劉　亮　左　靜　武中林　王光大　倪曉辰　趙　麗　左連富

(河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院腫瘤研究所流式細胞室，河北　石家莊　050011)

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肺耐藥相關(guān)蛋白在食管鱗狀細胞癌中的表達及其與多藥耐藥的相關(guān)性

劉亮左靜1武中林2王光大3倪曉辰4趙麗左連富

(河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院腫瘤研究所流式細胞室，河北石家莊050011)

目的檢測肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)在食管鱗狀細胞癌中的表達及其與食管癌多藥耐藥的相關(guān)性。方法通過免疫組化S-P法檢測LRP在食管鱗狀細胞癌及正常食管黏膜組織中的表達，并檢測LRP與食管鱗狀細胞癌不同臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果LRP在食管鱗狀細胞癌中表達水平顯著高于正常食管組織(P<0.01)，食管鱗狀細胞癌組織中LRP陽性表達水平與各臨床病理特征無相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論LRP在食管鱗狀細胞癌組織中的高表達可能參與了食管鱗狀細胞癌多藥耐藥的形成。

食管鱗癌；免疫組化；多藥耐藥；肺耐藥相關(guān)蛋白

大多食管癌患者發(fā)現(xiàn)疾病時已是癌癥晚期，喪失了手術(shù)治療的機會，只能進行化療或放療，且化療是控制食管癌術(shù)后復發(fā)、轉(zhuǎn)移的重要手段，但目前藥物治療效果不理想。且腫瘤細胞對化療藥物的耐藥性，嚴重影響了療效。肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)與腫瘤的多藥耐藥密切相關(guān)，廣泛分布在多種腫瘤組織中〔1～3〕。本文探討LRP在不同食管組織中的表達及其與食管鱗狀細胞癌耐藥的相關(guān)性。

1　材料與方法

1.1食管組織收集河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院2008年1月至2009年12月經(jīng)病理診斷證實的食管癌病例150例，從中選出80例食管鱗狀細胞癌和正常食管黏膜組織用于LRP蛋白的免疫組化檢測，男55例，女25例；年齡38～83〔平均(58.38±6.70)〕歲。

1.2主要試劑LRP抗體、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)試劑盒、免疫組化二抗試劑盒均由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.3免疫組化方法檢測LRP蛋白按常規(guī)免疫組化S-P法操作，結(jié)果判定：細胞質(zhì)和(或)細胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞。根據(jù)腫瘤細胞染色程度及陽性細胞所占百分比進行綜合評分，①陽性(+)，陽性細胞數(shù)>10%；②陰性(-)，無陽性細胞或陽性細胞數(shù)≤10%。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗。

2　結(jié)　果

圖1　不同食管黏膜組織中LRP蛋白表達(DAB，×200)

2.1LRP蛋白在不同食管黏膜組織中的表達圖1可見，LRP陽性產(chǎn)物定位于細胞質(zhì)和細胞核，呈棕黃色顆粒狀，彌散或散在分布。食管正常黏膜中LRP蛋白表達陽性率35.00%(28/80)，明顯低于食管鱗狀細胞癌組織LRP蛋白陽性表達率55.00%(44/80)(P=0.005)。

2.2食管鱗狀細胞癌中LRP蛋白陽性表達與不同臨床病理特征的關(guān)系食管鱗狀細胞癌中LRP蛋白的陽性表達與癌組織分化程度、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性(P>0.05)，見表1。

表1　食管鱗癌中LRP蛋白表達與臨床病理特征的關(guān)系(n)

3　討　論

腫瘤細胞對化療藥物的耐藥一直是臨床最為重視的問題，它影響到治療效果和愈后情況，有觀點認為腫瘤細胞的耐藥性是腫瘤細胞在化療藥物的作用下所發(fā)生的生物學改變，如藥物外流的增多〔4〕，藥物吸收的減少〔5〕，藥物代謝酶的功能恢復，結(jié)合酶的活動〔6～8〕，DNA的修復使細胞對凋亡的敏感性降低〔9,10〕及藥物靶點的突變〔11～13〕等。近年研究的熱點集中在藥物外流增多，目前的研究機制認為化療藥物可通過細胞膜和(或)細胞核上的蛋白和(或)通道將藥物輸送到細胞外，從而使得腫瘤細胞內(nèi)化療藥物的濃度降低，導致化療藥物不能殺傷腫瘤細胞，表現(xiàn)為腫瘤細胞對化療藥物的耐藥。在過去的研究中本研究小組發(fā)現(xiàn)具有藥物外排泵作用的三磷酸腺苷結(jié)合盒(ABC)B1及G2與食管鱗狀細胞癌的多藥耐藥有關(guān)〔14～16〕。

LRP是1993年Scheper等〔17〕在人非小細胞肺癌的P-gp陰性的多藥耐藥(MDR)細胞系SW-1573/2R120中首次發(fā)現(xiàn)，因此被命名為LRP。LRP基因定位于染色體16p13.1-16p11.2，編碼分子量110 000的蛋白。LRP蛋白含有896個氨基酸殘基，95%的LRP位于細胞質(zhì)中，5%位于核膜的胞質(zhì)和核膜孔附近。LRP廣泛分布在腫瘤組織中，且在腫瘤組織中表達率及表達強度明顯高于正常組織，但不同腫瘤其表達率不同。LRP可能通過兩種機制引起MDR，它可使以細胞核為靶點的藥物不能通過核孔進入細胞核，即使進入也在發(fā)生藥效前被泵出核外；或可使胞質(zhì)中藥物進入囊泡，并通過胞吐作用排出細胞外，從而使細胞內(nèi)抗癌藥的濃度降低，表現(xiàn)出抗癌藥對腫瘤細胞的作用降低，即腫瘤細胞對抗癌藥的耐藥。LRP雖然也具有將藥物排出的作用，但它沒有消耗ATP，而是主要通過“胞吐作用”將藥物排出細胞外，異于ABCB1及ABCG2引起耐藥的作用機制。本研究發(fā)現(xiàn)LRP可能與食管鱗狀細胞癌耐藥有關(guān)，但與食管癌的疾病程度無關(guān)。

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17Scheper RJ，Broxterman HJ，Scheffer GL，etal.Overexpression of a M(r)110，000 vesicular protein in non-P-glycoprotein-mediated multidrug resistance〔J〕.Cancer Res，1993；53(7)：1475-9.

〔2015-05-30修回〕

(編輯苑云杰/曹夢園)

河北省自然科學基金(H2012206107)；河北省醫(yī)學科學研究重點課題(20160167)；河北省普通高等學校強勢特色學科腫瘤學建設(shè)經(jīng)費〔冀教高(2005)52號〕

劉亮(1981-)，男，醫(yī)學博士，副教授，主要從事食管癌早期診斷及治療研究。

R735.1

A

1005-9202(2016)17-4141-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.17.002

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