王明明，孫 贊，權勤玲

(南京醫(yī)科大學康達學院藥學系，江蘇 連云港 222000)

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羥乙基淀粉130/0.4注射液中乳酸鈉質量研究

王明明，孫 贊，權勤玲

(南京醫(yī)科大學康達學院藥學系，江蘇 連云港 222000)

建立高效液相色譜法測定羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液中乳酸鈉含量的方法并考察樣品的穩(wěn)定性。采用thermo BDS HYPERSIL C18(25 cm×4.6 mm，5 μm)，流動相為0.39%磷酸二氫鉀(pH=2.0)：乙腈，梯度洗脫，檢測波長210 nm。結果表明，乳酸鈉在0.185～1.235 mg·mL-1范圍內線性關系良好，r=0.9998，樣品中乳酸鈉平均含量為0.588 mg·mL-1，長期穩(wěn)定性實驗乳酸鈉含量穩(wěn)定。該方法能夠準確的測定羥乙基淀粉130/0.4注射液中乳酸鈉含量，復方注射液穩(wěn)定性良好。

羥乙基淀粉130/0.4；乳酸鈉；穩(wěn)定性

羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液為羥乙基淀粉130/0.4、氯化鈉、乳酸鈉、氯化鉀與氯化鈣的滅菌水溶液，處方為羥乙基淀粉130/0.460.0 g、氯化鈉6.0 g、乳酸鈉3.1 g、氯化鉀0.3 g和氯化鈣0.3 g加注射用水制成1000 mL的溶液，各成分含量均為標示量的95.0%～105.0%。羥乙基淀粉130/0.4注射液具有擴容和稀釋血液的作用，乳酸鈉林格注射液為復方注射液，氯化鉀、氯化鈉、氯化鈣其中是臨床常用的電解質補充液，能及時補充體內流失的電解質成分，乳酸鈉為營養(yǎng)性成分，具有L型和D型2種結構，藥用L型，結構構型如圖1所示。該復方具有調節(jié)體液、電解質和酸堿平衡的功效[1-3]。羥乙基淀粉130/0.4與乳酸鈉林格注射液配伍使用，可以改善人體微循環(huán)，避免器官的功能性損害，起到補充藥物治療作用的效果[4]。最新有研究表明，羥乙基淀粉130/0.4(hydroxyethyl starch，HES)溶液會出現腎毒性反應、出血風險增加以及死亡率增高的趨勢，有待于進一步的研究[5-7]。本實驗以羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液作為研究對象，應用高效液相色譜方法檢測復方注射液中乳酸鈉的含量并對樣品進行穩(wěn)定性考察，為新型制劑的質量控制提供參考數據。

圖1 乳酸鈉構型結構

1 儀器與試藥

戴安U3000高效液相色譜儀，賽默飛世爾科技；HD-E702-225恒溫恒濕試驗箱，海達儀器；DZF-6000減壓真空干燥箱，上海善志儀器設備有限公司；XS千分之一分析天平，梅特勒科技有限公司。

羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液(批號：1212151，1212152，1212153)，南京正大天晴制藥有限公司；乳酸鈉對照品(批號：100911-201501，規(guī)格100 mg)，中國食品藥品檢定所；磷酸二氫鉀(分析純，500 g)，天津科密歐化學試劑有限公司；乙腈(色譜純，500 mL)，國藥集團化學試劑有限公司。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

采用thermo BDS HYPERSIL C18(25 cm×4.6 m，5 μm)色譜柱，0.39%磷酸二氫鈉(pH=0.2)為流動相A，乙腈為流動相B，梯度洗脫，流速為0.5 mL·min-1，檢測波長210 nm，進樣量10 μL。梯度洗脫條件見表1。

表1 梯度洗脫條件

2.2 溶液的配制

供試品溶液：取羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液10 mL，精密量取，置于50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

對照品溶液：取乳酸鈉對照品適量，精密稱定，制成每1 mL含乳酸鈉0.62 mg的溶液，搖勻濾過，取續(xù)濾液作為對照品溶液。

乳酸鈉對照品使用前需要前處理，處理方法為打開瓶蓋，置于減壓真空干燥箱中真空干燥4 h，加蓋密封，置于專用干燥皿中備用，室溫20 ℃下貯存，48 h內使用有效。

2.3 系統(tǒng)適用性考察

取羥乙基淀粉130/0.4約1.2 g，氯化鈉約0.12 g，乳酸鈉約0.062 g，氯化鉀約0.006 g，無水氯化鈣約0.004 g 置于100 mL量瓶中，加水稀釋溶解至刻度搖勻，作為系統(tǒng)適用性溶液。精密量取10 μL，按照“2.1色譜條件”項，進樣，記錄色譜圖。乳酸鈉保留時間7.4 min，色譜峰面積7.327 mAU·s，理論塔板數5438，拖尾系數1.05，分離度大于1.5，無機鹽和羥乙基淀粉130/0.4在該色譜條件下不出峰。系統(tǒng)適用性實驗結果見圖1。

圖1 系統(tǒng)適用性和穩(wěn)定性實驗

2.4 精密度考察

取濃度為0.62 mg·mL-1的乳酸鈉對照品溶液，連續(xù)進樣6次，進樣量10 μL，結果表明，6次進樣峰面積RSD為0.49%，表明精密度良好。

2.5 線性和線性范圍考察

取乳酸鈉對照品約31.0 mg，精密稱定，置于10 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取上述溶液0.3、0.8、1.0、1.5、2 mL置5 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻濾過。按照“2.1色譜條件”項進樣測定，以濃度(C)為橫坐標，峰面積(A)為縱坐標繪制標準曲線。計算線性回歸方程為：A=12.3190C+0.0921(r=0.9999)。結果表明，乳酸鈉質量濃度在0.2039～0.6118 mg·mL-1范圍內線性關系良好。

2.6 檢測限和定量限考察

取“2.2”項下對照品溶液，加水逐步稀釋，分別配制成濃度為6.175 μg·mL-1和2.031 μg·mL-1的溶液，進樣，記錄色譜圖。結果表明，乳酸進樣量為61.75 ng時，S/N=10，進樣量為20.31 ng時，S/N=3。

2.7 穩(wěn)定性考察

取“2.2”項下新配乳酸鈉對照品溶液室溫條件下放置0、5、7、9、12、14、16 h后分別進樣，記錄色譜圖。結果表明12 h內，5次進樣結果的RSD%為1.18%；14 h內6次進樣結果的RSD%為1.31%；16 h后，乳酸鈉對照品色譜峰分裂，出現雜質峰。因此，乳酸鈉對照品溶液14 h內保持穩(wěn)定，16 h后發(fā)生分解現象。穩(wěn)定性實驗色譜圖見圖1。

2.8 加樣回收率考察

取不含乳酸鈉處方條件下羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射液9份，置100 mL量瓶中，分別加入乳酸鈉對照品適量，流動相A溶解稀釋定容，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄色譜圖。計算結果，結果表明回收率為99.79%，RSD=1.14%。加樣回收率見表2。

表2 樣品回收率結果

3 樣品檢測

3.1 樣品含量測定

取批號1212151 1212152 12121153三批樣品，按照“2.2”項下溶液配制方法配制對照品溶液和供試品溶液，按照“2.1”項下色譜條件，精密取10 μL進樣，記錄色譜圖。外標法以峰面積計算結果，乳酸鈉含量分別為標示量的100.8%、99.7%和99.1%，符合質量標準。

3.2 樣品穩(wěn)定性實驗考察

3.2.1 加速實驗

取供試品三批，按照市售包裝，置恒溫恒濕干燥箱中，在溫度(40±2) ℃，相對濕度75%±5%的條件下放置6個月，分別于1月、2月、3月、6月時間點取樣一次，測定樣品中乳酸鈉含量，實驗數據和結果見表。

3.2.2 長期實驗

取供試品三批，按照市售包裝，置恒溫恒濕干燥箱中，在溫度(25±2) ℃，相對濕度60%±5%的條件下放置12個月，分別于0月、3月、6月、9月、12月時間點取樣一次，測定樣品中乳酸鈉含量。穩(wěn)定性實驗數據和結果見表3。

表3 樣品穩(wěn)定性實驗結果

注：樣品中乳酸鈉含量在95.0%～105.0%范圍內，均符合質量規(guī)定。

4 討 論

本實驗采用常用的十八烷基硅烷鍵合硅膠反向色譜柱，梯度洗脫對羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格注射中的乳酸含量進行測定，建立方法學標準并考察了樣品的放樣穩(wěn)定性。這種方法比早前應用旋光儀測定法測定乳酸鈉含量的方法操作更加方便，結果更準確，樣品的用量更少[8]。在實驗中，我們發(fā)現乳酸鈉溶液在室溫條件下24 h內存在明顯降解的現象，但是在放樣穩(wěn)定性實驗中，我們沒有發(fā)現樣品中乳酸鈉含量降低，這可能是由于復方溶液中的K+、Na+等離子對乳酸鈉起到穩(wěn)定的作用。檢測波長和溶劑的選擇方面，L型乳酸鈉在210 nm處存在最大紫外吸收波長，屬于末端吸收的范圍，溶劑的選取會一定范圍內影響乳酸鈉含量的測定，選用乙腈作為有機相能有效的減少末端吸收，降低柱壓，防止色譜基線漂移現象。

5 結 論

綜上所述，本方法建立了高效液相色譜方法用于測定羥乙基淀粉130/0.4乳酸鈉林格復方注射液中乳酸鈉的含量，并對樣品的長期和加速實驗穩(wěn)定性進行考察。結果表明，該方法測定乳酸鈉含量，測定值不受注射劑處方中其余藥物成分和輔料的干擾，樣品在存放期內，性質保持穩(wěn)定，該復方注射液具有廣闊的市場應用前景。

[1] Li Y, He R, Ying X, et al. Ringer’s lactate, but not hydroxyethyl starch, prolongs the food intolerance time after major abdominal surgery, an open-labelled clinical trial[J]. Bmc Anesthesiology, 2015, 15(1):1-8.

[2] 何銳,李玉紅,丁倩男,等.乳酸林格氏液體和羥乙基淀粉130/0.4氯化鈉注射液對腹腔鏡下胃腸癌根治術術后結局的影響[J].中國現代應用藥學,2016(4):466-473.

[3] 彭元志,杜健兒.應用6%羥乙基淀粉130/0.4行急性擴容性血液稀釋對腦腫瘤切除術患兒凝血功能和血流動力學的影響[J].上海醫(yī)學,2016(2):72-75.

[4] Mahmood H M, Pooya D, Amir R S, et al. Comparing the Effects of 5% Albumin and 6% Hydroxyethyl Starch 130/0.4 (Voluven) on Renal Function as Priming Solutions for Cardiopulmonary Bypass：A Randomized Double Blind Clinical Trial[J]. Anesthesiology & Pain Medicine, 2016, 6(1).

[5] Kancir A S P. The nephrotoxicity of 6% Hydroxyethyl Starch 130/0.4 in surgery[J]. Acta Anaesthesiologica Scandinavica, 2016, 60(4):548-549.

[6] Su F, Xie K, He X, et al. The Harmful Effects of Hypertonic Sodium Lactate Administration in Hyperdynamic Septic Shock[J]. Shock, 2016.

[7] 李佳,程晟,沈素.藥源性腎損害的臨床新視點[J].中國醫(yī)院用藥評價與分析,2016,16(3): 431-432.

[8] 劉廣楨,林林,孫晶,等.《中國藥典》2010年版二部旋光度法測定含量方法的規(guī)范統(tǒng)一建議[J].中國藥品標準,2013,14(4):249-250.

Study on Quality of Sodium Lactate Injection in Hydroxyethyl Starch 130/0.4

WANGMing-ming,SUNZan,QUANQin-ling

(Department of Pharmacy, Kangda College of Nanjing Medical University, Jiangsu Lianyungang 222000, China)

The HPLC method for determination the content of sodium lactate in hydroxyethyl starch 130/0.4 was established and the stability of the sample was investigated. Thermo BDS HYPERSIL C18(25 cm×4.6 mm, 5 μm), mobile phase 0.39% potassium dihydrogen phosphate (pH=2.0)：acetonitrile and program of gradient elution were used, and detection wavelength was 210 nm. Results indicated that sodium lactate maintained fine linear relationship in the concentration range of 0.185～1.235 mg·mL-1, r=0.9998, the content of sodium lactate in the samples was 0.588 mg·mL-1, long-term stability of the experimental results were stable. The methods could accurately determine the content of sodium lactate in hydroxyethyl starch 130/0.4 injection and the stability of the compound injection was good.

hydroxyethyl starch130/0.4; sodium lactate; stability

王明明(1986-)，男，助教，主要從事藥物質量研究。

R917

A

1001-9677(2016)020-0111-03