張一君,王玲玉,馬海明
(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,湖南 長沙 410128)
寧鄉(xiāng)豬肉質(zhì)相關(guān)Wnt10b基因多態(tài)性研究
張一君*,王玲玉,馬海明**
(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,湖南 長沙 410128)
為探討寧鄉(xiāng)豬肉質(zhì)相關(guān)Wnt10b基因的遺傳變異情況,本研究以寧鄉(xiāng)豬為研究對象,并與外來品種大白豬進(jìn)行了比較,并用PCR-RFLP方法檢測了該基因一個A→G類型的 SNP。結(jié)果表明,PCR-RFLP-Sal I多態(tài)性在寧鄉(xiāng)豬品種中A基因為優(yōu)勢等位基因,其基因頻率為0.686 6;大白豬中A基因為優(yōu)勢等位基因,基因頻率為0.667 7。經(jīng)卡方檢驗,符合孟德爾定律。本研究為寧鄉(xiāng)豬的保種選育積累了有益的資料。
豬;Wnt10b基因;PCR-RFLP
寧鄉(xiāng)豬原產(chǎn)于湖南省寧鄉(xiāng)縣的流沙河及草沖一帶,原名為流沙河豬或草沖豬。寧鄉(xiāng)豬形成歷史悠久,其體型特征是“絲頸葫蘆肚,耳薄嘴筒齊,稀毛現(xiàn)薄皮,魚尾后腳直,奶子一斬齊,四腳要撒蹄”,“烏云蓋雪銀頸圈”。體型中等,體質(zhì)疏松細(xì)致,體軀呈圓筒狀,毛色為黑白花,基本色調(diào)是四肢、肋腹及頸下的下部為白色,頭和臀部呈黑色。Wnt10b基因是經(jīng)典Wnt通路上的重要成員,該通路與豬肉質(zhì)性狀有密切關(guān)系。本研究旨在篩選寧鄉(xiāng)豬肉質(zhì)性狀遺傳標(biāo)記,旨在為該標(biāo)記應(yīng)用于寧鄉(xiāng)豬的保種選育提供理論依據(jù)。
1.1 樣品采集
取小塊豬耳組織提取DNA,寧鄉(xiāng)豬67頭,大白豬325頭,共計402頭,采豬耳組織樣品-20 ℃保存。
1.2 基因組DNA提取及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)擴增
基因組DNA提取按常規(guī)酚-氯仿進(jìn)行。Wnt10b基因SNP位點PCR-RFLP-Sal I的PCR擴增條件為95 ℃ 2 min(預(yù)變性),95 ℃ 30 s(變性),59 ℃30 s(退火),72 ℃ 30 s(延伸),40個循環(huán)。
對Wnt10b基因A/G位點的基因頻率、基因型頻率見圖1。PCR-RFLP-Sal I多態(tài)性的分布情況如表1所示。
由表2可知,這2個豬種的遺傳純合度都在0.5以上,且比較接近。寧鄉(xiāng)豬的有效等位基因數(shù)低于大白豬。從多態(tài)信息含量上看,兩個品種豬的PIC在0.25~0.5之間,屬于中度多態(tài)。
在寧鄉(xiāng)豬品種中,A基因為優(yōu)勢等位基因,其基因頻率為0.686 6。在外來品種大白豬中,A基因為優(yōu)勢等位基因,基因頻率為0.667 7;經(jīng)適合性卡方檢驗,可知符合孟德爾遺傳分離定律基因型頻率比1∶2∶1。大白豬和寧鄉(xiāng)豬在該基因位點具有遺傳多態(tài)性,并且具有較高的遺傳變異?!酢?/p>
S813.1
A
1001-0769(2016)11-0023-02
2016-06-24。
寧鄉(xiāng)豬基礎(chǔ)研究(5026401-0315069)。
張一君(1988.11- ),女,漢族,甘肅天水人,碩士在讀,研究方向為豬的分子遺傳與育種;E-mail:362824409@qq.com。
**通信作者:馬海明,博士,教授,研究方向動物遺傳育種;E-mail:mahai ming2000@163.com。