阿的魯驥，王長(zhǎng)庭，字洪標(biāo)，趙 江

不同株高密花香薷光合色素含量和根際土壤酶活性的變化

阿的魯驥1，王長(zhǎng)庭2*，字洪標(biāo)1，趙 江2

(1．西南民族大學(xué)青藏高原研究院，四川成都610041; 2．西南民族大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，四川成都610041)

密花香薷(Elsholtzia densa Benth．)是川西北高寒草甸的常見(jiàn)植物，為了探討其對(duì)高寒生態(tài)環(huán)境的生理生態(tài)適應(yīng)機(jī)制，分析四川省阿壩藏族羌族自治州紅原縣不同株高密花香薷葉面積、比葉質(zhì)量、光合色素含量以及根際土壤酶活性的變化規(guī)律．結(jié)果表明:不同高度的密花香薷植株，其比葉質(zhì)量和光合色素含量變化不顯著(P＞0．05)，葉面積隨著植株增高先增加后減小，當(dāng)植株高度在40～45 cm之間的葉面積最大，此時(shí)葉綠素含量最高，且Chl a/b最大;不同株高密花香薷根際土壤的纖維素酶、蔗糖酶和酸性磷酸酶活性變化規(guī)律不明顯，且與對(duì)照無(wú)明顯差異．硝酸還原酶和脲酶活性大于對(duì)照，隨著植株高度增加，根際硝酸還原酶和脲酶活性先增加后降低，脲酶活性與葉片Chl a的含量呈顯著正相關(guān)，株高大于46 cm的植株根際脲酶活性顯著大于對(duì)照(P＜0．05)．研究表明，密花香薷在生長(zhǎng)過(guò)程中可能釋放根系分泌物改變了土壤微生物活動(dòng)，提高根際氮素水平以促進(jìn)植物的光合作用效率．

高寒草甸;密花香薷;株高;生理適應(yīng);根際土壤酶活性

密花香薷(Elsholtzia densa Benth．)是唇形科(Labiatae)香薷屬(Elsholtzia)草本植物，別名咳嗽草、野紫蘇、臭香茹、媳蟋巴［1］，主要分布于我國(guó)西北和華北地區(qū)、印度、錫金、阿富汗、巴基斯坦、塔加拉等地，其生境主要為海拔1 800～4 100 m的高寒草甸、山坡、林地等［2］．密花香薷是川西北地區(qū)高寒草甸中的一種雜草類(lèi)植物，在圍欄禁牧后大量繁殖并快速生長(zhǎng)，對(duì)禾本科植物的生長(zhǎng)具有抑制作用［3］．光合作用是植物生長(zhǎng)發(fā)育的基礎(chǔ)和生產(chǎn)力高低的決定性因素，同時(shí)也是易受環(huán)境影響的生理過(guò)程，高海拔地區(qū)植物獨(dú)特的光合色素組成也是其光合作用適應(yīng)環(huán)境的重要特征［4］．植物與土壤之間的相互作用在決定植物的競(jìng)爭(zhēng)力以及分布格局中起著重要作用［5］．根際是指受植物根系活動(dòng)影響，物理、化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)上不同于土體的那部分靠近植物根系的微域土區(qū)，是植物－土壤生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)交換十分頻繁的一個(gè)界面，也是土壤微生物非?；钴S的一個(gè)區(qū)域［6］．植物經(jīng)光合作用固定的元素可通過(guò)根系分泌物的形式釋放到土壤中，為土壤微生物提供豐富的營(yíng)養(yǎng)，而土壤微生物可借助趨化感應(yīng)，游向富含根系分泌物的根際及根表面進(jìn)行定殖與繁殖［6］．土壤酶主要來(lái)源于土壤微生物和植物根系的分泌物，其活性高低能反映出土壤微生物活性［7］．因此，探討高海拔地區(qū)植物在生長(zhǎng)過(guò)程中光合特性的變化規(guī)律和根際土壤特性的變化規(guī)律，以及二者之間的相互關(guān)系，有助于了解高寒地區(qū)植物的生態(tài)對(duì)策．本研究以四川省阿壩藏族羌族自治州紅原縣高寒草甸中分布的密花香薷為對(duì)象，分析不同株高密花香薷葉面積、比葉質(zhì)量、光合色素含量以及根際土壤酶活性的變化規(guī)律，探討密花香薷對(duì)高寒生態(tài)環(huán)境的生理生態(tài)適應(yīng)機(jī)制，為川西北高寒草甸資源利用和牧場(chǎng)生態(tài)系統(tǒng)管理提供理論依據(jù)．

1 研究方法

1．1 野外取樣 研究區(qū)位于四川西北部紅原縣境內(nèi)的西南民族大學(xué)青藏高原基地，其自然環(huán)境概況見(jiàn)文獻(xiàn)［8］．于2014年8月選取環(huán)境條件基本一致的樣地(樣地面積1 000 m×1 500 m)，在樣地中隨機(jī)選取不同高度的密花香薷，每個(gè)高度10株．測(cè)定每株植物的高度后，采集莖頂東、南、西、北4個(gè)方向的成熟健康的各5片葉片，裝入自封塑料袋做好標(biāo)記．然后，挖出密花香薷植株，收集根際土壤，將同一高度植株的根際土壤混合均勻，裝入無(wú)菌自封塑料袋并作標(biāo)記，以同一樣地中沒(méi)有植物生長(zhǎng)的土壤作為對(duì)照(CK)．采集的葉片和土壤均置于放有冰袋的冰盒中帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)．

1．2 比葉質(zhì)量和光合色素的測(cè)定 將每個(gè)植株的葉片隨機(jī)分為2組，分別用于測(cè)定比葉質(zhì)量和葉綠體色素含量．

1．2．1 比葉質(zhì)量的測(cè)定 取出自封袋中的葉片，迅速用AM 300便攜式葉面積儀測(cè)定每片葉子的葉面積，每一植株測(cè)定10片，再置于烘箱中105℃殺青10 min，80℃烘干至恒質(zhì)量，稱(chēng)質(zhì)量，計(jì)算比葉質(zhì)量(單位為mg/cm2)［9］:

比葉質(zhì)量 =葉片干質(zhì)量和 /葉面積和，每一植株高度10次重復(fù)．

1．2．2 光合色素的測(cè)定 葉綠體色素含量的測(cè)定參照王學(xué)奎［10］的方法．將葉片洗凈，用濾紙吸干水分后，去中脈，剪成碎片，混勻．稱(chēng)取0．2 g葉片，放入研缽中，加入少量石英砂和碳酸鈣粉，再加入體積分?jǐn)?shù)80%丙酮2～3 mL研磨至勻漿，定容至10 mL，暗處?kù)o止1 h后，過(guò)濾，取濾液用SpectraMax M2多功能酶標(biāo)儀分別在波長(zhǎng)663、646和470 nm測(cè)定吸光度．計(jì)算葉綠素a(Chl a)、葉綠素b(Chl b)、總?cè)~綠素含量(Chl T)和類(lèi)胡蘿卜素(Car)的含量［9］:

式中，ca、cb和cT分別為葉綠素a和 b的質(zhì)量濃度及總?cè)~綠素質(zhì)量濃度;cCar為類(lèi)胡蘿卜素的總質(zhì)量濃度;再按下式求算植物組織中單位鮮質(zhì)量色素的含量(mg/g):

每一植株高度重復(fù)10次．

1．2．3 根際土壤酶活性測(cè)定 土壤脲酶、硝酸還原酶、酸性磷酸酶、纖維素酶、蔗糖酶以及酸性磷酸酶活性的測(cè)定采用文獻(xiàn)［7］的方法;用SpectraMax M2多功能酶標(biāo)儀測(cè)定各反應(yīng)液的吸光度;10次重復(fù)．

1．3 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 18．0進(jìn)行單因子方差分析(One－way ANOVA)．

2 結(jié)果與分析

2．1 不同株高密花香薷葉面積和比葉質(zhì)量的變化

由表1可見(jiàn)，隨著植株高度的增加，密花香薷的葉面積先增加后減小，植株高度在40～45 cm之間的葉面積最大;比葉質(zhì)量在不同高度的植株之間則無(wú)顯著變化．

表1 不同株高密花香薷葉面積和比葉質(zhì)量(means±SE，n=10)Table 1 Leaf areas and specific leaf weights of Elsholtzia densa Benth．a(chǎn)t different plant heights(means±SE，n=10)

2．2 不同株高密花香薷光合色素含量的變化 根據(jù)表2可知，不同株高密花香薷葉片中，葉綠素含量和類(lèi)胡蘿卜素含量具有一定的差異，其中各類(lèi)光合色素含量以株高40～45 cm時(shí)為最高，但是差異均未達(dá)到顯著程度(P＞0．05)．Chl a/b也表現(xiàn)為株高40～45 cm時(shí)最大，但在此高度下類(lèi)胡蘿卜素與葉綠素的比值(Car/Chl)卻最小，Chl a/b、Car/Chl與葉綠體色素含量相似，不同高度植株之間也沒(méi)有顯著的差異．

2．3 不同株高密花香薷根際土壤酶活性的變化密花香薷根際土壤酶活性在不同株高下具有不同程度的變化(表3)．不同株高密花香薷根際土壤的纖維素酶、蔗糖酶和酸性磷酸酶活性無(wú)明顯變化規(guī)律，且均與對(duì)照無(wú)顯著差異．硝酸還原酶活性和脲酶活性變化趨勢(shì)基本相似，整體來(lái)說(shuō)，根際土壤中這兩種酶的活性均大于對(duì)照，但隨著植物高度增加，酶活性呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)．不同高度植株之間根際土壤硝酸還原酶活性和株高小于46 cm植株之間根際土壤脲酶活性差異不顯著，而高度大于46 cm植株根際土壤脲酶活性與對(duì)照的差異達(dá)到顯著程度(P＜0．05)．

通過(guò)光合色素含量和土壤酶活性相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，根際土壤脲酶活性與葉片中的Chl a含量呈 顯著正相關(guān)關(guān)系(P＜0．05)．

表2 不同株高密花香薷葉片的葉綠素含量和和類(lèi)胡蘿卜素含量(means±SE，n=10)Table 2 Chlorophyll and carotinoid contents of Elsholtzia densa Benth．in Blade at different plant heights(means±SE，n=10)

表3 不同株高密花香薷根際土壤酶活性(means±SE，n=10)Table 3 The enzyme activities in rhizosphere soil of Elsholtzia densa Benth．a(chǎn)t different plant heights(means±SE，n=10)

3 討論和結(jié)論

高寒植物已經(jīng)對(duì)青藏高原強(qiáng)太陽(yáng)輻射、低CO2分壓、低溫以及土壤水分脅迫等環(huán)境因素產(chǎn)生了相應(yīng)的適應(yīng)性變化［11］．在植物的光合生理方面也形成了一定的適應(yīng)機(jī)制，高山植物獨(dú)特的光合色素組成是其光合作用適應(yīng)高山環(huán)境的重要特征［4］．高山植物的Chl a/b平均值為5．5，最高達(dá)9．3［12］;本研究結(jié)果表明，不同株高密花香薷葉片Chl a/b在2．45～2．79之間，明顯低于高山植物的Chl a/b的平均值;王玉萍等［13］研究表明，高山植物珠芽蓼(Polygonum viviparum)的Chl a/b也低于高山植物的平均值;低光葉綠體的Chl a/b在2．4～2．8之間，高光葉綠體的 Chl a/b則在 2．9～3．6之間［14－15］，而在本研究中，不同株高密花香薷葉片Chl a/b在2．45～2．79之間，說(shuō)明密花香薷的葉綠體屬于低光葉綠體;葉綠體的主要組成成分之一葉綠素與植物的光合速率呈正相關(guān)［16］．不同株高密花香薷葉片的各類(lèi)光合色素含量表現(xiàn)出動(dòng)態(tài)變化，其中株高在40～45 cm之間植株葉片中光合色素含量最高，表明這一高度下的密花香薷植株光合速率最大;比葉質(zhì)量是衡量植物光合作用性能的一個(gè)參數(shù)［16］．本研究結(jié)果表明，密花香薷比葉質(zhì)量與株高之間無(wú)明顯的相關(guān)性，這一結(jié)果與光合色素含量相似．不同高度的植株之間比葉質(zhì)量也無(wú)顯著差異．由此可見(jiàn)，株高對(duì)密花香薷葉片的光合色素含量影響不大．

土壤酶是參與土壤新陳代謝的重要物質(zhì)［17］，可作為土壤肥力的重要指標(biāo)［18］．土壤酶主要來(lái)自土壤微生物細(xì)胞，也可來(lái)自于動(dòng)植物殘?bào)w．土壤酶和土壤微生物共同推動(dòng)了土壤物質(zhì)轉(zhuǎn)化．其中，蔗糖酶活性高低反映了土壤熟化程度和肥力水平，纖維素酶活性與纖維素分解有關(guān)，硝酸還原酶活性大小反映了土壤氮素轉(zhuǎn)化作用的強(qiáng)度，脲酶、磷酸酶分別可表征土壤氮素和磷的狀況［17］．本研究結(jié)果表明，不同株高密花香薷根際土壤中，蔗糖酶、纖維素酶和酸性磷酸酶的活性變化規(guī)律不明顯且與對(duì)照差異不顯著．硝酸還原酶活性和脲酶活性整體高于對(duì)照，隨著植株高度增加表現(xiàn)出先增加后降低的趨勢(shì)，其中脲酶活性與Chl a含量呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，且當(dāng)植株高度大于46 cm時(shí)，脲酶活性與對(duì)照具有顯著的差異．這一結(jié)果表明，不同株高的密花香薷根際土壤氮代謝水平不同．高等植物部分光合產(chǎn)物被轉(zhuǎn)移到植物地下部分并向土壤中分泌，為土壤微生物提供營(yíng)養(yǎng)和能源，改變土壤微生物的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而改變根際生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)，反過(guò)來(lái)又作用于植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程［6］．推測(cè)密花香薷在生長(zhǎng)過(guò)程中，可能通過(guò)根系向根際土壤釋放根系分泌物影響微生物活動(dòng)，提高土壤脲酶活性和氮素水平．氮素水平的提高有利于提高光合色素含量和光化學(xué)效率，改善葉片的光合功能［19］，為其繁殖后代儲(chǔ)備物質(zhì)和能量．

致謝 西南民族大學(xué)創(chuàng)新型科研項(xiàng)目(CX2016SZ073)對(duì)本文給予了資助，謹(jǐn)致謝意．

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Change in Photosynthetic Pigment Contents and Soil Enzyme Activities of Rhizosphere in Elsholtzia densa Benth．with Different Plant Height

ADE Luji1，WANG Changting2，ZI Hongbiao1，ZHAO Jiang2

(1．College of Tibetan Plateau Research，Southwest University for Nationalities，Chengdu 610041，Sichuan; 2．College of Life Science and Technology，Southwest University for Nationalities，Chengdu 610041，Sichuan)

Elsholtzia densa Benth．is a dominant plant in alpine meadow of northwest Sichuan．To explore eco-physiological mechanisms of E．densa in environmental adaptation to alpine meadow，the changes of leaf areas，specific leaf dry weight，photosynthesis pigment contents in leaves and soil enzyme activities of rhizosphere in this plant with a height from 16 cm to 74 cm were tested in Hongyuan county of Sichuan Province．The results showed that with the increase of plant height，specific leaf dry weight and photosynthetic pigment contents had no significant differences(P＞0．05)，and leaf areas increased at first and then decreased．The leaf areas，chlorophyll contents and Chl a/b reached the highest at 40～50 cm height．Compared to the control，there were no significant differences among the activities of cellulases，sucrase and acid phosphatase in rhizosphere soils of E．densa，which did not change significantly with plant height．Activities of nitrate reductase and urease were much more than control，and increased at first and then decreased with the increasing plant height．The urease activities showed obvious difference(P＜0．05)when plant height＞46 cm，and arease activities was positively correlated with Chl a contents(P＜0．05)．These results suggested that E．densa during growth may modify the activities of rhizospheric microorganism through root exudates，and improved the level of nitrogen and the efficiency of photosynthesis．

alpine meadow;Elsholtzia densa Benth;plant height;physiological adaptability;soil enzyme activities of rhizosphere

S812

A

1001－8395(2016)05－0755－05

10．3969/j．issn．1001－8395．2016．05．024

(編輯 陶志寧)

2016－04－05

國(guó)家自然科學(xué)基金(31370542)、國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(2013CBA01807)和中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)專(zhuān)項(xiàng)資金(2014NZYTD01)

*通信作者簡(jiǎn)介:王長(zhǎng)庭(1969—)，男，教授，主要從事恢復(fù)生態(tài)學(xué)、根系生態(tài)學(xué)和微生物生態(tài)學(xué)的研究，E－mail:wangct@swun．edu．cn