陳瀛川　周建東（江蘇省如東縣掘港畜牧獸醫(yī)站　226499）

銀黃連翹散可溶性粉在靶動(dòng)物雞中的安全性研究

陳瀛川周建東
（江蘇省如東縣掘港畜牧獸醫(yī)站226499）

銀黃連翹可溶性粉是用于防治對(duì)雞傳染性支氣管炎的新中獸藥，為了考察其對(duì)靶動(dòng)物雞的安全性，選用綠殼蛋雞一日齡雛公雞120只，正常飼喂8天，從9日齡開(kāi)始時(shí)隨機(jī)分成4組，并記錄其體重。4組分別為空白對(duì)照（不給藥組）、組銀黃連翹散可溶性粉低劑量組、銀黃連翹散中劑量組和銀黃連翹散高劑量組。試驗(yàn)時(shí)，銀黃連翹可溶性粉分別按4、12、20g/L劑量混飲給藥，連續(xù)5d，自由采食及飲水。給藥后每天觀察雛雞的臨床癥狀，即精神、食欲、飲水、排便、運(yùn)動(dòng)和毒副反映，連續(xù)觀察12天，試驗(yàn)結(jié)束稱重，統(tǒng)計(jì)各組的日均增重、日均采食量、料重比；并采血進(jìn)行紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞總數(shù)和白細(xì)胞分類、總蛋白、白蛋白和血清生化指標(biāo)（AST、ALT、ALP、TG、TC、BUN、UA）的檢測(cè)；剖檢觀察心、肝、脾、肺、腎、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等器官的組織病理變化和分別稱量并統(tǒng)計(jì)臟器指數(shù)。結(jié)果顯示：與空白對(duì)照組相比，銀黃連翹散可溶性粉的3個(gè)劑量組對(duì)靶動(dòng)物雞的臨床癥狀、血液學(xué)、血液生化學(xué)、增重和臟器系數(shù)等指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05）。表明該藥對(duì)靶動(dòng)物雞具有較高的安全性。

銀黃連翹散可溶性粉雞靶動(dòng)物安全性

銀黃連翹散對(duì)傳染性支氣管炎有很強(qiáng)的預(yù)防作用。由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)純中藥新制劑，由金銀花、連翹、黃芩、蒲公英和桔梗提取制成。其作用有清熱解毒，涼血利咽；治療雞傳染性支氣管炎病毒引起的呼吸道疾病。以低劑量組即臨床推薦劑量銀黃連翹散可溶性粉4g/L、中劑量組銀黃連翹散可溶性粉12g/L和高劑量組銀黃連翹散可溶性粉20g/L混飲給藥，連續(xù)給藥5d，連續(xù)觀察12d，以觀察給藥后靶動(dòng)物雞的臨床癥狀、各臟器系數(shù)、血液學(xué)、血液生化學(xué)和臟器肉眼臨床變化，以提供有關(guān)銀黃連翹散可溶性粉在靶動(dòng)物雞的臨床血液學(xué)、血液生化學(xué)、臨床臟器病理變化方面的數(shù)據(jù)，為其臨床應(yīng)用的安全性評(píng)價(jià)提供數(shù)據(jù)資料。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)藥物銀黃連翹散可溶性粉：由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)研發(fā)，山東信得科技股份有限公司2014年4月6號(hào)生產(chǎn)，批號(hào)20140406。其成分有金銀花、黃芩、連翹、桔梗、蒲公英。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物1日齡綠殼蛋雞公雛，試驗(yàn)前按常規(guī)飼養(yǎng)，喂不含任何藥物的全價(jià)雛雞飼料，自由采食及飲水；5日齡斷喙，7日齡用新城疫LaSota苗滴鼻點(diǎn)眼，1羽份/只，飼養(yǎng)至9日齡用于試驗(yàn)。

1.3試驗(yàn)周期試驗(yàn)從2015年11月15日至12月06日，試驗(yàn)周期為20d。

1.4試驗(yàn)方法（1）分組及給藥：取9日齡健康雛雞120只，稱重后隨機(jī)分成4組（見(jiàn)圖1），每組30只，分別為空白對(duì)照組（不給藥組）、銀黃連翹散可溶性粉低劑量組，銀黃連翹散中劑量組和銀黃連翹散高劑量組（見(jiàn)表1）。試驗(yàn)時(shí)，銀黃連翹可溶性粉分別按4、12、20g/L劑量混飲給藥，喂藥連續(xù)5d，自由采食及飲水。（2）臨床觀察：每組試驗(yàn)雞還需連續(xù)觀察12d。在試驗(yàn)期內(nèi)，由實(shí)驗(yàn)參與人員進(jìn)行觀察，記錄靶動(dòng)物雞對(duì)藥物不同劑量產(chǎn)生的反應(yīng)，即精神、食欲、飲水、排便、運(yùn)動(dòng)和毒副反映。試驗(yàn)前和試驗(yàn)結(jié)束后各測(cè)定1次體重，據(jù)此計(jì)算日均增重情況等；觀察雞的精神狀況及弄濕墊料及拉稀、飲食欲減退及毒副反應(yīng)。（3）增重及臟器系數(shù)變化：在試驗(yàn)前后對(duì)各組試驗(yàn)雞稱重，計(jì)算出日均增重。試驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)撲殺10只雞，取其中六6只剖檢觀察心、肝、脾、肺、腎、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等臟器組織病理變化和分別稱量心、肝、脾、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等臟器重量，統(tǒng)計(jì)臟器指數(shù)（臟器濕重/活體重×100）。（4）血液學(xué)檢查：用負(fù)壓采血管對(duì)試驗(yàn)雞采集血樣（全血）適量，用肝素抗凝，采用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行血液學(xué)常規(guī)檢測(cè)。檢測(cè)的血液學(xué)參數(shù)有：紅細(xì)胞數(shù)量、白細(xì)胞數(shù)量、淋巴細(xì)胞數(shù)量、異嗜性粒細(xì)胞數(shù)量、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)量、單核細(xì)胞數(shù)量、淋巴細(xì)胞百分比、異嗜性粒細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、嗜酸性粒細(xì)胞百分比、嗜堿性粒細(xì)胞百分比、血紅蛋白含量。（5）血液生化學(xué)檢查：在試驗(yàn)結(jié)束，所有試驗(yàn)雞采集血樣（全血）適量，待血液凝固后吸取血清樣品，采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行血液生化學(xué)檢查。檢測(cè)的血液生化學(xué)參數(shù)有：谷丙轉(zhuǎn)移酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、白球比（A/G）、尿素（BUN）、尿酸（UA）、總膽固醇（Chol）、甘油三酯（TG）。（6）臟器臨床肉眼檢查：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組隨機(jī)撲殺10只試驗(yàn)雞進(jìn)行組織學(xué)檢查，對(duì)心、肝、脾、肺、腎、腺胃、腸、睪丸、法氏囊等臟器進(jìn)行常規(guī)檢查，根據(jù)出現(xiàn)的毒性情況決定是否對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步組織病理學(xué)檢查。（7）數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)以±SD表示，用SPSS19.0應(yīng)用軟件進(jìn)行組間數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)。采用t檢驗(yàn)比較試驗(yàn)組與對(duì)照組間均增重、料肉比（飼料利用率）、血液學(xué)和血液生化學(xué)等各項(xiàng)指標(biāo)的顯著性差異。

表1　試驗(yàn)雞給藥途徑及分組情況

2　結(jié)果與分析

2.1一般臨床觀察整個(gè)試驗(yàn)期間，空白對(duì)照組（不給藥組）、銀黃連翹散可溶性粉低劑量組，銀黃連翹散中劑量組和銀黃連翹散高劑量組中所有的靶動(dòng)物雞健康狀況良好，活動(dòng)、呼吸、飲水和采食均正常，在試驗(yàn)期間未觀察到任何臨床病理癥狀，試驗(yàn)期間各組試驗(yàn)雞均無(wú)死亡記錄。

2.2增重與飼料利用率根據(jù)試驗(yàn)前后各組試驗(yàn)雞的重量計(jì)算出平均值和日均增重，各組之間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（t檢驗(yàn)），結(jié)果表明各劑量組與對(duì)照組平均增重相比（見(jiàn)表2），體重稍有增加，均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，各劑量組料重比明顯下降，飼料利用率增加。表明銀黃連翹可溶性粉在一定劑量范圍內(nèi)，隨著劑量的增加，可改善飼料的利用率。

表2　試驗(yàn)期各組雞的日均增重（n=30）　　　　?。╣）

2.3臟器系數(shù)變化情況試驗(yàn)結(jié)束后每組隨機(jī)撲殺10只雞，取心臟等臟器稱重并計(jì)算臟器系數(shù)。對(duì)心臟等臟器系數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（t檢驗(yàn)），結(jié)果顯示與對(duì)照組相比，各劑量組試驗(yàn)雞的心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、腸道指數(shù)、腺胃指數(shù)、肺臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)、睪丸指數(shù)均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。這可能是因?yàn)楦鹘o藥組試驗(yàn)雞體重相對(duì)較大而引起的，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　各組試驗(yàn)雞的臟器系數(shù)（n=10）

2.4血液常規(guī)指標(biāo)分析靶動(dòng)物雞在使用銀黃連翹散可溶性粉不同劑量組血液學(xué)檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4。從表4中可以看出，空白對(duì)照組和各給藥組的紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性白細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、血紅蛋白濃度和血紅蛋白百分比均在正常范圍內(nèi)。但與對(duì)照組相比，低劑量組的紅細(xì)胞數(shù)顯著升高（P＜0.05）；低劑量組和高劑量組的白細(xì)胞總數(shù)則明顯低于中級(jí)中劑量組與對(duì)照組（P＜0.05）。其余指標(biāo)則無(wú)顯著性差異，表明不同劑量的藥物對(duì)血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)的影響較小。

表4　各組試驗(yàn)雞的血液學(xué)指標(biāo)（n=30）

2.5血液生化學(xué)檢測(cè)結(jié)果血液生化學(xué)檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可知，與對(duì)照組相比各劑量組試驗(yàn)雞的血液生化指標(biāo)均無(wú)顯著性差異（P＞0.05），表明銀黃連翹散可溶性粉對(duì)靶動(dòng)物雞的肝功能、腎功能、脂代謝、蛋白代謝均無(wú)不良影響。

表5　各組實(shí)驗(yàn)雞的血液生化指標(biāo)（n=10）　　?。╣/L）

2.6臟器臨床肉眼檢查結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將所有把動(dòng)物雞撲殺。對(duì)已經(jīng)剖檢的10只雞進(jìn)行檢查，對(duì)各組試驗(yàn)雞的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腺胃、腸道（十二指腸至直腸）、睪丸、法氏囊等觀察是否有病變，發(fā)現(xiàn)各個(gè)劑量組的臟器大小正常；胸腔、腹腔、心包無(wú)積液與粘連；肝脾腎色澤均勻，表面無(wú)腫脹及包塊；腺胃及腸道無(wú)出血點(diǎn)及其他病變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各劑量組對(duì)各器官并無(wú)毒害用。

3　討論

3.1銀黃連翹散的藥性銀黃連翹散可溶性粉屬于“八法”中的清法，稱為清熱藥，獸醫(yī)臨診最為常用［7］。清熱藥性屬寒涼，具有清熱解毒，涼血利咽等功能，主要用于高熱、熱痢、濕熱黃疸、熱毒瘡腫、熱性出血及暑熱等里熱病證，對(duì)于雞傳染性支氣管炎病毒引起的呼吸道疾病也有一定的療效［8］。銀黃連翹散可溶性粉是由金銀花，黃芩，連翹，桔梗，黃花地丁組成。集金銀花的抗病原微生物、抗炎、解熱、保肝、抗生育、止血、免疫調(diào)節(jié)、中樞興奮等功能；黃芩的抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜、抗炎、抗過(guò)敏、抗氧化；連翹的抗腫瘤、抗病毒、抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌、保肝護(hù)心、抗內(nèi)毒素、降壓、鎮(zhèn)吐止吐；桔梗的抗炎、祛痰、解熱鎮(zhèn)痛、擴(kuò)張血管、抗過(guò)敏；蒲公英的抗菌、抗腫瘤、抗氧化、免疫促進(jìn)等一系列功效集一體，組成的中藥適用于預(yù)防雞的病毒性傳染性支氣管炎［9］。目前預(yù)防IB的主要方法是接種疫苗，但由于疫苗的高強(qiáng)度、大范圍使用，IBV的毒力和抗原性發(fā)生了變異，使得疫苗接種難以取得理想免疫效果，有時(shí)甚至誘使該病發(fā)生。因此尋找新的藥物對(duì)于IB的防治具有重要的意義。

3.2試驗(yàn)?zāi)康谋驹囼?yàn)的目的是將銀黃連翹散可溶性粉不同劑量加水混合飲用，測(cè)試其對(duì)靶動(dòng)物雞的安全性。本試驗(yàn)測(cè)定了試驗(yàn)雞的健康、采食狀況；增重、各臟器指數(shù)；血液學(xué)、血液生化學(xué)指標(biāo)。銀黃連翹散可溶性粉低劑量組（4g/L）、銀黃連翹散中劑量組（12g/L）和銀黃連翹散高劑量組（20g/L）試驗(yàn)雞的增重、血液學(xué)、血液生化學(xué)等指標(biāo)參數(shù)與空白對(duì)照組（不給藥組）相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05），剖檢發(fā)現(xiàn)臟器均無(wú)異常變化。結(jié)果表明銀黃連翹散可溶性粉的安全適用范圍很大，使用中劑量對(duì)預(yù)防傳染性支氣管炎是最安全的。這與劉芳研究用“百呼清”可有效治療自然感染的雞傳染性支氣管炎，病雞治愈率都在99%以上有相似的結(jié)果，對(duì)IBV具有一定保護(hù)作用［10］。不同濃度的藥液毒傳染性支氣管炎病毒對(duì)感染雛雞均有保護(hù)作用。王永彬等用板黃口服液在靶動(dòng)物雞中的安全性研究，試驗(yàn)結(jié)果表明，板黃口服液在預(yù)防雞呼吸道疾病、提高機(jī)體免疫力的同時(shí)，也證明10倍推薦劑量（10%）的板黃口服液對(duì)靶動(dòng)物雞是安全的［11］。同樣是用于于呼吸道疾病，可見(jiàn)銀黃連翹散可溶性粉相對(duì)而言安全范圍廣。

4　總結(jié)

本試驗(yàn)分析了不同濃度的銀黃連翹散對(duì)靶動(dòng)物雞的臨床癥狀、血液學(xué)、血液生化學(xué)、各臟器系數(shù)和組織病理學(xué)指標(biāo)變化的影響，結(jié)果顯示與空白對(duì)照組相比，銀黃連翹散可溶性粉的不同劑量組對(duì)靶動(dòng)物雞的臨床癥狀、血液學(xué)、血液生化學(xué)、增重和臟器系數(shù)等指標(biāo)差異均不顯著（P＞0.05）。表明該藥對(duì)靶動(dòng)物雞具有較高的安全性。這對(duì)于抵抗IBV有重大意義。

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1007-1733（2016）08-0005-03

2016-05-12）