李　珂， 李陽杰， 張忠泉

(1.鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院 藥學(xué)院，河南 鄭州 451150； 2.河南大學(xué) 藥學(xué)院，河南 開封 475001)

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降脂合劑調(diào)脂作用的研究

李珂1， 李陽杰1， 張忠泉2

(1.鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院 藥學(xué)院，河南 鄭州 451150； 2.河南大學(xué) 藥學(xué)院，河南 開封 475001)

研究降脂合劑對不同模型動物的降血脂效果，通過對小鼠腹腔注射蛋黃乳液制作高血脂模型以及對大鼠采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)法建立大鼠高血脂模型，給以不同劑量的降脂合劑，觀察該藥對血脂指標的影響，再通過病理切片觀察降脂合劑對大鼠脂肪肝的影響.結(jié)果顯示，給藥組小鼠血清甘油三酯、總膽固醇水平較模型組均有下降，并呈劑量相關(guān)性.此研究可以為降脂合劑以后的臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù).

降脂合劑；高脂血癥；脂肪肝；調(diào)脂；降血脂

0　引言

高脂血癥(hyperlipidemia)是由于脂肪代謝或轉(zhuǎn)運異常而造成的血漿中一種或多種脂質(zhì)水平出現(xiàn)異常的一種全身性疾病，包括血漿中總膽固醇(total cholesterol, TC)和/或甘油三酯(triglyceride, TG)過高，或高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)過低，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)稱之為血脂異常.脂質(zhì)通常不溶或微溶于水，須與蛋白質(zhì)結(jié)合以脂蛋白形式存在，因此，高脂血癥又稱為高脂蛋白血癥.心血管疾病目前已成為包括我國在內(nèi)的許多國家的第一位死亡原因，而高脂血癥與許多致死、致殘性的疾病(如心肌梗死、腦卒中、動脈粥樣硬化等)有密切關(guān)系，是這些疾病的重要獨立危險因素[1-3].有效地防治血脂異常是防治心腦血管疾病的重要途徑，西醫(yī)治療本病療效尚不十分理想，且長期用藥的副作用仍然是高脂血癥治療中的一大難題.中醫(yī)藥適用各種血脂異?；颊?，通過改善血脂狀況而達到減少心血管事件發(fā)生并減少西藥副作用[4].降脂合劑是傳統(tǒng)降血脂驗方，本文研究降脂合劑對不同模型動物降血脂作用，為臨床用藥提供理論依據(jù).

1　降脂合劑對小鼠高脂血癥模型降血脂作用

1.1實驗動物、儀器、藥物

①動物:昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重(25±2)g，河南省實驗動物中心提供.②儀器:HF-2200R/2100R，高速離心機，上海利鑫堅離心機有限公司；HF240-360，全自動生化分析儀，漢方醫(yī)療器械有限公司;試劑盒：TC試劑盒、TG試劑盒、LDL-C(low density lipoprotein-cholesterol)試劑盒、HDL-C試劑盒，北京方程生物科技有限公司提供.③藥物:降脂合劑，用CMC(carboxymethylcellulose sodium)配制成濃度為1.0 g/ml的混懸液，備用；陽性藥物：辛伐他汀，上海信誼萬象藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號：06011，用CMC水配制成濃度為0.5 mg/ml的混懸液.④蛋黃乳液:取新鮮雞蛋，配制成75%的蛋黃乳液.

1.2實驗方法

取昆明種小鼠60只，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，將其隨機分為6組：正常組、模型組、陽性藥組，受試藥高、中、低劑量組，每組10只，雌雄各半.正常組及模型組灌服相應(yīng)體積的CMC溶液，陽性藥組灌服辛伐他汀液10 mg/kg，降脂合劑高劑量組灌服12 g/kg、中劑量組灌服6 g/kg、低劑量組灌服3 g/kg，連續(xù)給藥7 d.7 d后，除正常對照組外，其他各組小鼠均腹腔注射蛋黃乳液(0.5 ml/30 g).24 h后，摘眼球取血，用試劑盒檢測血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C指標.

1.3實驗結(jié)果

由表1的實驗結(jié)果可見：①與正常組相比，在腹腔注射蛋黃乳液24 h后，模型組小鼠血清TC、TG水平均有顯著性升高，與正常組比較，有顯著性差異(P<0.05)，說明此方法建?？煽?；②陽性藥組和模型組小鼠相比，血清TC水平降低，有顯著性差異(P<0.05)，同時，降脂合劑高劑量組與模型組相比，血清TG水平降低，有顯著性差異(P<0.05)；③降脂合劑中劑量組與模型組相比，血清TC水平降低，有顯著性差異(P<0.05)，但對血清TG水平影響與模型組相比，無顯著性差異(P>0.05)；④降脂合劑低劑量組與模型組相比，血清TC、TG水平，無顯著性差異(P>0.05).

表1　降脂合劑對高脂血癥模型小鼠血脂水平的影響±s)

注：*為和模型組比較：P<0.05

2　降脂合劑對大鼠脂肪肝模型的影響

2.1實驗動物、儀器、藥物

①實驗動物:SD(Sprague Dawley)大鼠，雄性，體重(180±20)g，由河南省實驗動物中心提供.②受試藥物:降脂合劑,用CMC配制成濃度為1.0 g/ml的混懸液，備用；陽性藥物：辛伐他汀，上海信誼萬象藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號：06011，用CMC水配制成濃度為0.5 mg/ml的混懸液.③高脂飼料:配方為豬油10%、膽固醇2%、蛋黃粉5%、膽鹽0.2%、蔗糖10%，由河南省實驗動物中心提供.

2.2實驗方法

取健康SD雄性大鼠60只，適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，隨機分成2組，正常組10只，給予普通飼料；高脂組50只，給予高脂飼料，連續(xù)喂養(yǎng)4 w，第4 w將50只高脂血癥大鼠隨機分為5組，即模型組，陽性藥組，降脂合劑高、中、低劑量組，每組10只.正常組和模型組大鼠灌服等體積CMC液，陽性藥組灌服辛伐他汀液10 mg/kg，降脂合劑高劑量組灌服12 g/kg、中劑量組灌服6 g/kg、低劑量組灌服3 g/kg，連續(xù)給藥4 w.于給藥4 w末，處死各組大鼠，切除肝臟，稱其濕重，并計算肝脂數(shù).最后將肝臟分別用10%甲醛溶液固定，用于制作病理切片.

2.3實驗結(jié)果

2.3.1降脂合劑對SD大鼠肝濕重及肝指數(shù)的影響

從表2可看出，降脂合劑高、中劑量組給藥組肝濕重和肝指數(shù)較模型組比較有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)，低劑量組給藥組肝濕重和肝指數(shù)較模型組比較，無明顯差異.

表2　降脂合劑對SD大鼠肝濕重及肝指數(shù)的影響±s)

注：與模型組比較*為P<0.05，**為P<0.01

2.3.2降脂合劑對SD大鼠肝組織形態(tài)的影響

肉眼可見正常組大鼠肝臟呈暗紅色、光澤鮮亮，觸及質(zhì)地柔軟；而模型組大鼠肝臟顏色呈乳白色，呈脂肪性變，觸及質(zhì)地較硬.陽性對照組、降脂合劑高劑量組肝臟與模型組相比，有不同程度的改善.

鏡下可見，正常組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，細胞呈條索狀排列，大小均勻，呈放射狀，肝竇結(jié)構(gòu)清晰；模型組大鼠肝小葉輪廓不清，匯管區(qū)大量炎細胞浸潤，細胞有濁狀病變，充斥大量脂肪并伴有嗜酸性病變及明顯空泡；陽性藥組大鼠肝臟匯管區(qū)清晰，肝小葉輪廓不清，細胞有嗜酸性、脂肪性變，大小不均，可見少量細胞空泡；高劑量組肝臟匯管區(qū)清晰，細胞輪廓較清楚，脂肪病變較輕，肝小葉細胞呈條索狀排列，大小均勻、一致.中劑量組大鼠肝臟匯管區(qū)清晰，肝小葉輪廓不清楚，細胞有少量脂肪性病變和濁狀病變，并有少量空泡形成，大小不均.低劑量組大鼠肝臟細胞有灶狀壞死和脂肪性變，細胞大小不均.各組大鼠肝臟病理切片如圖1所示(蘇木素-伊紅染色，hematoxylin and eosin,HE).

1.正常組；2.模型組；3.高劑量組；4.中劑量組；5.低劑量組；6.陽性藥組圖1　各組大鼠肝臟病理切片(HE，×200)Fig.1　The rats liver biopsy(HE，×200)

綜上所述，降脂合劑能顯著降低高脂血模型小鼠甘油三酯及總膽固醇水平，并呈劑量相關(guān)性；病理切片顯示，降脂合劑明顯減少脂肪肝模型大鼠肝臟內(nèi)脂肪蓄積.因此，本課題研究可以為降脂合劑以后的臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù).

[1]姜勇，李曉燕，胡楠，等．2004—2005年中國居民腦血管病死亡流行病學(xué)特征[J]．中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2010,44(4): 293-297．

[2]DAVIS S. The patient’s journey: Living with diabetes[J]．B M J，2006,332(7548):1018-1020．

[3]FORD E S，ZHAO G，TSAI J， et al. Low-risk lifestyle behaviors and all-cause mortality： Findings from the National Health and Nutrition Examination Survey Ⅲ Mortality Study[J]．American Public Health, 2011,101(10):1922-1929．

[4]江偉，楊?。咧Y的中醫(yī)藥研究[J]．華夏醫(yī)學(xué)，2009,12(6):1175-1177．

Study of Lipid-lowering Agents Lipid Metabolism

LI Ke1, LI Yangjie1， ZHANG Zhongquan2

(1.School of Pharmacy, Zhengzhou University of Industrial Technology, Zhengzhou 451150, China；2.SchoolofPharmacy,HenanUniversity,Kaifeng475001,China)

Study the effect of lipid lowering agents in different animal models, by intraperitoneal injection of egg yolk emulsion and the production of high lipid model rats fed with high fat and high sugar diet. Hyperlipemia rat model was established in order to give different doses of lipid-lowering agents, observe the effect of the drug on lipid levels, and then lipid lowering agent of fatty liver in rats by pathological examination. The results showed that mice administered serum triglycerides, total cholesterol levels were decreased compared with the model group and dose-related. Provide a theoretical basis for future clinical applications of lipid-lowering agent.

lipid-lowering agent; hyperlipidemia; fatty liver； adjust blood lipids； lower blood lipids

2016-05-06

河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點項目(13B150975)

李珂(1983—)，女，河南南陽人，鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院藥學(xué)院講師.

10.3969/j.issn.1007-0834.2016.03.010

R96

A

1007-0834(2016)03-0035-03