李　強(qiáng),劉艷超,劉　超,孟自力, 王　維,劉永輝

(1.河北省胸科醫(yī)院心臟外科，河北 石家莊 050041；2. 河北省胸科醫(yī)院心內(nèi)科，河北 石家莊 050041；3.河北省胸科醫(yī)院胸一科，河北 石家莊050041)

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心肌梗死患者自體外周血干細(xì)胞動員、采集效率與移植安全性的研究

李強(qiáng)1,劉艷超1,劉超2,孟自力1, 王維3*,劉永輝1

(1.河北省胸科醫(yī)院心臟外科，河北 石家莊 050041；2. 河北省胸科醫(yī)院心內(nèi)科，河北 石家莊 050041；3.河北省胸科醫(yī)院胸一科，河北 石家莊050041)

[摘要]目的探討心肌梗死患者自體外周血干細(xì)胞(autologous peripheral blood stem cell，APBSC)動員、采集的效率，以及自體外周血干細(xì)胞移植(autologous peripheral blood stem cell transplantation，APBSCT)治療心肌梗死的安全性和可行性。方法46例心肌梗死患者在常規(guī)藥物治療基礎(chǔ)上，冠狀動脈旁路移植術(shù)(coronary artery bypass grafting，CABG)前5 d，根據(jù)患者體質(zhì)量，給予重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony stimulating factor，rhG-CSF)450 μg/d(≤65 kg)或600 μg/d(>65 kg)皮下注射，進(jìn)行APBSC動員及擴(kuò)增。CABG前24 h進(jìn)行APBSC采集。46例患者均在非體外循環(huán)下行CABG，在完成血管橋吻合后，經(jīng)橋血管及心外膜下注入采集的APBSC。在APBSC動員、采集前后檢測外周血和采集產(chǎn)品中單個核細(xì)胞(mononuclear cells，MNC)及CD34+細(xì)胞數(shù)量。檢測APBSC采集前后血壓、心率、呼吸、白細(xì)胞(white blood cell，WBC)、紅細(xì)胞(red blood cell，RBC)、血紅蛋白(hemoglobin，Hb)、血細(xì)胞比容(hematocrit,Hct)、血小板( platelet，Plt)和血清Ca2+的變化。觀察APBSC動員、采集、移植過程中有無不良反應(yīng)。結(jié)果APBSC動員后外周血中WBC、MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量較動員前顯著升高(P<0.01)。APBSC采集后外周血中MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量較采集前顯著升高(P<0.01)，APBSC采集前后血壓、心率、呼吸、WBC、RBC、Hb、Hct及血清Ca2+變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，Plt計數(shù)采集后較采集前明顯降低(P<0.01)。APBSC動員、采集、移植過程中發(fā)生不良反應(yīng)20例，其中APBSC動員過程中的不良反應(yīng)占17.4%(8/46)，APBSC采集過程中的不良反應(yīng)占10.9%(5/46)，APBSC移植過程中的不良反應(yīng)占15.2%(7/46)。結(jié)論心肌梗死患者APBSC經(jīng)過動員、采集后可獲得較高的MNC和CD34+細(xì)胞產(chǎn)量；APBSCH治療心肌梗死安全可行。

[關(guān)鍵詞]心肌梗死；冠狀動脈旁路移植術(shù);非體外循環(huán)；干細(xì)胞移植

doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2016.05.009

近年來，由于造血細(xì)胞因子及血細(xì)胞分離機(jī)的廣泛應(yīng)用，使人們將骨髓中的造血干細(xì)胞動員進(jìn)入外周血循環(huán)并進(jìn)行分離、濃縮成為可能，同時自體外周血干細(xì)胞移植(autologous peripheral blood stem cell transplantation，APBSCT)在多個領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用[1-4],顯示了其比骨髓移植具有對患者創(chuàng)傷小、移植后免疫和造血功能恢復(fù)快、無需麻醉等優(yōu)點(diǎn)，從而引起了人們的廣泛興趣。國內(nèi)部分學(xué)者研究表明應(yīng)用APBSCT可以促進(jìn)心肌細(xì)胞再生、防止心室重構(gòu)和改善心功能[5-9]。但在APBSCT治療心肌梗死的過程中，有一個造血干細(xì)胞動員、采集、移植的過程，如何獲得較高的干細(xì)胞動員和采集效率，減少動員、采集、移植過程中的不良反應(yīng)，一直是干細(xì)胞移植研究的重點(diǎn)。本研究采用重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony stimulating factor，rhG-CSF)動員自體外周血干細(xì)胞(autologous peripheral blood stem cell，APBSC)，以CD34+細(xì)胞作為APBSC的標(biāo)記物，觀察APBSC動員、采集的效率，以及冠狀動脈旁路移植術(shù)(coronary artery bypass grafting，CABG)同期APBSCT治療心肌梗死的安全性和可行性。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2012年1月—2015年1月我院收治的心肌梗死患者46例，男性28例，女性18例，年齡55～77歲，平均(62.13±4.32)歲，體質(zhì)量59～89 kg，平均(70.24±6.23) kg，所有患者均經(jīng)冠狀動脈造影證實(shí)為2～3支病變。入選標(biāo)準(zhǔn)：左心室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction, LVEF)<45%；經(jīng)藥物治療心力衰竭緩解較差或反復(fù)發(fā)作。

所有患者均知情同意，此研究方案經(jīng)河北省胸科醫(yī)院道德倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2APBSC的動員與采集CABG前5 d，根據(jù)患者體質(zhì)量，給予rhG-CSF 450 μg/d(≤65 kg)或600 μg/d(>65 kg)皮下注射 1次/d，共用5 d，第5天在APBSC采集前90 min使用。于CABG前24 h采用大容量白細(xì)胞單采(large volume leukapheresis，LVL)進(jìn)行APBSC采集，采集前30 min預(yù)防性給予10%葡萄糖酸鈣20 mL口服，穿刺雙肘正中靜脈，選擇血流豐富的一側(cè)靜脈作入機(jī)通路，采集過程中每處理2 000～3 000 mL全血,靜脈緩慢注射10%葡萄糖酸鈣10 mL，采集的目標(biāo)是單個核細(xì)胞(mononuclear cells，MNC)>2.0×108/kg，CD34+細(xì)胞>2.0×106/kg[10]。

1.3 APBSC移植入選心肌梗死患者均采用非體外循環(huán)下CABG，在完成冠狀動脈端血管橋吻合后，將采集的干細(xì)胞注射至橋血管；在完成主動脈端血管橋吻合后，將采集的干細(xì)胞注射至梗死區(qū)域心外膜下的心肌組織，共分3或4次，每次移植干細(xì)胞時間3 min，間隔3 min后進(jìn)行第2次移植。

1.4檢測方法和觀察指標(biāo)應(yīng)用美國Abbott公司生產(chǎn)的Cell-Dyn1700型細(xì)胞計數(shù)儀檢測APBSC動員前和動員后1～5 d、采集前后外周血和采集產(chǎn)品中MNC數(shù)量；應(yīng)用美國BD公司生產(chǎn)的FACS-Calibur流式細(xì)胞儀測定APBSC動員、采集前后外周血和采集產(chǎn)品中CD34+細(xì)胞數(shù)量。APBSC采集前后監(jiān)測血壓、心率、呼吸、白細(xì)胞(white blood cell，WBC)、紅細(xì)胞(red blood cell，RBC)、血紅蛋白(hemoglobin，Hb)、血細(xì)胞比容(hematocrit,Hct)、血小板( platelet，Plt)和血清Ca2+的變化。動員過程中觀察有無骨痛、肌肉痛、頭痛、乏力、皮疹、發(fā)熱、胃腸道反應(yīng)、心絞痛或心力衰竭加重等發(fā)生。采集過程中觀察有無血流不足(報警)、枸櫞酸鹽中毒(低鈣性口周、肢端麻木及手足抽搐等)、心絞痛或心力衰竭加重、發(fā)熱、迷走神經(jīng)反應(yīng)性或低血容量性面色蒼白、暈厥等發(fā)生。移植過程中觀察有無竇性心動過緩、竇性停搏或Ⅲ度房室傳導(dǎo)阻滯、室上性心動過速、室性期前收縮、心室顫動、低血壓等發(fā)生。若患者出現(xiàn)低血壓或嚴(yán)重心律失常，積極給予對癥處理，必要時行體外循環(huán)輔助治療。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料比較分別采用F檢驗(yàn)、SNK-q檢驗(yàn)和配對t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1APBSC動員前后WBC、MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量的變化APBSC動員前至動員后5d,外周血中WBC、MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量呈逐漸升高趨勢，各時間點(diǎn)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1APBSC動員前后WBC、MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量變化

檢測時間WBC(×109/L)MNC(×109/L)CD34+細(xì)胞(×106/L)動員前6.17±1.14 1.02±0.17 0.99±0.17 第1天18.47±3.41*4.04±0.65*12.32±2.05*第2天32.92±3.37*#5.01±0.42*#29.30±5.12*#第3天41.42±5.32*#△6.63±1.46*#△49.03±8.54*#△第4天43.23±5.43*#△☆8.03±1.45*#△☆85.73±14.52*#△☆第5天50.15±4.46*#△☆▲9.79±1.04*#△☆▲168.25±32.45*#△☆▲F755.399447.088773.732P0.0000.0000.000

*P<0.01與動員前比較#P<0.01與動員第1天比較△P<0.01與動員第2天比較☆P<0.01與動員第3天比較▲P<0.01與動員第4天比較(SNK-q檢驗(yàn))

2.2APBSC采集前后MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量的變化APBSC采集后MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量明顯升高，與采集前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表2APBSC采集前后MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量變化

檢測時間MNC(×109/L)CD34+細(xì)胞(×107/L)采集前9.79±1.0416.82±3.24采集后67.25±10.22214.03±45.28t23.0074.598P0.0000.000

2.3APBSC采集前后生命體征、血象、電解質(zhì)的變化APBSC采集前后血壓、心率、呼吸、WBC、RBC、Hb、Hct及血清Ca2+差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；Plt計數(shù)采集后較采集前明顯降低(P<0.01)。見表3。

表3APBSC采集前后生命體征、血象、電解質(zhì)的變化

檢測時間收縮壓(mmHg)舒張壓(mmHg)心率(次/min)呼吸(次/min)WBC(×109/L)采集前120.50±14.3482.56±8.7277.25±9.5120.79±1.7048.26±4.52采集后120.06±11.2480.94±6.5275.63±11.4320.85±2.6948.19±3.48t0.4610.900-0.289-0.0960.162P0.6320.3620.7360.9540.854檢測時間RBC(×1012/L)Hb(g/L)Hct(%)Plt(×109/L)Ca2+(mmol/L)采集前4.70±0.49134.25±10.0640.28±6.29192.31±28.052.53±0.24采集后4.75±0.48137.06±13.5540.50±5.58147.94±27.512.57±0.15t1.6951.0150.70627.4410.659P0.1180.3560.4960.0000.511

2.4APBSCT治療心肌梗死安全性的評估APBSC動員、采集、移植過程中總的不良反應(yīng)為20例。APBSC動員過程中的不良反應(yīng)8例(17.4%)，其中骨痛4例(8.7%)，肌肉疼1例(2.2%)，乏力2例(4.4%)，心絞痛加重1例(2.2%)；APBSC采集過程中的不良反應(yīng)5例(10.9%)，其中血流不足2例(4.4%)，枸櫞酸鹽中毒1例(2.2%)，發(fā)熱2例(4.4%)；APBSC移植過程中的不良反應(yīng)7例(15.2%)，其中室上性心動過速2例(4.4%)，室性期前收縮1例(2.2%)，低血壓4例(8.7%)。上述不良反應(yīng)均在對癥治療后癥狀消失或好轉(zhuǎn)，無嚴(yán)重、不可糾正的不良反應(yīng)發(fā)生，無術(shù)中使用體外循環(huán)輔助發(fā)生，無死亡病例發(fā)生。

3　討　　論

近年來，APBSCT在國內(nèi)外得到了廣泛發(fā)展，已用于多個領(lǐng)域，其在心血管領(lǐng)域已成為研究的熱點(diǎn)。干細(xì)胞沒有明確的形態(tài)學(xué)特征，都表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞樣的單個核母細(xì)胞，故將CD34+細(xì)胞視為干細(xì)胞，并以CD34+細(xì)胞作為干細(xì)胞生物學(xué)活性與臨床應(yīng)用的源細(xì)胞。在穩(wěn)定造血狀態(tài)下，APBSC數(shù)量很少，只相當(dāng)于骨髓中造血干細(xì)胞數(shù)量的1%～10%，要成功進(jìn)行APBSCT，必須使其增加至正常數(shù)量的數(shù)十倍乃至百倍以上。使用rhG-CSF能促進(jìn)粒系造血干細(xì)胞增殖、分化，有效刺激骨髓造血，使存在于骨髓中的造血干細(xì)胞釋放進(jìn)入外周血，隨后應(yīng)用血細(xì)胞分離機(jī)從外周血中分離、濃縮造血干細(xì)胞，從而獲得足夠數(shù)量的造血干細(xì)胞進(jìn)行移植。然而，如何獲得較高的動員和采集效率，減少動員、采集、移植過程中的不良反應(yīng)一直是學(xué)者研究的重點(diǎn)。

以rhG-CSF為主的造血干細(xì)胞動員是通過影響造血干細(xì)胞和骨髓基質(zhì)微環(huán)境的黏附分子表達(dá)，降低造血干細(xì)胞與骨髓基質(zhì)的黏附作用，使造血干細(xì)胞遷離骨髓，進(jìn)入外周血循環(huán)。rhG-CSF應(yīng)用的劑量是影響APBSC動員效率的主要因素之一。不同的rhG-CSF劑量，在一定范圍內(nèi)其濃度與其對造血干細(xì)胞動員的效率直接相關(guān)。本研究入選患者rhG-CSF用量分別為(7.30±0.36) μg·kg-1·d-1(體質(zhì)量≤65 kg者)，(7.39±0.41) μg·kg-1·d-1(體質(zhì)量>65 kg者)，動員后第5天外周血中WBC、MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量分別為(50.15±4.46)×109/L，(9.79±1.04)×109/L，(168.25±32.45)×106/L，較動員前均有大幅度增高，且部分患者CD34+細(xì)胞數(shù)量已超過采集目標(biāo)2.0×106/kg。表明本研究心肌梗死患者rhG-CSF用量控制于5～10 μg·kg-1·d-1可獲得較高的APBSC動員效率。

APBSC采集的最佳時機(jī)尚無定論，rhG-CSF一般連續(xù)皮下注射5～7 d，于第4～7天采集為常見。錢震等[11]研究表明，健康供者由于骨髓儲備能力好，故動員時間短，一般rhG-CSF應(yīng)用4～5 d可達(dá)到采集要求。有研究表明粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)動員第5～6 天采集效果優(yōu)于第4～5天，且動員的時間如果過長，會引起CD34+細(xì)胞歸巢、采集效率下降、不良反應(yīng)增加。本研究入選患者外周血中WBC、MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量峰值均出現(xiàn)在動員后第5天，故采用第5天采集方案，采集后MNC、CD34+細(xì)胞數(shù)量分別為(67.25±10.22)×109/L，(214.03±45.28)×107/L，均較采集前有大幅度增高，且遠(yuǎn)超過采集目標(biāo)2.0×108/kg、2.0×106/kg。表明本研究心肌梗死患者動員后第5天采集可獲得較高的APBSC采集效率。

大容量白細(xì)胞單采是提高干細(xì)胞產(chǎn)率、減少采集次數(shù)的重要手段。一般認(rèn)為血液循環(huán)量越大，采集的MNC和CD34+細(xì)胞越多，但同時產(chǎn)品中RBC、粒細(xì)胞的污染及Plt的丟失嚴(yán)重。枸櫞酸葡萄糖A( acid ciliate dextruse-A,ACD-A)抗凝劑(由枸櫞酸鈉、枸櫞酸、葡萄糖配制)可使Plt從WBC層中得到更好的分離，以便于界面探測器區(qū)分密度差異而只收集MNC和CD34+細(xì)胞，提供純凈產(chǎn)品[12]。但進(jìn)入患者體內(nèi)的ACD-A越多，發(fā)生枸櫞酸鹽中毒的概率也越大，故全血與ACD-A比值一定要控制在9～12∶1，采集過程中密切觀察ACD-A流速。從獲得高產(chǎn)量、高質(zhì)量、高純度及減少Plt丟失等方面考慮，本研究入選患者APBSC采集過程中，全血與ACD-A比值一直控制在9～12∶1，均獲得了較高的MNC和CD34+細(xì)胞產(chǎn)量，以保障移植的細(xì)胞主要為干細(xì)胞。

本研究結(jié)果顯示，APBSC采集對血壓、心率、呼吸、WBC、RBC、Hb、Hct和血清Ca2+無明顯影響，主要是導(dǎo)致Plt數(shù)量的減少。APBSC采集后Plt計數(shù)平均從(192.31±28.05)×109/L降到(147.94±27.51)×109/L，但均在正常范圍內(nèi)，Plt計數(shù)的下降主要是由于其密度與MNC的密度較接近，當(dāng)血細(xì)胞分離機(jī)采集MNC時，部分Plt也被同時分離出來，盡管ACD-A抗凝劑可防止Plt的丟失，但仍無法避免少量的Plt混入采集產(chǎn)品中。

心肌梗死患者APBSC動員過程中常見的不良反應(yīng)有骨痛、肌肉痛、頭痛、乏力、皮疹、發(fā)熱、胃腸道反應(yīng)、心絞痛或心力衰竭加重等。骨痛多為彌漫性疼痛，其中較常出現(xiàn)疼痛的部位為脊柱、臀部或骨盆、肋骨，其發(fā)生可能與G-CSF的使用、骨代謝發(fā)生變化、骨特異性堿性磷酸酶增高、血清Ca2+濃度下降有關(guān)。本研究骨痛的發(fā)生率為8.7%，遠(yuǎn)低于相關(guān)文獻(xiàn)報道[13]，考慮可能與G-CSF的劑量有關(guān)。一般認(rèn)為當(dāng)G-CSF劑量≥8.8 μg·kg-1·d-1時，骨痛發(fā)生率明顯增高，本研究rhG-CSF劑量均<8.8 μg·kg-1·d-1，骨痛發(fā)生率較低，與文獻(xiàn)報道并不矛盾。由于本研究的對象為心肌梗死患者，應(yīng)用rhG-CSF后可引起心絞痛或心力衰竭加重，其發(fā)生率為2.2%，其原因可能與以下因素有關(guān)：高白細(xì)胞血癥致血液黏滯度增高；rhG-CSF使血小板第2相聚集功能增強(qiáng)及凝血酶增多；經(jīng)rhG-CSF刺激后粒細(xì)胞趨化功能增強(qiáng)，產(chǎn)生過氧化物和彈性蛋白酶增多，直接損傷血管內(nèi)皮功能。

運(yùn)用血細(xì)胞分離機(jī)采集APBSC總體上是安全的，但采集過程中不良反應(yīng)仍時有發(fā)生，主要有血流不足、枸櫞酸鹽中毒、心絞痛或心力衰竭加重、發(fā)熱、迷走神經(jīng)反應(yīng)性或低血容量性面色蒼白、暈厥等。血流量不足是較常見的不良反應(yīng)，可影響采集過程，甚至中斷采集。心肌梗死患者全身血管硬化和管腔變窄現(xiàn)象比較明顯，常會造成采集過程中儀器出現(xiàn)血流量不足的報警；APBSC采集時間一般較長，采集過程中難免移動手部，導(dǎo)致血流通路障礙，也會出現(xiàn)血流量不足的報警。本研究血流不足的發(fā)生率為4.4%，發(fā)生于開始采集1 h內(nèi)，考慮為患者本身血管細(xì)小所致，改用對側(cè)肘正中靜脈后，血流恢復(fù)正常。APBSC采集全程使用ACD-A抗凝劑進(jìn)行全血抗凝，其抗凝原理是枸櫞酸鹽與Ca2+結(jié)合，生成不解離的鰲合物[14]，從而阻斷Ca2+依賴的凝血因子的凝血反應(yīng)而起到抗凝作用。因此，ACD-A抗凝劑在抗凝的同時，可致血清Ca2+濃度下降。當(dāng)ACD-A抗凝劑滴速過快或滴入的量過多時，血清Ca2+濃度低于正常下限則引起枸櫞酸鹽中毒。本研究枸櫞酸鹽中毒的發(fā)生率為2.2%，表現(xiàn)為口周、肢端麻木感，經(jīng)靜脈緩慢注射10%葡萄糖酸鈣10 mL后癥狀消失。預(yù)防性補(bǔ)鈣可降低枸櫞酸鹽中毒的發(fā)生率，本研究于采集前30 min口服10%葡萄糖酸鈣20 mL，采集過程中每處理2 000～3 000 mL全血，靜脈注射10%葡萄糖酸鈣10 mL，整個采集過程一般注射4～6次，明顯降低了枸櫞酸鹽中毒的發(fā)生率。采集APBSC所用的管路、ACD-A液、鹽水等，若有熱原或細(xì)菌污染，可能出現(xiàn)發(fā)熱反應(yīng)甚至中毒性休克，雖然發(fā)生率很小，但應(yīng)注意無菌操作。本研究發(fā)熱的發(fā)生率為4.4%，不排除外管路及藥液被污染的可能，給予退熱治療后癥狀好轉(zhuǎn)，堅持到采集結(jié)束。

APBSC移植過程中常見的不良反應(yīng)有竇性心動過緩、竇性停搏或Ⅲ度房室傳導(dǎo)阻滯、室上性心動過速、室性期前收縮、心室顫動、低血壓等。其機(jī)制考慮為冠狀動脈痙攣所致；黏稠的干細(xì)胞懸液注入梗死相關(guān)動脈，造成后者一過性栓塞所致。本研究APBSC移植過程中不良反應(yīng)的發(fā)生率為15.2%，其中室上性心動過速4.4%，室性期前收縮2.2%，低血壓8.7%，分別給予胺碘酮、利多卡因、增加多巴胺用量等對癥處理后癥狀消失，無嚴(yán)重、不可糾正的不良反應(yīng)發(fā)生，無術(shù)中使用體外循環(huán)輔助發(fā)生。此外，本研究3例心肌梗死患者LVEF<30%，術(shù)前預(yù)防性置入主動脈內(nèi)球囊反搏泵(intra-aortic balloon pump，IABP)，可有效增加心肌血供、減少耗氧量、降低圍手術(shù)期低心排發(fā)生率[15]，不除外其對APBSC移植過程中的不良反應(yīng)產(chǎn)生了有益的影響。

綜上所述，心肌梗死患者APBSC動員、采集后可獲得較高的MNC和CD34+細(xì)胞產(chǎn)量，且遠(yuǎn)超過采集目標(biāo)的要求，足以保障移植的順利實(shí)施；APBSC采集對血壓、心率、呼吸、WBC、RBC、Hb、Hct及血清Ca2+無明顯影響，主要是導(dǎo)致Plt數(shù)量的減少，但均在正常范圍內(nèi)；APBSC動員、采集、移植過程中均出現(xiàn)了不同程度的不良反應(yīng)，但給予對癥處理后癥狀消失或好轉(zhuǎn)，無嚴(yán)重、不可糾正的不良反應(yīng)發(fā)生，無死亡病例發(fā)生，表明APBSCT治療心肌梗死并不增加主要臨床不良事件，是安全可行的。國外學(xué)者發(fā)現(xiàn)應(yīng)用APBSCT可取代受損心肌細(xì)胞并建立新的血管來改善血供[16-17]。本研究后續(xù)階段將采用SPECT心肌灌注顯像評價梗死區(qū)域及心外膜下心肌細(xì)胞存活的數(shù)量及密度，以提供APBSC在心肌存活的證據(jù)；將應(yīng)用心臟彩色超聲評價移植后心功能的改變，以證實(shí)APBSCT治療心肌梗死能改善心功能、抑制心室重構(gòu)。雖然需要解決的問題還很多，但相信隨著科技的發(fā)展進(jìn)步，這一治療方法將不斷完善，以便使更多患者受益。

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(本文編輯：許卓文)

[收稿日期]2015-10-29；[修回日期]2016-03-10

[基金項目]河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題(20120237)

[作者簡介]李強(qiáng)(1980-)，男，河北邢臺人，河北省胸科醫(yī)院主 *通訊作者。E-mail: 876270468@qq.com

[中圖分類號]R542.22; R617

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[文章編號]1007-3205(2016)05-0531-06

Study on the efficiencies of the mobilization， collection and the safety of the transplantation of autologous peripheral blood stem cell for myocardial infarction patients

LI Qiang1, LIU Yan-chao1, LIU chao2, MENG Zi-li1, WANG Wei3*, LIU Yong-hui1

(1.Department of Cardiac Surgery, the Chest Hosipital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041, China；2.Department of Cardiology, the Chest Hosipital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041, China; 3.Department of Chest Diseases I, the Chest Hosipital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041, China)

【Abstract】ObjectiveTo investigate the efficiencies of mobilization and collection of autologous peripheral blood stem cell(APBSC) for myocardial infarction patients. And to study the safety and feasibility of myocardial infarction treatment via the autologous peripheral blood stem cell transplantation(APBSCT). MethodsForty-six myocardial infarction patients with the therapy of conventional drug were given recombinant human granulocyte colonystimulating factor(rhG-CSF) 450 μg/d(≤65 kg) or 600 μg/d(>65 kg) by subcutaneous injection at five days before coronary artery bypass graft(CABG), according to patient's body mass, then were carried on the APBSC mobilization and expansion. APBSCs were collected 24 h before CABG. All patients underwent CABG with non-cardiopulmonary by-pass, and the APBSCs were injected via the bridge coronary vessels and sub-epicardially. Before and after APBSC mobilization and collection, mononuclear cell(MNC) and CD34+ cell from the peripheral blood were tested, and the blood pressure, heart rate, respiratory, white blood cell(WBC), red blood cell(RBC), hemoglobin(Hb), hematocrit(Hct), platelet(Plt) and serum Ca2+were also tested. Adverse reactions in the process of APBSC mobilization,collection and transplantation were observed. ResultsThe numbers of WBC,MNC and CD34+ cells in peripheral blood were all significantly increased(P<0.01) after APBSC mobilization than that before APBSC mobilization. After APBSC collection, the numbers of MNC and CD34+ cells were significantly increased(P<0.01).No significance existed in the blood pressure, heart rate, respiratory, WBC, RBC, Hb, Hct and serum Ca2+(P>0.05) . The number of Plt was significantly(P<0.01) decreased after collection. Adverse reactions occurred in 20 cases during APBSC mobilization, collection and transplantation, including the adverse reaction of 17.4%(8/46) in APBSC mobilization, 10.9%(5/46) in APBSC collection, and 15.2%(7/46) in transplantation.ConclusionThe MNC and CD34+ cells can be greatly increased after APBSC mobilization and collection, indicating safty and feasibility of APBSCT for myocardial infarction.

[Key words]myocardial infarction; coronary artery bypass grafting;off-pump; stem cell transplantation

治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事心胸外科疾病診治研究。