(bǔ)充，效果顯著，無不良反應(yīng)。而且配方合理精當(dāng)，價(jià)格低廉，藥物易于獲得，配制也十分方便，經(jīng)30多年臨床實(shí)踐，發(fā)現(xiàn)療效確切，創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，改為膏劑后，使用及攜帶方便。

通過本次實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)跌打軟膏的活血祛瘀、消腫止痛作用進(jìn)行了再一次的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，證明其對(duì)炎癥反應(yīng)引起的疼痛及腫脹具有明顯的治療作用，其中，跌打軟膏的消腫作用明顯優(yōu)于對(duì)照藥物，體現(xiàn)了中藥外用制劑在控制炎癥腫脹方面的優(yōu)勢(shì)，為跌打軟膏的應(yīng)用及推廣提供進(jìn)一步的科學(xué)依據(jù)。

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Experimental Study on Dieda Ointment in the Treatment of Acute Closed Soft Tissue Injury

YU Zhaozhong1,WAN Xiaoming1,DING Xueyong2,LIANG Weidong1,LIU Feng1
(1.Department of Orthopaedics and Traumatology,the Affiliated Hospital of Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330006,China; 2.Grade 2013 Graduate,Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanchang 330006,China)

Objective This topic usinged modern animal experiment research method,revealed mechanism of Dieda ointment in the treatment of acute closed soft tissue injury and provided a theoretical basis for the promotion of Dieda ointment.Methods 45 SD male rats were divided into Dieda ointment high concentration group,Dieda ointment low concentration group,Qingpeng ointment group, model group and blank control group.The SD rats in each group were given inunction ointment(excepting the blank group).The model group was given alcohol inunction.The blank group wasn't given medicine.The treatment continued for 1 week.On the first day,the third day,the fifth day and the seventh day,the local damage was observed,and the rats were sacrificed to observe the histological changes and the content of FGF-2 and IL-6 of the inflammatory factors were determined by SD.Results The experimental results were presented to illustrate the FGF-2 content of the Dieda ointment high concentration group increased,the content of IL-6 decreased in the magnitude of the low concentration group,Qingpeng ointment group,model group,and local damage gross observation score and histological score were statistically significant(P<0.05).Conclusion The Dieda ointment has accelerated acute closed soft tissue injury after the absorption of edema,blood stasis dissipation,tissue repair,and is worth to recommend that clinicians widely used.

Dieda ointment;acute closed soft tissue injury;experimental study

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.22.063

1672-2779（2016）-22-0139-04

：李海燕本文校對(duì)：李華南

2016-07-07）

江西省自然科學(xué)基金（No：20132BAB205096）

＊通訊作者：wanxm2005@126.com