宮新城，周平平，陳公武，史萬(wàn)玉（.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)中獸醫(yī)學(xué)院河北保定0700；.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院河北保定0700；.石家莊市農(nóng)林科學(xué)研究院河北石家莊05004）

葎草“止水痢”功效初探

宮新城1，周平平2，陳公武3，史萬(wàn)玉1
（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)中獸醫(yī)學(xué)院河北保定071001；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院河北保定071001；3.石家莊市農(nóng)林科學(xué)研究院河北石家莊050041）

葎為了研究草的止水痢功效，試驗(yàn)采用分步提取揮發(fā)油、多糖、黃酮的方法，并對(duì)各成分的抑菌、抗炎葎和止瀉作用進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明葎草揮發(fā)油、草多糖對(duì)大腸桿菌和沙門(mén)氏菌有葎抑制效果；草黃酮可以抑制蛋清引起的腫脹，葎草黃酮（B）組腫脹度為（1.36±0.14）m L，與生理鹽水組相比，差異顯著（P＜0.05葎），而草黃酮（A）組的腫脹度為（1.12±0.27）m L，與生理鹽水組相比，差異極顯著（P＜0.01）；葎草黃酮（A）可以顯著抑制由大黃引起的小鼠腹瀉，與生理鹽水組相比差異顯著（P＜0.05葎）；草揮發(fā)油、葎草多葎糖和草黃酮（A）部對(duì)大腸桿菌引起的葎腹瀉都有抑制作用，草黃酮（A）部的腹瀉次數(shù)為（30.37±3.13），與生理鹽水組相比差異極顯著（P＜0.05葎）。說(shuō)明草可以從抑菌、止瀉和消炎幾個(gè)方面治療動(dòng)物腹瀉。

葎草；抑菌；消炎；止瀉

葎草味甘、苦，性寒，具有清熱解毒，止水痢的葎功效，民間常用來(lái)治療家畜腹瀉。但當(dāng)前草在獸醫(yī)臨床應(yīng)用中并不多。因此本文以小鼠為試驗(yàn)動(dòng)葎葎物，對(duì)草止水痢功效進(jìn)行了研究，為草在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1　材料和方法

1.1材料

葎草，采于河北定州河北農(nóng)業(yè)大學(xué)中獸醫(yī)學(xué)院標(biāo)本園；大腸桿菌、沙門(mén)氏菌，購(gòu)于中國(guó)獸藥監(jiān)察所；紫外—可見(jiàn)分光光度計(jì)（SP-756型），上海光譜儀器有限公司。

1.2葎草有效成分提取葎

準(zhǔn)確稱(chēng)取草粉末250 g，首先用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油［1］；藥渣用水提醇沉法提取多糖［2，3］；濾液部分濃縮得到黃酮A部；再將藥渣部分醇提得到黃酮B部。

1.3抑菌試驗(yàn)

取大腸桿菌、沙門(mén)氏菌各5株，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊?cè)勅勚囵B(yǎng)基上，采用挖洞注藥法檢測(cè)草揮發(fā)油、草多糖、黃酮A部、黃酮B部的抑菌效果。

1.4抗炎試驗(yàn)將60日齡大鼠25只隨機(jī)分為5組，每組5只，分葎葎別灌服生理鹽水、草揮發(fā)油、草多糖、黃酮A部、黃酮B部0.5 mL/只，每日給藥一次，連續(xù)給藥7 d。末次給藥后30min，將雞蛋清注射于大鼠腳趾部皮下，0.3mL/只。然后將大鼠安裝足跖器容積測(cè)量器，在注射雞蛋清后0 h、0.5 h、1 h各測(cè)定一次排水量。

鼠爪腫脹度=致炎后鼠爪體積-致炎前鼠爪體積

1.5止瀉作用試驗(yàn)

1.5.1大黃致瀉模型

大黃200 g，煎煮濃縮至200mL。將20～22 g昆明系小鼠50只，隨機(jī)分為5組，分別灌服生理鹽葎葎水、草揮發(fā)油、草多糖、黃酮A部、黃酮B部0.5 mL/只，給藥1次/d，連續(xù)給藥3 d。于末次給藥后禁食6 h，每只小鼠灌服大黃水提液0.7mL，觀察小鼠排出稀糞數(shù)和排出的時(shí)間。

1.5.2大腸桿菌致瀉模型

前期處理同1.5.1，末次給藥時(shí)，每只小鼠注射氫化可的松0.1mL，并腹腔接種大腸桿菌2×108/只，觀察小鼠排出稀糞數(shù)和排出的時(shí)間。

2　試驗(yàn)結(jié)果

2.1葎草提取結(jié)果

試驗(yàn)中得到具有特殊濃香氣味的棕褐色揮發(fā)油（0.95±0.08）g葎，所采草中揮發(fā)油的含量約為0.38%。提取粗多糖（2.98±0.15）g葎，草中多糖的含量為1.19%。藥渣部分得到黃酮（B）部（0.75±0.04）g；提取多糖的濾液部分得到黃酮（A）部（4.20± 0.21）g葎，草中總黃酮的含量為1.98%。

2.2葎草有效成分抑菌試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果顯示，葎草揮發(fā)油、葎草多糖對(duì)大腸桿菌和沙門(mén)氏菌都有抑制效果，和葎草黃酮（A）、黃酮（B）相比差異顯著（P＜0.05），其中葎草揮發(fā)油對(duì)大腸桿菌的抑菌效果最好，為（22.2±2.97）mm（見(jiàn)表1）。

表1　葎草不同提取部位體外抑菌結(jié)果（n=5， φ=mm）

2.3葎草不同提取部位抗炎作用結(jié)果

試驗(yàn)顯示0.5 h后大鼠足跖腫脹很明顯，但是各組之間差異并不顯著（P＞0.05）；1 h葎后草黃酮（B）組腫脹度為（1.36±0.14）mL，與生理鹽水組相比，腫脹明顯減輕，差異顯著（P＜0.05葎），而草黃酮（A）組的腫脹度為1.12±0.27mL，與生理鹽水組相比降低，差異極顯著（P＜0.01）（見(jiàn)表2）。

表2　葎草不同提取部位對(duì)雞蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響（x±s）

2.4葎草不同部位止瀉作用試驗(yàn)

2.4.1葎草不同提取部位對(duì)大黃致瀉小鼠的作用由試驗(yàn)可以看到灌服大黃煎劑后6 h 13min生理鹽水組首先出現(xiàn)腹瀉，其他各組也先后出現(xiàn)了腹瀉現(xiàn)象，以葎草黃酮（A）組，出現(xiàn)腹瀉時(shí)間最晚，為9 h 20 min。各組出現(xiàn)的腹瀉次數(shù)也有差異，以葎草黃酮（A）次數(shù)最少，為（2.11±1.24）次，和生理鹽水組相比差異顯著（P＜0.05）（見(jiàn)表3）。

表3　葎草不同提取部位對(duì)大黃致瀉小鼠的作用結(jié)果

2.4.2葎草不同提取部位對(duì)大腸桿菌致瀉小鼠的作用

在注射大腸桿菌后3 h，小鼠開(kāi)始精神倦怠，被毛猬立，渾身發(fā)抖，并且開(kāi)始腹瀉，72 h后沒(méi)死的小鼠不再出現(xiàn)腹瀉現(xiàn)象。排出稀糞情況差異也比較大，葎草揮發(fā)油組，排稀糞次數(shù)為（45.67±3.37）次，葎草多糖組排稀糞次數(shù)為（35.35±2.36）次，對(duì)大腸桿菌引起的腹瀉有一定的抑制作用，與生理鹽水組相比差異顯著（P＜0.05），而葎草黃酮（A）能夠明顯的抑制大腸桿菌引起的腹瀉，為（30.37±3.13）次，與生理鹽水組相比差異極顯著（P＜0.01）（見(jiàn)表4）。

表4　葎草不同提取部位對(duì)大腸桿菌致瀉小鼠的作用

3　討論

《唐本草》認(rèn)為葎草有“止水痢”的功效，這也是葎民間用草治療家兔等動(dòng)物腹瀉的依據(jù)所在。試驗(yàn)葎葎中發(fā)現(xiàn)草揮發(fā)油、草多糖對(duì)大腸桿菌和沙門(mén)氏葎菌都有抑制效果，尤其草揮發(fā)油是對(duì)大腸桿菌的抑制效果更強(qiáng)，抑菌直徑為（22.2±2.97）mm，和其他資料相似［4］葎葎，這也是草止水痢一個(gè)佐證。草黃酮對(duì)注射蛋清引起的局部腫脹有抑制作用，在治療腹葎瀉時(shí)，草黃酮可以通過(guò)抗炎起到輔助作用。

試驗(yàn)中我們復(fù)制非感染性腹瀉和感染性腹瀉兩種動(dòng)物模型，灌服大黃煎劑后6 h 13min，生理鹽水組出現(xiàn)腹瀉，其它各組也先后出現(xiàn)了腹瀉現(xiàn)象，但是葎草黃酮（A）組，出現(xiàn)腹瀉時(shí)間最晚，為9 h 20min。葎各組出現(xiàn)的腹瀉次數(shù)也有差異，以草黃酮（A）次數(shù)最少，和生理鹽水組相比差異顯著（P＜0.05）［5］。說(shuō)明黃酮（A）部對(duì)大黃導(dǎo)致的腹瀉有很好的抑制作用。感染性腹瀉模型中，注射大腸桿菌后3 h，小鼠開(kāi)始精神倦怠，被毛猬立，渾身發(fā)抖，并且開(kāi)始腹瀉，72 h后沒(méi)死的小鼠不再出現(xiàn)腹瀉現(xiàn)象，排出稀糞情況差異也比較大，葎草揮發(fā)油和葎草多糖對(duì)大腸桿菌引起的腹瀉有一定的抑制作用，與生理鹽水組相比差異顯著；而葎草黃酮（A）能夠明顯的抑制大腸桿菌引起的腹瀉，與生理鹽水組相比差異極顯著。因此認(rèn)為葎草治療動(dòng)物腹瀉可以從抑菌、止瀉和消炎幾個(gè)方面發(fā)揮作用。（編輯：方穎）

［1］殷獻(xiàn)華，李天，潘衛(wèi)東，等.葎草揮發(fā)油化學(xué)成分分析及其抑菌作用研究［J］.山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)2010，29（5）: 415-418.

［2］褚衍亮，王娜，張明川.葎草多糖的超聲提取及抑菌活性研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21（2）:342-344.

［3］張小靈，丁卓平，褚琳.葎草中多糖微波提取工藝研究［J］.遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（3）:21-28.

［4］周家駒，謝桂榮，嚴(yán)新建.中藥原植物化學(xué)成分手冊(cè)［M］.1版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社2004:546.

［5］柳詩(shī)全.葎草栓劑止瀉作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.醫(yī)藥論壇雜志，2004，25（22）: 15-16.

10.3969/j.issn.1008-4754.2016.8.038