王昊龍，徐　弘，安　苗，田茂位，羅慧中

(貴州大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025)

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MS-222對雜交鱘幼魚的麻醉效果及模擬運(yùn)輸試驗

王昊龍，徐弘，安苗*，田茂位，羅慧中

(貴州大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025)

摘要：為了研究MS-222對雜交鱘的麻醉和運(yùn)輸效果，采用藥浴麻醉的方法研究了雜交鱘[西伯利亞鱘(Acipenser baerii)(♀)×史氏鱘(Acipenser schrenckii)(♂) ]幼魚在不同濃度和不同水溫下的麻醉效果，同時還模擬進(jìn)行密封運(yùn)輸試驗。結(jié)果表明：在17℃、20℃、23℃和26℃水溫下，MS-222對雜交鱘幼魚的有效麻醉濃度分別為30.89 mg/L～42.13 mg/L、31.15 mg/L～45.12 mg/L、38.45 mg/L～54.52 mg/L和49.02 mg/L～60.53 mg/L。隨著MS-222溶液濃度升高，雜交鱘幼魚進(jìn)入麻醉狀態(tài)所需時間縮短，其復(fù)蘇所需時間增加。雜交鱘幼魚麻醉時間有隨水溫降低而縮短的趨勢，復(fù)蘇時間有隨水溫降低而延長的趨勢。在22℃±0.5℃水溫和40 mg/L濃度下，麻醉運(yùn)輸12 h以1∶8的魚水比的運(yùn)輸效果最好；麻醉運(yùn)輸24h以1∶15的魚水比的運(yùn)輸效果最好；麻醉運(yùn)輸48 h以1∶25的魚水比運(yùn)輸比較合適。試驗表明：MS-222對雜交鱘幼魚有較好的麻醉復(fù)蘇效果，其適宜濃度為40 mg/L ～50 mg/L，在保證較高運(yùn)輸存活率情況下，可降低密封袋的用水量，從而減少運(yùn)輸成本。

關(guān)鍵詞：雜交鱘；MS-222；麻醉效果；運(yùn)輸

雜交鱘是鱘形目(Acipenseriforms)魚類中不同種屬間雜交的產(chǎn)物，具有生長速度快、適應(yīng)性廣、抗病力強(qiáng)等特點(diǎn)。以西伯利亞鱘(Acipenserbaerii)為母本與父本史氏鱘(Acipenserschrenckii)進(jìn)行種間雜交獲得的雜交鱘在養(yǎng)殖后期明顯快于西伯利亞鱘[1]，并逐漸成為當(dāng)前鱘魚養(yǎng)殖的重要品種之一。由于養(yǎng)殖、消費(fèi)等需求，其幼魚和成體往往要經(jīng)歷長時間和長距離的運(yùn)輸，如何提高其運(yùn)輸技術(shù)來保障成活率關(guān)系到鱘魚養(yǎng)殖者的切身利益。

MS-222(3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽，Tricaine methanesulphonate)具有操作簡單、效果迅速、安全性高等優(yōu)點(diǎn)，被美國國家食品及藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)為能用于食用魚的漁用麻醉劑。在中華鱘、史氏鱘、斑馬魚、鱖魚和斑點(diǎn)叉尾鮰等魚類的麻醉研究中已有嘗試[2-5]，但對雜交鱘的麻醉效果及運(yùn)輸?shù)脑囼炑芯亢币妶蟮?。為此，本文運(yùn)用MS-222對雜交鱘[西伯利亞鱘(Acipenserbaerii)(♀)×史氏鱘 (Acipenserschrenckii)(♂) ]幼魚進(jìn)行了麻醉效果和模擬密封運(yùn)輸試驗，并探討了影響MS-222麻醉效果的因素，以期望能夠為鱘魚運(yùn)輸實踐提供理論參考。

1材料與方法

1.1試驗材料

試驗用魚：挑選身體健康無傷，規(guī)格基本相近的魚，體長15.6 cm±1.46 cm，體重20.05 g±1.76 g。鱘魚苗種購于貴州省惠水縣斷杉鎮(zhèn)龍頭橋冷水魚養(yǎng)殖專業(yè)合作社，在實驗室暫養(yǎng)2周，試驗前停食2 d～3 d。

試驗藥品：MS-222由杭州動物藥品廠生產(chǎn)，純度≥99%，試驗前取一定量的藥品粉劑溶解于水中。

1.2試驗條件

在容器為30 L的水箱中進(jìn)行麻醉實驗和復(fù)蘇實驗，在雙層尼龍魚苗袋(長70 cm×寬40 cm)中進(jìn)行模擬運(yùn)輸試驗，試驗用水為曝氣48 h以上自來水，溶解氧7.0 mg/L～8.2 mg/L，pH 7.0～8.0。

1.3試驗方法

1.3.1不同水溫下MS-222對雜交鱘麻醉的有效濃度

設(shè)置17℃、20℃、23℃、26℃共4個溫度組，將雜交鱘分別放入20 mg/L、30 mg/L、40 mg/L、50 mg/L、60 mg/L的MS-222溶液中藥浴麻醉，以10尾雜交鱘為一個試驗單位，每組試驗單位3次重復(fù)。用秒表記錄魚體在麻醉狀態(tài)下的行為特征和進(jìn)入各個麻醉時期的時間。麻醉12 h后轉(zhuǎn)入等溫清水中復(fù)蘇，記錄魚體在復(fù)蘇過程中的行為特征和復(fù)蘇時間，將麻醉和復(fù)蘇過程分為不同時期。根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)作回歸分析，得出不同水溫下MS-222對雜交鱘麻醉的有效濃度，并且分析麻醉液濃度和水溫對麻醉效果的影響。

1.3.2麻醉時間和魚水比對運(yùn)輸存活率的影響

在22℃±0.5℃水溫下，將每組10尾停食48 h的實驗用魚先放入40 mg/L的MS-222溶液中麻醉，然后轉(zhuǎn)入裝有10 L相同濃度麻醉液的雙層尼龍魚苗袋中充氧打包，最后將打包好的尼龍袋放入大水箱中。在水箱中放入4個增氧閥振蕩水面模擬運(yùn)輸環(huán)境，在不同魚水比下運(yùn)輸12 h、24 h、48 h后，轉(zhuǎn)入等溫的清水中復(fù)蘇，每個試驗組3次重復(fù)，觀察并記錄存活率。同時設(shè)置對照組，對照組為不加麻醉劑運(yùn)輸?shù)聂~。

1.3.3數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2010和SPSS 23.0軟件對試驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。在單因素方差分析的基礎(chǔ)上采用LSR多重比較法進(jìn)行分析，統(tǒng)計值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，顯著性水平為P <0.05。

2結(jié)果與分析

2.1MS-222對雜交鱘麻醉的作用過程及麻醉程度分

綜合各濃度下MS-222的試驗觀察結(jié)果，參考Cooke等[6]、Woody等[7]、王利娟等[8]的麻醉復(fù)蘇分期標(biāo)準(zhǔn),可將雜交鱘的麻醉過程分為6期，復(fù)蘇過程分為4期。其中麻醉過程分別為1期(輕度鎮(zhèn)靜期)、2期(深度鎮(zhèn)靜期)、3期(平衡失調(diào)期)、4期(麻醉期)、5期(深度麻醉期)、6期(延髓麻醉期)。雜交鱘在麻醉2期、3期的行為特征與其它魚有所不同，具體表現(xiàn)為：魚體向一個方向靠攏，靜止不動或偶爾游動，體位保持正常(2期)，接著魚體開始失去平衡，側(cè)身游動直至仰臥，早期伴隨掙扎和狂游現(xiàn)象(3期)。

復(fù)蘇過程行為特征和分期與其它魚類似，復(fù)蘇后的魚放入單獨(dú)的水箱中飼養(yǎng)觀察一周，攝食游泳正常未見死亡。其中麻醉時間是指試驗魚進(jìn)入深度鎮(zhèn)靜期所需的時間。復(fù)蘇時間是指從麻醉魚放回到清水中開始到魚身體平衡完全恢復(fù)，對外界反應(yīng)恢復(fù)(復(fù)蘇3期)所需的時間。存活率是指能夠完全復(fù)蘇的麻醉魚的尾數(shù)占試驗總數(shù)的百分比。

2.2不同水溫下MS-222對雜交鱘麻醉的有效濃度

不同水溫下雜交鱘麻醉和復(fù)蘇時間與MS-222濃度的相關(guān)關(guān)系見表1。將數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸運(yùn)算得到：MS-222濃度與麻醉時間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，其中y為麻醉時間，x為MS-222濃度；MS-222濃度與復(fù)蘇時間呈正相關(guān)關(guān)系，其中y為蘇醒時間，x為MS-222濃度(圖1)。在水溫17℃時，MS-222對雜交鱘幼魚的有效濃度為30.89 mg/L～42.13 mg/L；20℃時，MS-222對雜交鱘幼魚的有效濃度為31.15 mg/L～45.12 mg/L；23℃水溫下，MS-222對雜交鱘幼魚的有效濃度為38.45 mg/L～54.52 mg/L；26℃時，MS-222對雜交鱘幼魚的有效濃度為49.02 mg/L～60.53 mg/L。

圖1　麻醉和復(fù)蘇時間與MS-222濃度的相關(guān)關(guān)系

注:圖A表示在17℃下，麻醉和復(fù)蘇時間與MS-222濃度的相關(guān)關(guān)系；圖B表示在20℃下，麻醉和復(fù)蘇時間與MS-222濃度的相關(guān)關(guān)系；圖C表示在23℃下，麻醉和復(fù)蘇時間與MS-222濃度的相關(guān)關(guān)系；圖D表示在26℃下，麻醉時間和復(fù)蘇時間與MS-222濃度的相關(guān)關(guān)系。

2.3水溫和MS-222濃度對雜交鱘的麻醉效果的影響

根據(jù)表2可知，用40 mg/L的MS-222溶液分別在水溫17℃、20℃、23℃、26℃下麻醉雜交鱘12 h，最后麻醉狀態(tài)都維持在深度鎮(zhèn)靜期，魚體轉(zhuǎn)入清水中都能正常復(fù)蘇。17℃雜交鱘進(jìn)入深度鎮(zhèn)靜期只需152.33 s，而復(fù)蘇需要216.67 s，而26℃進(jìn)入相同麻醉期需要225.00 s，而復(fù)蘇則只需162.67 s。由此可見：麻醉時間有隨水溫降低而縮短的趨勢，復(fù)蘇時間有隨水溫降低而延長的趨勢。

不同濃度的MS-222對雜交鱘的麻醉效果見表1。試驗中10 mg/L的MS-222溶液對雜交鱘麻醉效果不明顯，20 mg/L以上濃度可以進(jìn)入深度鎮(zhèn)靜期，有較明顯的麻醉效果。隨著MS-222濃度的增加，麻醉所需時間則越來越短，而復(fù)蘇所需時間則越來越長。如在水溫23℃下，30 mg/L的麻醉液進(jìn)入深度鎮(zhèn)靜期需要224.33 s，復(fù)蘇只需161.67 s，復(fù)蘇率100%，而50 mg/L進(jìn)入相同麻醉期只需153.67 s，復(fù)蘇需要235.00 s，復(fù)蘇率100%。在70 mg/L的麻醉液下，雜交鱘的復(fù)蘇率只有30%,而60 mg/L的復(fù)蘇率為90%。這說明60 mg/L的麻醉液是臨界值，過高的麻醉液濃度會造成魚體死亡。在23℃水溫，80 mg/L的麻醉液下，雜交鱘麻醉23 min時進(jìn)入6期(延髓麻醉期)如不馬上轉(zhuǎn)入清水中搶救則魚體死亡。

表1　水溫和MS-222 濃度對雜交鱘的麻醉效果

2.4麻醉時間和魚水比對運(yùn)輸試驗效果的影響

在22℃±0.5℃水溫下，用40 mg/L的MS-222溶液將雜交鱘分別麻醉運(yùn)輸12 h、24 h、48 h觀察并記錄不同魚水比下運(yùn)輸?shù)拇婊盥省８鶕?jù)表2可以得出：麻醉12 h，以1∶8魚水比運(yùn)輸較為合適，麻醉組存活率顯著高于對照組，與之相比以1∶7魚水比運(yùn)輸存活率較低，以1∶9魚水比運(yùn)輸會增加成本；麻醉24 h，以1∶15魚水比運(yùn)輸較為合適，麻醉組存活率顯著高于對照組，而以1∶11、1∶13魚水比運(yùn)輸存活率較低；麻醉48 h以1∶25的魚水比運(yùn)輸較為合適。麻醉組存活率顯著高于對照組，而以1∶30魚水比運(yùn)輸,麻醉組與對照組不顯著且增加運(yùn)輸成本。

表2　運(yùn)輸后雜交鱘在不同魚水比下的存活率變化

注：相同運(yùn)輸時間下平均值間字母不同者差異顯著( P<0.05)。

3討論

3.1MS-222對雜交鱘麻醉效果

MS-222在水溶液中可經(jīng)鰓、皮膚等部位傳導(dǎo)至魚腦感受中樞，抑制魚的反射和活動能力，使魚行動遲緩、呼吸減慢、代謝降低、耗氧減少，從而進(jìn)入類休眠狀態(tài)[9]。在試驗過程中確實可以使魚體反應(yīng)遲鈍，呼吸頻率降低，提高運(yùn)輸存活率。向建國等[10]用MS -222麻醉運(yùn)輸金魚，發(fā)現(xiàn)可以降低代謝物排泄量，提高運(yùn)輸存活率；莊平等[11]發(fā)現(xiàn)MS-222在一定程度上可以降低中華鱘幼魚的耗氧率和排氨率,這說明MS-222是比較理想的漁用麻醉劑。

3.2關(guān)于MS-222的有效濃度

麻醉劑的有效濃度受麻醉劑種類、魚的規(guī)格大小和種類等因素影響，對麻醉劑敏感程度存在差異[12],學(xué)者們有很大的主觀性。如Marking等[13]認(rèn)為理想的麻醉劑濃度應(yīng)滿足3 min之內(nèi)麻醉，5 min之內(nèi)復(fù)蘇。結(jié)合麻醉運(yùn)輸試驗效果，以3 min之內(nèi)麻醉，4 min之內(nèi)復(fù)蘇作為雜交鱘幼魚的有效濃度，經(jīng)過數(shù)據(jù)分析和試驗效果的驗證，在水溫17℃～26℃下，推薦40 mg/L～50 mg/L的MS-222濃度作為雜交鱘幼魚的麻醉運(yùn)輸濃度。陳細(xì)華等[2]認(rèn)為水溫15℃～20℃的條件下，30 mg/L～40 mg/L的MS-222溶液對中華鱘有較好的麻醉效果，莊平等[11]認(rèn)為MS-222對史氏鱘幼魚的鎮(zhèn)靜作用劑量為15 mg/L～30 mg/L,安全濃度為15 mg/L～57 mg/L。由此可見鱘魚使用MS-222麻醉有相似的有效濃度，而差別出現(xiàn)的原因可能是由于鱘魚品種及規(guī)格和試驗環(huán)境不同所致。

在實驗過程中雜交鱘的復(fù)蘇時間基本沒有超過5 min,這與史氏鱘恢復(fù)時間基本沒有超過4 min是一致的[14]。原因可能是鱘魚有頂水游動的習(xí)性，水箱中增氧閥有加快其鰓部氣體交換的作用, 并且水流對鱘魚有刺激作用, 能加快鱘魚蘇醒。

用于一般活魚運(yùn)輸?shù)淖罴崖樽砥诘呐袛鄻?biāo)準(zhǔn)是魚體對外界刺激幾乎沒有反應(yīng)能力，代謝率下降，但依然能夠保持平衡[15]，所以深度鎮(zhèn)靜期最為合適。與之相比，輕度鎮(zhèn)靜期的魚太活躍并不適合運(yùn)輸，而過高的麻醉濃度會使魚體失去平衡，增加魚體之間摩擦碰撞的機(jī)會也不適合運(yùn)輸。

3.3水溫對雜交鱘幼魚的麻醉效果

水溫是影響麻醉效果的又一重要因素，結(jié)合試驗結(jié)果得出：麻醉時間有隨水溫升高而延長的趨勢，復(fù)蘇時間有隨水溫升高而縮短的趨勢，這與王利娟等[8]的研究結(jié)果一致。而趙明等[16]和杜浩等[17]的研究表明，溫度越高，魚體達(dá)到麻醉狀態(tài)各階段的時間越短，而完全復(fù)蘇所需要的時間則越長。這可能是由于不同試驗魚品種對水溫和麻醉劑敏感程度不同所致，關(guān)于溫度對MS-222麻醉機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

3.4不同麻醉時間下魚水比對運(yùn)輸試驗效果的影響

實際運(yùn)輸過程中綜合考慮麻醉效果和節(jié)約成本。麻醉運(yùn)輸12 h的條件下，1∶8的魚水比有較好的運(yùn)輸效果；24 h的條件下，1∶15的魚水比有較好的運(yùn)輸效果；48 h的條件下，1∶25的魚水比有較好的運(yùn)輸效果。這說明在保證一定存活率的條件下，運(yùn)輸時間越長，則需要的水的比例就越大。內(nèi)在原因可能由于氧氣不足和水質(zhì)敗壞所致。在實驗過程中注意到運(yùn)輸24 h以上復(fù)蘇后發(fā)現(xiàn)魚體腹部表面和側(cè)面有明顯的擦傷痕跡,在實際運(yùn)輸中應(yīng)盡量縮短運(yùn)輸時間。運(yùn)輸后死亡的魚體幾乎都是缺氧窒息而死，這可能是由于在密封式不換水條件下隨著時間的推移，容器內(nèi)溶氧含量越來越低，受試動物可能為了滿足身體代謝對氧的需求而增大呼吸頻率，從而導(dǎo)致氧通量增加[18]。所以在實際運(yùn)輸過程中可以通過加入化學(xué)藥物增氧劑、降低溫度等方法進(jìn)一步提高存活率。

在敞口容器運(yùn)輸方式中麻醉運(yùn)輸有更好的效果,任潔等[19]在敞口容器中用MS-222麻醉運(yùn)輸草魚、鰱魚和團(tuán)頭魴的存活率分別提高25%、83%和81%，而在尼龍袋充氧運(yùn)輸方式中，由于該方法已經(jīng)能保證較高的存活率，故使用后效果稍遜。尼龍袋充氧運(yùn)輸適用于名貴水產(chǎn)品長途運(yùn)輸，配備冷藏車效果更佳，但由于其在運(yùn)輸過程中排污不便以及容易被刺破漏氣等缺點(diǎn)，只適合小批量魚的運(yùn)輸。

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Effect of MS-222 on the anesthetic results and simulated transportation in hybrid juvenile sturgeon

WANGHao-long，XUHong，ANMiao*，TIANMao-wei，LUOHui-zhong

(InstituteofAnimalScience,GuizhouUniversity,Guiyang,Guizhou550025,China)

Abstract:In order to toinvestigate the effect of MS-222 on the anesthetic results and simulated transportation in hybrid sturgeon, using the method of dipping anesthesia, we studied its anesthetic effect on hybrid juvenile sturgeon [Siberian sturgeon (Acipenser baerii) (♀) × Amur sturgeon (Acipenser schrenckii) (♂)] in different concentrations and under different temperatures. We also simulated the sealed transportation test. The results showed that: at the water temperatures of 17℃, 20℃, 23℃ and 26℃, the effective anesthetic concentrations of MS-222 on hybrid sturgeon were 30.89 mg/L ～ 42.13 mg/L, 31.15 mg/L ～ 45.12 mg/L, 38.45 mg/L ～ 54.52 mg/L and 49.02 mg/L ～ 60.53 mg/L, respectively. With the increase of MS-222 concentrations, the time required for the hybrid sturgeon to enter the anesthesia state decreased, while the time required for their recovery increased. There was a tendency that, with the water temperature decreasing, the anesthesia time for the hybrid juvenile sturgeon decreased and the recovery time extended. At 22℃ ± 0.5℃ temperature and 40 mg/L concentration, the best transportation effect for the narcotic transport 12h was achieved in the fish to water ratio of 1:8; the best for the narcotic transport 24h was in the fish to water ratio of 1:15; the more appropriate transportation effect for the narcotic transport 48h was in the fish to water ratio of 1:25. Our experiments indicated that MS-222 does have a good effect on the anesthesia and recovery of hybrid jevenile sturgeon and the optimal concentration is 40 mg/L ～ 50 mg/L. While ensuring a higher survival rate during transportation is important, the amount of water used in the sealed bags can be optimised to reduce the transport costs.

Key words:hybrid sturgeon; MS-222; anesthesia; transport

文章編號：1008-0457(2016)01-0040-05國際DOI編碼：15958/j.cnki.sdnyswxb.2016.01.009

中圖分類號：S965.3;Q959 .486

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

基金項目：貴州大學(xué)SRT計劃項目(2014125號)。通訊作者：安苗(1970-)，男，碩士，副教授，主要研究方向：水生動物增養(yǎng)殖與魚類種質(zhì)資源的研究；Email：gzuam@163.com。

收稿日期：2015-12-11；修回日期：2016-01-15