任玉合 王殿振 賀曉龍 王美琪 劉年強(qiáng) 劉月芹

摘 要：本試驗(yàn)通過對(duì)北蟲草前期生長條件的一致調(diào)控，研究不同照光時(shí)間處理對(duì)北蟲草轉(zhuǎn)色、原基形成及子實(shí)體生長的影響。結(jié)果表明：菌絲體轉(zhuǎn)色及原基形成期，每天照光16h，轉(zhuǎn)色及原基形成效果好；子實(shí)體生長期，每天照光12h，子實(shí)體質(zhì)量好、產(chǎn)量高。

關(guān)鍵詞：照光時(shí)間；北蟲草；生殖生長

中圖分類號(hào)：S567.3+5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20160431015

北蟲草是北冬蟲夏草的簡稱，也叫蛹蟲草或蛹草，屬于子囊菌門，盤菌亞門，糞殼菌綱，肉座菌目，麥角菌科，蟲草屬。它具有保肺、益腎、止血、化痰等功效，可作為強(qiáng)壯劑、鎮(zhèn)靜劑，用于虛癆病后的虛弱癥、肺結(jié)核吐血、老人虛弱的慢性咳喘、盜汗、貧血等癥。北蟲草的人工栽培研究目前主要集中在培養(yǎng)基配方以及溫度、光照強(qiáng)度等培養(yǎng)條件的優(yōu)化方面，對(duì)照光時(shí)間的研究很少，筆者以大米培養(yǎng)基為基質(zhì)進(jìn)行了照光時(shí)間對(duì)北蟲草生殖生長的影響研究，旨在為完善北蟲草生殖生長時(shí)光照時(shí)間的規(guī)范化調(diào)控，為提高人工培養(yǎng)北蟲草的產(chǎn)量與質(zhì)量提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株

C-1，由延安大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院食用菌實(shí)驗(yàn)室提供。

1.1.2 供試材料

葡萄糖，磷酸二氫鉀，硫酸鎂，酵母膏，維生素B1等藥品均為分析純；大米、蔗糖、玉米粉、土豆等均為市售。

1.1.3 儀器設(shè)備

超凈工作臺(tái)，高壓鍋，干燥箱，振蕩器，電子天平，培養(yǎng)箱，人工氣候箱等常用儀器及三角瓶、皮筋、牛皮紙、蟲草栽培盒、接種噴槍等耗材。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 活化

將保藏試管母種從冰箱取出，放入22℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，備用。

1.2.2 搖瓶菌種的制備

培養(yǎng)基配方：去皮土豆200g、葡萄糖20g、酵母膏10g、磷酸二氫鉀0.5g、pH自然、玉米粉6g、硫酸鎂0.3g、水1000mL。

培養(yǎng)基常規(guī)制備，制備好后裝入150mL的三角瓶，每瓶裝入50mL，于121℃、0.12MPa壓力下滅菌30min，冷卻后進(jìn)行無菌檢驗(yàn)，備用。

將活化好的母種在無菌條件下接入培養(yǎng)基中，室溫下靜置1d后，于22℃、210r/min的搖床中培養(yǎng)1d作為試驗(yàn)前培養(yǎng)，然后在20℃、180r/min的搖床中繼續(xù)培養(yǎng)5d，待出現(xiàn)細(xì)小的菌絲球時(shí)停止培養(yǎng)，備用。

1.2.3 栽培培養(yǎng)基的制備

每盒按大米50g，水65mL，蔗糖0.5g，維生素B1 0.2g裝好后封口靜置浸泡5h，在121℃、0.12MPa壓力下滅菌120min，冷卻后取出備用。

1.2.4 接種與培養(yǎng)

在無菌條件下將制備的搖瓶菌種用無菌水稀釋5倍，每盒接入5 mL菌液，再將接好種的栽培盒置于23℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，定期檢查發(fā)菌情況，連續(xù)培養(yǎng)至發(fā)滿菌。

1.2.5 生殖生長培養(yǎng)與觀察

將發(fā)滿菌的蟲草栽培盒移至人工氣候箱內(nèi)，溫度及濕度分別設(shè)置為21℃和60%RH，試驗(yàn)設(shè)置每日照光時(shí)間12h、14h、16h、18h和20h 5個(gè)處理水平，每個(gè)水平7個(gè)平行試驗(yàn)觀察對(duì)象，以每日不同光照時(shí)間的處理觀察記錄菌絲轉(zhuǎn)色的情況，及原基形成情況。

原基形成后再進(jìn)行照光處理試驗(yàn)，先對(duì)轉(zhuǎn)色及原基形成時(shí)設(shè)置的5個(gè)水平的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，得出較優(yōu)的轉(zhuǎn)色及原基形成時(shí)的照光處理時(shí)間，在此基礎(chǔ)上再考慮其子實(shí)體生長特性，設(shè)置每日光照時(shí)間8h、10h、12h、14h和16h的5個(gè)處理水平進(jìn)行試驗(yàn)，同樣每個(gè)水平7個(gè)平行試驗(yàn)觀察對(duì)象，觀察記錄每日不同光照時(shí)間的處理對(duì)子實(shí)體生長狀況的影響，從而分析得出較優(yōu)的生殖生長期每日光照時(shí)間組合調(diào)控方案。（整個(gè)子實(shí)體生長階段控制生長溫度在20±1℃、濕度在85%RH-95%RH，每天通風(fēng)2次，每次通風(fēng)20～30min）

上述過程均重復(fù)3次，每次重復(fù)取其平均值作為結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 光照時(shí)間對(duì)北蟲草菌絲轉(zhuǎn)色及原基形成的影響

每日光照時(shí)間對(duì)北蟲草菌絲轉(zhuǎn)色及原基形成的影響結(jié)果見表1。由表1可知，每日不同光照時(shí)間對(duì)北蟲草菌絲轉(zhuǎn)色及原基形成的影響存在明顯差異；其中轉(zhuǎn)色各自呈現(xiàn)出不同程度的黃色，每日照光12h時(shí)所需的轉(zhuǎn)色時(shí)間最長，達(dá)到了5.2d，伴隨日照光時(shí)間的增長，轉(zhuǎn)色時(shí)間有縮短的趨勢，在日照光時(shí)間達(dá)到16h時(shí)所需轉(zhuǎn)色時(shí)間最短，之后日照光時(shí)間延長使其轉(zhuǎn)色程度加深，轉(zhuǎn)色周期也有所延長。

。

2.2 光照時(shí)間對(duì)北蟲草子實(shí)體生長的影響

光照時(shí)間對(duì)北蟲草子實(shí)體生長的影響，結(jié)果見表2。由表2可知，在北蟲草子實(shí)體生長時(shí)期每日照光12h時(shí)出草所需時(shí)間最少，產(chǎn)量與質(zhì)量最高，色澤金黃，每日照光10h時(shí)產(chǎn)量較高，但其粗壯程度和整齊程度不如每日照光14h時(shí)的效果，每日照光8h和16h時(shí)其產(chǎn)量和質(zhì)量都相對(duì)最差，且出草所需時(shí)間也較長。

2.3 光照時(shí)間對(duì)北蟲草生物轉(zhuǎn)化率的影響

光照時(shí)間對(duì)北蟲草生物轉(zhuǎn)化率的影響，結(jié)果見表3。由表3可知，日光照時(shí)間12h與其他各個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間的差異達(dá)極顯著水平；日光照10h與14h的處理組的生物轉(zhuǎn)化率差異達(dá)顯著水平，日光照14h與16h處理的生物轉(zhuǎn)化率差異顯著，而日光照14h與8h，8h與16h處理的生物轉(zhuǎn)化率分別差異不顯著，日光照10h與8h、10h與16h處理的生物轉(zhuǎn)化率分別差異極顯著；從而結(jié)合表2中其他各項(xiàng)統(tǒng)計(jì)的性狀情況綜合考慮，可以得出北蟲草子實(shí)體生長階段每日光照12h時(shí)能使其子實(shí)體生長達(dá)到產(chǎn)量和質(zhì)量上有同步明顯提高，且所需要生長時(shí)間最短；每日光照10h與14h使其子實(shí)體生長的生物轉(zhuǎn)化率較低，質(zhì)量與光照12h的處理組有差距，且耗時(shí)較長；而每日光照8h與16h處理所得效果相對(duì)最差，不適合這一時(shí)段北蟲草生長對(duì)光照的需求。

3 結(jié)果與討論

通過對(duì)北蟲草前期生長條件的一致調(diào)控，使其在生殖生長時(shí)基本處于同一水平，然后分階段以相同的光照強(qiáng)度，不同的光照時(shí)間進(jìn)行光照處理，可以看出北蟲草在其生殖生長時(shí)對(duì)光照的需求隨著其生長程度不同而不同，在菌絲轉(zhuǎn)色和原基形成時(shí)需要較長時(shí)間充足的光照，用以菌絲體正常良好的轉(zhuǎn)色和健壯均勻原基的形成，這樣才有益于接下來子實(shí)體均勻良好的生長；而在子實(shí)體生長時(shí)其對(duì)光照的需求有所減少，光照量對(duì)其質(zhì)量及出草時(shí)間和產(chǎn)量都有直接的影響，生物轉(zhuǎn)化率的顯著性分析也證實(shí)了北蟲草在子實(shí)體生長時(shí)每日光照12h可以達(dá)到較高的生物轉(zhuǎn)化率。

在試驗(yàn)相同的條件下北蟲草在生殖生長階段中，前期的轉(zhuǎn)色和原基形成時(shí)需要每日光照16h，后期的子實(shí)體生長時(shí)需要每日光照12h，這樣的光照調(diào)控組合使得其質(zhì)量和產(chǎn)量都同步達(dá)到最好，生產(chǎn)的效率也相對(duì)大為提高。關(guān)于光照的影響當(dāng)中光照強(qiáng)度、光質(zhì)的對(duì)應(yīng)影響等都有待進(jìn)一步去探究。

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