魯君艷 姜志剛 黃靈芝 廖慧芳

[摘要] 目的 了解高危型人乳頭瘤病毒（HPV）在永州地區(qū)婦女中的感染情況及亞型分布。 方法 采用酶切信號(hào)放大法對(duì)2013年8月～2015年7月在本院婦科門診就診的1904例婦女宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行高危型HPV DNA基因分型檢測(cè)。 結(jié)果 1904例婦女高危型HPV陽性檢出率為21.11%（402/1904），在各年齡組中以56～65歲組婦女感染率最高，為28.68%，有部分婦女是雙重感染或三重感染。 結(jié)論 高危型HPV的檢測(cè)可早期發(fā)現(xiàn)宮頸病變，降低宮頸癌的發(fā)病率。

[關(guān)鍵詞] 人乳頭瘤病毒（HPV）；基因分型；雙重感染；宮頸癌

[中圖分類號(hào)] R440；R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2016）06-0091-02

Analysis of Yongzhou 1904 cases of human papillomavirus infection in women

LU Junyan JIANG Zhigang HUANG Lingzhi LIAO Huifang

Department of Clinical Laboratory， Yongzhou Central Hospital of South Hospital in Hunan Province，Yongzhou 425100，China

[Abstract] Objective To investigate the infection and subtypes distributions of high-risk human papillomavirus（HPV） among women in Yongzhou area. Methods A total of 1904 women in gynecology clinic，were emloyed，then their cervical exfoliated cells were harvested to detected high-risk HPV DNA genotyping by enzyme signal amplification method from August 2013 to July 2015 in our hospital. Results In 1904 cases，the positive rate of high-risk HPV were 21.11%（402/1904）. In the age grouping， 56-65 age group displayed the highest infection ratewhich was 28.68%. Some women showed double or triple infection. Conclusion The detection of high-risk HPV is helpful to the early cervical disease detection of ，and the reduction of the incidence of cervical cancer.

[Key words] Human papillomavirus（HPV）； Genotyping； Dual infection； Cervical cancer

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是強(qiáng)嗜上皮性、雙股環(huán)型無包膜、嚴(yán)格宿主范圍與組織特異性的 DNA 病毒。高危型HPV的持續(xù)感染是引發(fā)宮頸上皮內(nèi)瘤變以及宮頸癌的主要病原學(xué)因素[1]，高危型HPV DNA檢測(cè)是宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌篩查的重要手段。本研究利用一種特定核酸序列的信號(hào)放大方法，對(duì)1904例門診婦科就診婦女宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行高危型HPV檢測(cè)，初步了解永州地區(qū)婦女高危型HPV感染率及型別分布情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源

1904例受檢者為2013年8月～2015年7月在本院婦科門診就診的婦女。受檢者年齡16～72歲，受檢對(duì)象均無子宮頸或子宮切除史。行常規(guī)婦科檢查，以窺陰器暴露宮頸口，用消毒棉拭子將子宮頸口的分泌物拭去，然后用專用的宮頸刷沿宮頸口順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)5周取出，放入20 mL專用細(xì)胞保存液中，做好標(biāo)記，立即送檢。

1.2 儀器與試劑

北京英碩力科技有限公司HPV-DNA提取試劑盒、亞能生物熱循環(huán)擴(kuò)增儀、BioTek FLx800 熒光分析儀。

1.3 操作方法

采用酶切信號(hào)放大法檢測(cè)，是一種定量的體外診斷試驗(yàn)方法，可以檢測(cè)出14種國(guó)際癌癥研究署（IARC）指定的高危型HPV亞型，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66與68型HPV。本檢測(cè)法提供的試劑是三種寡核苷酸的混合物，14種依種系聯(lián)系相關(guān)分組的HPV，如相近DNA序列的病毒亞型（A5/A6、A7、A9HPV組）。A5/A6組包括51、56、66型HPV，A7組包括18、39、45、59、68型HPV，A9組包括16、31、33、35、52、58型HPV。操作按試劑盒說明書提取樣本DNA后，進(jìn)行熱循環(huán)擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行熒光分析檢測(cè)。

1.4 結(jié)果判斷

檢測(cè)信號(hào)對(duì)噪音比值FOZ（Fold-Over-Zero）（測(cè)量的標(biāo)本信號(hào)比目標(biāo)對(duì)照反應(yīng)孔信號(hào)），參考值的評(píng)價(jià)基于預(yù)先規(guī)定的臨床檢出≥CIN2的靈敏度目標(biāo)，是先前在分析靈敏度研究中定義的靠近參考值的值?；诖藰?biāo)準(zhǔn)，三種反應(yīng)混合物產(chǎn)生的HPV FOZ比值≥1.525，則樣本為HPV陽性，若HPV FOZ比值<1.525，但三個(gè)獨(dú)立反應(yīng)的FOZ值均>1.93，則樣本為HPV陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用Excel 2003對(duì)所檢測(cè)HPV亞型在不同年齡段中的感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。應(yīng)用SPSS18.0對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 1904例宮頸脫落細(xì)胞三組HPV亞型感染率檢測(cè)結(jié)果

見表1。1904例樣本檢出陽性例數(shù)402例，總陽性檢出率為21.11%（402/1904），陽性檢出率最高的高危型HPV是A9組，其次是A7組，A5/A6組檢出率最低。

表1 1904例宮頸脫落細(xì)胞三組HPV亞型感染率檢測(cè)結(jié)果

2.2 402例HPV陽性感染分布情況

402例HPV陽性例數(shù)中單一亞型分組感染101例，占65.7%，雙重亞型分組感染26例，占16.8%，三重亞型分組感染27例，占17.5%。

2.3 1904例婦女各年齡段HPV感染率

見表2。HPV感染率在不同年齡段是有差異的，16～25歲組較高，然后26～35歲組、36～45歲組逐漸降低，到46～55歲、56～65歲兩組感染率最高，66～72歲組則有所下降。感染率最高的56～65歲組與最低的26～35歲組、36～45歲組三組之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

表2 1904例婦女各年齡段HPV感染率

注：*χ2=25.154，P<0.01

3討論

宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤，發(fā)病率居女性惡性腫瘤第二。高危型HPV持續(xù)感染是引起宮頸上皮內(nèi)瘤變以及宮頸癌的主要病因，臨床證明在宮頸病變女性中高危型HPV 感染率達(dá)38.83%[2]，宮頸癌病例中高危型HPV感染率達(dá)95.0%～99.7%[3]。

HPV在不同地域的感染率有明顯差異，文獻(xiàn)報(bào)道HPV全球感染率約10%，亞洲感染率約8%[4]，而國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道HPV檢出率也有地域差異，其中沈陽地區(qū)高危型HPV檢出率16.9%[5]，武漢地區(qū)高危型HPV檢出率12.57%[6]，?？诘貐^(qū)HPV高危型檢出率10.82%[7]，廣州地區(qū)HPV高危型檢出率14.2%[8]，成都地區(qū)高危型HPV檢出率16.96%[9]，杭州地區(qū)高危型HPV檢出率12.8%[10]，這可能與各地選擇的患者范圍或檢測(cè)方法等有所不同，各地衛(wèi)生條件不同等具地域差異。本地區(qū)高危型HPV檢出率為22.11%，比其他地區(qū)要高，可能由于研究對(duì)象是婦科門診就診患者，不是健康體檢篩查者，也可能跟本地區(qū)經(jīng)濟(jì)較落后，婦女衛(wèi)生意識(shí)、個(gè)體的衛(wèi)生狀況差，孕次數(shù)多、分娩次數(shù)、流產(chǎn)次數(shù)多等有關(guān)。本地區(qū)亞型感染的主要型別是以HPV16型為代表的 A9組高危型HPV亞型，在402例HPV陽性例數(shù)中單一亞型分組感染101例，占65.7%，雙重亞型分組感染26例，占16.8%，三重亞型分組感染27例，占17.5%。

各年齡段HPV感染分布情況，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，HPV的感染隨著年齡的增長(zhǎng)呈“U”形分布[10]，即青年、老年感染率高，而中年感染率相對(duì)低，在本研究中，本地區(qū)受檢婦女HPV感染率在16～25歲組稍高，26～35歲較低，46～65歲最高?？赡苁?6～25歲組女性過早涉及性生活，衛(wèi)生防護(hù)意識(shí)差，且宮頸上皮修復(fù)的功能尚未成熟，當(dāng)性生活過早過頻時(shí)，其感染率相對(duì)增加[11]，26～45歲女性感染率相對(duì)較低，其原因可能是此年齡段的婦女機(jī)體免疫力強(qiáng)，生活穩(wěn)定，有一定的免疫應(yīng)答能力，感染處在抑制狀態(tài)[12]，感染率低。隨著年齡增大，女性激素水平發(fā)生變化，機(jī)體免疫力下降，易發(fā)生感染。因此，普及兩性性知識(shí)教育，加強(qiáng)女性衛(wèi)生保健意識(shí)，進(jìn)行針對(duì)性預(yù)防干預(yù)，如建議使用避孕套可有效降低感染率[14]。

70%～80%婦女在一生中都有可能感染HPV，而其中90%的婦女可通過自身免疫力將HPV清除[15]，只有少數(shù)人會(huì)呈持續(xù)感染狀態(tài)，成為患宮頸癌的高風(fēng)險(xiǎn)因素。婦女從HPV的最初感染到宮頸癌的發(fā)生一般需要5～10年，在此期間采取正確的防治措施，可預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。因此，對(duì)本地區(qū)婦女進(jìn)行高危型HPV感染的檢測(cè)，對(duì)早期發(fā)現(xiàn)宮頸病變、降低宮頸癌的發(fā)病率，具有重要意義。

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（收稿日期：2015-12-16）