陶曉杰　汪浩　趙宇飛　池善女

摘要：利用冷凍過(guò)濾優(yōu)化抗氧化劑叔丁基羥基茴香醚（BHA）和2，6-二叔丁基對(duì)甲酚（BHT）的萃取條件，通過(guò)加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)（BHA、BHT回收率均在95%以上，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于0.2%）評(píng)價(jià)了方法的準(zhǔn)確性。建立了快速、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確的檢測(cè)烘焙堅(jiān)果食品中BHA和BHT的方法。實(shí)驗(yàn)表明本方法具有很好的回收率和重復(fù)性，對(duì)檢測(cè)烘焙堅(jiān)果食品具有很好的應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞：GC-FID；烘焙堅(jiān)果食品；BHA；BHT

中圖分類號(hào)：R917 文獻(xiàn)識(shí)別碼：A 文章編號(hào)：1001-828X（2016）006-000-02

引言

食用油脂和含有食用油脂的食品在不適當(dāng)?shù)谋４鏃l件下或者超過(guò)保質(zhì)期就會(huì)發(fā)生酸敗現(xiàn)象。為了避免酸敗現(xiàn)象或者延緩其發(fā)生時(shí)間，通常會(huì)加入BHA、BHT或者其他的抗氧化劑和防腐劑，然而資料表明，BHA有潛在的致癌性，BHT危險(xiǎn)小一些，不過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)它能致癌。因此，研究食品中的BHA、BHT的檢測(cè)方法就十分重要。目前檢測(cè)BHA、BHT等抗氧化劑的方法有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、高效液相色譜法等。利用這些方法提取烘焙堅(jiān)果食品中的油脂都需要將樣品中油脂提取出來(lái)，然后再通過(guò)柱層析或者凝膠色譜方法去除掉脂肪。由于柱層析與凝膠色譜法操作繁瑣、試劑消耗大等。因此，本文用甲醇直接提取油脂中的BHA、BHT，提取液經(jīng)過(guò)冷藏靜置后過(guò)濾，減壓濃縮至近干用乙醇定容。待分析。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.材料試劑

石油醚（30℃～60℃）、甲醇、均為分析純；BHA、BHT標(biāo)樣，純度均高于99%；氮?dú)猓兌?9.999%。

2.儀器與設(shè)備

GC-2010（日本島津公司）-氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）、振蕩器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、離心機(jī)、冰箱。

3.色譜條件

色譜柱為DB-WAX石英毛細(xì)管柱，長(zhǎng)30m、內(nèi)徑0.25mm、膜厚0.25μm；柱溫：初始溫度為80℃，保持1min，以10℃/min升溫至230 ℃，保持8min；進(jìn)樣口溫度150℃，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1μm。檢測(cè)器：FID 溫度250℃。載氣流量：氮?dú)?.38 mL/min、氫氣40mL/min、空氣400mL/min。

4.樣品處理

（1）脂肪的提取

稱取樣品50～100g（視樣品脂肪含量而定），混合均勻，置于250mL具塞錐形瓶中，加入適量石油醚浸泡試樣，震搖10min靜置2-3h后快速濾紙過(guò)濾，減壓回收溶劑殘留脂肪備用。

（2）樣品的制備

準(zhǔn)確稱取樣品1-2g（精確至0.001g）于15 mL離心管中，用10 mL甲醇分3次萃?。ㄈ伪壤秊?mL、4mL、3mL），震蕩2min/次，靜置10min后吸取甲醇溶液合并于15mL離心管中（如果靜置后乳化較為嚴(yán)重，可以3000rmm離心3min），合并好的甲醇溶液置于冰箱-4℃冷凍1h后用快速定性濾紙過(guò)濾，再用約3mL甲醇沖洗濾紙上殘?jiān)?，合并甲醇溶液，減壓濃縮至近干，用乙醇定容至2.0mL，該溶液為待測(cè)溶液。

二、結(jié)果與討論

1.色譜條件的優(yōu)化

本實(shí)驗(yàn)采用DB-WAX毛細(xì)管柱，以及梯度升溫的方法測(cè)定混合標(biāo)樣的含量和分離情況，結(jié)果如圖1所示。圖1表明，隨著溫度的升高BHA、BHT能夠達(dá)到很好的基線分離，且峰形較好。

2.線性關(guān)系及檢出限

分別繪制BHA、BHT的標(biāo)準(zhǔn)曲線，再0.02～0.5mg/L范圍內(nèi)兩種物質(zhì)的濃度與峰面積的線性關(guān)系良好，其線性方程及相關(guān)系數(shù)見表1。以三倍的信噪比（3S/N）計(jì)算檢出限。

3.方法的回收率

取已知不含待測(cè)物的樣品，分別添加80ng和160ng的BHA和BHT標(biāo)準(zhǔn)品，每一梯度取3個(gè)樣待測(cè)，同時(shí)定容2mL經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后，按照1.3節(jié)色譜分析條件平行測(cè)定三次，計(jì)算回收率。實(shí)驗(yàn)表明，BHA、BHT的平均回收率分別為95.5%、95.2%，見表2。

4.烘烤榛子仁樣品的分析檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)采用本研究的方法，對(duì)3批次實(shí)際樣品驚醒測(cè)試，結(jié)果見表3。監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)表明，烘烤榛子仁中BHA、BHT的含量均為0。圖2為烘烤榛子仁樣品色譜圖。

三、結(jié)論

本文采用冷凍過(guò)濾提取烘烤榛子仁中的油脂作為前處理，并用氣象色譜法對(duì)烘烤榛子仁樣品中的BHA、BHT進(jìn)行了檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果顯示，BHA、BHT在80ng-160ng添加濃度范圍內(nèi)，回收率均大于95%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于0.2%。該方法簡(jiǎn)單、高效，而且其準(zhǔn)確性和重復(fù)性較好，可用于檢測(cè)堅(jiān)果食品中抗氧化劑的限度。

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