屈莉紅，荊魯寧

（山東省海陽市人民醫(yī)院產(chǎn)科，山東 海陽 265100）

胎盤組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α和內(nèi)皮素-1表達(dá)對糖尿病妊娠的影響

屈莉紅，荊魯寧

（山東省海陽市人民醫(yī)院產(chǎn)科，山東 海陽 265100）

目的探究分析胎盤組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）和內(nèi)皮素-1（ET-1）表達(dá)對糖尿病妊娠的影響。方法分別選取糖尿病妊娠患者30例（糖尿病妊娠組）、妊娠期糖尿病患者30例（妊娠糖尿病組）以及正常孕婦30例（對照組）。采用免疫組織化學(xué)法SP法測定EF-1及HIF-1α蛋白的含量，比較并分析各組檢測結(jié)果差異及其對糖尿病妊娠結(jié)局的影響。結(jié)果糖尿病妊娠患者胎盤組織EF-1及HIF-1α蛋白陽性表達(dá)率顯著高于妊娠糖尿病患者及對照組（P<0.05），糖尿病妊娠患者的產(chǎn)后出血、胎兒生長受限及妊娠高血壓等并發(fā)癥發(fā)生率（50.00%）顯著高于妊娠糖尿病患者（30.00%）及對照組（10.00%），各組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P< 0.05）。結(jié)論胎盤組織EF-1及HIF-1α蛋白表達(dá)情況對糖尿病妊娠患者的妊娠結(jié)局具有不良影響，EF-1及HIF-1α蛋白陽性表達(dá)率越高，妊娠并發(fā)癥發(fā)生率明顯增加，胎盤損害越嚴(yán)重。

胎盤組織；HIF-α；ET-1；糖尿病妊娠

糖尿病是臨床診療中較為常見的病癥，目前，糖尿病患者的妊娠率也在不斷增加，對母嬰健康存在嚴(yán)重威脅[1]。胎盤組織在缺氧狀態(tài)下可以促使缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia-induciblefactor-1α，HIF-1α）表達(dá)，內(nèi)皮素-1（endothelin-1，ET-1）是HIF-1α的下游靶基因，屬于纖維化致炎因子，HIF-1α和ET-1共同參與糖尿病妊娠的進展過程[2-3]。胎盤功能對胎兒的健康起著至關(guān)重要的保護作用，其病理改變依賴于胎盤含氧量。本研究胎盤組織中HIF-1α和ET-1表達(dá)對母嬰結(jié)局的影響作用?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2013年10月-2015年10月于山東省海陽市人民醫(yī)院產(chǎn)科接收的90例孕婦為研究對象。其中，糖尿病妊娠患者30例（糖尿病妊娠組）、妊娠期糖尿病患者30例（妊娠糖尿病組）以及正常孕婦30例（對照組）。糖尿病診斷符合中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)會制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，糖尿病妊娠組在本次妊娠前均已確診為糖尿病。所選90例研究對象均為單胎妊娠，排除具有貧血、精神障礙及其他心、肝、腎器官腫瘤疾病患者。3組患者均對本研究知情并自愿參與研究，本次研究已經(jīng)獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。3組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

無菌操作狀態(tài)下取2塊處于娩出30 min內(nèi)的3組胎盤組織母體面中央組織，注意避開組織鈣化及壞死區(qū)域，胎盤組織塊大小在1 cm×1 cm×1 cm左右，經(jīng)甲醛固定后，進行石蠟包埋處理。EF-1及HIF-1α蛋白定位采用免疫組織化學(xué)法SP法進行半定量檢測。兔抗人ET-1單克隆抗體及兔抗人HIF-1α多克隆抗體均由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供，檢測操作過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.3觀察指標(biāo)

觀察各組妊娠并發(fā)癥發(fā)生情況，觀察胎盤組織EF-1及HIF-1α蛋白的表達(dá)及定位情況。

1.4評價指標(biāo)

免疫組織化學(xué)法染色結(jié)果判定：顯微鏡下觀察到胞質(zhì)或者胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒即為陽性表達(dá)。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料采用（%）表示，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1各組胎盤組織HIF-1α和ET-1的表達(dá)情況

糖尿病妊娠組孕婦胎盤組織HIF-1α蛋白表達(dá)陽性率為66.67%，ET-1蛋白表達(dá)陽性率為73.33%，與妊娠糖尿病組及對照組胎盤組織HIF-1α和ET-1表達(dá)水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1　3組HIF-1α和ET-1蛋白表達(dá)陽性率比較例（%）

2.2HIF-1α和ET-1在各組胎盤組織中的定位情況

胎盤組織HIF-1α和ET-1蛋白表達(dá)定位在胎盤合體、細(xì)胞核及胞質(zhì)部分，均可以見到棕黃色顆粒的陽性表達(dá)，糖尿病妊娠組的HIF-1α和ET-1蛋白表達(dá)明顯增強，妊娠糖尿病組及對照組表達(dá)相對較弱，糖尿病妊娠組、妊娠糖尿病組及對照組中HIF-1α和ET-1蛋白表達(dá)的定位結(jié)果見附圖。

附圖　HIF-1α和ET-1的定位（SP×100）

2.3各組妊娠不良并發(fā)癥發(fā)生率比較

糖尿病妊娠組孕婦出現(xiàn)胎兒生長受限3例，并發(fā)癥發(fā)生率為50.00%，較妊娠糖尿病組孕婦及對照組并發(fā)癥高（P<0.05），見表2。

表2　3組妊娠結(jié)局比較結(jié)果例（%）

3 討論

糖尿病妊娠是臨床上造成孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒死亡的重要原因，糖尿病妊娠患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞功能出現(xiàn)障礙。正常妊娠過程中，孕10周左右時胚胎滋養(yǎng)葉細(xì)胞開始逐漸侵入母體蛻膜，增加血流動力，確保胎盤和胚胎發(fā)育的營養(yǎng)需求[5]。糖尿病妊娠患者存在不同程度的糖耐量異常，女性妊娠期會出現(xiàn)胰島素代謝異常將造成糖代謝異常。糖尿病妊娠會對孕婦和胎兒產(chǎn)生較大的不良影響，妊娠晚期婦女的血糖代謝障礙導(dǎo)致先兆子癇、妊娠期糖尿病、妊娠期抑郁癥、細(xì)菌性陰道病、影響胎兒的宮內(nèi)發(fā)育，增加新生兒患心血管疾病、免疫系統(tǒng)疾病和糖尿病等慢性疾病的風(fēng)險，例如造成早產(chǎn)、子癇前期等等，影響著孕婦和胎兒的健康。而糖尿病的發(fā)生，有很多的危險因素，例如高血糖、高血脂等等。糖尿病妊娠孕婦的機體狀態(tài)往往呈現(xiàn)高血糖狀態(tài)，這將在一定程度上造成胚胎組織細(xì)胞缺氧，進而導(dǎo)致機體發(fā)生血管增生、間質(zhì)纖維等效應(yīng)[6]。HIF可以對機體缺氧狀態(tài)進行適應(yīng)調(diào)節(jié)，調(diào)控缺氧反應(yīng)基因的表達(dá)。HIF主要在缺氧環(huán)境下活化，同時在富氧環(huán)境下降解，所以HIF表達(dá)可以提高機體缺氧的適應(yīng)能力。妊娠胎盤發(fā)育早期長期處于缺氧狀態(tài)，滋養(yǎng)細(xì)胞分泌HIF-1α激活靶基因ET-1表達(dá)，從而促進胎盤心血管生成，維持營養(yǎng)供應(yīng)。臨床研究表明，血管內(nèi)皮生長因子、ET-1等基因均受HIF-1α調(diào)控，HIF-1α能夠促進血管生成、調(diào)節(jié)血管舒縮功能，維持機體的氧穩(wěn)態(tài)[7-9]。ET-1是由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成的纖維化因子，可以在缺氧環(huán)境中與HIF-1α實現(xiàn)特異性結(jié)合。ET-1參與糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展過程，通過引發(fā)胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞的應(yīng)激化反應(yīng)導(dǎo)致胎盤局部損傷[10]。本組糖尿病妊娠組HIF-1α蛋白表達(dá)量相對較高，其胎盤絨毛微血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)中的ET-1蛋白表達(dá)也顯著高于對照組和妊娠糖尿病組（P<0.05），說明糖尿病妊娠組孕婦血糖水平存在較大的波動，高血糖狀態(tài)下HIF-1α水平升高，進而刺激ET-1表達(dá)的增多，導(dǎo)致孕婦胎盤結(jié)構(gòu)功能出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p害，影響妊娠結(jié)局。糖尿病是典型的血糖代謝障礙疾病，對患者的血液微循環(huán)及流變性造成了一定影響，容易導(dǎo)致患者出現(xiàn)缺血、缺氧甚至水腫等并發(fā)癥[11-12]。糖尿病患者妊娠后將導(dǎo)致胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞及胎盤絨毛發(fā)生間質(zhì)纖維化，引發(fā)胎盤缺血缺氧。本組研究結(jié)果顯示，糖尿病妊娠患者的HIF-1α及ET-1蛋白表達(dá)水平升高導(dǎo)致妊娠并發(fā)癥的發(fā)生率增加，說明HIF-1α及ET-1表達(dá)情況引發(fā)了糖尿病妊娠患者的不良妊娠結(jié)局。

綜上所述，糖尿病妊娠患者胎盤組織HIF-1α及ET-1表達(dá)參與了妊娠結(jié)局的發(fā)生、發(fā)展，臨床治療中應(yīng)關(guān)注以HIF-1α及ET-1為靶點的抗糖尿病并發(fā)癥治療，積極改善預(yù)后。

[1]楊曉菊,孫玲玲,張萌,等.糖尿病患者妊娠后胎盤組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α及內(nèi)皮素-1的表達(dá)及與妊娠結(jié)局關(guān)系[J].中華實用診斷與治療雜志,2014,28(1):15-17.

[2]VICENTE G C,CORREIA-SANTOS A M,SUZUKI A,et al. Maternal exposure to diets containing flaxseed flour or flaxseed oil during pregnancy and lactation protects the aortic remodeling in adult male offspring of diabetic rat dams[J].Journal of the Science of Food and Agriculture,2015,95(14):2973-2980.

[3]許焯.高危因素早期干預(yù)對108例妊娠期糖尿病妊娠結(jié)局的影響[J].糖尿病新世界,2015,11(4):83.

[4]唐琳,張翠翠,郭青,等.血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素1及缺氧誘導(dǎo)因子1α在糖尿病腎病腎組織的表達(dá)及意義[J].中華腎臟病雜志,2011, 27(5):374-375.

[5]楊曉菊,楊宗利,王學(xué)芹,等.HIF-1α、VEGF在妊娠期糖尿病胎盤組織中的表達(dá)及其與胎兒缺氧的關(guān)系[J].實用婦產(chǎn)科雜志,2012, 28(11):962-966.

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[8]楊曉菊,徐琳,楊宗利,等.妊娠期糖尿病胎盤組織缺氧誘導(dǎo)因子1α及血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)與妊娠結(jié)局的關(guān)系[J].中華糖尿病雜志,2013,5(5):287-292.

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（張蕾編輯）

Influence of placental hypoxia inducible factor-1α and endothelin-1 in gestational diabetes patients

Li-hong Qu，Lu-ning Jin
（Department of obstetrics，Haiyang People's Hospital，Haiyang，Shandong 265100，China）

Objective To explore the the influence of placental hypoxia inducible factor 1 alpha（HIF-1α）and endothelin-1（ET-1）in gestational diabetes.Methods A number of 30 patients diabetes during pregnancy and 30 gestational diabetes patients were selected，and 30 cases of normal pregnant women were selected at the same time as a control group.Immune histochemical method and SP method were used to detect EF-1 and HIF-1α protein content.Differences between groups of test result and its influence on pregnancy outcomes of diabetes were compared and analysis.Results The placental tissue EF-1 and HIF-1α protein positive expression rate in patients with diabetes during pregnancy was significantly higher than that of gestational diabetes mellitus patients and the control group（P＜0.05）.Patients with diabetes during pregnancy had higher rate of postpartum hemorrhage，fetal growth restriction and higher incidence of complications（P＜0.05）.Conclusions The expressions of EF-1 and HIF-1α protein in placental tissue have adverse effects on patients with diabetes during pregnancy.

placenta tissue；HIF-1α；ET-1；gestational diabetes

R 714.256

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.20.010

1005-8982（2016）20-0044-04

2016-04-06