高玉峰

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028007)

施灸赫依三穴對(duì)失眠模型大鼠鎮(zhèn)靜催眠作用機(jī)理研究

高玉峰

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028007)

以蒙醫(yī)灸療法為處理因素，探尋施灸赫依三穴對(duì)睡眠紊亂模型大鼠行為學(xué)及腦組織神經(jīng)細(xì)胞因子的影響。方法：將50只大鼠分為空白、模型、頂會(huì)穴、赫依穴、黑白際穴等5組，每組10只，空白與模型組大鼠經(jīng)腹腔注射對(duì)氯苯丙胺酸(PCPA)使大鼠睡眠節(jié)律紊亂，頂會(huì)穴、赫依穴、黑白際穴組分別施灸相應(yīng)穴位。觀察各組大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉后的睡眠時(shí)間。檢測大鼠腦組織NO與NOS含量。結(jié)果：(1)各組大鼠對(duì)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間比較：治療后與模型組比較空白組和治療組均有顯著性差異(P<0.05)；(2)各組大鼠腦組織中NO含量和NOS活性比較:與模型組比較空白對(duì)照組、頂會(huì)穴組和赫依穴組均有顯著性差異(P<0.05)，黑白際穴組無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論：施灸赫依三穴對(duì)睡眠紊亂模型大鼠具有鎮(zhèn)靜催眠作用，頂會(huì)穴與赫依穴可能是通過抑制腦組織一氧化氮合酶(NOS)誘導(dǎo)產(chǎn)生過量的一氧化氮(NO)，降低神經(jīng)細(xì)胞的興奮性，起到神經(jīng)保護(hù)作用，黑白際穴組對(duì)腦組織中NO與NOS無影響，可能是通過其他途徑起到神經(jīng)調(diào)節(jié)作用。

蒙醫(yī)灸療；赫依三穴；鎮(zhèn)靜催眠作用；機(jī)理研究

失眠是指患者對(duì)睡眠時(shí)間或質(zhì)量不滿足并影響白天社會(huì)功能的一種主觀體驗(yàn)。失眠會(huì)引起人的全身不適、疲勞感、不安、無精打采，反應(yīng)遲緩、記憶力不集中等癥狀，它的最大影響是精神方面的，嚴(yán)重一點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致精神分裂。現(xiàn)如今，失眠癥的發(fā)生率逐年增高，我國失眠障礙患者比例已超過20%。因睡眠質(zhì)量問題導(dǎo)致的多種社會(huì)問題及事故發(fā)生幾率較睡眠正常人高出2倍。

在市場上治療失眠癥的藥物諸多?？诜魉庪m能迅速入眠，但容易成依賴或成癮。因此人們?cè)絹碓阶非髠鹘y(tǒng)醫(yī)學(xué)治療失眠癥的方法[1]。

灸法是蒙醫(yī)傳統(tǒng)“五療”的重要內(nèi)容之一。蒙醫(yī)灸法是以蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，經(jīng)過長期的、大量的臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)積累而形成的一種獨(dú)特的非藥物療法。是在人體各部相關(guān)的固定穴位或不定穴位上通過“灼熱”或“溫?zé)帷贝碳ざ_(dá)到調(diào)節(jié)氣血、增強(qiáng)體質(zhì)、防治疾病和保健的目的[2]。該法具有適應(yīng)范圍廣，療效卓著，見效快，復(fù)發(fā)率低，副作用小，經(jīng)濟(jì)方便等優(yōu)點(diǎn)。對(duì)失眠癥、健忘癥、消化不良、胃火衰敗、浮腫、癲狂等多中疾病療效顯著[3]。

赫依三穴是指頂會(huì)穴(位于從兩眉正中，往上劃一線，再從兩耳葉上緣正中往上劃一線，此二線在頭頂之交叉處便是，即中醫(yī)之百會(huì)穴)、赫依穴(位于第七頸椎棘突與第一胸椎棘突間隙窩中。即中醫(yī)之大椎穴)、黑白際穴(位于兩乳正中對(duì)直的心窩處，即中醫(yī)之膻中穴。)等3個(gè)穴位。臨床上針灸該3個(gè)穴位對(duì)赫依偏盛引起的疾病(如失眠癥)有較好的療效[3]。

該實(shí)驗(yàn)研究中我們以蒙醫(yī)灸療法為處理因素，選取赫依三穴作用于失眠伴焦慮模型大鼠，對(duì)其療效機(jī)理加以驗(yàn)證，為今后的機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。為臨床辯證施治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料：采用健康級(jí)Wister大鼠50只,體重180± 20g，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(吉)2011-0004。藥物：對(duì)氯苯丙胺酸(PCPA),由北京環(huán)亞太克生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司提供，批號(hào)：sigma—c6506。NOS與NO試劑盒：上海瀘尚生物科技有限公司提供。艾灸貼(蘇州東方艾絨廠出品)直徑約4mm，長約1cm，灸墊厚度為2mm。

1.2 方法：購買Wister大鼠后在飼料充足、無干擾的正常睡眠狀態(tài)下飼養(yǎng)3d。稱重后隨機(jī)分為空白組、模型組、頂會(huì)穴組、赫依穴組、黑白際穴組等5組，每組10只。治療組與模型組：將PCPA用生理鹽水配置成混懸液(45mg/100g)，腹腔注射PCPA 混懸液(1mL/100g)，每日1次，連續(xù)注射2d；空白對(duì)照組常規(guī)喂養(yǎng)；當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)毛皮枯槁，舉肢、理毛、走動(dòng)次數(shù)明顯，不能安臥等外部特征與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4],即造模成功。治療組：d3起開始施灸，按參考文獻(xiàn)[5，6]記載在大鼠頂會(huì)穴、赫依穴、黑白際穴剪去穴位周圍鼠毛，進(jìn)行施灸，每次行3個(gè)艾灸貼，時(shí)間5min,共施灸7d?？瞻捉M和模型組d3開始按程序抓取不施灸，連續(xù)7d。

1.3 指標(biāo)檢測：于末次灸療1h后，每組大鼠分別給予戊巴比妥鈉40 mg/kg，腹腔注射。記錄大鼠的睡眠時(shí)間(以翻正反射消失為入睡時(shí)間，從翻正反射消失至恢復(fù)時(shí)間為睡眠持續(xù)時(shí)間)。之后將各組大鼠斷頭處死，即刻剝離出腦組織備用。腦組織中NO與NOS含量測定分別依據(jù)NOS與NO的測定試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，結(jié)果用±S表示，兩組間資料比較采用單因素方差分析，以P<0.05為差異有顯著性意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)大鼠戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響：模型組與空白組比較，模型組大鼠睡眠時(shí)間短(P<0.05)。模型組和3個(gè)治療組間比較，3個(gè)治療組大鼠的睡眠時(shí)間均延長(P<0.05)，見表1。

表1 治療后大鼠對(duì)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間的影響

注:模型組與空白組比較，◆P<0.05；與各治療組比較●P<0.05，●●P<0.05，●●●P<0.05；

2.2 對(duì)大鼠腦組織中NO與NOS的影響：各組大鼠腦組織中NO含量和NOS活性比較: 模型組和空白對(duì)照組之間有顯著性差異(P<0.05)。與模型組比較頂會(huì)穴組和赫依穴組均有顯著性差異(P<0.05)，黑白際穴組無明顯差異(P>0.05)，見表2

表2 對(duì)大鼠腦組織中NO與NOS的影響

注:與空白組比較，◆P<0.05；與模型組比較，●P<0.05，●●P<0.05，●●●P>0.05

3 討論

蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為失眠的主要原因是因赫依與血相搏而導(dǎo)致的，按三根病變說，赫依偏盛紊亂是其基本原因；就發(fā)病部位講，失眠多合并于心、腎病、腦、神經(jīng)病等。因語境行為過度、委屈或興奮、憤怒、急躁等精神刺激、饑餓狀態(tài)下過度勞累、飲食營養(yǎng)和熱能缺乏、年老而心體素衰弱，導(dǎo)致赫依偏盛，與血交搏，侵入心、主脈、神經(jīng)、白脈，導(dǎo)致其功能紊亂而發(fā)病。而施灸赫依三穴具有抑赫依，疏通赫依與血之運(yùn)行路、促進(jìn)白脈傳導(dǎo)、寧心安神的功效。在臨床實(shí)踐中也證明了針灸赫依三穴對(duì)赫依偏盛引起的疾病有較好的療效[7]。

NO既參與神經(jīng)細(xì)胞間的信息傳遞過程，又參與多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程。NO在體內(nèi)由NOS催化而產(chǎn)生。由于NO是性質(zhì)活潑的氣體，因此人們多通過NOS合酶來反映NO的含量[8] [9]。NO在神經(jīng)系統(tǒng)的活動(dòng)中起重要作用，NO增多具有神經(jīng)毒性作用[10]。因此,探尋NO、NOS與失眠癥的關(guān)系具有一定的臨床意義。

本課題通過觀察施灸赫依三穴對(duì)睡眠紊亂模型大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉后睡眠時(shí)間的影響及大鼠腦組織中NO含量和NOS活性比較。進(jìn)一步驗(yàn)證了灸療法的鎮(zhèn)靜催眠作用 ，為進(jìn)一步機(jī)理研究提供了行為學(xué)依據(jù)。

[1]張鵬，鼓建偉．中醫(yī)療法消除運(yùn)動(dòng)性失眠的研究進(jìn)展[J]．中醫(yī)藥信息雜志，2014，31(6)：129.

[2] 蒙古學(xué)百科全書總編輯委員會(huì)．蒙古學(xué)百科全書(醫(yī)學(xué))[M]．內(nèi)蒙古人民出版社，2012，7：137.

[3] 蒙古學(xué)百科全書編輯委員會(huì)．蒙古學(xué)學(xué)百科全書(醫(yī)學(xué))[M]．內(nèi)蒙古人民出版社，2012，7：43.

[4] 李艷琴．實(shí)驗(yàn)性腦損傷中腦組織NO含量、NOS活性的改變及意義[J]．南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2012，32(6)：500.

[5]陳英松．蒙醫(yī)實(shí)驗(yàn)療術(shù)學(xué)[M]．內(nèi)蒙古大學(xué)出版社,2008.

[6]斯欽圖,于天源.蒙醫(yī)灸療法抗衰老二三穴組穴配伍規(guī)律實(shí)驗(yàn)研究[J]．世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2010，12(6)：976-980.

[7]策·蘇榮扎布.蒙醫(yī)內(nèi)科學(xué)[M]．內(nèi)蒙古民族出版社，1986，490-491.

[8]劉學(xué)松，安方玉，等.當(dāng)歸多糖對(duì)衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及NO、NOS表達(dá)水平的影響[J].中醫(yī)醫(yī)學(xué), 2013，26(5)：75.

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[10]白麗敏，李亞東.神經(jīng)解剖學(xué)[M]．中國中醫(yī)藥出版社，2003，8：190-191.

2016年 8月17日收稿

1.內(nèi)蒙古自然基金項(xiàng)目(2012MS1114)；2.國家自然基金項(xiàng)目(81460762)3.內(nèi)蒙古自治區(qū)衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)醫(yī)療衛(wèi)生科研計(jì)劃項(xiàng)目(201301077)

高玉峰(1979-)，男(蒙古族)，內(nèi)蒙古興安盟人，副主任醫(yī)師。E-mail：hubaolige@126.com

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