王軍 周迎春 陳曦 王倩 何長生 占松鶴*

（1，安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 230091；2，安徽省畜禽防治技術(shù)服務(wù)中心 230091）

安徽部分地區(qū)主要豬病血清學(xué)抗體檢測(cè)

王軍1,2周迎春1陳曦1王倩1何長生1占松鶴1*

（1，安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 230091；2，安徽省畜禽防治技術(shù)服務(wù)中心 230091）

從安徽省部分地區(qū)種豬場種豬、規(guī)模化養(yǎng)殖場商品豬及散養(yǎng)豬隨機(jī)抽取采集的血清樣品，共計(jì)3242份，分別對(duì)其進(jìn)行了豬瘟、口蹄疫和高致病性豬藍(lán)耳病的免疫抗體檢測(cè)。用阻斷ELISA方法檢測(cè)豬瘟抗體；用液相阻斷ELISA方法檢測(cè)豬口蹄疫抗體，用ELISA方法檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病抗體，結(jié)果表明，豬瘟、口蹄疫和高致病性豬藍(lán)耳病的免疫抗體合格率分別為85.07%、78.01%和88.86%；3種免疫抗體均合格的樣品數(shù)為2224份，占所檢樣品總數(shù)的68.60%。說明當(dāng)前安徽省豬群總體免疫效果較好，血清抗體能夠達(dá)到有效保護(hù)水平，但仍存在豬只個(gè)體發(fā)生主要豬病的風(fēng)險(xiǎn)。

豬?。回i瘟；豬口蹄疫；高致病性豬藍(lán)耳??；免疫抗體；血清學(xué)檢測(cè)

豬瘟 （CSF）、 豬口蹄疫 （FMD）、 高致病性豬藍(lán)耳?。≒RRS）等是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展并具有高度傳染性的主要疫病[1]，也是我國重點(diǎn)防控的豬類動(dòng)物疫病[2]。各生長階段的豬只均可感染發(fā)病[3]。目前，對(duì)這幾種疫病的防治主要依靠疫苗的免疫預(yù)防。鑒于當(dāng)前國內(nèi)外豬病的流行特點(diǎn)，非典型性疫病、混合性或繼發(fā)性感染疫病以及條件性疫病增多[4]，導(dǎo)致豬病越來越錯(cuò)綜復(fù)雜，給診斷和防治帶來很多困擾，生豬養(yǎng)殖業(yè)疫病控制面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)[5]。通過對(duì)部分地區(qū)豬群的血清學(xué)抗體檢測(cè)，可以了解安徽省不同區(qū)域豬瘟、口蹄疫及高致病性豬藍(lán)耳病的免疫狀況，為有效開展豬群主要疫病的防治、合理制定免疫計(jì)劃及進(jìn)行主要疫病的風(fēng)險(xiǎn)分析工作提供重要依據(jù)。為此，我們對(duì)來自安徽省亳州、宿州、六安、合肥、宣城、黃山等6個(gè)地級(jí)市的豬血清樣品進(jìn)行了豬瘟、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病的免疫抗體檢測(cè)，現(xiàn)將檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下，供讀者參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品

選取安徽省處于不同區(qū)域的6個(gè)地級(jí)市：亳州市、宿州市、六安市、合肥市、宣城市、黃山市。其中：亳州、宿州地處淮北地區(qū) （淮河以北地區(qū)）；六安、合肥地處江淮地區(qū)（淮河和長江之間地區(qū)）；宣城、黃山地處江南地區(qū) （長江以南地區(qū)），采集豬血樣3242份，其中包括種豬1199份、規(guī)模場商品豬1769份、散養(yǎng)豬274份。前腔靜脈或耳靜脈采血，每份約5ml，自然凝固析出血清，離心分離后備用。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)器材

單道、8道、12道移液器若干，96孔U型反應(yīng)板若干，100ml、1000ml量筒，KL-UP-Ⅲ-10超純水機(jī)，ELX405R 96通道全自動(dòng)洗板機(jī)，TECAN SUNRISE REMOTE酶標(biāo)儀。

1.1.3 檢測(cè)試劑

豬瘟病毒抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：99-43220 C531，由美國IDEXX公司生產(chǎn)，購自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司；口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：20150516101，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)；豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷試劑盒，批號(hào)201510012，由上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)；豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)99-40959 E681，由美國IDEXX公司生產(chǎn)，購自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司。

1.2 方法

按照2015年國家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)計(jì)劃中指定的方法進(jìn)行檢測(cè)[6]。

1.2.1 豬瘟

采用抗體阻斷ELISA，檢測(cè)豬瘟免疫抗體，抗體陽性即判定為免疫合格。

1.2.2 豬口蹄疫

O型口蹄疫抗體：采用液相阻斷ELISA，合成肽疫苗采用VP1結(jié)構(gòu)蛋白ELISA進(jìn)行檢測(cè)。液相阻斷ELISA：抗體效價(jià)≥26；VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA：抗體效價(jià)≥25，判定為免疫合格。

1.2.3 高致病性豬藍(lán)耳病

采用ELISA方法，高致病性豬藍(lán)耳病ELISA抗體檢測(cè)陽性，判定為免疫合格。

2 結(jié)果

相關(guān)檢測(cè)結(jié)果與數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)見表1～6。

2.1 豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果

所檢測(cè)3242份豬血清樣品，豬瘟免疫抗體合格數(shù)2758份，免疫抗體合格率85.07%。由表1知，亳州、宿州、六安、合肥、宣城、黃山6市的豬瘟抗體合格率分別為：90.36%、78.24%、74.36%、93.18%、84.36%、89.89%；由表2知，種豬、規(guī)模場豬、散養(yǎng)豬的抗體合格率分別為：90.16%、82.36%、80.29%。均達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的合格標(biāo)準(zhǔn)。從表3可以看出，所抽檢的6市中，種豬、規(guī)模場豬及散養(yǎng)豬的抗體合格率最高的市分別為亳州市、合肥市、黃山市；種豬、規(guī)模場豬及散養(yǎng)豬的抗體合格率最低的市分別為宣城市、六安市、宿州市。其中，六安市的規(guī)模場豬及散養(yǎng)豬的抗體合格率均較低，分別為61.13%和65%；宿州市散養(yǎng)豬的抗體合格率最低，為64.29%。

表1 6地級(jí)市樣品免疫抗體合格率

表2 不同畜別免疫抗體總體合格率

表3 豬瘟免疫抗體合格情況

表4 豬口蹄疫免疫抗體合格情況

表5 高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體合格情況

表6 CSF、FMD、PRRS 3種免疫抗體均合格情況

2.2 豬口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

由表1或2可以看出，豬口蹄疫免疫抗體合格數(shù)2529份，占所檢樣品總數(shù)的78.01%。由表1知，亳州、宿州、六安、合肥、宣城、黃山6市的豬口蹄疫抗體合格率分別為：88.35%、60.39%、72.71%、89.24%、72.85%、85.11%；由表2知，種豬、規(guī)模場豬、散養(yǎng)豬的抗體合格率分別為：82.24%、75.35%、76.64%。從表4可以看出，對(duì)于不同畜別，種豬抗體合格率最高的為合肥市，合格率93.33%，最低為宿州市，合格率72.86%；規(guī)模場豬抗體合格率最高的為合肥市，合格率88.33%，最低為宿州市，合格率52.30%；散養(yǎng)豬抗體合格率最高的為黃山市，合格率92.31%，最低為宿州市，合格率為53.57。

2.3 高致病性豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)結(jié)果

由表1或2可以看出，高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體合格數(shù)2881份，占所檢樣品總數(shù)的88.86%。由表1知，亳州、宿州、六安、合肥、宣城、黃山6市的高致病性豬藍(lán)耳病抗體合格率分別為：96.59%、77.45%、84.43%、93.33%、86.81%、96.28%；由表2知，種豬、規(guī)模場豬、散養(yǎng)豬的抗體合格率分別為：92.41%、87.05%、85.04%。從表5可以看出，亳州市的種豬及規(guī)模場豬抗體合格率均最高，分別為98.64%、97.17%；黃山市的散養(yǎng)豬抗體合格率最高，為96.92%；而宿州市的種豬、規(guī)模場豬及散養(yǎng)豬的抗體合格率均最低，分別為85.43%、72.79%、67.86%。

2.4 CSF、FMD、PRRS 3種免疫抗體均合格情況

所檢測(cè)3242份豬血清樣品，CSF、FMD、PRRS 3種免疫抗體均合格份數(shù)為2224，總體合格率為68.60%。由表6知，亳州、宿州、六安、合肥、宣城、黃山6市的總體合格率分別為：76.71%、53.92%、61.72%、84.24%、60.74%、76.60%，按畜別來看，各市的種豬合格率相對(duì)較高，而散養(yǎng)豬合格率相對(duì)較低。

3 討論

（1）依據(jù)檢測(cè)結(jié)果，總體來看，雖然豬瘟、豬口蹄疫和高致病性豬藍(lán)耳病的免疫抗體合格率均達(dá)到國家規(guī)定的70%的標(biāo)準(zhǔn)，但豬口蹄疫免疫效果相對(duì)較差，如宿州市規(guī)模場豬及散養(yǎng)豬的抗體合格率均在60%以下，遠(yuǎn)未達(dá)到有效保護(hù)水平。這意味著豬群存在發(fā)生口蹄疫的風(fēng)險(xiǎn)。究其原因，是否因?yàn)橐呙鐔栴}或者因?yàn)榇嬖陴B(yǎng)殖戶漏免現(xiàn)象，還是由其他諸如免疫程序不合理、疫苗使用和操作不當(dāng)以及免疫抑制性疾病等因素造成免疫失敗，有待進(jìn)一步調(diào)查研究。

（2）本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中，CSF、FMD、PRRS 3種免疫抗體均合格的豬血清樣品數(shù)占所檢樣品總數(shù)的68.60%，未達(dá)到70%的合格標(biāo)準(zhǔn)。這表明豬群免疫力不甚理想，略低于有效保護(hù)水平，豬只個(gè)體存在發(fā)生主要豬病的安全隱患。正常情況下，疫苗之間會(huì)相互干擾[7]，有必要加強(qiáng)主要豬病的免疫程序優(yōu)化[8]，同時(shí)注重加強(qiáng)豬群免疫狀況監(jiān)測(cè)，以期提高整體免疫效果。對(duì)于免疫抗體合格率未達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)的場點(diǎn)，在及時(shí)補(bǔ)免的同時(shí)，應(yīng)加強(qiáng)相關(guān)疫病的監(jiān)測(cè)工作，密切注意這些場點(diǎn)的疫病動(dòng)態(tài)。

（3）從地區(qū)來看，淮北地區(qū) （亳州、宿州2市）CSF、FMD、PRRS 3種疫病的平均免疫抗體合格率分別為：84.23% （849/1008）、 74.21% （748/1008）、 86.90% （876/1008）；江淮地區(qū) （六安、合肥2市）3種疫病的平均免疫抗體合格率分別為：84.66% （1021/1206）、81.76% （986/1206）、89.30% （1077/1206）； 江南地區(qū) （宣城、 黃山2市）3種疫病的平均免疫抗體合格率分別為：86.38% （888/1028）、 77.33% （795/1028）、 90.27% （928/1028）， 采用SPSS軟件 （19.0）對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，差異不顯著 （P＞0.05）?？梢?，安徽省豬群CSF、FMD、PRRS的免疫情況無明顯的地區(qū)差異。這與該3種動(dòng)物疫病在前幾年均被列為國家強(qiáng)制免疫病種有關(guān)[9]。

（4）所抽取的3242份樣品，包括種豬1199份、規(guī)模場豬1769份、散養(yǎng)豬274份，CSF、FMD、PRRS 3種免疫抗體均合格樣品數(shù)分別為：種豬906份、規(guī)模場豬1152份、散養(yǎng)豬166份，種豬、規(guī)模場豬、散養(yǎng)豬的合格率分別為：75.56%、65.12%、60.58%，根據(jù)SPSS軟件計(jì)算知，差異顯著 （0.01＜P＜0.05）；同時(shí)結(jié)合不同病種的檢測(cè)結(jié)果看，種豬的免疫抗體合格率明顯高于規(guī)模場豬及散養(yǎng)豬。這可能與種豬的飼養(yǎng)周期較長、免疫次數(shù)較多有關(guān)?？梢姡i群免疫效果與飼養(yǎng)種類、養(yǎng)殖方式有一定關(guān)系。

[1]蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)[M].第四版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001.

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[6]農(nóng)業(yè)部.關(guān)于印發(fā)《2015年國家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》的通知[Z].農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2015〕10 號(hào).北京:農(nóng)業(yè)部,2015-04-01.

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[9]農(nóng)業(yè)部.關(guān)于印發(fā)《2013年國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》的通知[Z].農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2013〕8 號(hào).北京:農(nóng)業(yè)部,2013-02-25.

王軍 （1983-），男，安徽省合肥市人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防控工作。

*通訊作者：占松鶴 （1970-），男，安徽省合肥市人，博士，主要從事動(dòng)物疫病防控工作。