文/中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì) 萬(wàn)遂如

關(guān)于豬偽狂犬病的凈化問(wèn)題

文/中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì) 萬(wàn)遂如

自2011～2013年，我國(guó)華北、華中、華東和東北等地部分養(yǎng)豬場(chǎng)（包括免疫豬群）先后暴發(fā)豬偽狂犬病以來(lái)，2014年疫情有所緩解，呈現(xiàn)散發(fā)狀態(tài)，發(fā)病率與死亡率明顯下降。但是陽(yáng)性豬場(chǎng)野毒株持續(xù)感染，陰性豬場(chǎng)野毒感染陽(yáng)性率上升，出現(xiàn)了一些新情況與新問(wèn)題。因此，養(yǎng)豬場(chǎng)對(duì)豬偽狂犬病的防控不能掉以輕心，要積極采取綜合防控措施，實(shí)施對(duì)豬偽狂犬病的區(qū)域凈化。為此，談點(diǎn)個(gè)人意見，僅供養(yǎng)豬場(chǎng)參考。

1　目前豬群中偽狂犬病流行出現(xiàn)的新情況

1.1豬偽狂犬病新流行毒株抗原性已發(fā)生變異

據(jù)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物疫病診斷中心報(bào)告，自2012～2014年，先后從全國(guó)20幾個(gè)省、市、自治區(qū)有關(guān)養(yǎng)豬場(chǎng)送檢的病料樣品中檢測(cè)出偽狂犬病毒野毒感染，部分豬場(chǎng)陽(yáng)性率高達(dá)70%。并先后從河南、山東等地豬場(chǎng)發(fā)病豬群中分離鑒定出8株強(qiáng)毒力偽狂犬野毒，通過(guò)對(duì)野毒株的基因全序列測(cè)序?qū)Ρ确治?，發(fā)現(xiàn)8株野毒株的TK、gB、gC和gE等6個(gè)基因片段序列均有不同程度變異。gC和gB等基因的免疫原性基因和核苷酸還原酶基因小亞基（RR1）等重要功能發(fā)生變異，導(dǎo)致抗原性和毒力發(fā)生改變，對(duì)仔豬的毒力增強(qiáng)，致病力增高，使用現(xiàn)有的偽狂犬病疫苗免疫接種豬群不能完全抵御流行毒株的感染。使用現(xiàn)有的偽狂犬病疫苗免疫接種綿羊，然后用原來(lái)的豬源偽狂犬病病毒強(qiáng)毒攻擊，免疫綿羊全部獲得保護(hù)，而對(duì)照組綿羊全部發(fā)病死亡。改用新分離的偽狂犬病野毒株攻擊綿羊，其保護(hù)率只有50%。說(shuō)明目前新分離的PRV流行毒株的抗原性發(fā)生了改變，導(dǎo)致現(xiàn)有的偽狂犬病疫苗不能完全提供免疫保護(hù)。偽狂犬病病毒野毒株的抗原性發(fā)生變異、毒力發(fā)生改變，具有組織嗜性與神經(jīng)毒力作用，這是當(dāng)前我國(guó)豬群中偽狂犬病再次發(fā)生的主要原因。流行的野毒株不僅引發(fā)豬只發(fā)病造成死亡，而且可感染豬場(chǎng)飼養(yǎng)的犬與貓，引起發(fā)病而死亡。

1.2豬偽狂犬病流行病學(xué)新特點(diǎn)

流行病學(xué)新特點(diǎn)表現(xiàn)為：當(dāng)偽狂犬病野毒流行時(shí)，豬群處于免疫空白期或免疫力低下時(shí)，豬群中g(shù)E抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率升高，生產(chǎn)母豬會(huì)出現(xiàn)繁殖障礙，新生仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，發(fā)病率與死亡率增高。當(dāng)豬群具有一定的免疫力，使用的疫苗毒株與野毒株匹配時(shí)，gE抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)，但是豬群不出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，生產(chǎn)性能沒(méi)有異常。

1.3當(dāng)前豬群中偽狂犬病流行的主要毒株

當(dāng)前我國(guó)豬群中流行的偽狂犬毒株主要還是亞洲型，與歐洲型相隔較遠(yuǎn)。雖然豬群中偽狂犬病野毒感染的陽(yáng)性率逐年上升，從7%上升到26%。但據(jù)分子流行病學(xué)調(diào)查以及對(duì)病毒5個(gè)基因序列的分析結(jié)果表明，偽狂犬病野毒株與Bartha毒株遺傳距離最遠(yuǎn)，而與偽狂犬病毒HB-98毒株遺傳關(guān)系最近。由此可見，當(dāng)前豬群中使用HB-98毒株生產(chǎn)的疫苗給豬群免疫接種仍為上策。國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究報(bào)告顯示，HB-98毒株疫苗不僅能產(chǎn)生很強(qiáng)的細(xì)胞免疫，而且還可誘導(dǎo)機(jī)體快速分泌α-干擾素和β-干擾素等天然細(xì)胞因子。實(shí)踐證實(shí)，豬群中增加疫苗免疫的密度與強(qiáng)度（每年普免4次）和注射劑量（改為每頭3頭份），使用HB-98毒株生產(chǎn)的疫苗免疫，仍可以使豬只獲得免疫保護(hù)，豬群不出現(xiàn)偽狂犬病臨床癥狀，生產(chǎn)狀況正常，還能減少豬群向外排毒的數(shù)量。

2　豬偽狂犬病流行態(tài)勢(shì)

養(yǎng)豬場(chǎng)里的鼠類、貓、牛、羊、兔等動(dòng)物都是偽狂犬病毒的攜帶者，是本病的重要傳染來(lái)源，可將病毒傳染給豬，牛與豬之間還可相互傳播。通過(guò)直接接觸或間接接觸，經(jīng)呼吸道、消化道、破損的傷口、黏膜以及配種等感染；妊娠母豬感染病毒后，母體可通過(guò)胎盤將病毒傳給胎兒；以氣溶膠的形式經(jīng)空氣傳播，傳播距離為2～3km。本病的發(fā)生無(wú)明顯的季節(jié)性，但發(fā)病多見于寒冷、氣溫多變的秋、冬及初春季節(jié)。新生仔豬出生后3日齡即可發(fā)病，表現(xiàn)為不吃乳、嘔吐、腹瀉、鳴叫、興奮不安、昏睡、四肢痙攣、呼吸衰竭而死亡。3～15日齡以內(nèi)的仔豬發(fā)病率與死亡率可達(dá)100%，斷奶仔豬發(fā)病率為20%～40%，死亡率為30%左右。臨床上表現(xiàn)為頑固性腹瀉、呼吸困難、咳嗽、出現(xiàn)神經(jīng)癥狀等。成年豬多為隱性感染，gE-ELISA檢測(cè)野毒陽(yáng)轉(zhuǎn)率較高，癥狀表現(xiàn)為發(fā)高燒，伴有嚴(yán)重的呼吸道癥狀，死亡率較低。妊娠母豬感染后表現(xiàn)為流產(chǎn)，產(chǎn)死胎或木乃伊胎，以產(chǎn)死胎為主，流產(chǎn)率可高達(dá)35%。生產(chǎn)母豬表現(xiàn)為不育、不發(fā)情、返情率高、屢配不孕等。種公豬發(fā)生睪丸腫脹、萎縮，性欲低下或喪失，精子活力差。

在偽狂犬病發(fā)病的過(guò)程中，臨床上常見有藍(lán)耳病病毒、豬瘟病毒、圓環(huán)病毒2型、豬流感病毒、肺炎支原體、副豬嗜血桿菌、傳染性胸膜肺炎放線桿菌及附紅細(xì)胞體等病原共感染或繼發(fā)感染，導(dǎo)致嚴(yán)重的呼吸道疾病綜合征的發(fā)生，發(fā)病率與死亡率升高，造成更大的經(jīng)濟(jì)損失。

3　防控措施

3.1免疫預(yù)防

建議使用與流行毒株同源性高的基因缺失疫苗對(duì)豬群實(shí)施免疫接種，如偽狂犬病鄂A毒株疫苗或HB-98毒株雙基因缺失疫苗就是很好的疫苗，與當(dāng)前流行的偽狂犬毒株同源性很高。按下列程序進(jìn)行免疫預(yù)防。

仔豬：仔豬出生后第2d，用雙基因缺失疫苗滴鼻，每個(gè)鼻孔滴0.5mL；35日齡肌肉注射1次疫苗，每頭1頭份；70日齡加強(qiáng)免疫1次，每頭2頭份；商品豬直至出欄上市不用再注射疫苗。滴鼻免疫屬于黏膜免疫范疇，不受體液循環(huán)中的母源抗體干擾。

后備種豬：第1次發(fā)情配種前8周與4周各肌肉注射1次疫苗，每次每頭3頭份。

生產(chǎn)種豬：每3個(gè)月免疫1次，1年普免4次，每次每頭肌肉注射3頭份。當(dāng)前由每年3次普免改為4次普免，增大免疫密度與強(qiáng)度；免疫劑量由每頭2頭份增大為3頭份，用現(xiàn)有的雙基因缺失疫苗免疫接種完全可以使豬群獲得免疫保護(hù)，能阻止發(fā)病并減少了豬群的排毒數(shù)量，進(jìn)行安全生產(chǎn)。接種疫苗時(shí)，可配合使用免疫增強(qiáng)劑，如豬用轉(zhuǎn)移因子、白細(xì)胞介素-4及MHC-Ⅱ類分子等，可與疫苗混合肌肉注射，中、小豬每頭0.5mL，大豬每頭1mL。

一個(gè)豬場(chǎng)要選用一種優(yōu)質(zhì)的偽狂犬病疫苗進(jìn)行免疫接種，不要經(jīng)常更換使用不同廠家生產(chǎn)的基因缺失疫苗，或者基因缺失疫苗與偽狂犬病弱毒活疫苗交替使用。否則，有可能導(dǎo)致不同基因缺失疫苗之間發(fā)生基因重組，或者與弱毒活疫苗及野毒基因發(fā)生基因重組。這種病毒基因重組的可能性正在不斷增大，有可能出現(xiàn)“超強(qiáng)毒株”，應(yīng)引起關(guān)注。

3.2豬偽狂犬病的凈化

動(dòng)物疫病凈化是通過(guò)采取疫苗免疫、檢疫診斷、淘汰陽(yáng)性動(dòng)物、加強(qiáng)生物安全措施及培育健康動(dòng)物等系列措施，在一個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)或區(qū)域根除某種動(dòng)物疫病的過(guò)程。凈化工作是一項(xiàng)系統(tǒng)工程，涉及范圍很廣，部門眾多?！秶?guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）》要求在全國(guó)養(yǎng)豬場(chǎng)凈化高致病性藍(lán)耳病、豬瘟、豬偽狂犬病及豬繁殖與呼吸綜合征4種疫病。農(nóng)業(yè)部計(jì)劃用10年時(shí)間（從2012年開始）對(duì)規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟∵M(jìn)行凈化，采取“逐場(chǎng)推進(jìn)，分層實(shí)施，技術(shù)集成，示范創(chuàng)建”的總體思路，堅(jiān)持分病種、分階段、分區(qū)域地開展凈化工作。目前，針對(duì)豬偽狂犬病有優(yōu)質(zhì)有效的疫苗，又有標(biāo)準(zhǔn)化的抗體監(jiān)測(cè)技術(shù)與鑒別疫苗毒與野毒感染的診斷方法，已完全具備了凈化豬偽狂犬病的條件。凈化技術(shù)介紹如下，供參考。

3.2.1豬群隔離分群飼養(yǎng)，實(shí)施“全進(jìn)全出”的飼養(yǎng)管理制度 養(yǎng)豬場(chǎng)的豬群一律按后備種豬舍、配種舍、妊娠舍、產(chǎn)仔舍、保育舍、育肥舍及隔離舍等進(jìn)行分群隔離飼養(yǎng)，并實(shí)施空圈徹底消毒，“全進(jìn)全出”的生物安全措施，科學(xué)飼養(yǎng)管理豬群。

3.2.2制定科學(xué)可行的偽狂犬病凈化計(jì)劃 養(yǎng)豬場(chǎng)開展凈化工作之前，要認(rèn)真調(diào)查當(dāng)?shù)丶氨矩i場(chǎng)近年來(lái)的動(dòng)物疫病流行情況與動(dòng)態(tài)，并進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和經(jīng)濟(jì)評(píng)估。一定要全面考慮凈化風(fēng)險(xiǎn)，資金是否能承擔(dān)，技術(shù)支撐與管理水平如何，結(jié)合豬場(chǎng)的生產(chǎn)實(shí)際和疫病流行狀況制定切實(shí)可行的凈化計(jì)劃。并做好凈化前的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作，如優(yōu)質(zhì)疫苗、檢測(cè)試劑、消毒劑及其他物質(zhì)的準(zhǔn)備和人員與技術(shù)的培訓(xùn)等。當(dāng)前豬場(chǎng)凈化偽狂犬病重點(diǎn)應(yīng)放在種豬群與后備種豬群的凈化。因?yàn)榉N豬感染偽狂犬病后可終身帶毒，持續(xù)向外排毒，使病毒在豬場(chǎng)內(nèi)循環(huán)傳播。只有凈化種豬群，建立健康的陰性豬群，才能從根本上解決豬場(chǎng)感染偽狂犬病的問(wèn)題。

3.2.3凈化豬群實(shí)施疫苗普免 豬群普免可選用與本場(chǎng)流行毒株同源性高的、優(yōu)質(zhì)的雙基因缺失疫苗，如武漢科前公司研發(fā)的鄂A毒株或HB-98株生產(chǎn)的偽狂犬病活疫苗，免疫原性好、保護(hù)力高、安全性好，對(duì)豬無(wú)毒力，不會(huì)形成潛伏感染。免疫程序請(qǐng)按照本文“3.1”介紹的方案實(shí)施即可。把缺失基因表達(dá)蛋白作為標(biāo)志蛋白，然后通過(guò)對(duì)抗標(biāo)志蛋白抗體的檢測(cè)（gEELISA鑒別法）將疫苗免疫動(dòng)物與野毒感染動(dòng)物區(qū)分開來(lái)。因?yàn)閯?dòng)物使用基因缺失疫苗免疫后，動(dòng)物體內(nèi)不能產(chǎn)生抗gE抗體，此時(shí)利用gE-ELISA試劑盒，檢測(cè)gE抗體存在與否，就可以確定豬只是否感染野毒株，故該項(xiàng)技術(shù)可用于豬偽狂犬病的凈化根除。

豬群普免后，按規(guī)定時(shí)間采血全面檢測(cè)1次豬群的免疫抗體水平，并用gE-ELISA鑒別診斷1次。檢測(cè)抗體水平合格，gE-ELISA鑒別診斷為陰性者定為健康豬群；檢測(cè)抗體水平不合格，gE-ELISA鑒別診斷為陰性者，豬群立即補(bǔ)注1次疫苗，強(qiáng)化免疫；然后再做檢測(cè)；檢測(cè)抗體水平不合格，gE-ELISA鑒別診斷為陽(yáng)性者及隱性感染帶毒者，一律淘汰處理，不能作為種豬使用。

3.2.4淘汰陽(yáng)性豬后的陽(yáng)性豬群要進(jìn)一步強(qiáng)化免疫 每季度用gE-ELISA鑒別診斷1次，檢出的陽(yáng)性豬堅(jiān)決淘汰；可疑豬只再用PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）進(jìn)行檢查，最后做出認(rèn)定。種公豬與生產(chǎn)母豬要全部采血檢查，后備種豬在100日齡時(shí)全部采血檢查。每半年采樣品檢測(cè)1次，經(jīng)過(guò)3～4個(gè)循環(huán)，最終豬群可達(dá)到偽狂犬病的凈化。

3.2.5培育健康豬群 偽狂犬病陽(yáng)性豬群生產(chǎn)的仔豬，出生后進(jìn)行疫苗免疫接種（免疫程序見3.1），斷奶后隔離飼養(yǎng)，16周齡時(shí)做1次血清學(xué)檢查，檢查為陽(yáng)性者一律淘汰。陰性者隔30d后再做1次血清學(xué)檢查，如仍為陰性，即可建立起健康豬群。

3.2.6配合凈化工作，加強(qiáng)疫病綜合防控措施的落實(shí)

在實(shí)施疫苗免疫接種、檢查診斷淘汰陽(yáng)性豬只及培育健康豬群等各項(xiàng)凈化方案時(shí)，豬場(chǎng)一定要緊密配合凈化工作的開展，全面加強(qiáng)綜合防控措施的落實(shí)，只有這樣才能最終達(dá)到疫病凈化的目的。

3.2.6.1豬場(chǎng)禁止飼養(yǎng)犬與貓，并驅(qū)趕鳥類 犬、貓與鳥類可攜帶偽狂犬病毒，是豬場(chǎng)偽狂犬病的重要傳染源。

3.2.6.2豬場(chǎng)要定期滅鼠、殺蟲 ①定期滅鼠。我國(guó)鼠類的數(shù)量超過(guò)30億只，每年偷吃糧食250萬(wàn)t，超過(guò)我國(guó)每年進(jìn)口糧食的總量，經(jīng)濟(jì)損失達(dá)100多億元。鼠類不僅吃掉豬場(chǎng)的飼料、咬壞物品和門窗等，而且攜帶50多種人畜共患病病原，危害性很大。豬場(chǎng)每季度應(yīng)滅鼠1次，鼠類攜帶豬偽狂犬病毒，是豬場(chǎng)偽狂犬病重要的傳染源。滅鼠時(shí)，可選用立克命（拜耳），直接撒施，滅鼠徹底、安全、使用方便。也可用敵鼠鈉鹽原藥1.5g，加熱水100mL徹底溶解后，再加入適量的糖，拌入1，000g玉米面或小麥面，陰干后即可使用。

②殺蟲。吸血昆蟲如蚊、蠅、蜱、虻等可攜帶100多種細(xì)菌、20多種病毒、30多種原蟲，可傳播傳染病和寄生蟲病20幾種。特別是夏季與秋季要注意殺滅各種吸血昆蟲。豬場(chǎng)要填平污水池與積水溝，清理垃圾、污物，鏟除雜草與雜物，疏通排水道和陰溝等。綠化豬場(chǎng)周圍環(huán)境，徹底消滅吸血昆蟲的滋養(yǎng)之地?？捎?.05%蚊蠅凈噴灑豬舍和豬體，每周2次，殺滅昆蟲；或者用0.1%力高峰（拜耳）溶液或1∶50的拜蟲殺溶液噴灑，可殺滅各種吸血昆蟲和體外寄生蟲，安全效果好，使用方便。

3.2.6.3消毒 豬舍每周消毒1次，發(fā)生疫情時(shí)每天消毒1次；通道、進(jìn)出口、用具、車輛每天消毒；外壞境每月清掃1次，消毒1次；人員進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)淋浴更換衣帽鞋等，才能進(jìn)入，并定向流動(dòng)，不準(zhǔn)串舍。消毒可用大連三儀動(dòng)物藥品有限公司研發(fā)的0.7%博滅克（濃戊二醛溶液）、拜獨(dú)清（月芐三甲氯胺溶液），1∶300稀釋，用于豬舍、通道、場(chǎng)地及環(huán)境噴灑消毒。人員與物品可用5%聚維酮碘溶液消毒。以上消毒劑具有廣譜殺菌作用、殺滅能力強(qiáng)、藥效持久、性能穩(wěn)定、安全、使用方便的特點(diǎn)。

3.2.6.4飼喂優(yōu)質(zhì)的全價(jià)飼料 要給豬只飼喂?fàn)I養(yǎng)全價(jià)、科學(xué)搭配的低氮日糧和氨基酸平衡日糧，保證有足夠的蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素和各種維生素（特別要注意增強(qiáng)非特異性免疫力的維生素A、維生素E等，以及微量元素硒、鋅、鉻等用量），確保豬只各個(gè)生長(zhǎng)階段的營(yíng)養(yǎng)需要。這是保障豬只的免疫力與抗病力的物質(zhì)基礎(chǔ)，嚴(yán)禁飼喂發(fā)霉變質(zhì)的飼料，防止造成霉菌毒素中毒。

3.3動(dòng)物疫病凈化應(yīng)注意的問(wèn)題

3.3.1養(yǎng)豬場(chǎng)的疫病凈化工作是一個(gè)系統(tǒng)工程，要全場(chǎng)上下齊心協(xié)力，經(jīng)營(yíng)管理、生產(chǎn)計(jì)劃、疫病防控、人才技術(shù)、財(cái)務(wù)與后勤保障各個(gè)方面都要?jiǎng)悠饋?lái)，工作量很大，費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、費(fèi)錢。只要計(jì)劃周密，方案合理，措施得力，不怕麻煩，堅(jiān)持下去，不前緊后松，定能獲得圓滿成功。

3.3.2養(yǎng)豬場(chǎng)實(shí)施動(dòng)物疫病凈化的重點(diǎn)是種豬群。引種時(shí)要嚴(yán)格檢疫，從嚴(yán)選優(yōu)后備母豬。種豬群是養(yǎng)豬的源頭，一旦種豬攜帶病原體，就可通過(guò)引種大面積、遠(yuǎn)距離傳播疫病。如果種豬群健康，疫病得到控制，也就控制了動(dòng)物疫病傳播的核心部分，生產(chǎn)環(huán)節(jié)的疫病也就容易控制。

3.3.3凈化動(dòng)物疫病使用的疫苗與檢測(cè)用的診斷試劑盒，一定是正規(guī)廠家生產(chǎn)的，有正式批準(zhǔn)文號(hào)的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，千萬(wàn)不能使用劣質(zhì)產(chǎn)品，否則影響豬只的免疫效果與檢測(cè)結(jié)果的正確性，而造成誤判，導(dǎo)致動(dòng)物疫病凈化失敗。

3.3.4養(yǎng)豬場(chǎng)實(shí)施動(dòng)物疫病凈化可以與當(dāng)?shù)亟o(wú)疫病區(qū)建設(shè)和生物安全隔離區(qū)建設(shè)結(jié)合進(jìn)行。這樣許多資源與技術(shù)都可以共享與共用，工作同步開展。盡快實(shí)現(xiàn)養(yǎng)豬場(chǎng)特定動(dòng)物疫病無(wú)疫狀況，并與區(qū)域共同構(gòu)成動(dòng)物疫病區(qū)域化管理，以確保養(yǎng)豬生產(chǎn)持續(xù)健康地發(fā)展?！?/p>