周選民 劉梅訊▲ 李小力 黨書毅.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院介入放射科，湖北十堰 44000；.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院心內(nèi)科，湖北十堰 44000

急性冠脈綜合征患者接受經(jīng)皮冠脈介入治療后血漿IL-12水平變化及相關(guān)性分析

周選民1劉梅訊1▲李小力1黨書毅2
1.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院介入放射科，湖北十堰 442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院心內(nèi)科，湖北十堰 442000

目的 探討急性冠脈綜合征（ACS）患者接受經(jīng)皮冠狀動脈介入治療（PCI）前后血漿白介素12（IL-12）水平改變及相關(guān)影響因素。 方法 選取2014年5月～2015年2月就診湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院的156例ACS患者為觀察組，接受冠脈造影無異常的35例胸痛患者為對照組，檢測患者PCI（或冠脈造影）前后血漿IL-12水平；同時收集患者臨床資料，對患者基線時IL-12水平與臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行多元逐步回歸分析。 結(jié)果ACS患者中STEMI組（n=66）基線血漿IL-12水平最高，為（215.94±37.91）ng/mL，NSTEMI組（n=32）次之，為（168.67±31.94）ng/mL，緊接著UA組（n=58）為（114.41±24.65）ng/mL，均較正常組［（72.18±15.24）ng/mL］顯著升高。在接受PCI治療后，ACS各組血漿IL-12水平有不同程度下降；正常組在冠脈造影后無改變。多元回歸分析發(fā)現(xiàn)ACS患者IL-12水平與患者年齡、C反應(yīng)蛋白（CRP）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，特別是冠脈狹窄Gensini積分呈正相關(guān)。結(jié)論 血漿IL-12在ACS患者中明顯升高，接受有效的PCI治療后其水平下降。IL-12水平與CRP、冠脈狹窄Gensini積分呈顯著正相關(guān)。推測IL-12是ACS過程中重要的炎癥介質(zhì)，可能與疾病發(fā)生、發(fā)展以及冠脈狹窄嚴(yán)重程度有關(guān)。

急性冠脈綜合征；經(jīng)皮冠狀動脈介入治療；白細(xì)胞介素-12；Gensini積分；多元回歸分析

急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）是以冠狀動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）斑塊破裂或侵襲，繼發(fā)完全或不完全閉塞性血栓形成為病理基礎(chǔ)的一組臨床綜合征，包括急性ST段抬高性心肌梗死（ST elevated myocardial infarction，STEMI）、急性非ST段抬高性心肌梗死 （non-ST-elevation myocardial infarction，NSTEMI）和不穩(wěn)定型心絞痛（unstable angina pectoris，UA）。隨著研究不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)免疫炎性反應(yīng)不僅在AS斑塊的發(fā)生發(fā)展過程中，而且與其不穩(wěn)定、發(fā)生斑塊破裂過程密切相關(guān)［1-2］。與穩(wěn)定型冠脈斑塊比較，不穩(wěn)定斑塊周圍T細(xì)胞浸潤數(shù)量是其10倍之多［3］。另外，ACS患者循環(huán)血液中出現(xiàn)明顯的促炎癥細(xì)胞因子和趨化因子的升高［4-6］。白介素12（Interleukin-12，IL-12）主要由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生，它可通過促進(jìn)NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的生長以及誘導(dǎo)輔助性T細(xì)胞向Th1分化，進(jìn)而激活炎癥級聯(lián)反應(yīng)以及細(xì)胞毒性T細(xì)胞引起斑塊破裂［7-8］。近年來，不斷有文獻(xiàn)報道在ACS患者體內(nèi)IL-12水平是升高的［9］，另外，復(fù)雜病變的UA患者IL-12水平同樣較簡單病變的高［10］。但關(guān)于ACS患者接受經(jīng)皮冠脈介入術(shù)（precutaneous coronary interventions，PCI）后IL-12水平如何變化研究較少。因此，本實(shí)驗(yàn)通過比較ACS接受PCI術(shù)前后血漿IL-12水平變化，探討其在ACS急性發(fā)病過程中的作用；同時通過多元回歸分析IL-12水平與冠脈狹窄程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

連續(xù)入選湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院（以下簡稱“我院”）心內(nèi)科2014年5月～2015年2月收治并確診為ACS的住院患者156例，平均年齡（64.23±9.15）歲，男性76.28%。其中UA患者58例，NSTEMI患者32例，STEMI患者66例。所有患者均符合《內(nèi)科學(xué)》ACS的診斷［11］，且行PCI術(shù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①現(xiàn)患嚴(yán)重感染性疾病、免疫系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤；②嚴(yán)重的肝腎或心功能不全（EF＜50%）；③其他原因不能行冠脈介入治療，或者資料不全的患者。以同期35例胸痛待查入院，經(jīng)冠脈造影檢查正常者為對照組，平均年齡（65.94±7.82）歲，男性74.29%。本研究通過我院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者本人或家屬知情同意并簽字。

1.2 研究方法

1.2.1 基線臨床資料收集 詳細(xì)記錄患者入院時一般資料以及住院期間常規(guī)化驗(yàn)和影像學(xué)檢查結(jié)果。

1.2.2 標(biāo)本采集及測定 所有患者均在行PCI術(shù)或冠脈造影之前采集靜脈血，另外術(shù)后24 h再次采集靜脈血，標(biāo)本置入肝素鈉抗凝管中，以3000r/min離心10min，取上清分裝2支試管，-80℃冰箱保存待測。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測血漿IL-12水平，試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司，由R&D systems（U.S.）公司生產(chǎn)。操作嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。

1.2.3 冠狀動脈狹窄程度評定 分別由至少兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的心血管介入醫(yī)師判定和分析冠狀動脈狹窄程度及部位，采用Gensini積分系統(tǒng)進(jìn)行定量計算［12］。見表1。

表1 Gensini評分系統(tǒng)

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計量資料采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。正態(tài)分布計量資料的比較采用t檢驗(yàn)和方差分析，非正態(tài)分布計量資料采用秩和檢驗(yàn)，其中兩兩比較采用LSD（滿足方差齊性）或Dunnet T3法（不滿足方差齊性）。計數(shù)資料率的比較用卡方檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析及多元逐步回歸分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組基線臨床特征

4組患者基線時年齡、性別等基本資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與正常組比較，ACS患者合并高血壓比率高，同時有更高的CRP、LDL-C水平，而HDL-C水平、平均左心射血分?jǐn)?shù)（LVEF）相對較低。各組ACS患者冠脈狹窄程度Gensini評分中，STEMI組顯著高于NSTEMI組和UA組。見表2。

2.2 各組患者血漿IL-12水平比較

ACS患者基線時的血漿IL-12水平顯著高于正常對照組［（72.18±15.24）ng/mL］，其中以STEMI組［（215.94±37.91）ng/mL］和 NSTEMI組［（168.67± 31.94）ng/mL］最為明顯。另外，所有ACS患者行PCI術(shù)后24 h，血漿IL-12水平均有不同程度下降，而正常對照組患者冠脈造影后IL-12水平變化不大。見表3、圖1。

表2 各組患者基線臨床特征（±s）

表2 各組患者基線臨床特征（±s）

注：TC：總膽固醇；TG：三酰甘油；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；CRP：C反應(yīng)蛋白；ESR：血沉；LVEF：左心射血分?jǐn)?shù)；LVEDd：左心室舒張末期內(nèi)徑

組別 高血壓?。踤（%）］ 血肌酐（μmol/L） TC（mmol/L） TG（mmol/L） LDL-C（mmol/L） HDL-C（mmol/L）正常組（n=35）UA組（n=58）NSTEMI組（n=32）STEMI組（n=66）P值16（45.71）32（55.17）19（59.37）42（63.64）0.012 67.58±18.78 89.56±15.56 94.28±15.78 95.45±17.49 0.042 4.38±0.86 4.25±1.12 4.56±0.75 4.34±0.95 0.741 1.42±0.65 1.53±0.74 1.41±0.61 1.47±0.84 0.416 2.64±1.01 2.83±0.87 2.74±0.94 2.91±1.23 0.012 1.56±0.41 1.42±0.53 1.38±0.68 1.31±0.74 0.026組別 CRP（mg/L）ESR（mm/h） LVEF（%） LVEDd（cm） Gensini積分（分）正常組（n=35）UA組（n=58）NSTEMI組（n=32）STEMI組（n=66）P值2.75±0.84 4.78±1.12 6.61±1.52 7.74±1..86 0.001 14.42±2.11 16.78±1.86 19.62±2.68 17.48±1.97 0.061 58.14±15.23 51.23±14.85 48.75±11.46 45.30±14.85 0.024 4.55±0.23 4.68±0.65 4.85±0.42 5.23±0.86 0.043 0 28.14±4.12 30.52±3.68 52.26±6.37 0.004

表3 各組患者血漿IL-12水平比較（ng/mL，±s）

表3 各組患者血漿IL-12水平比較（ng/mL，±s）

注：術(shù)前各組與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 術(shù)前 術(shù)后 P值正常組（n=35）UA組（n=58）NSTEMI組（n=32）STEMI組（n=66）72.18±15.24 114.41±24.65*168.67±31.94**215.94±37.91**86.42±21.67 89.87±18.77 103.91±26.76 157.25±34.72 0.386 0.029 0.017 0.006

圖1 各組患者手術(shù)前后血漿IL-12水平比較

2.3 血漿IL-12水平與患者臨床指標(biāo)的相關(guān)分析

對ACS患者臨床有意義相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行Spearman相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)患者血漿IL-12水平與年齡、合并高血壓、TG、TC、LDL-C、CRP、以及Gensini積分呈正相關(guān)，與HDL-C、LVEF水平呈負(fù)相關(guān)。見表4。

表4 患者血漿IL-12水平與臨床指標(biāo)的Spearman相關(guān)性分析

2.4 血漿IL-12為因變量的多元回歸分析

以“2.3”項(xiàng)下結(jié)果中得到的相關(guān)性較高臨床指標(biāo)為自變量，血漿IL-12水平為因變量，進(jìn)行多元逐步回歸分析，結(jié)果顯示IL-12水平與Gensini積分顯著相關(guān)，其他相關(guān)因素還有年齡、CRP、LDL-C水平。見表5。

表5 IL-12為因變量的多元逐步回歸分析

3 討論

ACS是一類臨床上的常見病，發(fā)病急、進(jìn)展快、預(yù)后極差。其具體發(fā)病機(jī)制仍然不是特別清楚，但越來越多研究發(fā)現(xiàn)急性炎性反應(yīng)在ACS動脈粥樣斑塊發(fā)生、發(fā)展以及破裂過程中發(fā)揮極為重要的作用［4，13-14］。既往文獻(xiàn)報道，ACS患者粥樣斑塊以及受累冠脈周圍大量炎癥細(xì)胞浸潤；同時，這些患者循環(huán)血液中炎癥介質(zhì)及炎性細(xì)胞因子如 1、2、6、13、18、23、TNFα、IFN-γ以及CRP、CD40、CD25等均有不同程度的升高［1，5，15-16］。

近年來新發(fā)現(xiàn)的IL-12是白介素家族中典型代表，主要由單核/巨噬細(xì)胞和成熟樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生［17］。在人類免疫網(wǎng)絡(luò)中，IL-12占據(jù)著十分重要的位置，它是一個非常重要的Th1細(xì)胞極化因子，可促進(jìn)Th1細(xì)胞增殖和分化，上調(diào)干擾素-γ的表達(dá)，從而在調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞反應(yīng)中起重要作用，參與到炎癥級聯(lián)反應(yīng)中；另外，IL-12是誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）免疫應(yīng)答的最佳細(xì)胞因子，啟動細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，可殺傷很多組織和細(xì)胞，包括促進(jìn)粥樣斑塊的破裂［7，18］。國內(nèi)外相繼有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)UA患者IL-12水平明顯高于穩(wěn)定心絞痛和正常對照組患者。另外，UA復(fù)雜

病變患者體內(nèi)IL-12水平也高于簡單病變患者，提示IL-12不僅參與ACS發(fā)病過程，而且也有可能與其病變嚴(yán)重程度有關(guān)。

本實(shí)驗(yàn)同樣證實(shí)與對照組（非ACS患者）比較，ACS各組IL-12水平均升高，以STEMI升高最為明顯。在接受PCI術(shù)后24 h，ACS患者IL-12水平出現(xiàn)不同程度下降，但是正常組卻未改變，反映IL-12可能在ACS發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，而冠脈血運(yùn)重建后炎性反應(yīng)出現(xiàn)一定程度降低。進(jìn)一步，以IL-12水平為因變量的多元回歸分析，發(fā)現(xiàn)冠脈嚴(yán)重程度Gensini積分與其顯著相關(guān)，提示嚴(yán)重的冠脈狹窄可能會誘發(fā)更為強(qiáng)烈的炎性反應(yīng)，導(dǎo)致IL-12水平升高。另外，IL-12水平也與炎癥介質(zhì)CRP以及患者年齡和LDL-C水平有關(guān)。CRP是急性時相蛋白，主要參與局部或全身炎性反應(yīng)，在急性炎癥、創(chuàng)傷或冠狀動脈疾病時它會明顯升高，其水平可以作為預(yù)測未來心血管事件的獨(dú)立危險因素［19］。LDL-C一直以來被認(rèn)為是重要的冠心病危險因素，它進(jìn)入血管內(nèi)膜后會發(fā)生氧化修飾后變成氧化修飾低密度脂蛋白 （Ox-LDL），造成內(nèi)皮損傷，促進(jìn)粥樣斑塊的形成，另外它還可以刺激巨噬細(xì)胞，放大炎性反應(yīng)參與斑塊的壞死、破裂過程，從而誘發(fā)ACS［20］。由此可以看出，IL-12可能通過一系列炎癥介質(zhì)的相互作用，參與到炎癥級聯(lián)反應(yīng)過程，從而在ACS發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用，并可在一定程度反映患者疾病嚴(yán)重程度。當(dāng)然，免疫炎性反應(yīng)網(wǎng)絡(luò)非常復(fù)雜，IL-12如何參與到ACS病生理機(jī)制還不是特別清楚，其與疾病預(yù)后之間的關(guān)系還有待進(jìn)一步挖掘。

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Change and correlation analysis of plasma interleukin-12 after PCI in patients of acute coronary syndrome

ZHOU Xuanmin1LIU Meixun1▲LI Xiaoli1DANG Shuyi2
1.Department of Interventional Radiology，Taihe Affiliated Hospital of Hubei Medical College，Hubei Province，Shiyan 442000，China；2.Department of Cardiology，Taihe Affiliated Hospital of Hubei Medical College，Hubei Province，Shiyan 442000，China

Objective To investigate the change of plasma interleukin-12（IL-12）after percutaneous coronary intervention （PCI）in patients of acute coronary syndrome （ACS），and to explore the association between IL-12 and clinical characteristics.Methods 156 ACS patients underwent PCI admitted in Taihe Affiliated Hospital of Hubei Medical College from May 2014 to February 2015 were selected as observation group，while 35 chest pain patients without coronary artery stenosis were selected as control group.Plasm IL-12 level were detected by ELISA before and after PCI（or coronary arteriography）in all patients.In addition，general and clinical characteristics of patients were collected and analysed carefully，including accumulated points of Gensini abut vessel lesions.Results Compared with control group，the peri-operative plasm level of IL-12 was significantly higher in patients with ACS.Particularly，STEMI group had the highest IL-12 level［（215.94±37.91）ng/mL］，followed by NSTEMI group［（168.67±31.94）ng/mL］.After PCI，IL-12 level was decreased in some degrees among ACS groups.Multi regression analysis revealed plasm IL-12 level was correlated with patients's age，CRP，LDL-C level，and most importantly，accumulated points of Gensini.Conclusion Plasm IL-12 level is significantly higher in ACS patiens，and PCI can alleviate，which suggests IL-12 may act as an important inflammatory mediator in the pathogenesis and progression of ACS.In some way，it can have some effects on the reflection of disease severity.

Acute coronary syndrome；Percutaneous coronary intervention；Interleukin-12；Gensini score；Multi regression analysis

R541.4

A

1673-7210（2016）06（a）-0019-04

2016-02-05本文編輯：趙魯楓）

湖北省自然科學(xué)基金計劃項(xiàng)目（2011CDC049）；湖北省十堰市科學(xué)技術(shù)研究與開發(fā)項(xiàng)目（14Y17）。

周選民（1971.6-），男，副教授，副主任技師；研究方向：介入放射技術(shù)在冠心病中的應(yīng)用。

▲通訊作者