莫鋒　孫冬林

[摘 要] 目的：觀察乙型肝炎與肝硬化脾切除后淋巴細(xì)胞亞群變化規(guī)律，分析其臨床指導(dǎo)意義。方法：以我院2012年6月—2015年6月收治382例肝病患者及同期30例健康體檢者為研究對(duì)象，進(jìn)行前瞻性對(duì)照研究。比較非活動(dòng)性乙型肝炎表面抗原（HBsAg）攜帶者、慢性乙型肝炎、代償期肝硬化、失代償期肝硬化、原發(fā)性肝癌、脾切除患者于正常受試者淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞、自然殺傷（NK）細(xì)胞水平及異常率之間的差異。結(jié)果：脾切除患者CD3+、CD4+、CD8+表達(dá)水平顯著低于其他各組，CD3+異常率、CD4+異常率、CD8+異常率高于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。失代償期肝硬化患者B淋巴細(xì)胞顯著高于其他各組，原發(fā)性肝癌、脾切除患者NK細(xì)胞顯著高于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。原發(fā)性肝癌、慢性乙型肝炎患者B淋巴細(xì)胞異常率顯著高于其他各組，脾切除、代償期肝硬化、失代償期肝硬化患者NK細(xì)胞異常率顯著高于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：乙型肝炎與肝硬化患者均存在不同程度的免疫功能缺陷，隨著病情的進(jìn)展，其細(xì)胞免疫活化功能逐漸降低。脾切除患者淋巴細(xì)胞亞群異常更為明顯。

[關(guān)鍵詞] 乙型肝炎；肝硬化；脾切除；淋巴細(xì)胞亞群

中圖分類號(hào)：R657.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-5200（2016）04-087-03

DOI：10.11876/mimt201604033

據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年因HBV感染引發(fā)的肝硬化、肝衰竭和原發(fā)性肝細(xì)胞癌死亡患者達(dá)100萬(wàn)以上[1]。慢性乙型肝炎導(dǎo)致脾瘀血、功能亢進(jìn)，需行脾切除。有學(xué)者指出，患者脾切除術(shù)后免疫功能存在明顯變化，感染和腫瘤風(fēng)險(xiǎn)急劇上升，但其具體機(jī)制尚不明確[2]。最新研究表明，HBV并不對(duì)肝細(xì)胞造成直接損傷，而是通過(guò)誘導(dǎo)機(jī)體T細(xì)胞介導(dǎo)的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)清除病毒的同時(shí)損傷肝細(xì)胞，而脾切除后T細(xì)胞數(shù)量減少和活化功能降低可能是導(dǎo)致患者易于感染和疾病遷延不愈的主要原因[3]。為明確肝炎、肝硬化過(guò)程及脾切除后機(jī)體淋巴細(xì)胞各亞群之間的變化，我院進(jìn)行了前瞻性對(duì)照分析，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料

選取我院2012年6月—2015年6月收治的382例參照2010版指南[4]確診為慢性乙型肝炎患者及同期30例健康體檢者，382例患者中，非活動(dòng)性HBsAg攜帶者（A組）19例，男13例，女6例，年齡（41.90±8.83）歲；慢性乙型肝炎（B組）83例，男56例，女27例，年齡（41.28±7.52）歲；代償期肝硬化（C組）51例，男38例，女13例，年齡（42.35±9.01）歲；失代償期肝硬化（D組）39例，男25例，女14例，年齡（41.77±8.84）歲；原發(fā)性肝癌（E組）104例，男85例，女19例，年齡（41.60±8.74）歲；脾切除（SP組）86例，男58例，女28例，年齡（41.24±9.07）歲。將30例健康體檢者納入正常對(duì)照組（NC組）。各組受試者性別比例、年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均知情同意且自愿參與。

1.2 研究方法

抽取各組受試者空腹靜脈血2 mL，F(xiàn)ACSCalibur流式細(xì)胞儀（美國(guó)BD公司）及熒光標(biāo)記的單克隆抗體試劑盒MultiTESTTM IMK Kit（美國(guó)BD公司）對(duì)其淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞及自然殺傷（NK）細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，其中淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)指標(biāo)包括CD3+、CD4+、CD8+，使用MultiSET全自動(dòng)獲取分析軟件提取數(shù)據(jù)，并計(jì)算CD4+/CD8+比值。比較各組受試者淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞水平、異常率之間的差異[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS18.0進(jìn)行分析，異常率采用χ2檢驗(yàn)，淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)以（x±s）表示，t檢驗(yàn)，以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果比較

SP組患者CD3+、CD4+、CD8+表達(dá)水平顯著低于其他各組，其CD4+/CD8+顯著高于A組、B組、C組及NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；E組患者CD3+、CD8+表達(dá)水平顯著低于A組、B組、C組及NC組，其CD4+/CD8+顯著高于后者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組CD3+、CD4+表達(dá)水平顯著低于A組、B組、C組及NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)異常率比較

SP組患者CD3+異常率、CD4+異常率、CD8+異常率高于其他各組，其CD4+/CD8+異常率顯著低于代償期肝硬化、C組、E組及NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；E組CD3+異常率顯著高于A組、B組、C組、D組及NC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組患者CD4+/CD8+異常率分別為21.6%、23.1%，顯著高于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果比較

C組B淋巴細(xì)胞顯著高于其他各組，E組、SP組NK細(xì)胞顯著高于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。E組、B組B淋巴細(xì)胞異常率顯著高于其他各組，SP組、C組、D組患者NK細(xì)胞異常率顯著高于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）見表3。

3 討論

目前臨床多數(shù)觀點(diǎn)認(rèn)為，機(jī)體針對(duì)HBV特異性抗原的免疫反應(yīng)是引發(fā)肝細(xì)胞損傷的主要原因，病毒數(shù)量與細(xì)胞病變的相關(guān)性并不突出[6-7]。臨床已證實(shí)脾切除對(duì)乙肝患者免疫功能存在一定程度的影響，但對(duì)其具體影響機(jī)制尚不明確[8]。本研究發(fā)現(xiàn)隨著病情由乙肝向肝硬化、肝癌不斷進(jìn)展，其CD3+、CD4+、CD8+均逐漸降低，而B細(xì)胞則是自乙肝向肝硬化進(jìn)展期間逐漸升高，由肝硬化向肝癌進(jìn)展期間降低，接受脾切除治療的患者，上述變化更為明顯。因此，我們認(rèn)為乙肝患者免疫異常多以CD4+、B淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞減少為主。黃芳等[9]發(fā)現(xiàn)，CD4+細(xì)胞數(shù)量的逐漸減少是引發(fā)HBV感染慢性化的主要原因，并逐漸導(dǎo)致肝細(xì)胞逐漸破壞，同時(shí)，長(zhǎng)期炎癥損傷可加劇肝細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)膠原蛋白沉積，進(jìn)一步引發(fā)病情進(jìn)展。作為一種殺傷性細(xì)胞亞群，CD3+、CD4+、CD8+等在拮抗HBV不斷復(fù)制的過(guò)程中存在大量的自身消耗，一旦其水平大幅下降甚至耗竭，機(jī)體免疫監(jiān)視和防御功能往往明顯下降，甚至出現(xiàn)免疫功能紊亂、免疫功能衰竭[10-11]。本研究脾切除患者CD3+、CD4+、CD8+表達(dá)水平顯著低于其他各組，表明脾切除患者處于明顯免疫功能減退狀態(tài)。

在本次研究中，我們發(fā)現(xiàn)，脾切除患者B淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞水平顯著高于NC組，說(shuō)明脾切除患者存在明顯B細(xì)胞、NK細(xì)胞代償性增加表現(xiàn)，這說(shuō)明患者免疫功能處于重度異常狀態(tài)，繼發(fā)惡性腫瘤或兇險(xiǎn)感染風(fēng)險(xiǎn)較高[12-13]。因此，對(duì)于代償期、失代償期肝硬化患者，行脾切除時(shí)應(yīng)十分謹(jǐn)慎，避免免疫功能受損導(dǎo)致感染、腫瘤風(fēng)險(xiǎn)上升[14-15]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，對(duì)于合并肝硬化的患者，應(yīng)用脾栓塞方式進(jìn)行治療能夠在不影響其淋巴細(xì)胞亞群水平的前提下，發(fā)揮與脾切除相近的臨床效果[16]，

這為肝硬化合并脾功能亢進(jìn)患者的治療提供了新的

方向。

綜上所述，乙型肝炎與肝硬化脾切除患者均存在不同程度的免疫功能缺陷，隨著病情的進(jìn)展，其淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量逐漸下降、細(xì)胞免疫活化功能逐漸降低，且以脾切除患者最為明顯。因此，針對(duì)乙型肝炎、肝硬化、脾切除患者，應(yīng)常規(guī)監(jiān)測(cè)淋巴細(xì)胞亞群變化，一旦發(fā)生腫瘤風(fēng)險(xiǎn)，及時(shí)干預(yù)[17]。

參 考 文 獻(xiàn)

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