吳瑩瑩，丁躍明，畢　磊，田林波，王　敏，潘　云（大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，云南大理　671000）

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大理地區(qū)HPV感染與宮頸病變及相關(guān)危險(xiǎn)因素關(guān)系初探

吳瑩瑩，丁躍明，畢磊，田林波，王敏，潘云*
（大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，云南大理671000）

［摘要］目的：探討大理地區(qū)婦女宮頸人乳頭瘤病毒（HPV）感染亞型與宮頸病變及其流行病學(xué)特征的關(guān)系。方法：收集2011年7月至2014年9月在大理大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科門診病例，共2 053例，平均年齡為39.46歲，應(yīng)用基因擴(kuò)增及導(dǎo)流雜交技術(shù)進(jìn)行基因亞型檢測(cè)。TCT及病理檢查方法對(duì)其進(jìn)行病變類型檢測(cè)。收集整理HPV陽(yáng)性患者的年齡、民族、職業(yè)。結(jié)果：2 053例病例中陽(yáng)性例數(shù)為308例，陽(yáng)性率為15.00%。共檢測(cè)出14種高危型：HPV16（28.90%）、HPV52（21.75%）、HPV58（12.99%）、HPV18（10.39%）、HPV68（4.22%）、HPV31（2.27%）、HPV66（3.25%）、HPV33（5.19%）、HPV39（5.52%）、HPV53（4.55%）、HPV59 （1.62%）、HPV56（0.65%）、HPV35（1.62%）、HPV51（2.60%）；5種低危型：HPV45、HPV42、HPV6、HPV11、81（cp8304）。HPV單一感染宮頸病變陽(yáng)性率為21.95%（TBS）、50%（病理），多重感染宮頸病變陽(yáng)性率為4.88%（TBS）、9.38%（病理）。陽(yáng)性病例中有122例記錄了民族，其中白族81例（66.39%），漢族27例，彝族6例，傈僳族4例，藏族2例，回族1例，納西族1例。白族婦女中共檢出8種基因亞型。職業(yè)主要分為務(wù)農(nóng)人員（52.70%），非務(wù)農(nóng)人員（職員、公務(wù)員及自由職業(yè)者等）（47.30%）。結(jié)論：大理地區(qū)HPV感染高危型以16型、52型、58型、18型最常見(jiàn)，多重感染并不增加宮頸癌的發(fā)生。HPV病例構(gòu)成比較高的年齡段為30～52歲，陽(yáng)性率較高的年齡段為≥62歲。白族婦女中較常見(jiàn)的HPV基因亞型為HPV52型、16型、58型、18型。HPV感染亞型分布具有一定的地域、年齡及民族特點(diǎn)。

［關(guān)鍵詞］人乳頭瘤病毒感染；宮頸病變；基因亞型；病理；宮頸脫落細(xì)胞學(xué)

［DOI］10. 3969/j. issn. 1672-2345. 2016. 02. 006

子宮頸癌是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，位居女性惡性腫瘤第2位，國(guó)內(nèi)外大量的研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌的高危因素排名前4位為：人乳頭瘤病毒（HPV）感染，人流次數(shù)，宮頸炎，首次性交年齡〔1〕。國(guó)際癌癥研究中心專題討論會(huì)（1995年）明確提出HPV感染是宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素〔2〕，HPV基因亞型主要分為兩種：高危型和低危型，其中高危型HPV持續(xù)感染為宮頸癌變的必要條件之一。通過(guò)研究人員對(duì)HPV感染與宮頸病變關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，HPV基因分型具有一定的流行病學(xué)分布特點(diǎn)。本文通過(guò)回顧性研究收集資料分析大理地區(qū)婦女HPV感染亞型與宮頸病變的關(guān)系，以及HPV感染的年齡、民族、職業(yè)特點(diǎn)。

1　研究對(duì)象及研究方法

1.1一般資料收集2011年7月至2014年9月在大理大學(xué)附屬醫(yī)院婦科門診病例2 053例，應(yīng)用基因擴(kuò)增及導(dǎo)流雜交技術(shù)進(jìn)行基因分型檢測(cè)、新柏氏基液細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（TCT）及病理檢查方法進(jìn)行病變類型檢查的病例進(jìn)行回顧性分析研究。

1.2試劑HPV基因亞型檢測(cè)應(yīng)用人乳頭狀瘤病毒（HPV）分型檢測(cè)試劑盒（PCR+膜雜交法）（潮州凱普生物化學(xué)有限公司），該試劑盒系由HPV核酸擴(kuò)增試劑、HPV雜交檢測(cè)試劑等組成，采用基因擴(kuò)增技術(shù)及導(dǎo)流雜交原理，通過(guò)反向點(diǎn)雜交檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物與包被有型特異性探針膜雜交結(jié)果，采用堿性磷酸酶系統(tǒng)定性檢測(cè)，從而對(duì)HPV基因型進(jìn)行分型檢測(cè)，可檢測(cè)出16種高危型HPV基因：HPV16、18、31、33、35、39、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68，以及5種低危型HPV基因：HPV6、11、42、43、cp8304（81）。

1.3方法對(duì)HPV感染陽(yáng)性的婦女進(jìn)行宮頸/陰道細(xì)胞學(xué)（TBS）或病理組織學(xué)檢查（以自愿為原則），共有82例進(jìn)行TCT檢測(cè)，64例進(jìn)行病理學(xué)檢查。對(duì)陽(yáng)性病例的流行病學(xué)指標(biāo)（年齡、民族、職業(yè)）進(jìn)行整理、篩選、分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均應(yīng)用SPSS17.0系統(tǒng)進(jìn)行。

2　結(jié)果

進(jìn)行基因分型檢測(cè)的2 053例病例，HPV陽(yáng)性例數(shù)為308例，陽(yáng)性率為15.00%，共檢出19種基因亞型，其中高危型14種，低危型5種。基因亞型為前4位HPV16占28.90%（89/308）、HPV52占21.75% （67/308）、HPV58占12.99%（40/308）、HPV18占10.39%（32/308）。見(jiàn)表1。

表1　大理地區(qū)308例HPV基因亞型構(gòu)成比

HPV單一型別感染率為12.03%（247/2 053），在陽(yáng)性病例的構(gòu)成比為80.19%（247/308），多重感染型別（包括雙重，三重及以上感染）的感染率為2.97%（61/2 053），構(gòu)成比為19.81%（61/308）。TCT結(jié)果中TBS分類高于非典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）則為宮頸病變陽(yáng)性，病理檢測(cè)結(jié)果中病變類型高于低度鱗狀上皮內(nèi)病變（CIN1）則為宮頸病變陽(yáng)性，單一感染宮頸病變陽(yáng)性率分別為21.95%（18/82）、50% （31/64），多重感染宮頸病變陽(yáng)性率分別為4.88%（4/ 82）、9.38%（6/64），進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.01差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2、3。

表2　單一感染及混合感染HPV型別情況

表3　不同型別感染對(duì)應(yīng)TBS及病理學(xué)檢查情況

通過(guò)對(duì)HPV陽(yáng)性病例進(jìn)行年齡分組（年齡在19歲到71歲，平均年齡為39.9歲，以10歲為區(qū)間，共分為5組（19～30歲，30～41歲，41～52歲，52～63歲，≥63歲），對(duì)其進(jìn)行分析，在30～41歲，41～52歲這兩個(gè)年齡段，構(gòu)成比較高分別為39.54%（122/308）、38.89%（119/308）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?！?3歲年齡段的陽(yáng)性率較高為26.92%，構(gòu)成比為2.27 %。見(jiàn)表4。

對(duì)陽(yáng)性并記錄民族（122例）病例進(jìn)行整理分析，白族有81例，占66.39%，漢族有27例，占22.13%（見(jiàn)表3）。之后對(duì)這些白族、HPV感染陽(yáng)性的病例進(jìn)行基因亞型分析，共檢出8種基因亞型：52型（21例），16型（18例），58型（11例），18型（9例），39型（8例），33型（7例），66型（5例），68型（2例）。

表4　年齡分組及民族分布與HPV感染

職業(yè)分布，包括務(wù)農(nóng)人員、職員、公務(wù)員及自由職業(yè)等多種職業(yè)，其中務(wù)農(nóng)人員所占比例為52.70%，非務(wù)農(nóng)人員占48.30%。

3　討論

通過(guò)近幾年對(duì)HPV亞型感染與宮頸病變的研究發(fā)現(xiàn)，HPV亞型分布具有一定的地理性，在世界范圍內(nèi)，以16型最多，其次為18型，45型，31型，33型，拉丁美洲以33型最常見(jiàn)，其次為39型和59型〔3〕，亞洲國(guó)家中，除16型、18型外，58型，52型引起宮頸癌所占比例較西方國(guó)家及非洲國(guó)家多〔4-5〕。北京地區(qū)常見(jiàn)基因亞型依次為16型、58型、52型、33型〔6〕。李軍等〔7〕研究結(jié)果顯示西安地區(qū)育齡婦女以16型、58型、18型、66型、33型比較常見(jiàn)。Li等〔8〕研究發(fā)現(xiàn)成都地區(qū)宮頸癌中最主要的感染亞型為HPV 16型、58型、18型、52型。本文首次對(duì)大理地區(qū)婦女HPV基因亞型做了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)大理地區(qū)HPV感染亞型分布與我國(guó)境內(nèi)其他地區(qū)相比較，HPV感染常見(jiàn)基因亞型有一定差異，大理地區(qū)常見(jiàn)HPV基因亞型為16型、58型、52型、18型。符合亞洲地區(qū)HPV基因亞型感染的特點(diǎn)。HPV多重感染與宮頸癌病變發(fā)生的關(guān)系一直是學(xué)者們關(guān)注的問(wèn)題，有人認(rèn)為高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變更趨向多重感染，HPV雙重、多重感染增加，導(dǎo)致宮頸病變程度加重，但是通過(guò)大量流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，多重感染并不增加宮頸癌的發(fā)生。本研究對(duì)單一感染與多重感染宮頸病變陽(yáng)性率分析，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，支持單一感染比多重感染更增加宮頸病變發(fā)生機(jī)率，初步結(jié)果顯示多重感染并不增加宮頸癌的發(fā)生。

國(guó)內(nèi)外大量研究顯示不同年齡段HPV感染率存在差異。范潔琳等〔9〕研究發(fā)現(xiàn)湖南湘雅地區(qū)大于60歲婦女HPV感染率最高，原因可能與該年齡段患者體檢意識(shí)較差，有臨床癥狀后才到醫(yī)院檢查，或是由于機(jī)體免疫力較差等有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)圍絕經(jīng)期間（50～59歲）HPV感染率較高，大于60歲開(kāi)始下降，原因可能與人體內(nèi)雌孕激素水平變化影響宮頸上皮的化生過(guò)程，增加了宮頸HPV感染率。本研究結(jié)果提示大理地區(qū)婦女HPV感染中構(gòu)成比較高的年齡段為30～52歲，但陽(yáng)性率無(wú)明顯差異，可能與該年齡段婦女有意識(shí)的進(jìn)行婦科常規(guī)查體，總體基數(shù)較大，相對(duì)其他構(gòu)成比較高有關(guān)?！?3歲年齡段的陽(yáng)性率較其他年齡段高。與范潔琳等的研究相符。陳志芳等〔10〕對(duì)西北地區(qū)，包括新疆漢族、維吾爾族、哈薩克族在內(nèi)的婦女進(jìn)行HPV調(diào)查發(fā)現(xiàn)，主要以HPV 16型、58型、18型、52型、31型最常見(jiàn)，大理州共有21個(gè)民族，分別是：漢、白、彝、回、傈僳、苗、納西、壯等民族。其中又以漢族和白族居多，在本研究中白族和漢族HPV感染率最高，白族所占比例為66.39%（81/122），在本研究中發(fā)現(xiàn)白族中常見(jiàn)的HPV基因亞型為52型、16型、58型、18型，與大理地區(qū)的整體基因亞型分布相符。

Winer等〔11〕研究發(fā)現(xiàn)，性交并不是必須的傳播途徑，環(huán)境污染傳播和垂直傳播等可能是HPV傳播的潛在途徑。吳瑞芳等〔12〕研究結(jié)果提示HPV感染率存在職業(yè)差異。通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)HPV陽(yáng)性病例中務(wù)農(nóng)人員占一半以上的比例（59.22%），提示大理地區(qū)女性職業(yè)對(duì)HPV感染率有一定影響，導(dǎo)致這一結(jié)果的原因可能與患者生活的環(huán)境和個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣等有關(guān)。

綜上所述，本次研究發(fā)現(xiàn)大理地區(qū)婦女感染HPV基因亞型具有一定的年齡、民族、職業(yè)等特點(diǎn)，總體上符合亞洲地區(qū)HPV基因亞型感染的特點(diǎn)，本地區(qū)應(yīng)重視HPV16型、58型、52型和18型感染的防治。本研究初步提示多重感染并不增加宮頸癌的發(fā)生。但本研究仍有些不足，雖然基礎(chǔ)研究樣本量很大，但是沒(méi)有追蹤對(duì)每位HPV感染陽(yáng)性病人進(jìn)行TCT以及病理學(xué)檢查，導(dǎo)致研究TCT及病理學(xué)檢查結(jié)果的樣本量較少，不利于觀察HPV陽(yáng)性病人的病情變化。

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（責(zé)任編輯董杰）

Relashionship between HPV Infection and Cervical Lesions and Associated Risk Factors in Dali

Wu Yingying, Ding Yueming, Bi Lei, Tian Linbo, Wang Min, Pan Yun*
（Clinical College, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China）

〔Abstract〕Objective: To explore the relationship between Dali women with cervical human papillomavirus（HPV）infection and disease subtypes and epidemiological characteristics of the cervix. Methods: Samples of the obstetrics and gynecology outpatients from July 2011 to September 2014 at the Affiliated Hospital of Dali University were collected. 2 053 cases with an average age of 39.46 years were undertaken the detection of subgenotypes diversion by gene amplification and hybridization techniques. TCT and pathological examination method was used to the type of lesion detection. HPV-positive patients were collected according to the age, nationality and profession. Results: Positive cases were 308 and the positive rate was 15.00%. 14 kinds of high-risk were detected: HPV16（28.90%）, HPV52（21.75%）, HPV58（12.99%）, HPV18（10.39%）, HPV68（4.22%）, HPV31（2.27%）, HPV66（3.25%）, HPV33（5.19%）, HPV39（5.52%）, HPV53（4.55%）, HPV59（1.62%）, HPV56（0.65%）, HPV35（1.62%）, HPV51（2.60%）. 5 kinds of low-risk types were: HPV45, HPV42, HPV6, HPV11,81（cp8304）. HPV infection in cervical lesions single positive rate were 21.95%（TBS）, 50%（pathology）, and multiple infections cervical lesions positive rate 4.88%（TBS）, 9.38%（pathology）. 122 positive cases were recorded nationalities, including 81 Bai cases（66.39%）, 27 Han, 6 Yi, 4 Lisu, 2 Tibetan, 1 Muslim and 1 Naxi. Bai women were detected eight kinds of subgenotypes. The occupations were farmers（52.70%）and non-farmers（employees, civil servants and freelancers, etc.）（47.30%）. Conclusion: Most common types of HPV infection in Dali were 16, 52, 58, 18. And multiple infection did not increase the incidence of cancer. HPV cases constituted a relatively high age group of 30 to 52 years old, and a high positive rate is≥62 years of age. The common genetic subtypes in Bai women were HPV type of 52, 16, 58, 18. HPV infection with certain subtypes were characterized by geography, age, and ethnic characteristics.

〔Key words〕human papillomavirus infection; cervical lesions; subtypes; pathology; cervical cytology

［中圖分類號(hào)］R711.74

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A

［文章編號(hào)］1672-2345（2016）02-0023-04

［收稿日期］2015-03-26［修回日期］2015-07-20

［作者簡(jiǎn)介］吳瑩瑩，碩士研究生，主要從事頭頸部腫瘤基礎(chǔ)與臨床研究.

*通信作者：潘云，教授．