雷小文?

（贛州市畜牧研究所，江西??贛州??341000）

互葉百千層提取物對(duì)仔豬血清溶菌酶的影響

雷小文

（贛州市畜牧研究所，江西??贛州??341000）

溶菌酶是動(dòng)物機(jī)體非特異性免疫的重要指標(biāo)。通過(guò)測(cè)定仔豬血清中溶菌酶的含量變化來(lái)評(píng)價(jià)互葉百千層提取物對(duì)仔豬非特異性免疫力的影響。以灌服方式給仔豬飼喂不同濃度的提取物，以黃芪多糖、長(zhǎng)效土霉素、以及不添加藥物的空白組作為試驗(yàn)對(duì)照；觀察測(cè)定仔豬腹瀉發(fā)病率、死亡率，檢測(cè)血清中溶菌酶含量。結(jié)果顯示，該提取物能夠顯著提高仔豬血清中溶菌酶的含量，效果可與黃芪多糖媲美。該試驗(yàn)結(jié)果對(duì)提高植物提取物在防治仔豬腹瀉中的開(kāi)發(fā)與運(yùn)用具有重要的意義。

溶菌酶；互葉百千層提取物；黃芪多糖；仔豬；非特異性免疫

溶菌酶在醫(yī)藥衛(wèi)生、食品生產(chǎn)保存等領(lǐng)域用途廣泛，具有抗菌、消炎、抗病毒等作用［1-2］；近年來(lái)，溶菌酶在動(dòng)物疾病預(yù)防中的應(yīng)用研究逐漸引起研究人員的重視，其在提高畜禽非特異性免疫、殺滅病原微生物等方面具有很好的效果［3］。仔豬腹瀉是危害仔豬健康的主要疾病之一，仔豬一旦發(fā)生腹瀉，不僅死亡率高，而且治愈后的仔豬往往生長(zhǎng)發(fā)育受阻，飼料轉(zhuǎn)化率下降［4］。對(duì)于仔豬腹瀉的防治，使用微生態(tài)制劑和中草藥制劑是有效防治仔豬腹瀉，防止抗生素過(guò)量使用導(dǎo)致仔豬腸道微生態(tài)失衡的有效手段［5］。

互葉百千層，別名澳洲茶油，是原產(chǎn)于澳洲的一種具有抗菌、抗病毒、消炎、促進(jìn)傷口修護(hù)等功能的植物，鑒于其廣泛的生物學(xué)功能，其樹(shù)葉提取物在醫(yī)療衛(wèi)生、預(yù)防保健、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用逐步得到重視［6］?；ト~百千層樹(shù)葉提取物成分復(fù)雜，經(jīng)過(guò)提取脫毒后用于動(dòng)物體能夠提高動(dòng)物機(jī)體免疫力；本文通過(guò)研究互葉百千層樹(shù)葉提取物飼喂仔豬后血清溶菌酶的變化，探討其對(duì)提高仔豬非特異性免疫力的影響以及對(duì)機(jī)體內(nèi)殺菌、抗病毒的功能，為下一步開(kāi)展互葉百千層樹(shù)葉提取物用于防治仔豬腹瀉提供基礎(chǔ)。

1　試驗(yàn)材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

大長(zhǎng)二元母豬6頭其所產(chǎn)仔豬總計(jì)64頭，均由贛州市某種豬場(chǎng)提供；互葉百千層提取物由無(wú)錫市晨芳生物科技有限公司提供；傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)苗購(gòu)置于上海海利生物工程有限

公司；黃芪多糖（98%濃度）購(gòu)置于北京生泰爾有限公司；20%長(zhǎng)效土霉素（得米先）購(gòu)置于美國(guó)輝瑞動(dòng)物保健品有限公司。懷孕母豬料和仔豬哺乳料購(gòu)置于贛州雙胞胎股份有限公司。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)分組

本次實(shí)驗(yàn)共分為6組（I、II、III、IV、V、VI），每組1頭母豬，及所產(chǎn)仔豬；母豬均為二胎母豬，不同母豬產(chǎn)仔時(shí)間前后相差不超過(guò)2天，配種公豬均為杜洛克；母豬均在產(chǎn)前2周肌肉注射傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)苗。I、II、III、IV、V、VI組試驗(yàn)各組產(chǎn)仔數(shù)分別為11頭、10頭、11頭、11頭、11頭、10頭。

1.2.2試驗(yàn)處理

I組：喂食互葉百千層提取物，在21日齡以?xún)?nèi)通過(guò)灌服給藥，每頭豬每天為5?mL，分2次，每次2.5?mL；22日齡至28日齡（斷奶）則采取灌服給藥每頭豬為每天6?mL，一次給藥。

II組：喂食互葉百千層提取物，在21日齡以?xún)?nèi)通過(guò)灌服給藥，每頭豬每天為6?mL，分兩次，每次3?mL；22日齡至28日齡（斷奶）則采取灌服給藥每頭豬為7?mL，一次給藥。

III組：喂食互葉百千層提取物，在21日齡以?xún)?nèi)通過(guò)灌服給藥，每頭豬每天為7?mL，分兩次，每次3.5?mL；22日齡至28日齡（斷奶）則采取灌服給藥每頭豬為8?mL，一次給藥。

IV組：黃芪多糖組，每頭仔豬通過(guò)灌服給藥黃芪多糖顆粒每天5?g（用溫開(kāi)水溶解），一次給藥完畢，一直用藥到28日齡。

V組：在仔豬3日齡、7日齡、21日齡給進(jìn)行長(zhǎng)效土霉素注射液（20%）肌肉注射，分別為每頭豬0.5?mL、1?mL、1.5?mL。

VI組：空白對(duì)照組，仔豬不使用任何藥物，只進(jìn)行接種疫苗，做空白對(duì)照。

試驗(yàn)各組仔豬免疫程序如下：7?d 和21?d免疫豬氣喘病疫苗；15日齡接種豬藍(lán)耳病弱毒疫苗；24日齡接種豬瘟疫苗，一免。

1.2.3試驗(yàn)管理

試驗(yàn)全期做好仔豬保溫措施，每天進(jìn)行欄舍消毒，保證環(huán)境衛(wèi)生，采取自由飲水，試驗(yàn)期28?d；每日記錄仔豬發(fā)病率、死亡率。

1.2.4數(shù)據(jù)測(cè)定

在14日齡和28日齡時(shí)前腔靜脈采血，分離血清，測(cè)定溶菌酶含量。

1.2.5數(shù)據(jù)處理

分別對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)用excell進(jìn)行試驗(yàn)處理，對(duì)試驗(yàn)組和對(duì)照組進(jìn)行t值檢驗(yàn)，以測(cè)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1試驗(yàn)各組仔豬腹瀉發(fā)病死亡情況

試驗(yàn)各組在采取不同的處理后，仔豬發(fā)病率、腹瀉率、死亡率結(jié)果如表1。

從表1可以看出：試驗(yàn)II組的腹瀉頭數(shù)最低，且發(fā)病和死亡數(shù)也是最低的；添加互葉百千層植物提取物的I組、II組、III組在控制仔豬腹瀉方面都有一定效果，但I(xiàn)I組效果最佳。

2.2不同試驗(yàn)處理仔豬血清溶菌酶含量

試驗(yàn)不同處理組仔豬在14日齡和28日齡前腔靜脈采血，分離血清，測(cè)定溶菌酶含量，結(jié)果如表2。

對(duì)表2中的各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)，t＜0.05為差異顯著，t＜0.01為差異極顯著。對(duì)以上結(jié)果進(jìn)行分析，可以看出：

1）I組、II組、III組在用藥后14?d仔豬血清中溶菌酶的含量都大于VI組（空白對(duì)照組），分別高了0.31?U/ mL（t＞0.05）、0.61?U/mL（t＜0.05）、0.16?U/mL（t＞0.05）；用 藥 后28?d則分別高了0.88?U/mL（t＜0.05）、2.33?U/mL（t＜0.01）、0.73（t＜0.05）；因此，II組效果最佳，且在用藥后28?d對(duì)溶菌酶的誘導(dǎo)效果要明顯高于14?d。

2）IV組（黃芪多糖）仔豬血清中溶菌酶含量在用藥后14?d和28?d分別比VI組（空白對(duì)照）高了0.77?U/mL （t＜0.05）、2.11?U/mL（t＜0.01）。

3）II組（互葉百千層植物提取物對(duì)溶菌酶誘導(dǎo)作用效果最佳）和IV組（黃芪多糖）進(jìn)行比較，都能明顯誘導(dǎo)仔豬血清溶菌酶的產(chǎn)生，且誘導(dǎo)效果2組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

表1　試驗(yàn)各組仔豬腹瀉發(fā)病死亡情況

表2　試驗(yàn)各組仔豬血清溶菌酶含量

4）V組仔豬血清中溶菌酶的含量與VI組（空白對(duì)照組）相比較，前者略低于后者0.08?U/mL（t＞0.05），且在28日齡更加明顯，降低了0.42?U/mL （t＜0.05）?？股氐氖褂迷谝欢ǔ潭壬弦种屏巳芫傅漠a(chǎn)生。

3　討論

溶菌酶具有提高畜禽非特異性免疫、殺滅病原微生物等功能，本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)仔豬灌服互葉百千層植物提取物和黃芪多糖，以抗生素對(duì)照和空白對(duì)照作為參照，測(cè)定用藥后14日齡和28日齡仔豬血清溶菌酶的含量變化。結(jié)果表明：互葉百千層植物提取物能夠誘導(dǎo)仔豬多產(chǎn)生溶菌酶，誘導(dǎo)效果可以與黃芪多糖媲美，且該研究中還發(fā)現(xiàn)互葉百千層植物提取物對(duì)仔豬溶菌酶的誘導(dǎo)功能在用藥時(shí)間延長(zhǎng)的情況下效果要大于黃芪多糖，這有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。

互葉百千層植物提取物用于仔豬應(yīng)該選擇最佳有效劑量，用量過(guò)大或過(guò)小都會(huì)降低用藥效果，該研究中發(fā)現(xiàn)“在21日齡以?xún)?nèi)每頭豬6?mL，22日齡至28日齡每頭豬7?mL”是最佳的用藥濃度。

抗生素組的仔豬血清溶菌酶含量低于空白對(duì)照組，這提示一些抗生素可能會(huì)抑制動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生溶菌酶；因此，抗生素的使用雖然能夠有效防治仔豬疾病，但能夠抑制機(jī)體的部分非特異性免疫能力，這可能也是導(dǎo)致大量使用抗生素會(huì)導(dǎo)致仔豬頑固性腹瀉的原因之一。

［1］?戴清源，?陳祥貴，?李曉霞，?等.溶菌酶的研究進(jìn)展［J］?.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技，?2005?（3）：33-34.

［2］?肖懷秋，?林親錄，?李玉珍，?等.溶菌酶及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用［J］?.中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，?2005?（2）：32-34.

［3］?鄒仕庚，?朱光道.溶菌酶及其在畜禽飼料中的應(yīng)用［J］?.畜禽業(yè)，?2007?（7）：2-3.

［4］?王紅寧.仔豬腹瀉成因及綜合防治技術(shù)措施［J］.中國(guó)畜牧雜志，2006，4（6）：5-8.

［5］?楊林.微生態(tài)制劑對(duì)仔豬腸道非特異性免疫防御機(jī)能的影響［D］.哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué).2001：7-21.

［6］?吳頔，謝吉蓉，宋琴，等.茶樹(shù)油作為天然抗菌劑的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2013（21）：32-35.

2016-04-22）

江西省星火計(jì)劃項(xiàng)目“利用微生態(tài)制劑和中草藥綜合防治仔豬腹瀉技術(shù)”（編號(hào)：2013?2BBF61018）；江西省生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（編號(hào)：JXARS-03）；江西現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科研協(xié)同創(chuàng)新專(zhuān)項(xiàng)（編號(hào)：JXXTCX2015004-002）

雷小文（1983—），碩士研究生