李里力，曹曉莉

(天津市泰達(dá)醫(yī)院 兒科，天津 300457)

益生菌對支氣管哮喘患兒血清神經(jīng)生長因子及白細(xì)胞介素-33水平的影響

李里力Δ，曹曉莉

(天津市泰達(dá)醫(yī)院 兒科，天津 300457)

目的 探討益生菌對支氣管哮喘患兒血清神經(jīng)生長因子(nerve growth factor，NGF)及白細(xì)胞介素-33(interleukin-33，IL-33)水平的影響。方法 選取天津市泰達(dá)醫(yī)院兒科收治的74例支氣管哮喘患兒，將其隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對照組，每組各37例。對照組患兒在給予控制感染、糾正電解質(zhì)等常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，吸入布地奈德氣霧劑和特布他林氣霧劑，口服酮替芬片、孟魯司特鈉，實(shí)驗(yàn)組患兒在對照組的基礎(chǔ)上給予益生菌，2組患兒均治療14 d。比較治療前后2組患兒血清NGF、IL-33水平及不良反應(yīng)發(fā)生率。結(jié)果 治療后實(shí)驗(yàn)組與對照組的血清NGF及IL-33水平均降低，與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組血清NGF水平較低(P<0.05)，血清IL-33水平較低(P<0.05)；與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 益生菌能夠有效改善支氣管哮喘的臨床癥狀和炎癥反應(yīng)，推測其機(jī)制可能與益生菌降低支氣管哮喘患兒血清NGF及IL-33水平有關(guān)。

益生菌；支氣管哮喘；血清神經(jīng)生長因子；白細(xì)胞介素-33

支氣管哮喘(bronchial asthma，BA)是一種由嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等多種不同細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞組分一同參與的以氣道高反應(yīng)性氣道炎癥[1]，我國主要城市城區(qū)兒童哮喘總患病率為3.02%，2年現(xiàn)患率為2.32%，不同性別、不同年齡、不同地域和不同城市兒童哮喘患病率存在明顯差異，仍有近1/3患兒未得到及時(shí)和準(zhǔn)確診斷，哮喘的用藥和管理狀況亟待改進(jìn)[2]，已成為嚴(yán)重威脅公眾健康的主要慢性疾病之一。我國兒童哮喘調(diào)查顯示其患病率約為0.5%～2%, 個(gè)別地區(qū)則高達(dá)約5%。全國至少有2千萬左右的患兒[3]。中、重度患兒，臨床上多采用支氣管舒張類藥物，但單純對癥治療會(huì)掩蓋炎癥發(fā)展，使氣道高反應(yīng)性加重。益生菌(Probiotics)是一類能夠促進(jìn)腸道微生物菌群平衡,對宿主健康或生理功能產(chǎn)生有益作用的活性微生物[4]，它不僅能有效的抑制和清除有害菌的生長，還能提升免疫力。目前臨床上用益生菌治療支氣管哮喘的研究較少，因此本研究通過觀察益生菌對支氣管哮喘患兒血清神經(jīng)生長因子、IL-33水平，以期為益生菌治療支氣管哮喘提供可能的臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集天津市泰達(dá)醫(yī)院2013年11月～2015年5月確診為支氣管哮喘的患兒74例。男性42例，女性32例，年齡2～10歲。按照就診順序分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。實(shí)驗(yàn)組37例，男性23例，女性14例，年齡2～10歲，平均年齡(6.03±1.46)歲，平均病程(1.03±0.11)年；對照組37例，男性19例，女性18例，年齡2～11歲，平均年齡(6.01±1.40)歲，平均病程(1.09±0.19)年。2組年齡、性別、病程等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患兒均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)哮喘學(xué)組《支氣管哮喘防治指南》[5]關(guān)于支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)；對研究中使用的藥物無過敏史；肝腎功能、心電圖正常；患兒家屬自愿參加本次研究，簽署知情同意書，并獲得本院倫理協(xié)會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：依從性差，不配合治療者；支氣管發(fā)作期的危重癥患兒；合并嚴(yán)重的心臟疾病、肝腎功能異常等；對研究中所涉及藥物過敏。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：所有患兒均給予控制感染、糾正電解質(zhì)與酸堿平衡、限制鈉鹽及水分?jǐn)z入等常規(guī)治療。對照組：個(gè)體化吸入布地奈德氣霧劑和特布他林氣霧劑，酮替芬片(國藥準(zhǔn)字H32023240，江蘇云陽集團(tuán)藥業(yè)有限公司)口服，2～3歲患兒0.5 mg Bid；3～6歲患兒0.75 mg Bid；6～14歲患兒1 mg Bid；在患兒的發(fā)病癥狀得到緩解和控制時(shí)停藥。孟魯司特鈉(國藥準(zhǔn)字H20064828, 企業(yè)名稱：四川大冢制藥有限公司)口服，不同年齡段的患兒服用的劑量不同，年齡在4～6歲之間的患兒服藥劑量為4 mg qd；年齡在6～14歲的患兒服藥劑量為5 mg qd。實(shí)驗(yàn)組：在對照組治療的基礎(chǔ)上，加用雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片(國藥準(zhǔn)字S19980004，內(nèi)蒙古雙奇藥業(yè)股份有限公司)1.0 g/次，3次/d。2組患兒均連續(xù)服用14 d。

1.2.2 觀察指標(biāo)：所有患兒均于治療前后采集清晨空腹靜脈血2 mL，加入肝素抗凝后立即低溫離心后取得血清。血清神經(jīng)生長因子(nerve growth factor，NGF)測定采用人神經(jīng)生長因子ELISA檢測盒測定，試劑盒由上海心語生物科技有限公司生產(chǎn)；白細(xì)胞介素-33(interleukin-33，IL-33)測定采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定(ELASA)法，試劑盒由上?；瘜W(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，所用儀器為FX-6MG酶聯(lián)免疫光譜分析儀。檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，并嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行操作和質(zhì)控。

2 結(jié)果

2.1 治療前后2組患兒血清NGF水平比較 治療后2組患兒的血清NGF水平與治療前相比均降低(P<0.05)；與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組患兒的血清NGF水平較低(P<0.05)。見表1。

組別 例數(shù)時(shí)間NGF(pg/mL)對照組37治療前91 65±11 68治療后70 12±7 06?實(shí)驗(yàn)組37治療前92 75±10 57治療后51 34±5 29?#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 治療前后2組患兒IL-33水平比較 治療后2組患兒IL-33水平與治療前相比均降低(P<0.05)；與對照組治療后比較，實(shí)驗(yàn)組患兒血清IL-33水平較低(P<0.05)。見表2。

組別 例數(shù)時(shí)間IL?33(pg/mL)對照組37治療前281 64±32 46治療后223 94±27 64?實(shí)驗(yàn)組37治療前283 65±31 46治療后156 97±20 73?#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 2組患兒的不良反應(yīng)比較 實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)2例心悸，1例惡心嘔吐食欲下降，1例頭痛，不良反應(yīng)發(fā)生率為10.81%；對照組出現(xiàn)2例心悸，2例惡心嘔吐食欲下降，1例頭痛，不良反應(yīng)發(fā)生率為13.51%，差異無統(tǒng)計(jì)意義(χ2=0.126，P>0.05)。

3 討論

支氣管哮喘簡稱哮喘，是一種常見而多發(fā)的氣道慢性炎癥性疾病，其發(fā)病機(jī)制尚不完全明確[6]，已知的機(jī)制有變態(tài)反應(yīng)、氣道的慢性炎癥、氣道神經(jīng)調(diào)節(jié)失常、氣道重構(gòu)及其相互作用等。支氣管哮喘近年來在全世界的發(fā)病率都有明顯增加的趨勢。哮喘的發(fā)病多由過敏反應(yīng)引起的，益生菌是指一類通過改善腸內(nèi)菌群平衡,對宿主起到有益作用的活性微生物[7]，能夠調(diào)節(jié)過敏IgE抗體和免疫平衡功能，減少由過敏反應(yīng)引起的細(xì)胞激素反應(yīng)，改善過敏體質(zhì)，增強(qiáng)肺部免疫功能，加強(qiáng)呼吸道防御能力。本實(shí)驗(yàn)通過對患兒血清神經(jīng)生長因子、IL-33的水平變化以及安全性的檢測，來研究益生菌對支氣管哮喘的作用機(jī)制。

哮喘的病因很復(fù)雜，許多因素都能參與和誘發(fā)哮喘的發(fā)病，在哮喘的氣道高反應(yīng)性上，神經(jīng)機(jī)制發(fā)揮著相當(dāng)重要的作用。NGF是一種能夠營養(yǎng)神經(jīng)元和促進(jìn)突起生長雙重功能的調(diào)節(jié)因子，對神經(jīng)的生長具有調(diào)節(jié)作用，能調(diào)控中樞和周圍神經(jīng)元的發(fā)育、分化、生長、再生，并在其功能特性的表達(dá)中發(fā)揮重要作用。NGF還能夠影響免疫細(xì)胞的活性，來對免疫系統(tǒng)的功能進(jìn)行調(diào)節(jié)。NGF與受體結(jié)合后，經(jīng)過一系列反應(yīng)形成了由軸膜覆蓋、含有具備生物活性的NGF的小泡，經(jīng)軸突轉(zhuǎn)運(yùn)至胞體，通過某些第二信使體系轉(zhuǎn)導(dǎo)來啟動(dòng)一系列的級聯(lián)反應(yīng)，從而對靶細(xì)胞中某些蛋白基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控，來發(fā)揮它的生物效應(yīng)。NGF通過對T、B細(xì)胞，嗜酸性和肥大細(xì)胞等免疫細(xì)胞的聚集、活化進(jìn)行調(diào)控，使炎性介質(zhì)的釋放得到促進(jìn)，并形成惡性循環(huán)從而擴(kuò)大炎癥反應(yīng)[8]。同時(shí)，NGF通過對相關(guān)細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的啟動(dòng)和增強(qiáng)，使收縮氣道的平滑肌神經(jīng)纖維興奮性提高，從而使氣道的炎癥狀態(tài)長期存在，導(dǎo)致發(fā)生氣道重塑。有學(xué)者研究表明，過敏性疾病尤其是哮喘，其患兒體內(nèi)神經(jīng)生長因子的水平明顯高于正常人群[9]，且患兒的病情嚴(yán)重程度與NGF升高的水平成正比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比實(shí)驗(yàn)組患兒的血清NGF水平明顯較低(P<0.05)，證實(shí)了益生菌能夠減輕支氣管哮喘患兒血清NGF水平，進(jìn)而降低氣道高反應(yīng)性，改善哮喘癥狀。

IL-33即白細(xì)胞介素-33，是IL-1家族的一種細(xì)胞因子，它有多種免疫學(xué)效應(yīng)[10]。IL-33的分布比較廣泛，在胃、肺等器官組織中的表達(dá)程度很高，它在扮演分泌性細(xì)胞因子時(shí)，能調(diào)節(jié)和參與Th2免疫反應(yīng)，起到前炎性因子的作用；在扮演核因子時(shí)，能在細(xì)胞核內(nèi)定位，抑制轉(zhuǎn)錄。哮喘患兒肺部發(fā)生炎癥反應(yīng)，其上皮細(xì)胞受損，就會(huì)釋放大量IL-33入血[11]，之后IL-33與其效應(yīng)細(xì)胞膜上的受體ST2結(jié)合，激活MAPK和IRAK4，從而產(chǎn)生TH2相關(guān)的細(xì)胞因子，例如IL-4、IL-5等，來對Th2類免疫應(yīng)答產(chǎn)生促進(jìn)作用，同時(shí)使血清IgE和IgA的水平增加，促進(jìn)哮喘相關(guān)因子大量釋放，誘導(dǎo)肺的病理性改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組患兒的IL-33的生成水平明顯較低(P<0.05)，證實(shí)了益生菌能夠有效改善支氣管哮喘患兒的炎癥反應(yīng)。研究結(jié)果顯示，2組不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證實(shí)了益生菌在治療過程中的安全性。

本實(shí)驗(yàn)通過對74位支氣管哮喘患兒的血清生長因子和IL-33的生成水平進(jìn)行檢測分析，以及對安全性的觀察和評估，證實(shí)了益生菌能夠有效降低減輕支氣管哮喘患兒的氣道高反應(yīng)性，改善哮喘癥狀和炎癥反應(yīng)，對臨床具有指導(dǎo)意義。

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(編校：王冬梅)

Effect of probiotics on bronchial asthma in children with NGF and IL-33

LI Li-liΔ, CAO Xiao-li

(Department of Pediatrics, Teda Hospital of Tianjin, Tianjin 300457, China)

ObjectiveTo explore the effect of probiotic on bronchial asthma in children with the serum levels of nerve growth factor and IL-33.Methods74 cases of children with bronchial asthma were randomly divided into experimental group and control group, 37 cases in each group. Control group given control infection, correct electrolyte, etc, on the basis of conventional treatment, inhaled budesonide aerosol and terbutaline aerosol, oral methadone for Finn, meng LuSi sodium, on the basis of the experimental group patients in the control group given probiotics, two groups of children with treatment for 14 days.Serum levels of nerve growth factor, IL-33 and incidence of adverse reactions were compared between two groups of children pre and post-treatment.ResultsThe experimental group and control group after treatment, serum levels of nerve growth factor and the level of IL-33 decreased, compared with the control group, experimental group with lower serum levels of nerve growth factor (P<0.05), the lower level of serum IL - 33 (P<0.05); Compared with the control group, incidence of adverse reactions of experimental group was no statistical difference.ConclusionProbiotics can effectively improve the clinical symptoms and inflammation of bronchial asthma, speculated that the mechanism may be related to probiotics reduce children with bronchial asthma on serum levels of nerve growth factor and IL - 33.

probiotics; bronchial asthma; serum levels of nerve growth factor; IL-33

李里力，通信作者，女，本科，主治醫(yī)師，研究方向：兒內(nèi)科，E-mail：tjlilili@163.com。

R725.6

A

1005-1678(2016)01-0126-03