■ 卓北臣（湖南省慈利縣畜牧水產(chǎn)局 ）

洞庭鯰魚(yú)春季繁殖生物學(xué)特征研究

■ 卓北臣（湖南省慈利縣畜牧水產(chǎn)局 ）

國(guó)內(nèi)對(duì)于鯰魚(yú)的生物學(xué)特性研究的報(bào)道較少，僅見(jiàn)有湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院的龍昱、劉少軍對(duì)本地鯰魚(yú)生物學(xué)特性及性腺顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究和向梟等的小口鯰的生物學(xué)特性及養(yǎng)殖技術(shù)的報(bào)道，另外還有華南師范大學(xué)生物系肖智對(duì)鯰繁殖習(xí)性的研究。因此，為了能進(jìn)一步的了解鯰魚(yú)的各項(xiàng)生物學(xué)特性，特別是洞庭湖常德湖區(qū)的野生鯰魚(yú)的生物學(xué)特性，探索人工養(yǎng)殖的方法，帶動(dòng)當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)具有很大的意義。

洞庭湖位于中國(guó)湖南省北部，是中國(guó)第3大湖，僅次于青海湖、鄱陽(yáng)湖，也是中國(guó)第2大淡水湖，是長(zhǎng)江中游重要吞吐湖泊。北有松滋、太平、藕池、調(diào)弦4口（1958年堵塞調(diào)弦口）引江水來(lái)匯，南和西面有湘江、資水、沅江、澧水注入。水資源豐富水質(zhì)比較清潔，富營(yíng)養(yǎng)化不明顯，且在常德江段水流平緩，野生魚(yú)類(lèi)品種和水生植物種類(lèi)繁多，為鯰魚(yú)的生長(zhǎng)和繁殖提供了非常好的自然環(huán)境，因而洞庭湖流域用于開(kāi)發(fā)鯰魚(yú)養(yǎng)殖的價(jià)值很高。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)洞庭湖常德湖區(qū)鯰魚(yú)的3、4月繁殖生物學(xué)研究，以期為鯰魚(yú)的人工繁殖及增養(yǎng)殖等提供一些基礎(chǔ)理論資料。

圖1 試驗(yàn)野生鯰魚(yú)的選購(gòu)

圖2 毀髓

圖3 解剖

圖4 年齡測(cè)定

圖5 洞庭鯰魚(yú)雌雄外形比較

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣品的采集

生物學(xué)樣本（洞庭湖區(qū)野生鯰魚(yú)）共計(jì)60尾 （2015年3月和4月各30尾），編號(hào)從1號(hào)到60號(hào)，其中前30號(hào)為3月樣品，后30號(hào)為4月樣品。采樣時(shí)在健康活潑者（狀態(tài)正常，個(gè)體大小相近，體色烏黑均勻，體表完好無(wú)損，活力較好，健康無(wú)?。┲须S機(jī)選購(gòu)，性別數(shù)量不定。

1.2 試驗(yàn)器材及用品準(zhǔn)備

解剖器材：解剖盤(pán)、解剖剪、解剖刀、毀髓針、鑷子、骨剪；

測(cè)量器材：體視顯微鏡、放大鏡、直尺、電子天平；

藥品：生理鹽水、0.5%～2%KOH溶液、乳酸等；

其他：水箱、增氧器、干抹布、培養(yǎng)皿、玻璃分針等。

1.3 方法

1.3.1 樣本全部進(jìn)行生物學(xué)解剖和測(cè)量

樣本為新鮮解剖，由于鯰魚(yú)體表富含粘液易手滑，且胸鰭第一鰭條已骨化易傷手；為了減少試驗(yàn)過(guò)程中意外傷害的發(fā)生，我們應(yīng)用干燥抹布抓住頭頸后部?jī)蓚?cè)顳窩處以減少試驗(yàn)過(guò)程中由于魚(yú)身擺動(dòng)而刺傷自己。

解剖時(shí)自肛門(mén)處沿腹中線向頭部方向解剖。其時(shí)應(yīng)注意解剖剪尖微微向上挑起解剖，以免劃破生殖器官及其他內(nèi)臟器官。

需進(jìn)行形態(tài)測(cè)量的基本參數(shù)及其測(cè)量要點(diǎn)如下：

體長(zhǎng)——指自下顎端至尾鰭基部的長(zhǎng)度；

體高——指軀干部最高處的垂直高；

頭長(zhǎng)——指由吻端至鰓蓋骨后緣（不包括鰓蓋膜）的長(zhǎng)度；

吻長(zhǎng)——指由上顎前端至眼前緣的長(zhǎng)度；

腸長(zhǎng)——指由幽門(mén)至肛門(mén)的長(zhǎng)度；

總重——指整條魚(yú)的體重；

去臟重——指去除所有內(nèi)臟器官之后的凈重。

形態(tài)測(cè)量采用傳統(tǒng)的測(cè)量方法：取鮮魚(yú)樣，用電子天平稱重（精確到0.1g）；用直尺測(cè)量體長(zhǎng)、體高、頭長(zhǎng)、口寬等可量性狀（精確到0.1cm）。

1.3.2 樣品年齡測(cè)定

洞庭湖區(qū)野生鯰魚(yú)通體無(wú)磷，年齡通過(guò)脊椎骨來(lái)鑒定。

解剖鯰魚(yú)時(shí)取靠近腦顱的椎體4～5節(jié)。取出后可放在堿液（0.5%～2%KOH溶液）中適度浸泡，以除去軟組織，再放入酒精或乙醚中脫脂后干燥；或直接自然法風(fēng)干后用解剖針或其他尖銳物體清除脊椎內(nèi)的膠質(zhì)；本試驗(yàn)采用后者。年齡鑒別的方法也有兩種，一種是將干燥后的椎骨放在蠟盤(pán)粒，關(guān)節(jié)臼朝上，在放大鏡下觀察椎體中央斜凹面上的輪紋；另一種則在乳酸浸泡后在體視鏡下觀察椎體斜凹面上輪紋。椎體斜凹面上的寬層和窄層交替排列，呈同心圓狀。生長(zhǎng)旺季形成白色寬紋，生長(zhǎng)緩慢時(shí)形成暗色窄紋。通常將窄紋視作年輪。

魚(yú)類(lèi)年齡的名稱與年齡組的劃分參照殷名稱編著的魚(yú)類(lèi)生態(tài)學(xué)。確定魚(yú)類(lèi)年齡的名稱要根據(jù)硬組織上年輪的數(shù)目、最后年輪的位置及采集年齡資料的季節(jié)。通常把出生時(shí)間相同的魚(yú)歸并為1個(gè)年齡組，以便于統(tǒng)計(jì)分析。我國(guó)對(duì)淡水魚(yú)類(lèi)年齡組的劃分，通常采用下列方法：

0齡組：指春夏季出生后尚未越冬的當(dāng)年魚(yú)，硬組織上尚無(wú)年輪。

I齡組：指已越過(guò)第1個(gè)冬季的幼魚(yú)，硬組織上有1個(gè)年輪，包括一冬齡魚(yú)和二夏齡魚(yú)。一冬齡魚(yú)指過(guò)冬后以至春季的魚(yú)，硬組織邊緣已形成第1個(gè)年輪，或此輪尚在形成中。魚(yú)正滿1周歲或尚不足1年。以“1”表示。二夏齡魚(yú)指過(guò)冬后又經(jīng)歷了1個(gè)生長(zhǎng)季節(jié)，在秋季以至冬初測(cè)定的魚(yú)，硬組織上只有1個(gè)年輪，從年輪至邊緣有不少環(huán)片，這是第2個(gè)生長(zhǎng)期所形成的。以“1”表示。

表1 洞庭湖野生鯰魚(yú)繁殖群體3、4月體長(zhǎng)組成

表2 洞庭湖野生鯰魚(yú)繁殖群體3-4月體重組成

表3 3、4月洞庭湖野生鯰魚(yú)卵巢發(fā)育狀況懷卵量情況統(tǒng)計(jì)結(jié)果

表4 洞庭湖野生鯰魚(yú)卵巢成熟系數(shù)春季變化情況

Ⅱ齡組：指已越過(guò)第2個(gè)冬季的魚(yú)，硬組織上有2個(gè)年輪，包括： 2冬齡魚(yú)：指已越過(guò)第2個(gè)冬季以至第3年春季的魚(yú)，硬組織邊緣已形成第2個(gè)年輪，或尚在形成中。魚(yú)正滿2周歲或尚不足2整年。以“2”表示；3夏齡魚(yú)：指越過(guò)第2個(gè)冬季后又經(jīng)歷了第3個(gè)生長(zhǎng)季節(jié)，在秋季以至冬初測(cè)定的魚(yú)，硬組織上有2個(gè)年輪，在第2個(gè)年輪至邊緣有不少環(huán)片，為第3年生長(zhǎng)所形成。以“2”表示。

其余年齡組以此類(lèi)推。

1.3.3 性別鑒定

魚(yú)體尾部有明顯分叉的為雄性；沒(méi)有很明顯則為雌性。鑒別時(shí)應(yīng)注意分叉是否為天然。

1.3.4 性腺發(fā)育狀況的評(píng)價(jià)

通過(guò)解剖試驗(yàn)，取野生鯰魚(yú)的精巢或卵巢稱重。如若是雌性鯰魚(yú)，還要對(duì)卵巢所處時(shí)期，卵粒數(shù)和發(fā)育情況進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)。即在卵巢的中心部位去取少量卵粒用電子天平稱重（精確到0.01g），以此來(lái)估算每尾魚(yú)的整個(gè)卵巢的卵粒數(shù)，然后再在體視鏡下對(duì)其分散計(jì)數(shù)，并隨機(jī)測(cè)量10粒卵粒的直徑。統(tǒng)計(jì)卵巢懷卵量評(píng)估生殖力，統(tǒng)計(jì)方法是取1g卵巢以5%中性福爾馬林固定，記數(shù)所有開(kāi)始沉積卵黃的卵粒；1克卵巢懷卵數(shù)乘以性腺重獲得絕對(duì)懷卵量；相對(duì)懷卵量通過(guò)絕對(duì)懷卵量/去臟重（g）求得；成熟系數(shù)公式為：成熟系數(shù)（GSI）=（卵巢重g/去臟重g）×100%。

1.3.5 卵徑的測(cè)量

在體視顯微鏡下進(jìn)行測(cè)量。在每次進(jìn)行測(cè)量前必須進(jìn)行校準(zhǔn)。

測(cè)定前先用鏡臺(tái)測(cè)微尺校正標(biāo)定目鏡測(cè)微尺的刻度。

目鏡測(cè)微尺是1塊圓形玻片，在玻片中央把5mm長(zhǎng)度刻成50等份，或把10mm長(zhǎng)度刻成100等份。測(cè)量時(shí)，將其放在接目鏡中的隔板上（此處正好與物鏡放大的中間像重疊）來(lái)測(cè)量經(jīng)顯微鏡放大后的細(xì)胞物象。由于不同目鏡、物鏡組合的放大倍數(shù)不相同，目鏡測(cè)微尺每格實(shí)際表示的長(zhǎng)度也不一樣，因此目鏡測(cè)微尺測(cè)量微生物大小時(shí)須先用置于鏡臺(tái)上的鏡臺(tái)測(cè)微尺校正，以求出在一定放大倍數(shù)下，目鏡測(cè)微尺每小格所代表的相對(duì)長(zhǎng)度。

鏡臺(tái)測(cè)微尺是中央部分刻有精確等分線的載玻片，一般將lmm等份為100格，每格長(zhǎng)l0μm（即0.0lmm），是專(zhuān)門(mén)用來(lái)校正目鏡測(cè)微尺的。

目鏡測(cè)微尺的校正：把目鏡的上透鏡旋下，將目鏡測(cè)微尺的刻度朝下輕輕地裝入目鏡的隔板上，把鏡臺(tái)測(cè)微尺置于載物臺(tái)上，刻度朝上。先用低倍鏡觀察，對(duì)準(zhǔn)焦距，視野中看清鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡，使目鏡測(cè)微尺與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行，移動(dòng)推動(dòng)器，使兩尺重疊，再使兩尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔細(xì)尋找兩尺第2個(gè)完全重合的刻度，計(jì)數(shù)兩重合刻度之間目鏡測(cè)微尺的格數(shù)和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。因?yàn)殓R臺(tái)測(cè)微尺的刻度每格長(zhǎng)l0μm，所以由下列公式可以算出目鏡測(cè)微尺每格所代表的長(zhǎng)度。例如，目鏡測(cè)微尺5小格正好與鏡臺(tái)測(cè)微尺5小格重疊，已知鏡臺(tái)測(cè)微尺每小格為l0μm，則目鏡測(cè)微尺上每小格長(zhǎng)度為=5×10μm/5＝10μm。用同法分別校正在高倍鏡下和油鏡下目鏡測(cè)微尺每小格所代表的長(zhǎng)度。

由于不同顯微鏡及附件的放大倍數(shù)不同，因此校正目鏡測(cè)微尺必須針對(duì)特定的顯微鏡和附件（特定的物鏡、目鏡、鏡筒長(zhǎng)度）進(jìn)行，而且只能在特定情況下重復(fù)使用，當(dāng)更換不同放大倍數(shù)的目鏡或物鏡時(shí)，必須重新校正目鏡測(cè)微尺每1格所代表的長(zhǎng)度。

本試驗(yàn)采用從鯰魚(yú)卵巢的中心部位取的材料置載玻片上，滴加1滴生理鹽水，然后用玻璃分針等尖細(xì)的工具將卵粒均勻分開(kāi)，然后隨機(jī)測(cè)量其中10粒，再按照已經(jīng)校正的比例尺度換算。

表5 各年齡洞庭湖野生鯰魚(yú)雌魚(yú)對(duì)繁殖的貢獻(xiàn)情況

表6 洞庭湖野生鯰魚(yú)3、4月繁殖群體性比情況研究表

2 結(jié)果與分析

2.1 洞庭湖野生鯰魚(yú)形態(tài)特征

前部平扁， 后部側(cè)扁。 頭扁平，頭寬大于頭高。吻寬且縱扁、 圓鈍，口亞上位、 寬大，口裂呈弧形，伸達(dá)眼前緣下端。下頜稍突出于上頜；上下頜具絨毛狀細(xì)齒，形成弧形寬齒帶，眼小，側(cè)上位；眼間隔較寬且平。前后鼻孔相隔較遠(yuǎn)；前鼻孔呈短管狀，近吻端；后鼻孔圓形，位于眼前上方。須兩對(duì)；上頜須長(zhǎng)，后伸超過(guò)胸鰭起點(diǎn)，可至鰭條末端；下頜須較短，后端超過(guò)眼后緣。 鰓蓋膜不與鰓峽相連。魚(yú)體全身裸露，無(wú)鱗；皮膚富含粘液，側(cè)線完全且平直。 背鰭短小， 約位于體前1/3處。 腹鰭起點(diǎn)垂直上方之前，無(wú)硬刺，其起點(diǎn)距吻端較距尾鰭基部近。胸鰭圓扇形， 較小，側(cè)下位，骨質(zhì)硬刺后緣有鋸齒，后伸超過(guò)背鰭基后端，但不及腹鰭。腹鰭小，起點(diǎn)位于背鰭基后端垂直下方之后， 末端超過(guò)臀鰭起點(diǎn)。臀鰭基部很長(zhǎng)， 后端與尾鰭相連。無(wú)脂鰭。尾鰭微內(nèi)凹，上、下葉等長(zhǎng)。 肛門(mén)距臀鰭起點(diǎn)較腹鰭基后端近。體背面及側(cè)面一般為褐灰色或灰黑色， 腹面灰白色，背鰭、臀鰭、尾鰭灰黑色， 胸鰭、腹鰭色淺。體側(cè)有不規(guī)則斑紋。

2.2 洞庭湖野生鯰魚(yú)的繁殖習(xí)性

洞庭湖野生鯰魚(yú)1 齡即有部分達(dá)性成熟， 2 齡全部性成熟。自然環(huán)境中， 其繁殖旺盛季節(jié)為5～7月，根據(jù)卵母細(xì)胞的發(fā)育情況、卵徑的分布及人工催產(chǎn)的試驗(yàn)結(jié)果等， 可將其產(chǎn)卵類(lèi)型定為同步成熟分批產(chǎn)出型。

雌魚(yú)卵巢為一對(duì)長(zhǎng)圓形的囊，未成熟的卵粒為淺黃色，而成熟卵粒為草綠色。懷卵量一般為數(shù)千至萬(wàn)粒，魚(yú)卵有粘性，一般附在水草、礁石上發(fā)育。產(chǎn)卵期一般在4～6月。

2.3 繁殖群體組成

2.3.1 洞庭湖野生鯰魚(yú)繁殖群體年齡組成

洞庭湖野生鯰魚(yú)1齡即有部分達(dá)性成熟，2齡全部性成熟。本次參與試驗(yàn)的多為1～3齡。

2.3.2 洞庭湖野生鯰魚(yú)3～4月繁殖群體體長(zhǎng)、體重組成

洞庭湖野生鯰魚(yú)繁殖群體3～4月的體長(zhǎng)分布范圍為14.80～44.00cm，主要分布于25.00～40.00cm（88.33）.中雌性的主要分布于25.00～40.00cm（90.25%），雄性也主要分布于25.00～40.00cm（85.72%） ，雄性個(gè)體沒(méi)有體長(zhǎng)超過(guò)40.00cm的。

洞庭湖野生鯰魚(yú)繁殖群體3～4月體重分布范圍為55.0～710.0g。其中雌性主要分布于150～450g（76.9%） ，雄性主要分布于150～350g（61.9%）。450g以上的個(gè)體主要由雌性構(gòu)成。雌性平均體重比雄性高70g左右（表2）。

2.3.3 洞庭湖野生鯰魚(yú)3、4月懷卵量與卵巢成熟系數(shù)

洞庭湖野生鯰魚(yú)的卵巢成對(duì)位于鰾和腎臟的腹面，呈長(zhǎng)圓形的囊狀.

由表3可知，3、4月洞庭野生鯰魚(yú)絕對(duì)懷卵量平均值分別為32,161粒和38,923粒左右，4月較3月有所增加但不很明顯。相對(duì)懷卵量平均值分別為133粒和118粒。

按卵細(xì)胞的成熟等級(jí)或時(shí)相，卵巢可分為6個(gè)時(shí)期.第Ⅲ期卵巢淺黃綠色，是形成卵黃的過(guò)渡時(shí)期-；第Ⅳ期4卵巢黃色略帶綠色，內(nèi)被卵黃顆粒填充。如表4洞庭野生鯰魚(yú)卵巢成熟系數(shù)春季變化情況。

3月卵巢發(fā)育以Ⅲ、Ⅳ為主，Ⅲ期多于Ⅳ期；4月仍以Ⅲ、Ⅳ期為主，Ⅲ期少于Ⅳ期，有Ⅴ期出現(xiàn)。3、4月洞庭野生鯰魚(yú)成熟系數(shù)在0.48～7.60之間變化，4月較3月成熟系數(shù)整體上有所提高。綜上可以推斷，4月的洞庭鯰魚(yú)即將進(jìn)入繁殖期。

2.3.4 洞庭湖野生鯰魚(yú)3、4月份卵徑

對(duì)鯰魚(yú)卵粒直徑測(cè)量的兩次試驗(yàn)結(jié)果表明，4月試驗(yàn)中少數(shù)鯰魚(yú)的卵粒直徑較3月試驗(yàn)大外，大部分都在1,000μm以下，而3月試驗(yàn)的卵粒直徑均在這個(gè)水平。因而從這點(diǎn)也可以推斷洞庭湖野生鯰魚(yú)在4月還未進(jìn)入排卵期，繁殖期大概在5月，4月不適合人工藥物催產(chǎn)。

3 討論

3.1 關(guān)于洞庭湖野生鯰魚(yú)最小性成熟個(gè)體

肖智在鯰繁殖習(xí)性的研究一文中指出：鯰1齡即可達(dá)性成熟，但只是其中部分生長(zhǎng)較快的個(gè)體，約占群體的50%左右。2齡個(gè)體全部性成熟。成熟最小型為: 雌魚(yú)體長(zhǎng)2,214cm，體質(zhì)量51g；雄魚(yú)體長(zhǎng)1,718cm，體質(zhì)量34g。此次的試驗(yàn)結(jié)果中成熟最小型為: 雌魚(yú)體長(zhǎng)19.20cm，體質(zhì)量125.00g；雄魚(yú)體長(zhǎng)14.80cm，體質(zhì)量55.00g；均為1齡魚(yú)。由此推斷，雌魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育較雄魚(yú)快。

3.2 洞庭湖野生鯰魚(yú)的年齡群體對(duì)種群繁殖的貢獻(xiàn)情況

由表可知，此次樣品1、2、3齡鯰魚(yú)中，以2、3齡鯰魚(yú)對(duì)繁殖的貢獻(xiàn)為主，且貢獻(xiàn)率與魚(yú)齡有正向相關(guān)性。據(jù)此可以推斷鯰魚(yú)雌魚(yú)年齡與其對(duì)種群繁殖的貢獻(xiàn)率在一定范圍內(nèi)正相關(guān)，但由于此次參加試驗(yàn)的樣品無(wú)4齡及以上，故而實(shí)際情況有待進(jìn)一步擴(kuò)大研究調(diào)查考證。

3.3 關(guān)于洞庭湖野生鯰的性比

如表6，3月性別比例為雌性∶雄性=20∶10=2.0；4月性別比例為雌性∶雄性=19∶11=1.7。兩次試驗(yàn)總性別比例為雌性：雄性=39∶21=1.8。兩次試驗(yàn)結(jié)果表明，隨機(jī)購(gòu)買(mǎi)的洞庭湖野生鯰魚(yú)的雌性鯰魚(yú)遠(yuǎn)比肖智鯰繁殖習(xí)性的研究小，得出此結(jié)局的原因可能有兩種：一種可能因?yàn)檠芯康牟蓸訒r(shí)間不一樣（肖智鯰繁殖習(xí)性的研究為2月采樣，本試驗(yàn)為3、4月采樣），而性比在繁殖周期內(nèi)會(huì)發(fā)生一定的變化；另一種是因?yàn)檫x購(gòu)的鯰魚(yú)數(shù)量偏少，試驗(yàn)的范圍還不夠。

但不管原因如何，研究表明春季洞庭野生鯰魚(yú)雌雄性比大于1，即雌魚(yú)比例較大，且前面關(guān)于洞庭湖野生鯰魚(yú)3～4月繁殖群體體長(zhǎng)、體重組成的調(diào)查研究也得出雌魚(yú)體重方面有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。綜上優(yōu)勢(shì)均有利于發(fā)展洞庭野生鯰魚(yú)的養(yǎng)殖。

在鯰群體中雌性明顯地多于雄性， 在人工養(yǎng)殖池塘中尤其如此，同時(shí)同齡個(gè)體比較雌性的生長(zhǎng)又顯著地大于雄性。這正好符合養(yǎng)殖需要，有利于提高養(yǎng)殖產(chǎn)量。但由于在池塘養(yǎng)殖群體中雌雄比例的嚴(yán)重失調(diào)，雖然在人工繁殖過(guò)程中雄魚(yú)可多次重復(fù)利用，但多次使用后雄魚(yú)損傷嚴(yán)重且精液質(zhì)量下降，難以保證受精率，給生產(chǎn)帶來(lái)一些不便和不利。為解決這一矛盾可考慮在魚(yú)苗生長(zhǎng)初期使用甲基睪丸酮等激素處理，將遺傳上的雌性轉(zhuǎn)化為生理上的雄性，從而提高雄魚(yú)的數(shù)量。這樣不但可以緩解雄魚(yú)數(shù)量不足的矛盾，而且可以培育出全雌鯰（遺傳雌性與轉(zhuǎn)化雄性交配所得子代） ，更有利于養(yǎng)殖生產(chǎn)，同時(shí)可以對(duì)鯰的性別分化機(jī)制進(jìn)行探討。這在實(shí)踐中是否可行尚待進(jìn)一步的研究。（參考文獻(xiàn)略）