楊　浩，　熊　云*，　朱　鵬，　和倩倩，　黃海龍

1. 中國人民解放軍后勤工程學(xué)院, 軍事油料應(yīng)用與管理工程系， 重慶 401331；2. 浙江省寧波大學(xué)應(yīng)用海洋生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 寧波 315211

噴氣燃料中污染微生物檢測(cè)方法概況

楊浩1，熊云1*，朱鵬2，和倩倩1，黃海龍2

1. 中國人民解放軍后勤工程學(xué)院, 軍事油料應(yīng)用與管理工程系， 重慶 401331；2. 浙江省寧波大學(xué)應(yīng)用海洋生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 寧波 315211

摘要：微生物污染不僅降解噴氣燃料，還嚴(yán)重威脅儲(chǔ)存和飛行安全。噴氣燃料中污染微生物的檢測(cè)是有效治理微生物污染的前提。基于此，本文將噴氣燃料中污染微生物檢測(cè)方法分為傳統(tǒng)法、分析生物學(xué)法以及分子生物學(xué)方法，并對(duì)三種方法優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了詳細(xì)介紹。最后對(duì)噴氣燃料中污染微生物檢測(cè)方法進(jìn)行了展望。

關(guān)鍵詞：噴氣燃料； 微生物； 檢測(cè)方法； 傳統(tǒng)法； 分析生物學(xué)法； 分子生物學(xué)法

油庫日常管理中基本上是不可能做到貯藏設(shè)備的絕對(duì)光潔以及無水，因此基本上無法避免噴氣燃料中微生物的存在[1]。最早發(fā)現(xiàn)噴氣燃料微生物污染是在上世紀(jì)50年代，Bakanauskas發(fā)現(xiàn)飛機(jī)油箱中有微生物的存在，并影響了飛機(jī)正常飛行。兩年后，美國一架B-52轟炸機(jī)就因?yàn)槲⑸镂廴咀枞诉^濾器而墜毀[2]。Gaylarde CC等發(fā)現(xiàn)噴氣燃料中微生物的存在會(huì)腐蝕貯藏設(shè)備、管道、氧化密封項(xiàng)圈，也會(huì)堵塞飛機(jī)過濾器等等[3]。根據(jù)美國1991年調(diào)查報(bào)道，每年僅由硫酸鹽還原菌造成的損失就有60億美元之多[4]。鑒于此，噴氣燃料微生物污染問題得到了廣泛的關(guān)注，并提出了許多解決方法。但是，噴氣燃料中污染微生物群落的鑒定是解決噴氣燃料微生物污染問題前提，對(duì)針對(duì)性解決貯藏設(shè)備腐蝕、油料管道堵塞等問題具有重要的指導(dǎo)意義。噴氣燃料中污染微生物的檢測(cè)方法也是隨著微生物檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展而不斷改進(jìn)，可分為傳統(tǒng)學(xué)方法、分析微生物學(xué)方法以及分子生物學(xué)方法。本文便從這三個(gè)方面對(duì)噴氣燃料中污染真菌檢測(cè)方法概況進(jìn)行介紹，并對(duì)各方法的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)。

1傳統(tǒng)方法

1.1傳統(tǒng)方法應(yīng)用

傳統(tǒng)方法多是先將微生物進(jìn)行培養(yǎng)基分離培養(yǎng)，再根據(jù)微生物形態(tài)學(xué)或者生態(tài)學(xué)特征、培養(yǎng)基理化變化以及特定的有性型分析來進(jìn)行微生物種類鑒定。Darby RT等利用培養(yǎng)基方法對(duì)噴氣燃料中微生物進(jìn)行分離鑒定，最后得到了主要污染真菌為枝孢霉(Hormoconisresinae)、擬青霉(Paecilomycesvarioti)、青霉(Penicillium)以及曲霉(Aspergillus)。Ferrari等利用培養(yǎng)基方法從JP-4樣品中分離出眾多種類的微生物，并總結(jié)出主要污染真菌為枝孢霉(Hormoconisresinae)、煙曲霉(Aspergillusfumigatus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、氣單胞菌屬(Aeromonas)以及硫酸鹽還原菌(Sulfate Reducing Bacteria)[5]。郭玲玲等利用不同的培養(yǎng)基從噴氣燃料微生物進(jìn)行分離鑒定出了法式檸檬酸桿菌(Frenchcitricacidbacillus)、棒狀桿菌(corynebacterium)、麥芽桿菌(Maltbacillus)以及葡萄球菌(Staphylococci)等細(xì)菌，青霉菌(Penicillium)、木霉菌(Trichoderma)、曲霉菌(Aspergillus)和枝孢霉菌(Hormoconisresinae)等真菌[6]。袁祥波等利用傳統(tǒng)方法從噴氣燃料懸浮物中分離鑒定出枝孢霉菌，從而驗(yàn)證了真菌是產(chǎn)生噴氣燃料懸浮物的主要原因之一[7]。

1.2傳統(tǒng)方法的局限性

傳統(tǒng)方法具有成本低、方便簡單的優(yōu)點(diǎn)，方法成熟，適用性范圍廣，是不可或缺的微生物鑒定方法。但是傳統(tǒng)方法基本上是建立在培養(yǎng)基基礎(chǔ)上的，這就要求被鑒定的微生物能夠在培養(yǎng)基中存活。但是Amann RI等發(fā)現(xiàn)自然環(huán)境中大約只有1%的微生物可以通過培養(yǎng)基的方法分離鑒定出來，表1列舉出了不同生境下可培養(yǎng)微生物的比例。另外，建立在培養(yǎng)基方法上的傳統(tǒng)方法因?yàn)樾枰獙?duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)，所以耗時(shí)長，難以滿足快速檢驗(yàn)的需求[8]。

表1　不用生境下可培養(yǎng)微生物比例

2分析生物學(xué)方法

鑒于傳統(tǒng)方法的局限性，分析生物學(xué)法應(yīng)運(yùn)而生。這種方法主要是利用高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、質(zhì)譜法(MS)以及氣質(zhì)聯(lián)用的方法(GC/MS)來分析檢測(cè)微生物代謝產(chǎn)物、細(xì)胞中的脂肪酸、蛋白質(zhì) 、多肽、多糖等，來進(jìn)行微生物鑒定[9-11]。Fang J等利用GC/MS方法，通過對(duì)磷脂酯結(jié)合態(tài)脂肪酸分析，發(fā)現(xiàn)噴氣燃料中大量硫酸鹽還原菌的存在[12]。Jung等利用GC/MS檢測(cè)藤黃類諾卡菌代謝產(chǎn)物，來比較藤黃類諾卡菌代謝不同長度碳鏈烴的能力[13]。Rauch ME等利用氣相色譜法，通過分析脂肪酸甲酯鑒定出噴氣燃料中九個(gè)屬細(xì)菌，17種菌[14]。

分析生物學(xué)方法，實(shí)際上是借助化學(xué)分析的方法來進(jìn)行微生物檢測(cè)，相對(duì)于傳統(tǒng)方法不需要對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)，更加簡單、而且耗時(shí)短。另外，可以在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)快速定性或定量檢測(cè)出納克級(jí)別的微生物成分，所以可以用來快速鑒定微生物。但是，這種方法相比較來講，需要專門的操作人員，并且還需要配備相應(yīng)的儀器，成本很高。并且分析生物學(xué)方法鑒定結(jié)果受微生物自身以及環(huán)境有關(guān)。不同的溫度、環(huán)境、微生物自身的胞齡都會(huì)或多或少的影響細(xì)胞脂肪酸的組成。即使嚴(yán)格按照儀器操作要求進(jìn)行操作，數(shù)據(jù)庫中含有未知菌種與否會(huì)直接影響分析微生物脂肪酸結(jié)果的準(zhǔn)確性。尤其當(dāng)數(shù)據(jù)庫囊括的菌種匱乏的話，這種差異性會(huì)更大[15]。

3分子生物學(xué)方法

分子生物學(xué)方法是基于分子水平來研究生物生命活動(dòng)及其科學(xué)規(guī)律，在微生物鑒定領(lǐng)域主要研究對(duì)象為微生物DNA和RNA。由于其具有準(zhǔn)確性、靈敏度高、耗時(shí)短、特異性強(qiáng)、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛利用在微生物檢測(cè)上[16]。在噴氣燃料微生物檢測(cè)方面的應(yīng)用主要有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)方法，以及建立在PCR基礎(chǔ)上的16S、18S rDNA以及ITS基因測(cè)序方法。另外環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)和橫向流動(dòng)試紙條快速檢測(cè)技術(shù)(LFD)相結(jié)合的LAMP-LFD檢測(cè)方法也出現(xiàn)在噴氣燃料微生物檢測(cè)領(lǐng)域[17-21]。

3.1PCR以及建立在PCR基礎(chǔ)上的檢測(cè)技術(shù)

Denaro T等利用傳統(tǒng)PCR和直接PCR方法在J-8樣品中分離鑒定出了之前沒有發(fā)現(xiàn)的28種菌，并且對(duì)比了直接PCR和傳統(tǒng)PCR在鑒別微生物方面的差異，發(fā)現(xiàn)直接PCR不需要對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)，大大減少了操作步驟以及檢測(cè)周期，而且直接PCR檢測(cè)出微生物的數(shù)量一般是傳統(tǒng)PCR方法的4倍[17]。White等利用傳統(tǒng)PCR以及建立在PCR基礎(chǔ)上的變性梯度凝膠電泳(DGGE)方法對(duì)30個(gè)樣品進(jìn)行微生物種群的鑒定分析，發(fā)現(xiàn)海洋桿菌屬(Marinobacter)、伯克氏菌屬(Burkholderia)以及鹽單胞菌屬(Halomonas)為主要的微生物種群[18]。Tardy-Jacquenod 等利用16S rDNA測(cè)序技術(shù)從水相樣品中分離鑒定出了21種硫酸鹽還原菌(Sulphate-reducing bacteria)[19]。袁祥波等利用18S rRNA技術(shù)特異性檢測(cè)噴氣燃料懸浮物中枝胞霉菌(Hormoconisresinae)，揭示了噴氣燃料懸浮物和真菌生長之間的關(guān)系[7]?；赑CR基礎(chǔ)上的16S、18S rRNA以及ITS測(cè)序相比較傳統(tǒng)方法以及分析生物技術(shù)具有特異性更強(qiáng)、更準(zhǔn)確，尤其在微生物多樣性分析時(shí)具有更好的應(yīng)用。

Rauch ME等對(duì)比GC-FAMEY法和16S方法鑒定噴氣燃料中微生物，發(fā)現(xiàn)GC-FAMEY法分離鑒定出來的一種需氧型細(xì)菌為英美地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)，但是DNA測(cè)序卻發(fā)現(xiàn)該菌是短小芽孢桿菌Bacilluspumilus[15]。Harold W通過對(duì)比GC和16S rRNA方法發(fā)現(xiàn)，有些細(xì)菌GC方法沒有檢測(cè)出來，但是通過16S rRNA方法卻檢測(cè)出來[20]。這說明在菌種檢測(cè)上，分子生物學(xué)方法特異性和準(zhǔn)確性要強(qiáng)于分析生物學(xué)方法。另外基因測(cè)序可以突破傳統(tǒng)方法的局限性，發(fā)現(xiàn)一些不能夠分離培養(yǎng)的微生物，這對(duì)研究微生物多樣性至關(guān)重要。

3.2LAMP方法的應(yīng)用

LMAP是Notomi等人開發(fā)的一種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)，相比于PCR技術(shù)具有特異性強(qiáng)、靈敏度該、操作簡單、不依賴專業(yè)設(shè)備，耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)，近年來得到廣泛應(yīng)用[21]。LFD是Kiatpathomchai設(shè)計(jì)的一種可以將LAMP擴(kuò)增結(jié)果短時(shí)間內(nèi)呈現(xiàn)在試紙條上的一種技術(shù),這就簡化了LAMP產(chǎn)物檢測(cè)步驟，縮短了檢測(cè)時(shí)間，因此LAMP-LFD技術(shù)在微生物檢測(cè)方面得到了越來越多的應(yīng)用[22]。和倩倩等首次利用LAMP-LFD方法對(duì)噴氣燃料中特征真菌枝孢霉(Hormoconisresinae)進(jìn)行檢測(cè)，并跟PCR方法進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)不論特異性還是靈敏度，LAMP-LFD都比PCR方法強(qiáng)。而且用時(shí)只需35 min，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于PCR的3 h[23]。但是同樣因?yàn)長AMP方法擴(kuò)增效率高，多組實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行，容易發(fā)生氣溶膠污染，出現(xiàn)假陽性[22]。

微流控技術(shù)的出現(xiàn)可以完美解決掉假陽性問題，并且還可以實(shí)現(xiàn)了LAMP反應(yīng)的高通量檢測(cè)。微流控是一種精確控制和操控微尺度流體，尤其特指亞微米結(jié)構(gòu)的技術(shù)。圖1為博奧生物有限公司開發(fā)的晶芯?RTisochipTM-A恒溫?cái)U(kuò)增微流控芯片核酸分析儀及配套碟式芯片，擁有我國自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，而且在國際上也處于領(lǐng)先地位,。其碟式芯片實(shí)驗(yàn)體系只需要1.5 μL,而普通LAMP方法反應(yīng)體系為25 μL，大大減少了試劑以及模板使用量，節(jié)約了成本。碟式芯片具有24個(gè)通道，每個(gè)通道都設(shè)立緩沖區(qū)域，這樣就實(shí)現(xiàn)了多組實(shí)驗(yàn)平行進(jìn)行，而不會(huì)產(chǎn)生假陽性[24]。Zhou QJ等便利用晶芯?RTisochipTM-A恒溫?cái)U(kuò)增微流控芯片核酸分析儀特異性檢測(cè)出10種水產(chǎn)生物致病菌。并且發(fā)現(xiàn)和傳統(tǒng)方法及PCR方法相比具有更高的靈敏度、特異性，而且操作簡單、耗時(shí)更短以及反應(yīng)體系小的優(yōu)勢(shì)，可以用在微生物實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)上[25]。同時(shí)這些優(yōu)點(diǎn)正是部隊(duì)油庫噴氣燃料微生物檢測(cè)所需要的，因此完全可以將這種技術(shù)運(yùn)用在噴氣燃料微生物檢測(cè)上。

圖1晶芯?RTisochipTM-A 恒溫?cái)U(kuò)增微流控芯片

核酸分析儀及配套碟式芯片

4國際航空運(yùn)輸協(xié)會(huì)推薦的方法

國際航空運(yùn)輸協(xié)會(huì)推薦了四種檢測(cè)飛機(jī)油箱中微生物的方法，為目前國際上運(yùn)用最多的噴氣燃料污染微生物檢測(cè)方法[26]。根據(jù)原理可分為兩大類，傳統(tǒng)方法以及分子生物學(xué)方法。

4.1MicrobMonitor2?檢測(cè)方法

英國ECHA微生物學(xué)有限公司開發(fā)的Microb-Monitor2?裝置[26]，利用傳統(tǒng)方法，原理為在半固體營養(yǎng)培養(yǎng)基中加入顯色劑四氮唑紅(TTC)，若檢測(cè)燃料或水中含有微生物則在凝膠上會(huì)出現(xiàn)紅色的菌落，根據(jù)培養(yǎng)基上培養(yǎng)的微生物數(shù)量，可定量檢測(cè)燃料和水相中所有酵母菌、霉菌和細(xì)菌，如圖2。

圖2　使用MicrobMonitor2檢測(cè)噴氣燃料

4.2Easicult Combi檢測(cè)方法

芬蘭奧林診斷公司開發(fā)的Easicult Combi裝置，這種裝置只能檢測(cè)水相中的微生物，原理上和 MicrobMonitor2方法相似，都是利用傳統(tǒng)方法進(jìn)行噴氣燃料中污染微生物的檢測(cè)，可做到半定量檢測(cè)霉菌、酵母菌和細(xì)菌[26]。和第一種方法不同的是Easicult Combi有標(biāo)準(zhǔn)微生物培養(yǎng)生長圖，鑒定時(shí)只需要將載片與標(biāo)準(zhǔn)圖對(duì)比即可，如圖3。

圖3　使用Easicult Combi檢測(cè)步驟

4.3HY-LiTE?JET A1燃料試驗(yàn)

HY-LiTE?JET A1燃料試驗(yàn)是德國默克集團(tuán)開發(fā)出來的，利用分子生物學(xué)方法進(jìn)行噴氣燃料中污染微生物的檢測(cè)，原理是通過測(cè)量樣品中ATP的含量來評(píng)估樣品中的活菌數(shù)，簡便快捷操作簡單[26]。Geva J等分別從22個(gè)軍用油相中提取樣品，分別利用測(cè)ATP熒光法和傳統(tǒng)法檢測(cè)燃料中微生物的量，發(fā)現(xiàn)燃料中菌落數(shù)在2 000 cfu/L～20 000 cfu/L之間時(shí)相關(guān)性達(dá)到0.96，而菌落數(shù)大于20 000 cfu/L時(shí)相關(guān)性變?yōu)?.54，菌落數(shù)小于2 000 cfu/L，相關(guān)性會(huì)更低，減小為0.25。所以，ATP熒光法用來評(píng)估噴氣燃料中微生物數(shù)量具有局限性，但是當(dāng)菌落數(shù)在2 000 cfu/L～20 000 cfu/L之間時(shí)，準(zhǔn)確率還是很高的[27]。但是HY-LiTE?JET A1燃料試驗(yàn)即ATP熒光法只能告訴我們噴氣燃料中是否有微生物的存在，以及微生物的數(shù)量(這種方法根據(jù)Geva J等研究發(fā)現(xiàn)，不一定準(zhǔn)確)，但是無法告訴我們是哪些微生物，即無法對(duì)污染微生物進(jìn)行特異性檢測(cè)。

4.4FUELSTATTM resinae PLUS檢測(cè)方法

FUELSTATTM resinae PLUS方法[26]便解決了HY-LiTE?JET A1方法不能對(duì)噴氣燃料中微生物特異性檢測(cè)的缺點(diǎn)，這種方法本質(zhì)上就是酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)，是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)，特異性強(qiáng)，準(zhǔn)確率高的優(yōu)點(diǎn)。Gaylarde 等用酶聯(lián)免疫吸附法來鑒定航空煤油中的枝孢霉菌，發(fā)現(xiàn)這種方法準(zhǔn)確性高，很少會(huì)和其他真菌有交叉反應(yīng)[28]。但是這種方法容易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)、酶標(biāo)板整體背景高以及吸光度數(shù)值偏高或偏低等問題，并且造成這些問題的原因很多，而且這種方法比較適合實(shí)驗(yàn)室操作，很難應(yīng)用在戶外使用[29]。

5展望

傳統(tǒng)方法，分析生物學(xué)方法以及分子生物學(xué)方法在實(shí)際運(yùn)用中各有利弊，沒有一種方法可以適用于所有環(huán)境，滿足所有要求，應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際需要選擇不同的方法進(jìn)行污染微生物的鑒定，并且有些時(shí)候?yàn)榱藴?zhǔn)確，會(huì)運(yùn)用兩種或者三種方法進(jìn)行比對(duì)以達(dá)到消除誤差的效果。油庫實(shí)地檢測(cè)要求檢測(cè)方法簡單、特異性強(qiáng)、耗時(shí)短，抗干擾能力強(qiáng)等，而和倩倩等人針對(duì)部隊(duì)實(shí)際需要開發(fā)的LAMP-LFD方法相對(duì)于傳統(tǒng)方法、分析生物學(xué)方法以及其他分子生物學(xué)方法相比，特異性更強(qiáng)、耗時(shí)更短，而且不需要依賴相對(duì)昂貴的專業(yè)儀器，因此利于現(xiàn)場(chǎng)實(shí)地快速檢測(cè)，值得推廣[23]。尤其是微流控技術(shù)的成熟應(yīng)用，使得LAMP方法高通量特異性檢測(cè)噴氣燃料中污染微生物得以實(shí)現(xiàn)。另外，根據(jù)LFD試紙條檢測(cè)線亮度和LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物量之間的關(guān)系，可以發(fā)展LFD試紙條定量技術(shù)，這將是推動(dòng)LAMP-LFD方法應(yīng)用的另一個(gè)重要因素。假如LFD試紙條定量技術(shù)能夠成熟運(yùn)用，將使得油庫噴氣燃料污染微生物實(shí)地定性定量快速檢測(cè)得以實(shí)現(xiàn)。

油罐中相對(duì)穩(wěn)定的微環(huán)境的形成，必然經(jīng)歷了幾次微生物群落演替。因此建立準(zhǔn)確微生物群落演替數(shù)據(jù)庫，對(duì)噴氣燃料污染微生物的防治具有重要意義。這樣當(dāng)我們監(jiān)測(cè)到某種或者某幾種微生物出現(xiàn)的時(shí)候，根據(jù)微生物群落演替數(shù)據(jù)庫，我們就可以模擬出油罐中微生物接下來的變化，這就對(duì)我們針對(duì)性解決微生物污染提供了基礎(chǔ)。傳統(tǒng)方法以及分析生物學(xué)方法由于其本身的局限性，所以并不適合微生物群落演替的研究，而PCR、16S rRNA以及18S rDNA等方法不僅耗時(shí)長，操作復(fù)雜，而且分辨率低，在分析親緣關(guān)系近、變異小的物種時(shí)，會(huì)將多個(gè)鄰近基因型的樣本混為一體。新一代高通量測(cè)序技術(shù)(next-generation sequencing technology)的出現(xiàn)，大大縮短了測(cè)序時(shí)間，同時(shí)降低了成本，跨越了傳統(tǒng)分子生物學(xué)研究方法所不能逾越的鴻溝，使得對(duì)所有目標(biāo)樣本進(jìn)行全基因組測(cè)序和差異比較分析成為可能[30]。本課題組已經(jīng)率先開展了此項(xiàng)工作，得到了一些進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)了之前許多噴氣燃料微生物研究未曾出現(xiàn)的微生物，并對(duì)噴氣燃料中微生物進(jìn)行了歸屬。因此可以預(yù)見，新一代高通量測(cè)序技術(shù)(next-generation sequencing technology)在噴氣燃料微生物污染問題的解決上具有廣泛的應(yīng)用前景。

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An outline of detection methods for microorganisms in jet fuel

YANG Hao1, XIONG Yun1, ZHU Peng2, HE Qian-qian1,HUANG Hai-long2

1. Dept. of Oil Application & Management Engineering，LEU，Chongqing 401311，China;2. Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology, Ningbo University, Ningbo 315211, China

AbstractMicrobial contaminants in aviation fuel not only degrade the fuel, but also accelerate corrosion within the fuel tank and threaten flight safety. The detection of contaminating microorganism in jet fuel is the premise of effective treatment of microbial contamination. The methods for detecting the contamination in jet fuel are divided into traditional methods, analytical microbiology methods and molecular biology methods. The advantages and disadvantages of the three methods for detecting microrganisms in jet fuel and their developments were introduced.

Key wordsjet fuel; microorganism; detection methods; traditional methods; analytical microbiology methods; molecular biology methods

基金項(xiàng)目：總后勤部物資油料部重大項(xiàng)目“微生物對(duì)庫存噴氣燃料懸浮物的影響及防治技術(shù)研究” yx214L048。

作者簡介：楊浩(1991～)，研究生， 主要從事方向?yàn)閲姎馊剂衔⑸镂廴痉矫娴难芯?。E-mail：yanghaolyyz20@126.com。 *通訊作者: 熊云，教授，博士生導(dǎo)師。中國人民解放局后勤工程學(xué)院軍用油料應(yīng)用教研室主任,曾獲部隊(duì)科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)，主要從事軍用油品應(yīng)用、油料節(jié)約研究。電話：023-8673142，E-mail：xyun241@126.com。