鄭飛，于慧敏，高麗

(寧波市第二醫(yī)院 婦科，浙江 寧波 315010)

氟比洛芬酯在子宮肌瘤患者體內(nèi)的藥物代謝分布及對(duì)前列腺素E2的影響

鄭飛Δ，于慧敏，高麗

(寧波市第二醫(yī)院 婦科，浙江 寧波 315010)

目的 探討氟比洛芬酯(flurbiprofen axetil，F(xiàn)A)在子宮肌瘤的藥物代謝分布及對(duì)前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)的影響。方法 選取2014年1月～2016年2月在寧波市第二醫(yī)院因子宮肌瘤行子宮全切術(shù)的患者86例，隨機(jī)分為對(duì)照組44例和觀察組42例。對(duì)照組和觀察組分別于術(shù)前15 min給予0.9%氯化鈉溶液和1 mg/kg FA，檢測(cè)FA的活性代謝物氟比洛芬(flurbiprofen，F(xiàn)P)，酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測(cè)組織勻漿中PGE2的濃度。結(jié)果 觀察組正常組織和腫瘤組織FP濃度分別為(0.70±0.13)μg/mL和(1.72±0.13)μg/mL，明顯高于對(duì)照組(0.00±0.00)g/mL和(0.00±0.00)μg/mL,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組腫瘤組織FP濃度明顯高于正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組正常組織和腫瘤組織PGE2濃度分別為(189.29±26.38)pg/mL和(260.01±46.63)pg/mL，均明顯低于對(duì)照組(210.03±35.22)pg/mL和(390.20±92.10)pg/mL,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組血漿FP濃度為(5.50±0.72)μg/mL，明顯高于對(duì)照組(0.00±0.00)μg/mL,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而PGE2濃度為(602.38±84.09)pg/mL，明顯低于對(duì)照組(920.13±89.05)pg/mL,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 FA在子宮肌瘤組織中有一定的靶向分布，可降低PGE2濃度，從而起到減輕患者痛覺(jué)的作用。

氟比洛芬酯；子宮肌瘤；前列腺素E；ELISA法

子宮肌瘤是臨床最常見(jiàn)的婦科腫瘤，常見(jiàn)于30～50歲婦女，據(jù)統(tǒng)計(jì)30歲以上的婦女超過(guò)20%有子宮肌瘤[1]，子宮肌瘤的長(zhǎng)期發(fā)生發(fā)展可以導(dǎo)致子宮肌層來(lái)源惡性腫瘤的發(fā)生，臨床預(yù)后不佳。

子宮肌瘤不僅可以導(dǎo)致局部壓迫癥狀，影響到患者的月經(jīng)周期或者月經(jīng)量，同時(shí)可以給患者帶來(lái)明顯的下腹部、腰部疼痛不適感?，F(xiàn)階段臨床上對(duì)于子宮肌瘤的診治已越來(lái)越關(guān)注于患者自主癥狀的改善研究，氟比洛芬酯是新型的解熱鎮(zhèn)痛消炎藥，可以通過(guò)抑制局部子宮肌瘤組織中的環(huán)氧化酶及前列腺素的合成，進(jìn)而減輕患者的疼痛不適體驗(yàn)[2-4]。本研究通過(guò)選取2014年1月～2016年2月于寧波市第二醫(yī)院因子宮肌瘤行子宮全切術(shù)的患者86例，探討了氟比洛芬治療后的局部組織中的前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)及氟比洛芬(flurbiprofen，F(xiàn)P)的變化，進(jìn)而為揭示氟比洛芬酯的作用機(jī)制提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月～2016年2月于寧波市第二醫(yī)院因子宮肌瘤行子宮全切術(shù)的患者86例，采用隨機(jī)數(shù)字表法，將患者隨機(jī)分為對(duì)照組44例和觀察組42例。對(duì)照組患者年齡32～56歲，平均(43.71±7.04)歲，BMI(22.19±4.10)kg/m2。觀察組患者年齡34～53歲，平均(44.39±6.30)歲，BMI(22.36±3.28)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：①美國(guó)麻醉醫(yī)師協(xié)會(huì)(American Society of Anesthesiologists，ASA)分類[5]為Ⅰ～Ⅱ級(jí)；②無(wú)肝腎功能異常、血液系統(tǒng)功能障礙、高血壓等疾??；③患者及家屬知情同意并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有消化道潰瘍、心衰；②非甾體類藥物過(guò)敏史、阿司匹林哮喘史；③妊娠期或哺乳期女性。2組患者年齡及BMI比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本次研究獲得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：對(duì)照組術(shù)前15 min給予0.9%氯化鈉溶液，觀察組術(shù)前15 min給予1 mg/kg 氟比洛芬(南京凱基生物科技有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20048594)，氟比洛芬加入20 mL0.9%氯化鈉溶液中推注，5 min內(nèi)推注完畢。

1.2.2 檢測(cè)方法：患者手術(shù)開(kāi)始后1 h采集靜脈血2 mL，按照10 000 r/min的離心速度進(jìn)行離心分離血清，-20 ℃保存待測(cè)，采集標(biāo)本后1 w內(nèi)檢測(cè)氟比洛芬(flurbiprofen，F(xiàn)P)和前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)，采用瑞士羅氏全自動(dòng)生化分析儀E170模塊進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海泰康生物科技有限公司。具體檢測(cè)方法參照試劑盒說(shuō)明書，試劑盒內(nèi)配有質(zhì)控血清或質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品，所有操作嚴(yán)格按照操作說(shuō)明完成。酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測(cè)組織勻漿PGE2水平，采用低溫高速離心機(jī)進(jìn)行離心，1 000 r/min(離心半徑為15 cm)，手術(shù)切除標(biāo)本離體3 min內(nèi)切取正常及肌瘤組織各2～3 g，采用南京凱基生物科技公司生產(chǎn)的HGF-F0系列組織細(xì)胞提取液提取組織勻漿，獲得組織勻漿后抽取50 μL樣品加入96孔板內(nèi)，采用去離子水作為陰性對(duì)照，采用50 μLcryab作為陽(yáng)性對(duì)照，平衡搖晃20 s混勻，室溫下孵育2 h，采用TBSP緩沖液清洗3次，5 min/次，加入100 μL底物，平衡搖晃30～45 s，25 ℃室溫下孵育40 min，加入250 μL終止物，直到96孔板中每孔的顏色變黃，最后以空白對(duì)照為基準(zhǔn)，采用分光光度計(jì)進(jìn)行讀數(shù)。PGE2抗體購(gòu)自羅氏檢測(cè)公司，相關(guān)配套試劑購(gòu)自南京凱基生物科技有限公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書的要求進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 2組組織勻漿FP和PGE2濃度比較 觀察組正常組織和腫瘤組織FP濃度明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，觀察組腫瘤組織FP濃度明顯高于正常組織(P<0.05)；2組腫瘤組織PGE2濃度均明顯高于正常組織(P<0.05)，觀察組正常組織和腫瘤組織PGE2濃度均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組組織勻漿FP濃度和PGE2濃度比較Tab.1 Comparison of tissue homogenate FP and PGE2 concentration between

*P<0.05，與本組正常組織比較，compared with the same group of normal tissue；#P<0.05， 與對(duì)照組比較，compared with the control group

2.2 2組血漿FP和PGE2濃度比較 觀察組血漿FP明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，而PGE2明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 2組血漿FP和PGE2濃度比較Tab.2 Comparison of plasma FP and PGE2 concentration

*P<0.05，與對(duì)照組比較，compared with the control group

3 討論

雌激素受體活性的上調(diào)及局部雌/孕激素受體比例的紊亂，可以促進(jìn)子宮平滑肌細(xì)胞的過(guò)度增殖。相關(guān)研究我國(guó)現(xiàn)階段子宮肌瘤的發(fā)病率呈現(xiàn)出了明顯上升的趨勢(shì)，特別是在育齡期女性中發(fā)病率更高。肌瘤內(nèi)的平滑肌細(xì)胞的紅色樣、玻璃樣及肉瘤樣變性，可以促進(jìn)肌瘤病變的進(jìn)展，導(dǎo)致臨床轉(zhuǎn)歸的惡化。在對(duì)于子宮肌瘤發(fā)病過(guò)程中的基礎(chǔ)發(fā)病機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn)，PGE2的過(guò)度激活在肌瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要的意義[6]。PGE2的激活可以通過(guò)PI3K/AKT信號(hào)通路，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞炎癥因子的釋放，加劇5-羥色胺誘導(dǎo)的自主性疼痛感染的產(chǎn)生[7]。特別是局部肌瘤組織中的PGE的上升，可以進(jìn)一步促進(jìn)環(huán)氧化酶-2等致痛物質(zhì)的產(chǎn)生，增加患者的疼痛評(píng)分[8]。

氟比洛芬酯的機(jī)制尚不清晰，主要考慮其可以通過(guò)抑制局部肌瘤組織或者血清中的IL-6、5-羥色胺及前列腺素等的合成，進(jìn)而減輕患者的疼痛體驗(yàn)[9-10]。已有的研究探討了氟比洛芬酯治療子宮肌瘤患者后的自主癥狀的改善作用，認(rèn)為1 mg/kg的氟比洛芬酯即可顯著地改善患者的癥狀[11-12]。但迄今為止缺乏對(duì)于氟比洛芬酯治療后的血清或者局部肌瘤組織中的相關(guān)藥物代謝產(chǎn)物的研究，同時(shí)本研究的創(chuàng)新性在于揭示了氟比洛芬酯治療后的血清或者局部組織中的PGE2濃度變化，進(jìn)而探討了氟比洛芬的作用機(jī)制。

本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組子宮肌瘤組織中的FP濃度明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明氟比洛芬治療后的子宮肌瘤患者局部病變組織中的藥物有效濃度可明顯上升。氟比洛芬酯是新型的藥物劑型，在體內(nèi)可以靶向運(yùn)送至病變部位，促進(jìn)病變組織總局部有效藥物濃度的上升。Zhang L等[13]、劉文濤等[14]通過(guò)回顧性分析了90例樣本量的臨床資料，發(fā)現(xiàn)氟比洛芬酯治療后的子宮肌瘤患者局部組織中的FP濃度可上升25%以上，這與本研究的結(jié)論較為一致。

同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，治療后的觀察組患者血液中的FP濃度也明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，提示了循環(huán)血及子宮肌瘤局部組織中的FP均有顯著的上升。PGE是致痛的中間物質(zhì)，其可以通過(guò)誘導(dǎo)下游5-羥色胺及補(bǔ)體的激活，進(jìn)而加劇患者的疼痛體驗(yàn)，導(dǎo)致患者癥狀的加劇，本研究中治療后的觀察組患者的PGE濃度明顯下降，低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，特別是腫瘤組織中局部PGE的濃度下降較為明顯(P<0.05)，提示氟比洛芬酯可能通過(guò)抑制PGE的表達(dá)，促進(jìn)局部子宮肌瘤組織中的PGE的下降，進(jìn)而發(fā)揮鎮(zhèn)痛效果。氟比洛芬酯可以通過(guò)抑制環(huán)氧化酶的活性、促進(jìn)PGE激酶的末端磷酸化，進(jìn)而抑制PGE的合成。但需要注意的是，Zhang L等[13]的研究中并未發(fā)現(xiàn)氟比洛芬酯治療后的PGE的下降，這與本研究的結(jié)論存在一定的差別，考慮到檢測(cè)方法的不統(tǒng)一、臨床資料的收集偏倚及隨訪時(shí)間的不同等，均可能導(dǎo)致了最終結(jié)論的差別。

綜上所述，在子宮肌瘤患者局部組織及循環(huán)血中，氟比洛芬酯的有效藥物成分FP的表達(dá)明顯上升，其鎮(zhèn)痛機(jī)制的發(fā)揮可能與抑制PGE的表達(dá)等有關(guān)。但本研究對(duì)于氟比洛芬酯治療后的局部肌瘤組織中PGE的上升與患者疼痛評(píng)分的關(guān)系研究不足，存在一定的局限性。

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(編校：薛雪)

Drug metabolism distribution of FA in uterine fibroids and its effect on PGE2

ZHENG FeiΔ, YU Hui-min, GAO Li

(Department of Gynecology, the NO.2 Hospital of Ningbo, Ningbo 315010, China)

ObjectiveTo investigate drug metabolism distribution of flurbiprofen axetil(FA) in uterine fibroids and its effect on prostaglandin E2(PGE2).MethodsA total of 86 patients with uterine fibroids from January 2014 to February 2016 in The NO.2 Hospital of Ningbo were randomly divided into control group of 44 cases and observation group of 42 cases.The control group and the observation group were given 0.9% sodium chloride solution and 1 mg/kg FA at 15 min before operation,detection of the active metabolite of FA flurbiprofen (FP),and the concentration of PGE2in tissue homogenate was detected by ELISA.ResultsThe observation group FP concentration of normal and tumor tissue were (0.70±0.13)μg/mL and (1.72±0.13)μg/mL,significantly higher than the control group(0.00±0.00)μg/mL and (0.00±0.00)μg/mL, the difference was statistically significant(P<0.05), the FP concentration of tumor tissue in the observation group was significantly higher than that in the normal group, the difference was statistically significant(P<0.05), the normal tissue and tumor tissue PGE2concentration in the observation group were (189.29±26.38) pg/mL and (260.01±46.63) pg/mL,which were significantly lower than those in the control group(210.03±35.22)pg/mLand(390.20±92.10)pg/mL, the difference was statistically significant(P<0.05), the observation group plasma FP was (5.50±0.72)μg/mL,significantly higher than the control group(0.00±0.00)μg/mL, the difference was statistically significant(P<0.05),and PGE2was (602.38±84.09) pg/mL,significantly lower than the control group(920.13±89.05)pg/mL, the difference was statistically significant(P<0.05).ConclusionFA in the uterine fibroids have a certain distribution of targeted,can reduce the concentration of PGE2,so as to alleviate the pain of patients.

flurbiprofen axetil; uterine fibroids; prostaglandin E; ELISA method

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.12.016

鄭飛，通信作者，男，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：婦科腫瘤，E-mail：zhengfeiking@163.com。

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