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牡蠣肽鋅螯合物的制備工藝研究

2016-09-14 12:25:18王海軒谷瑞增蔡木易中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院北京市蛋白功能肽工程技術(shù)研究中心北京100015
食品工業(yè)科技 2016年8期
關(guān)鍵詞:螯合物沉淀劑硫酸鋅

劉 艷,魯 軍,陳 亮,王海軒,谷瑞增,蔡木易(中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院,北京市蛋白功能肽工程技術(shù)研究中心,北京100015)

牡蠣肽鋅螯合物的制備工藝研究

劉 艷,魯 軍,陳 亮,王海軒,谷瑞增,蔡木易*
(中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院,北京市蛋白功能肽工程技術(shù)研究中心,北京100015)

分析牡蠣肽氨基酸組成及相對(duì)分子質(zhì)量分布,并以牡蠣肽為原料、硫酸鋅為鋅源對(duì)牡蠣肽鋅螯合物的制備工藝進(jìn)行研究,通過(guò)測(cè)定鋅離子螯合率和螯合物得率衡量螯合效果。結(jié)果表明,牡蠣肽相對(duì)分子質(zhì)量小于1000 u的組分高達(dá)92.34%,富含谷氨酸和天冬氨酸這兩種酸性氨基酸及其酰胺;保證螯合率及得率的最佳螯合條件為:肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,肽濃度為0.06 g/mL,反應(yīng)溫度為50℃,沉淀劑乙醇為5倍反應(yīng)液體積,pH5.33,反應(yīng)時(shí)間60 min。在此條件下鋅離子的螯合率為89.55%±0.23%,螯合物得率為56.64%±0.55%。

牡蠣,肽,鋅,螯合物,制備工藝

鋅是人體必需的微量元素之一,在人體生長(zhǎng)發(fā)育、生殖遺傳等重要生理過(guò)程中起到至關(guān)重要的作用。鋅存在于DNA聚合酶、堿性磷酸酶等80多種代謝相關(guān)酶中,直接關(guān)系到核酸及蛋白質(zhì)合成及代謝、細(xì)胞再生與分裂、細(xì)胞代謝[1]。人體缺乏鋅元素時(shí),會(huì)出現(xiàn)各種含鋅酶活性及免疫功能降低的現(xiàn)象。我國(guó)居民普遍存在鋅缺乏的問(wèn)題,根據(jù)對(duì)19個(gè)省的調(diào)查表明,60%的學(xué)齡前兒童鋅攝入量?jī)H為正常值的50%左右,鋅缺乏較為嚴(yán)重[2]。

近年來(lái),以活性肽為原料,開(kāi)發(fā)易于吸收利用、生理活性強(qiáng)的新型補(bǔ)鋅劑,已成為熱點(diǎn)研究問(wèn)題。高紅梅等[3]以小麥肽作為原料制備小麥肽鋅螯合物,螯合率達(dá)84.25%;張全才[4]采用水解米蛋白肽作為原料制備補(bǔ)鋅劑,螯合率達(dá)70.1%;Wang等[5]從芝麻蛋白水解物中鑒定出Ser-Met和Asn-Cys-Ser這兩個(gè)活性肽段與鋅離子以1∶1的比例結(jié)合為螯合物,并且證實(shí)水分子參與了螯合物的形成;Chen等[6]從牡蠣蛋白水解物中分離、鑒定出具有鋅離子螯合能力的肽段結(jié)構(gòu)HLRQEEKEEVTVGSLK。此外,研究表明腸道內(nèi)存在特殊的肽的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),其位于小腸上皮細(xì)胞的刷狀緣膜[7]。與氨基酸相比,活性肽的吸收效率高且不易飽和[8]。

牡蠣肽是以牡蠣肉為原料,經(jīng)過(guò)蛋白提純、酶解、提純等步驟加工制得,具有均衡的氨基酸組成的肽類(lèi)混合物,其蛋白含量高、穩(wěn)定性高、易于消化吸收。大量研究表明,牡蠣肽具有抗氧化[9]、抗菌[10]、降

血壓[11]、免疫調(diào)節(jié)[12]等多種功能活性。

本研究首先對(duì)牡蠣肽原料組成進(jìn)行分析,然后以硫酸鋅作為鋅源對(duì)牡蠣肽鋅螯合物的制備工藝進(jìn)行了研究,為新型活性肽補(bǔ)鋅劑的開(kāi)發(fā)以及牡蠣資源的利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

牡蠣 市售;硫酸鋅、硫脲、氟化氨、二甲酚橙、乙酸鈉、冰醋酸、濃硫酸、抗壞血酸、乙二胺四乙酸二鈉、無(wú)水乙醇、檸檬酸 北京化工廠(chǎng),分析純;木瓜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶 諾維信生物技術(shù)有限公司;乙腈 美國(guó)Fisher公司,色譜純;三氟乙酸 英國(guó)Alfa Aesar公司,分析純;肽標(biāo)準(zhǔn)品 中國(guó)藥品生物制品檢定所。

AB104-N電子天平 梅特勒托利多公司;HW.SY21-KP4恒溫水浴箱 北京市長(zhǎng)風(fēng)儀器儀表公司;S20P-K精密pH計(jì) 梅特勒托利多;3K-15離心機(jī) 德國(guó)Sigma公司;DHG-9075A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 北京陸??萍加邢薰?;LC-20A高效液相色譜儀 日本島津;氨基酸分析儀 德國(guó)Membrapure A300。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 牡蠣肽制備 將牡蠣去殼清洗,加水碾磨成牡蠣漿,去殼牡蠣與水的重量比為1∶1~1∶5;加入檸檬酸調(diào)整pH至5,在30℃條件下攪拌該牡蠣漿3 h,3000 r/min離心去除上清液,得到牡蠣渣料;將該牡蠣渣料以3∶1的水渣比加水進(jìn)行混合、攪拌,調(diào)整pH 至8,加熱至45℃,按每克牡蠣渣料加入50 U的風(fēng)味蛋白酶和50 U的木瓜蛋白酶,酶解4 h,90℃加熱滅酶15 min;將酶解液離心,轉(zhuǎn)速為3000 r/min;然后對(duì)上清液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮,條件為蒸汽壓(0.1±0.02)MPa,溫度40~80℃、按照濃縮液總固含量10%~30%的比例加入活性炭粉進(jìn)行脫色,并過(guò)濾、滅菌;用離心噴霧干燥器將上述脫色后的濃縮液進(jìn)行干燥處理,條件為進(jìn)口溫度140~160℃,出口溫度80~90℃,制成牡蠣活性肽粉。

1.2.2 氨基酸組成分析 依據(jù)GB/T 5009.124-2003《食品中氨基酸的測(cè)定》,使用氨基酸自動(dòng)分析儀對(duì)牡蠣肽中的氨基酸組成進(jìn)行分析。

1.2.3 相對(duì)分子質(zhì)量分布分析 采用高效液相凝膠色譜法。樣品用流動(dòng)相溶解,經(jīng)孔徑為0.2 μm聚四氟乙烯膜過(guò)濾后進(jìn)行液相檢測(cè)。色譜條件:色譜柱:TSK gel G2000 SWXL 300 mm×7.8 mm;流動(dòng)相:乙腈∶水∶三氟乙酸=45∶55∶0.1(體積比);檢測(cè)波長(zhǎng):UV 220 nm;流速:0.5 mL/min;柱溫:30℃;進(jìn)樣體積:10 μL;上樣濃度:1 mg/mL。使用GPC軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。以五種肽標(biāo)準(zhǔn)品制作相對(duì)分子質(zhì)量校正曲線(xiàn),標(biāo)準(zhǔn)品為:乙氨酸—乙氨酸—乙氨酸(MW 189)、乙氨酸—乙氨酸—酪氨酸—精氨酸(MW 451)、桿菌酶(MW 1450)、抑菌肽(MW 6500)、細(xì)胞色素C (MW 12500)。

1.2.4 牡蠣肽鋅螯合物的制備 稱(chēng)取一定質(zhì)量的牡蠣肽粉和硫酸鋅,分別用少量蒸餾水溶解后定容,得到一定濃度的牡蠣肽溶液和硫酸鋅溶液。分別量取一定體積的兩種溶液,混合均勻,并置于一定溫度下反應(yīng)至所需時(shí)間。冷卻后,加入一定體積的無(wú)水乙醇,在7500 r/min的轉(zhuǎn)速下離心15 min,除去上清液,并用無(wú)水乙醇洗滌離心1~2次。將沉淀物置于45℃電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘干,得牡蠣肽鋅螯合物。每組設(shè)置3個(gè)平行組,測(cè)定鋅的螯合率及螯合物得率。

1.2.5 鋅的螯合率及螯合物得率的測(cè)定計(jì)算 首先測(cè)定牡蠣肽鋅螯合物中鋅的質(zhì)量,根據(jù)《GB 25579-2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑硫酸鋅》[13]中鋅含量測(cè)定方法并進(jìn)行改進(jìn)。稱(chēng)取0.03~0.1 g牡蠣肽鋅螯合物,置于50 mL錐形瓶中,加少量水潤(rùn)濕,滴加2滴50%(V/V)硫酸溶液溶解,加10 mL水、2 mL氟化氨飽和溶液、0.5 mL硫脲溶液(200 g/L)和0.04 g抗壞血酸,搖勻溶解后加入3 mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液(pH5~6)和2滴二甲酚橙指示液(2 g/L),用乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定由紫紅色變?yōu)榱咙S色為終點(diǎn),同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。

試樣中鋅質(zhì)量X(g)按下式計(jì)算:

式中:V1—滴定試樣溶液所消耗的乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積,mL;V2—滴定空白溶液所消耗的乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積,mL;C—乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度,mol/L;65.39—鋅的相對(duì)分子質(zhì)量。

鋅的螯合率及螯合物得率按照以下公式計(jì)算。

鋅的螯合率(%)=W1/W0×100

式中:W0—反應(yīng)體系中鋅的總質(zhì)量,g;W1—螯合物中鋅的總質(zhì)量,g。

螯合物得率(%)=W3/W2×100

式中:W2—初始反應(yīng)物的總質(zhì)量,g;W3—反應(yīng)后牡蠣肽鋅螯合物的總質(zhì)量,g。

1.2.6 單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)中對(duì)牡蠣肽與硫酸鋅質(zhì)量比、牡蠣肽濃度、反應(yīng)溫度、反應(yīng)pH、反應(yīng)時(shí)間、沉淀劑乙醇用量進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。牡蠣肽與硫酸鋅質(zhì)量比對(duì)螯合反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn):質(zhì)量比分別為1∶1、4∶1、8∶1、12∶1、16∶1、20∶1、24∶1、28∶1、32∶1,肽質(zhì)量濃度0.04 g/mL,溫度60℃,pH5.33,反應(yīng)時(shí)間60 min,沉淀劑為反應(yīng)液體積的1倍。牡蠣肽濃度對(duì)螯合反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn):肽質(zhì)量濃度分別為0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 g/mL,肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,溫度60℃,pH5.33,反應(yīng)時(shí)間60 min,沉淀劑為反應(yīng)液體積的1倍。溫度對(duì)螯合反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn):反應(yīng)溫度分別為30、40、50、60、70℃,肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,肽質(zhì)量濃度0.04 g/mL,pH5.33,反應(yīng)時(shí)間60 min,沉淀劑為反應(yīng)液體積的1倍。pH對(duì)螯合反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn):反應(yīng)pH分別為5.33、5、4、3,肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,肽質(zhì)量濃度0.04 g/mL,溫度50℃,反應(yīng)時(shí)間60 min,沉淀劑為反應(yīng)液體積的1倍。時(shí)間對(duì)螯合反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn):反應(yīng)時(shí)間分別為20、40、60、80 min,肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,肽質(zhì)量濃度0.04 g/mL,溫度50℃,pH5.33,沉淀劑為反應(yīng)液體積的1倍。沉淀劑乙醇用量對(duì)螯合反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn):乙醇用量分別為反應(yīng)液體積的0、1、2、3、4、5、6倍,肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,

肽質(zhì)量濃度0.04 g/mL,溫度50℃,pH5.33,反應(yīng)時(shí)間60 min。

在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上確定正交實(shí)驗(yàn)的因素及水平,選用L9(34)正交表進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表1,確定最佳的螯合制備工藝。

表1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表Table1 Design of the orthogonal experiment

1.3 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,組間比較采用t檢驗(yàn),若p<0.05,兩者有顯著性差異;若p<0.01,兩者有極顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 牡蠣肽成分分析

對(duì)按方法1.2.1制得的牡蠣肽進(jìn)行氨基酸含量及相對(duì)分子質(zhì)量分布分析,結(jié)果見(jiàn)表2和表3。

表2 牡蠣肽氨基酸含量Table2 Amino acid composition of oyster peptide

肽類(lèi)與鋅離子螯合能力與其氨基酸組成密切相關(guān),Jiang等[14]指出酸性氨基酸含量較高的肽段與鋅離子的結(jié)合能力更強(qiáng)。牡蠣肽氨基酸含量測(cè)定結(jié)果顯示,谷氨酸、天冬氨酸這兩種酸性氨基酸及其酰胺含量較高,其中谷氨酸及其酰胺(Gln+Glu)含量最高,占10.981%;天冬氨酸及其酰胺(Asp+Asn)占8.369%。

表3 牡蠣肽相對(duì)分子質(zhì)量分布情況Table3 Relative molecular weight distribution of oyster peptide

表3結(jié)果表明,牡蠣肽主要由小分子肽段構(gòu)成。相對(duì)分子質(zhì)量小于1000 u的組分占92.34%,其中500~1000 u的組分占22.61%,140~500 u的組分占54.63%。按照氨基酸平均相對(duì)分子質(zhì)量為137 u計(jì)算,牡蠣肽主要由八肽以下的小分子肽段構(gòu)成,并且二肽和三肽所占比例最高。研究表明,小肽的吸收效率比氨基酸高,更容易被人體吸收利用,進(jìn)而發(fā)揮其多種功能活性[15]。

2.2 牡蠣肽鋅制備單因素實(shí)驗(yàn)

2.2.1 牡蠣肽與硫酸鋅質(zhì)量比對(duì)螯合反應(yīng)的影響 由圖1可知,牡蠣肽與硫酸鋅的質(zhì)量比對(duì)螯合反應(yīng)的影響很大。在牡蠣肽與硫酸鋅質(zhì)量比為1∶1至32∶1范圍內(nèi),鋅的螯合率隨質(zhì)量比的增大而增大,當(dāng)比值為20∶1時(shí),螯合率達(dá)75.58%,比值繼續(xù)增大時(shí),螯合率達(dá)89%。螯合物得率測(cè)定結(jié)果顯示,隨牡蠣肽與硫酸鋅質(zhì)量比的增大出現(xiàn)下降的趨勢(shì),比值為8∶1至20∶1范圍內(nèi),得率為17%~15%,當(dāng)比值繼續(xù)增大時(shí),得率降低至13%以下。由上述結(jié)果可知,當(dāng)肽與鋅鹽質(zhì)量比過(guò)低時(shí),鋅離子的螯合率較低,造成鋅源的浪費(fèi);比值過(guò)大時(shí),螯合物的得率較低,造成牡蠣肽原料的浪費(fèi)。因此,比值在20∶1左右比較合適,選擇此質(zhì)量比作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)條件。

圖1 牡蠣肽與硫酸鋅的質(zhì)量比對(duì)螯合反應(yīng)的影響Fig.1 Effect of mass ratio of oyster peptide to ZnSO4on chelating reaction

圖2 牡蠣肽濃度對(duì)螯合反應(yīng)的影響Fig.2 Effect of the concentration of oyster peptide on chelating reaction

2.2.2 牡蠣肽濃度對(duì)螯合反應(yīng)的影響 由圖2可知,牡蠣肽濃度對(duì)螯合反應(yīng)的影響較大。牡蠣肽濃度過(guò)

低或過(guò)高時(shí),螯合率均較低,當(dāng)濃度為0.04、0.06、0.08 g/mL時(shí),螯合率分別為78.18%、75.23%、73.28%,此時(shí)得率分別為13.87%、13.92%、14.63%,為較合適的濃度范圍。選擇0.04 g/mL作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)條件。

2.2.3 溫度對(duì)螯合反應(yīng)的影響 由圖3可知,反應(yīng)溫度主要影響鋅離子的螯合率,而對(duì)螯合物得率影響較小。在40、50、60℃下,螯合率較高,并且在50℃時(shí),螯合率達(dá)到最高,為77.18%。螯合物得率檢測(cè)結(jié)果顯示,40、50、60℃下得率均在13%~14%范圍內(nèi)。選擇螯合率最高的50℃進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

圖3 反應(yīng)溫度對(duì)螯合反應(yīng)的影響Fig.3 Effect of temperature on chelating reaction

2.2.4 pH對(duì)螯合反應(yīng)的影響 在肽濃度為0.04 g/mL、肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1條件下,不經(jīng)pH調(diào)節(jié),反應(yīng)液的pH為5.33。加堿會(huì)導(dǎo)致氫氧化鋅沉淀生成,不利于螯合物的制備;pH太低,過(guò)多的氫離子會(huì)取代金屬離子,影響螯合物的形成,此時(shí)螯合率及得率均較低。因此,將肽溶液與硫酸鋅溶液混合后的pH即為反應(yīng)適宜條件,不宜進(jìn)行pH調(diào)節(jié)。

圖4 反應(yīng)pH對(duì)螯合反應(yīng)的影響Fig.4 Effect of pH on chelating reaction

2.2.5 時(shí)間對(duì)螯合反應(yīng)的影響 由圖5可知,反應(yīng)時(shí)間對(duì)鋅離子的螯合率有顯著影響,而對(duì)螯合物得率影響較小。在20~60 min內(nèi),隨時(shí)間的增加鋅的螯合率增加,在60 min時(shí)為77.14%,此時(shí)得率為13.65%。選擇60 min作為后續(xù)反應(yīng)時(shí)間。

2.2.6 沉淀劑乙醇用量對(duì)螯合反應(yīng)的影響 在牡蠣肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,牡蠣肽濃度為0.04 g/mL條件下,沉淀劑乙醇用量對(duì)鋅離子螯合率及螯合物得率影響很大。由圖6可知,隨乙醇用量的增加螯合率及產(chǎn)物得率都隨之增加,在乙醇用量為反應(yīng)液體積的4倍、5倍及6倍時(shí),鋅離子螯合率分別為85.81%、86.53%、86.43%,產(chǎn)物得率分別為41.59%、45.48%、44.64%。選擇螯合率及得率較高的沉淀劑乙醇用量(4、5、6倍)作為正交實(shí)驗(yàn)條件。

圖5 反應(yīng)時(shí)間對(duì)螯合反應(yīng)的影響Fig.5 Effect of time on chelating reaction

圖6 沉淀劑乙醇用量對(duì)螯合反應(yīng)的影響Fig.6 Effect of the dosage of precipitating agent(ethanol)on chelating reaction

2.3 牡蠣肽鋅制備正交實(shí)驗(yàn)

根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,對(duì)牡蠣肽與硫酸鋅質(zhì)量比、牡蠣肽濃度、反應(yīng)溫度、沉淀劑乙醇用量這四個(gè)因素進(jìn)行L9(34)正交實(shí)驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表5。

由表5可知,影響鋅的螯合率的因素主次順序是A>D>B>C,即肽與硫酸鋅質(zhì)量比>沉淀劑乙醇用量>牡蠣肽濃度>反應(yīng)溫度;影響螯合物得率的因素主次順序?yàn)镈>B>A>C,即沉淀劑乙醇用量>牡蠣肽濃度>肽與硫酸鋅質(zhì)量比>反應(yīng)溫度。最佳實(shí)驗(yàn)方案是D2B2A2C2,即肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,肽濃度為0.06 g/mL,反應(yīng)溫度為50℃,沉淀劑乙醇為5倍反應(yīng)液體積,在此條件下鋅離子的螯合率為89.55%±0.23%,得率為56.64%±0.55%。

3 結(jié)論

本研究結(jié)果表明,牡蠣肽屬于小分子肽段混合物,其中相對(duì)分子質(zhì)量小于1000 u的組分占92.34%,蛋白質(zhì)含量高,富含酸性氨基酸。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn),確定保證螯合率和得率的適宜方案,即肽與硫酸鋅質(zhì)量比為20∶1,肽濃度為0.06 g/mL,反應(yīng)溫度為50℃,反應(yīng)時(shí)間為60 min,沉淀劑乙醇為5倍反應(yīng)液體積,在此條件下鋅離子的螯合率為89.55%± 0.23%,得率為56.64%±0.55%。該制備工藝過(guò)程中無(wú)有害物質(zhì)參加和產(chǎn)生、操作簡(jiǎn)單、成本低廉。

表5 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table5 Result of the orthogonal experiment

牡蠣肽螯合鋅作為有機(jī)鋅,相比無(wú)機(jī)鋅具有高效、安全、穩(wěn)定的特點(diǎn),并且在補(bǔ)充微量元素的時(shí)候同時(shí)可補(bǔ)充具有多項(xiàng)功能的活性肽,全面強(qiáng)化牡蠣肽鋅螯合物的生理功效,將具有良好的應(yīng)用前景。今后,牡蠣肽鋅螯合物的結(jié)構(gòu)及生理功能還有待進(jìn)一步研究。

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Preparation of oyster peptide-zinc chelates

LIU Yan,LU Jun,CHEN Liang,WANG Hai-xuan,GU Rui-zeng,CAI Mu-yi*
(Beijing Engineering Research Center of Protein&Functional Peptides,China National Research Institute of Food and Fermentation Industries,Beijing 100015,China)

The oyster peptides were characterized according to their amino acid composition and molecular weight distribution,and the preparation conditions of the peptides-zinc chelates were analyzed.Oyster peptides and zinc sulfate were the raw materials,and chelating effect was determined by chelating ratio of zinc and the yield of the peptide-zinc chelates.The results revealed that oyster peptides were composed of 92.34% peptides with a molecular size under 1000 u,and rich in glutamic acid and glutamine,aspartic acid and asparagines.Moreover,the optimal condition of the chelating reaction was as follow:the mass ratio of peptides to ZnSO4was 20∶1,the concentration of peptides was 0.06 g/mL,the reaction temperature was 50℃,the dosage of precipitating agent(ethanol)was 5 times as much as reaction liquid,the pH value was 5.33,and the reaction time was 60 min.Under the optimal chelating conditions,the chelated zinc ratio reached 89.55%± 0.23%,and the productive index of the peptide-zinc chelates was 56.64%±0.55%.

oyster;peptide;zinc;chelate;preparation technology

TS202.1

B

1002-0306(2016)08-0257-05

10.13386/j.issn1002-0306.2016.08.045

2015-07-02

劉艷(1986-),女,碩士,工程師,研究方向:功能性食品,E-mail:liuyan39259@163.com。

*通訊作者:蔡木易(1962-),男,教授級(jí)高級(jí)工程師,研究方向:功能性食品,E-mail:caimuyi@vip.sina.com。

北京市科技計(jì)劃項(xiàng)目(Z131100003113010);國(guó)家十二五科技支撐項(xiàng)目(2012BAD33B04-02);國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)項(xiàng)目(2013AA102205-02);科技北京百名領(lǐng)軍人才培養(yǎng)工程項(xiàng)目(Z131110000513026)。

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