（信陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河南 信陽(yáng) 464000）

中藥治療豬弓形蟲(chóng)病效果研究

馬超鋒*

（信陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河南 信陽(yáng) 464000）

弓形蟲(chóng)?。╰oxoplasmosis）又稱弓形體病，是由剛地弓形蟲(chóng)（toxoplasma gondii）在人和動(dòng)物體內(nèi)寄生而引起的人獸共患原蟲(chóng)病。豬弓形蟲(chóng)病會(huì)導(dǎo)致母豬流產(chǎn)、弱胎、死胎，患病仔豬高熱、呼吸困難、消瘦及便秘等；而弓形蟲(chóng)與其他疾病混合感染暴發(fā)性流行時(shí)會(huì)造成育肥豬大量死亡，還會(huì)引起不同程度的繁殖障礙性疾病，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。

弓形蟲(chóng)屬于細(xì)胞內(nèi)寄生的血液原蟲(chóng)，畜禽一旦感染，雖然可通過(guò)藥物治療消除癥狀，但是畜禽機(jī)體將會(huì)一直帶蟲(chóng)，在應(yīng)激或亞健康狀況下都會(huì)發(fā)病。弓形蟲(chóng)病的根本防治手段是研制行之有效、使用方便的疫苗，現(xiàn)階段還沒(méi)有較完善的商品化弓形蟲(chóng)疫苗可供使用，主要采取常規(guī)措施預(yù)防弓形蟲(chóng)病的發(fā)生。目前，防治畜禽弓形蟲(chóng)病主要采用磺胺類藥物，具有使用方便、吸收迅速、見(jiàn)效快等優(yōu)點(diǎn)。但是也存在問(wèn)題，一是其對(duì)豬體自身危害方面，長(zhǎng)期使用磺胺類藥物可能增加毒副作用和耐藥性，量大還易形成結(jié)晶造成腎臟的急性損傷；二是公共衛(wèi)生方面，養(yǎng)殖戶使用磺胺類未按要求執(zhí)行休藥期，以使藥物殘留畜禽體內(nèi)危害人類健康。而利用中草藥進(jìn)行防治研究較多的如黃芪、青蒿類等，通過(guò)干擾蟲(chóng)體核酸代謝、破壞蟲(chóng)體膜系統(tǒng)和超微結(jié)構(gòu)、誘導(dǎo)蟲(chóng)體細(xì)胞凋亡、影響Ca2+跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)及免疫調(diào)節(jié)等而發(fā)揮作用，但現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)還沒(méi)有效果良好的防治畜禽弓形蟲(chóng)病的中草藥配方。本研究將采用不同中藥配方對(duì)豬弓形蟲(chóng)病發(fā)病豬進(jìn)行治療試驗(yàn)，以篩選出效果較好中藥防治豬弓形蟲(chóng)病。

1 材料與方法

1．1 材料

1.1.1 試驗(yàn)豬

信陽(yáng)市某豬場(chǎng)同一棟舍88頭60日齡三元雜交豬，外觀健康，豬弓形蟲(chóng)病抗體檢測(cè)結(jié)果陰性。

1.1.2 檢測(cè)試劑盒及主要儀器設(shè)備

1.1.2.1 檢測(cè)試劑 豬弓形蟲(chóng)IgG抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自洛陽(yáng)萊普生信息有限公司；豬弓形蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒，信陽(yáng)師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院提供；弓形蟲(chóng)陽(yáng)性分離株，信陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心分離保存。

1.1.2.2 主要儀器 TDZ-WS臺(tái)式低速離心機(jī)（長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司），10～100μL多道移液器（德國(guó)Eppendorf公司），DHP-500避光培養(yǎng)箱（常州市凱航儀器有限公司），Thermo洗板機(jī)888型（美國(guó)Thermo公司），Thermo全自動(dòng)定量繪圖酶標(biāo)儀MFC型（美國(guó)Thermo公司），PCR儀（德國(guó)Biometra）、凝膠成像系統(tǒng)（以色列 DNR MiniBIS Pro）。

1．2 方法

1.2.1 中藥治療方案

對(duì)豬群采用3個(gè)中藥配方防治弓形蟲(chóng)感染：A方，黃花蒿、柴胡；B方，常山、檳榔、柴胡、麻黃、 甘草、桔梗；C方，大黃、丹皮、梔子、連翹、蒲公英、天花粉、金銀花、甘草；各個(gè)配方均拌料飼喂5 d。

1.2.2 中藥防治豬弓形蟲(chóng)病試驗(yàn)方案

1.2.2.1 試驗(yàn)豬分組 將試驗(yàn)豬隨機(jī)分成11組，每組8頭。分組情況及試驗(yàn)方案見(jiàn)表1，試驗(yàn)期間，豬舍溫度保持在20～28 ℃。

1.2.2.2 試驗(yàn)豬觀察 對(duì)豬群連續(xù)觀察30 d，每天上午8點(diǎn)、下午4點(diǎn)各測(cè)量記錄體溫1次，取8頭豬體溫平均值為當(dāng)天各組體溫，上午體溫在40 ℃以上，下午體溫在40.5 ℃以上，視為體溫升高；觀察體溫升高的天數(shù)，出現(xiàn)典型弓形蟲(chóng)臨床癥狀的豬只數(shù)量和維持時(shí)間，臨床癥狀、死亡頭數(shù)、時(shí)間；剖檢死亡豬只，采樣并觀察病理變化；比較增重情況(試驗(yàn)開(kāi)始前和結(jié)束時(shí)稱重)。

1.2.2.3 試驗(yàn)豬弓形蟲(chóng)病抗體檢測(cè)和病原學(xué)檢測(cè) 試驗(yàn)開(kāi)始前（0 d）和開(kāi)始后7 d、14 d、21 d、28 d、35 d對(duì)各組存活豬進(jìn)行抗體檢測(cè)，試驗(yàn)豬只死亡時(shí)，采集病料進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。

1.2.3 中藥治療豬弓形蟲(chóng)病臨床應(yīng)用試驗(yàn)

采用篩選出的療效較好的中藥配方對(duì)豬從保育轉(zhuǎn)育肥時(shí)，較易發(fā)生豬弓形蟲(chóng)病的豬場(chǎng)在轉(zhuǎn)入育肥舍前后連續(xù)使用5 d，評(píng)價(jià)其應(yīng)用效果。

表1 試驗(yàn)分組及方案

表2 試驗(yàn)豬只各項(xiàng)指標(biāo)

2 結(jié)果

2．1 各組豬只體溫變化情況

第2、6、7、8組均在攻蟲(chóng)后3～4 d出現(xiàn)體溫升高癥狀，第1、3、4、5組在攻蟲(chóng)后6 d體溫開(kāi)始升高，第9、10、11組在11 d出現(xiàn)體溫升高癥狀；陽(yáng)性對(duì)照組發(fā)燒維持時(shí)間最長(zhǎng)，為16 d，第9、10、11組發(fā)燒時(shí)間最短，具體情況見(jiàn)表2。

2．2 各組豬只弓形蟲(chóng)病典型癥狀出現(xiàn)及維持時(shí)間

各試驗(yàn)組豬只均出現(xiàn)明顯臨床癥狀（發(fā)燒、呼吸困難、便秘等）時(shí)間，陽(yáng)性對(duì)照組持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)，為8 d，8頭均出現(xiàn)癥狀；第9、10、11組出現(xiàn)典型癥狀時(shí)間最短，為2～3 d，發(fā)病率為25%～37.5%；具體情況見(jiàn)表2。

2．3 各組豬只死亡率

陽(yáng)性對(duì)照死亡率最高，為62.5%；其次為空白對(duì)照組的37.5%；第3、4、5、9、10、11組無(wú)豬只死亡。

2．4 各組豬只弓形蟲(chóng)病抗體和病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果

在試驗(yàn)第0、7、14、21、28、35 d對(duì)各組豬只分別采取血樣，應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)抗體；血清中抗體陽(yáng)性維持天數(shù)見(jiàn)表2，第1、第2組由于未采用中藥治療，抗體持續(xù)35 d以上，第3、6、7、8組試驗(yàn)豬血清中抗體均持續(xù)21 d以上，第4、5、9、10、11組抗體持續(xù)14 d，先用藥再攻蟲(chóng)組血清中抗體持續(xù)天數(shù)顯著少于其他組，第10、11組血清中抗體持續(xù)天數(shù)少于其他組；這說(shuō)明在豬群發(fā)病之前采用B、C方對(duì)豬群保健，對(duì)弓形蟲(chóng)有較好的防控效果。對(duì)病死豬只采取組織樣品，用PCR方法檢測(cè)，結(jié)果顯示均為弓形蟲(chóng)陽(yáng)性。

2．5 中藥臨床應(yīng)用效果評(píng)價(jià)

對(duì)在轉(zhuǎn)群時(shí)較易感染豬弓形蟲(chóng)病豬場(chǎng)應(yīng)用B、C配方中藥制劑拌料飼喂，豬弓形蟲(chóng)病的發(fā)病率和病死率分別由50%和40%下降到10%和20%以下，可有效防控豬弓形蟲(chóng)的發(fā)生，為養(yǎng)殖戶挽回經(jīng)濟(jì)損失數(shù)百萬(wàn)元。

3 討論

豬弓形蟲(chóng)病的臨床癥狀與豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬鏈球菌病某些癥狀相似，并且混合感染，給診斷帶來(lái)困難，影響豬場(chǎng)防治方案的制定，本項(xiàng)目組建立了敏感、快速、特異的弓形蟲(chóng)病PCR檢測(cè)方法，可以準(zhǔn)確的診斷該病。本試驗(yàn)中，研制的3個(gè)中藥配方對(duì)豬弓形蟲(chóng)病都有較好的防治效果，能減少化學(xué)藥物使用造成的殘留和副作用，在豬群發(fā)病之前應(yīng)用中藥全群保健預(yù)防，可以顯著降低豬群的發(fā)病率、死亡率和病程；B方和C方在減少豬群癥狀和縮短病程方面又優(yōu)于A方，C方效果最優(yōu)。本試驗(yàn)研制的中藥配方經(jīng)臨床試驗(yàn)表明早期預(yù)防效果優(yōu)于發(fā)病后治療效果，可顯著減輕發(fā)病癥狀，對(duì)臨床上危害養(yǎng)豬業(yè)的豬弓形蟲(chóng)病的防治具有重要意義，可以大范圍推廣應(yīng)用。

2016-06-27）

2014年信陽(yáng)市科技攻關(guān)項(xiàng)目（140054）-信陽(yáng)地區(qū)豬弓形蟲(chóng)病感染情況調(diào)查及綜合防控技術(shù)研究與應(yīng)用

馬超鋒（1981-），男，漢，河南禹州人，高級(jí)獸醫(yī)師，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防治，E-mail:machaofeng5@163.com。