李鶯，戚文華，尚航影，朱其叢

（鄭州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)流通中心，鄭州 450006）

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芹菜、草莓基質(zhì)對(duì)甲胺磷等4種有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)定的影響

李鶯，戚文華，尚航影，朱其叢

（鄭州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)流通中心，鄭州 450006）

摘要研究芹菜、草莓基質(zhì)對(duì)甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果、毒死蜱4種有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)的影響。利用樣品基質(zhì)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)樣品，對(duì)比草莓、芹菜樣品、丙酮溶液中4種農(nóng)藥的保留時(shí)間、峰形、峰面積。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DB-5MS色譜柱上，丙酮溶液、芹菜基質(zhì)、草莓基質(zhì)中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果色譜峰出峰時(shí)間不完全重合，保留時(shí)間最大漂移0.1 min。丙酮溶劑、芹菜基質(zhì)較草莓基質(zhì)中的甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果更容易出現(xiàn)峰拖尾現(xiàn)象，且芹菜基質(zhì)溶液中相同濃度的甲胺磷、乙酰甲胺磷峰面積分別約是草莓基質(zhì)溶液中的75%，90%。毒死蜱的保留時(shí)間、峰形、響應(yīng)面積在草莓基質(zhì)、芹菜基質(zhì)、丙酮溶液中基本一樣。

關(guān)鍵詞草莓基質(zhì)；芹菜基質(zhì)；試劑溶液；保留時(shí)間漂移；峰拖尾

近年來(lái)隨著蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析技術(shù)的發(fā)展，不同種類(lèi)樣品帶來(lái)的基質(zhì)效應(yīng)問(wèn)題引起越來(lái)越多的關(guān)注與重視［1-2］，其中樣品基質(zhì)中非待測(cè)組分對(duì)檢測(cè)信號(hào)響應(yīng)值的增強(qiáng)或減弱效應(yīng)，以及如何消除或補(bǔ)償基質(zhì)效應(yīng)方面的研究較多［3-5］，因這會(huì)對(duì)待測(cè)物濃度測(cè)定的準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響。但基質(zhì)中非待測(cè)組分對(duì)待測(cè)農(nóng)藥定性的干擾研究相對(duì)較少，而這將直接影響待測(cè)農(nóng)藥的定性判斷。

筆者在日常檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)DB-17MS柱GCFPD上機(jī)采集后，篩出一個(gè)疑似檢出氧化樂(lè)果的草莓樣品，再用DB-5MS柱GC-MS/MS確認(rèn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)草莓樣品中氧化樂(lè)果與芹菜基質(zhì)標(biāo)品中氧化樂(lè)果保留時(shí)間在DB-5MS色譜柱上不完全重合，出現(xiàn)了0.05 min的漂移，給定性增加了難度。為此采用基質(zhì)配制標(biāo)準(zhǔn)樣品的方式，比較了草莓、芹菜樣品中甲胺磷等4種農(nóng)藥在DB-5MS 柱子上GC-PFPD的色譜峰保留時(shí)間偏差情況，發(fā)現(xiàn)不僅色譜峰出峰時(shí)間發(fā)生漂移，而且峰形、響應(yīng)都有所不同。因此筆者針對(duì)此現(xiàn)象進(jìn)行了探討，為蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)提供借鑒，避免檢測(cè)結(jié)果的誤判。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：GC2010-FPD型，日本島津公司；

氣相色譜儀：GC456-PFPD型，美國(guó)布魯克公司；

氣相色譜-質(zhì)譜儀：456-TQ型，美國(guó)布魯克公司；

高速勻質(zhì)器：海道夫Silent Crusher M，德國(guó)海道夫公司；

氮吹儀：N-EVAP型，美國(guó)Organomation公司；

渦旋振蕩器：WH-861型，華麗達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)備公司；

乙腈、丙酮：色譜純，德國(guó)CNW公司；

氯化鈉：分析純，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；

針孔式微孔過(guò)濾膜：0.22 μm，尼龍；

甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果、毒死蜱農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：1 000 μg/mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津）；

農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：8 μg/mL，分別用丙酮將4種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋配制成80 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再分別準(zhǔn)確移取4種農(nóng)藥儲(chǔ)備液1 mL于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至標(biāo)線，存放在-18℃冰箱中，使用前用丙酮稀釋成所需質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2 樣品制備

取芹菜整棵，草莓全果，經(jīng)縮分，切碎充分混勻后，準(zhǔn)確稱(chēng)取25.0 g于250 mL廣口瓶中，加入氯化鈉5～7 g，乙腈50.0 mL，高速勻漿2 min，在室溫下靜置約30 min。吸取上層液10.0 mL于10 mL離心管中，水浴80℃氮吹蒸發(fā)至近干后，加入5 mL丙酮，渦旋混勻，經(jīng)0.22 μm針孔濾膜過(guò)濾，得到芹菜、草莓基質(zhì)溶液，待用。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制

準(zhǔn)確吸取100，50，50 μL農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液分別移入3個(gè)2 mL容量瓶中，各用丙酮、芹菜基質(zhì)溶液、草莓基質(zhì)溶液定容，得到質(zhì)量濃度為0.4 μg/mL的試劑基標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，0.2 μg/mL的芹菜基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液及草莓基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4 儀器工作條件

1.4.1 布魯克GC儀

色譜柱：DB-5MS柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；載氣（高純氮）流量：2 mL/min；檢測(cè)器溫度：270℃；檢測(cè)器氣體流量：1 Air Flow 17 mL/min，H2Flow 13 mL/min，2 Air Flow 10 mL/min；進(jìn)樣口溫度：250℃；柱溫：初始60℃（保持1 min），以30℃/min升至95℃，以10℃/min升至190℃，以10℃/min升至210℃，以30℃/min升至250℃（保持1 min）；不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣體積：1 μL。

1.4.2 島津GC儀

色 譜 柱：VF-17MS柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；載氣（高純氮）流量：2 mL/min；檢測(cè)器溫度：270℃；檢測(cè)器氣體流量：Air Flow 100 mL/min，H2Flow 80 mL/min；進(jìn)樣口溫度：220℃；柱溫：初始110℃（保持1.5 min），以10℃/min升至230℃，以30℃/min升至260℃（保持1 min）；不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣體積：1 μL。

1.4.3 GC-MS/MS

（1）色譜條件。色譜柱：DB-5 MS柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣（高純氦）流量：1 mL/min；進(jìn)樣口溫度：280℃；柱溫：初始110℃（保持1.0 min），以20℃/min升至200℃（保持1.0 min），以10 ℃/min升至230℃（保持1.0 min），以20℃/min升至280℃（保持2 min）；不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣體積：1 μL。

（2）質(zhì)譜條件。離子源：EI源，電離電壓為70 eV；離子源溫度：230℃；接口溫度：280℃；容積延遲：3.5 min；測(cè)定方式：MRM；監(jiān)測(cè)離子（氧化樂(lè)果）：母離子156，子離子79（25 V），110（10 V）。

2 結(jié)果與討論

2.1 基質(zhì)效應(yīng)的影響

2.1.1 色譜峰形

對(duì)1.2，1.3節(jié)制得到的草莓樣品空白、芹菜樣品空白、0.4 μg/mL試劑標(biāo)準(zhǔn)溶液、0.2 μg/mL芹菜基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液、0.2 μg/mL草莓基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.4.1實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，色譜圖見(jiàn)圖1。由圖1可知，草莓、芹菜空白樣品色譜譜圖干凈，在甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果、毒死蜱處均無(wú)干擾；甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果3種農(nóng)藥的色譜峰形，在試劑溶液中呈山包形態(tài)，在芹菜基質(zhì)溶液中出現(xiàn)峰形拖尾不對(duì)稱(chēng)，在草莓基質(zhì)溶液中峰形較為尖銳。毒死蜱的峰形基本不受基質(zhì)影響。

圖1 樣品空白、試劑基標(biāo)準(zhǔn)溶液、基質(zhì)基標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖

2.1.2 出峰保留時(shí)間

圖2為試劑基標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品基質(zhì)基標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖。

圖2 試劑基標(biāo)準(zhǔn)溶液與基質(zhì)基標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

從圖2中可見(jiàn)，草莓基質(zhì)標(biāo)品中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果保留時(shí)間分別為7.01，9.41，11.24 min，芹菜基質(zhì)標(biāo)品較草莓略早出峰，保留時(shí)間分別為6.91，9.35，11.21 min，分別相差0.1，0.06，0.03 min，時(shí)間漂移偏差逐漸減少，甲胺磷、乙酰甲胺磷相差時(shí)間都大于定性判定要求±0.05 min內(nèi)［6］，氧化樂(lè)果保留時(shí)間差小于0.05 min，但從圖2（c）中可見(jiàn)兩峰明顯不重合，這在日常檢測(cè)中很容易造成誤判。試劑配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液與基質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液也存在保留時(shí)間差異，但時(shí)間偏差沒(méi)有規(guī)律。毒死蜱在試劑、草莓基質(zhì)、芹菜基質(zhì)中出峰的時(shí)間一致均為15.02 min，即沒(méi)有因溶劑、基質(zhì)不同而出現(xiàn)偏離。

對(duì)上述情況進(jìn)行分析，可能是甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果含有-P=O結(jié)構(gòu)，極性較強(qiáng)，使色譜峰保留時(shí)間在不同基質(zhì)中漂移明顯，且出峰越慢，保留時(shí)間漂移受基質(zhì)影響越小；而含-P=S結(jié)構(gòu)的毒死蜱沒(méi)有受基質(zhì)影響而引起保留時(shí)間的偏差。這一現(xiàn)象與文獻(xiàn)［7-8］提到的含有P=O建的化合物中基質(zhì)效應(yīng)要比含P=S鍵的基質(zhì)效應(yīng)明顯相一致。但有文獻(xiàn)提到毒死蜱在番茄、青椒、蔥、韭菜等蔬菜基質(zhì)、試劑溶液中會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間差異［9-10］，這可能與樣品基質(zhì)和色譜系統(tǒng)的不同有關(guān)。

2.1.3 色譜峰響應(yīng)

用1.2中得到的草莓基質(zhì)溶液、芹菜基質(zhì)溶液、及丙酮作溶劑分別配制相同濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.4.1實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣分析，得到4種農(nóng)藥峰面積差異如圖3所示。由圖3可知，毒死蜱峰面積大小在3種溶液中差別不大；甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果在草莓、芹菜基質(zhì)中峰響應(yīng)有一定差別，芹菜基質(zhì)中甲胺磷、乙酰甲胺磷峰面積約是草莓基質(zhì)中面積的75%，90%，會(huì)影響定量計(jì)算結(jié)果［11-12］，氧化樂(lè)果峰面積兩者差別不大。由于試劑溶液、芹菜基質(zhì)中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果峰拖尾嚴(yán)重，積分方法的設(shè)置對(duì)積分峰面積影響頗大，故選擇合適的積分方法尤為重要。

圖3 試劑、草莓基質(zhì)、芹菜基質(zhì)中4農(nóng)藥峰面積比較

2.2 草莓樣品中氧化樂(lè)果的檢測(cè)

檢測(cè)一批不同種類(lèi)的蔬菜、水果樣品時(shí)，用1.2方法處理樣品，同時(shí)用芹菜空白基質(zhì)溶液配制一定濃度的多農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.4.2實(shí)驗(yàn)條件在DB-17 MS 柱GC-FPD 上進(jìn)樣，結(jié)果發(fā)現(xiàn)草莓樣品中有峰與芹菜基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品中氧化樂(lè)果保留時(shí)間重合很好，如圖4（a）。為了進(jìn)一步確證草莓樣品中是否有氧化樂(lè)果檢出，按實(shí)驗(yàn)條件1.4.3在DB-5MS柱GC-MS/MS上進(jìn)樣采集得到圖4（b），發(fā)現(xiàn)此峰保留時(shí)間較標(biāo)準(zhǔn)樣品向后移動(dòng)0.05 min，峰形稍有拖尾，但沒(méi)有芹菜基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品嚴(yán)重，這與前述2.1.1，2.1.2中現(xiàn)象一致。計(jì)算離子對(duì)156＞79與156＞110豐度比發(fā)現(xiàn)，此峰為59.7，芹菜基質(zhì)標(biāo)中氧化樂(lè)果的豐度比為63.6，二者基本一致。因此可以判定此草莓樣品中有氧化樂(lè)果檢出。

3 結(jié)語(yǔ)

用基質(zhì)配制標(biāo)準(zhǔn)樣品的方式，對(duì)比了草莓、芹菜樣品中含有甲胺磷等4種農(nóng)藥時(shí)的色譜行為。DB-5 MS柱子上，甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果在草莓與芹菜基質(zhì)中其保留時(shí)間、峰形、峰面積不一致，其中保留時(shí)間最大漂移為0.1 min。芹菜基質(zhì)中的甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果更容易出現(xiàn)峰拖尾現(xiàn)象。毒死蜱的色譜行為在草莓、芹菜基質(zhì)或溶劑中基本相同，不受干擾。因在日常檢測(cè)工作中針對(duì)每一種蔬菜、水果配制基質(zhì)標(biāo)樣可行性不高，建議檢測(cè)樣品中未知峰出峰時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)果略微偏移時(shí)，最好選擇相同基質(zhì)配制標(biāo)品再進(jìn)行定性確證，避免漏檢。

參 考 文 獻(xiàn)

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聯(lián)系人：李鶯；E-mail： liysmiling@163.com

中圖分類(lèi)號(hào)：O657.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1008-6145（2016）01-0091-04

doi：10.3969/j.issn.1008-6145.2016.01.027

收稿日期：2015-11-08

Effects of Strawberry and Celery Matrix on Deteminiation of 4 Organophosphorus Pesticides

Li Ying， Qi Wenhua， Shang Hangying， Zhu Qicong
（Zhengzhou Agricultural Products Quality Testing Center， Zhengzhou 450006， China）

AbstractMatrix effects on deteminiation of 4 organophosphorus pesticides methamidophos，acephate，omethoate，chlorpyrifos in strawberry and celery was studied. The standard substance solutions was prepared，the retention times，peak shapes，peak areas of 4 kinds of pesticides were compared in different solutions of strawberry sample， celery sample and acetone. It was found that as DB-5 MS column was used，the peak retention times of methamidophos，acephate，omethoate in acetone，celery matrix solution，strawberry matrix solution were not overlapped， and their retention time maximum drift was 0.1 min. The peak tailing of methamidophos，acephate，omethoate in celery matrix solution and acetone were more serious than that in strawberry matrix solution. The methamidophos，acephate peak areas in celery matrix standard solution were about 75%，90% of that in the same concentration of strawberry matrix standard solution. In strawberry，celery，acetone stander solution，the retention time，peak shape，peak area of chlorpyrifos were almost the same.

Keywordsstrawberrry matrix； celery matrix； reagent solution； retention time drift； peak tailing