趙衛(wèi)衛(wèi) 侯朝暉 陳冰 任力 朱建平

[摘要] 目的 分析骨橋蛋白（OPN）在侵入性胎盤和正常胎盤組織中的表達(dá)差異，探討其在侵入性胎盤發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法 選取2014年1月～2015年10月在中國(guó)人民解放軍空軍總醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的單胎晚期妊娠68例產(chǎn)婦的胎盤組織為研究對(duì)象，將其中正常妊娠產(chǎn)婦的胎盤組織34例作為對(duì)照組，侵入性胎盤疾病產(chǎn)婦的胎盤組織34例作為研究組，其中胎盤粘連26例（胎盤粘連組），胎盤植入8例（胎盤植入組）。采用免疫組化EnVision二步法檢測(cè)所有胎盤組織中OPN蛋白表達(dá)水平；采用SYBR Green PCR方法檢測(cè)所有標(biāo)本中OPN mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果 OPN蛋白在胎盤粘連組、胎盤植入組和對(duì)照組胎盤組織中的陽性表達(dá)率分別為73.07%、75.00%、35.29%。胎盤粘連組和胎盤植入組OPN蛋白陽性表達(dá)率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；胎盤植入組與胎盤粘連組OPN蛋白陽性表達(dá)率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。胎盤粘連組中OPN mRNA表達(dá)較對(duì)照組上調(diào)1.36倍，而胎盤植入組OPN mRNA表達(dá)較對(duì)照組上調(diào)了1.21倍。 結(jié)論 胎盤組織中OPN表達(dá)升高可能與侵入性胎盤疾病的發(fā)生有關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 骨橋蛋白；侵入性胎盤；粘連性胎盤；植入性胎盤

[中圖分類號(hào)] R339.22 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2016）03（b）-0080-04

[Abstract] Objective To investigate the role in thepathogenesis of placenta accrete through analyzing the expression differences of osteoponin （OPN） in the tissues of placenta accrete and normalplacenta. Methods Sixty-eight cases of placenta tissues of the third trimester pregnant women delivering in Department of Gynecology and Obstetrics of Air Force General Hospital from January 2014 to October 2015 were chosen as the research objects. 34 cases of placenta tissues from normal pregnancy women were taken as the control group and 34 cases of placenta tissues from pregnant women with placenta accrete were taken as the research group， of which including 26 cases of placenta adhesion （placenta adhesion group） and 8 cases of placenta increta （placenta increta group）. The protein expressions of OPN in all placenta tissues were measured by EnVision immunohistochemistry. The mRNA expression of OPN in all placenta tissues were detected through SYBR Green PCR method. Results The positive rates of OPN protein expression in the placenta adhesion group， placenta increta group and control group were 73.07%， 75.00%， 35.29% respectively. The positive rates of OPN protein expression in the placenta adhesion group and placenta increta group were both significantly higher than the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. There was no statistically significant difference between placenta increta group and placenta adhesion group （P > 0.05）. The mRNA expression of OPN in placenta adhesion group increased 1.36 times compared with the control group； and the mRNA expression of OPN in placenta increta group increased 1.21 times compared with control group. Conclusion High expression of OPN in tissues of placenta may be related to the pathogenesis of placenta accrete.

[Key words] Osteoponin； Placenta accrete； Placenta Adhesion； Placentaincreta

侵入性胎盤是由于胎盤種植部位子宮內(nèi)膜缺損或者發(fā)育不良，導(dǎo)致胎盤絨毛直接種植在子宮肌層甚至深入肌層的病理現(xiàn)象[1]，是導(dǎo)致產(chǎn)后出血極為嚴(yán)重的并發(fā)癥。根據(jù)絨毛侵入子宮肌層的深度分為粘連性胎盤、植入性胎盤和穿透性胎盤[2]。目前我國(guó)剖宮產(chǎn)率居高不下，計(jì)劃外妊娠人工流產(chǎn)不斷增加，“普遍二胎”制度放開，妊娠伴子宮創(chuàng)傷史的孕婦會(huì)越來越多，侵入性胎盤疾病的發(fā)生率也將隨之上升。據(jù)統(tǒng)計(jì)，近年來我國(guó)侵入性胎盤的發(fā)病率占所有妊娠的0.4%～1.93%[3]。侵入性胎盤疾病發(fā)病隱蔽，胎盤娩出前不易被發(fā)現(xiàn)，處理起來被動(dòng)棘手，因此該疾病越來越受到人們的關(guān)注。骨橋蛋白（osteoponin，OPN）是一種細(xì)胞外介質(zhì)，可以與整合素受體αvβ3特異性結(jié)合，從而發(fā)揮細(xì)胞間黏附、細(xì)胞遷移以及細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用[4]。目前對(duì)于OPN與侵入性胎盤疾病發(fā)生關(guān)系的報(bào)道極為少見，本研究采用免疫組化EnVision二步法和SYBR Green PCR方法檢測(cè)晚孕期侵入性胎盤組織中OPN的表達(dá)情況，從而初步探討OPN在侵入性胎盤發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月～2015年10月在空軍總醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩的單胎晚期妊娠孕婦共68例，其中正常妊娠孕婦胎盤組織34例作為對(duì)照組，發(fā)生侵入性胎盤疾病孕婦胎盤組織34例作為研究組，其中包括胎盤粘連26例（胎盤粘連組），胎盤植入8例（胎盤植入組）。參照Gielchinshey等[5]在2002年提出的侵入性胎盤的診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除合并妊娠期高血壓、妊娠期糖尿病、圍生期心肌病及胎膜早破等病史的孕婦。經(jīng)過孕婦同意，并經(jīng)相關(guān)醫(yī)學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，收集部分產(chǎn)后胎盤組織進(jìn)行檢測(cè)。三組孕婦年齡、妊娠次數(shù)及孕齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。見表1。

1.2 標(biāo)本采集

產(chǎn)婦胎盤娩出后迅速取胎盤母面粘連或植入部位的胎盤組織2～3塊，正常胎盤選取中間帶部位，避開出血、壞死、鈣化的地方，每塊大小1.0 cm×1.0 cm×1.0 cm，用生理鹽水沖洗，置于4%多氯甲醛中固定24 h后，自來水沖洗，酒精梯度脫水，二甲苯透明，最后石蠟包埋制成蠟塊，用于免疫組化和SYBR Green PCR實(shí)驗(yàn)。

1.3 免疫組織化學(xué)EnVision二步法檢測(cè)胎盤組織OPN蛋白表達(dá)水平

每例標(biāo)本取石蠟切片2張，EnVision二步法免疫組織化學(xué)染色。主要步驟：石蠟切片60℃烤片機(jī)過夜；二甲苯脫蠟2次，每次5 min；100%酒精、95%酒精、85%酒精、75%酒精、雙蒸水各5 min，水化；盛有pH 6.0乙二胺四乙酸液（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）的高壓鍋中高溫抗原修復(fù)2 min；3%過氧化氫溶液中10 min，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶；磷酸緩沖鹽（PBS）液沖洗后，滴加一抗即兔抗人OPN單克隆抗體（1∶150，北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司），37℃孵育60 min；PBS液沖洗，滴加二抗（DAKO公司），室溫孵育30 min；PBS液沖洗，使用二氨基聯(lián)苯胺溶液（DAKO公司）顯色，自來水沖洗；蘇木精復(fù)染，1%的鹽酸酒精分化，1%氨水中返藍(lán)；75%酒精、85%酒精、95%酒精、100%酒精脫水各3 min；二甲苯溶液透明，中性樹膠封片。用一抗稀釋液替代一抗進(jìn)行陰性對(duì)照，反應(yīng)呈陰性。

1.4 免疫組化結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

參照Shimizu法[6]，每張切片在顯微鏡下觀察隨機(jī)選擇5個(gè)高倍鏡視野，計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。根據(jù)陽性細(xì)胞在全部組織細(xì)胞中所占的百分比以及陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度進(jìn)行半定量評(píng)分。陽性細(xì)胞占總細(xì)胞百分比評(píng)分：<25%為0分；25%～50%為1分；>50%～75%為2分；>75%為3分。染色強(qiáng)度評(píng)分：不著色為0分；黃色為1分；棕色為2分；棕褐色為3分。根據(jù)以上兩項(xiàng)評(píng)分之和進(jìn)行判斷：0分為陰性（-）；1～2分為弱陽性（+）；3～4分為中度陽性（++）；5～6分為強(qiáng)陽性（+++）。

1.5 SYBR Green PCR方法檢測(cè)胎盤組織中OPN mRNA表達(dá)水平

分別取5 μm厚石蠟切片5片，使用HiPure FFPE RNA Plus Kit試劑盒（Magen公司）提取RNA。使用核酸測(cè)定儀（Merinton公司）檢測(cè)并記錄提取樣品RNA濃度，計(jì)算OD260/OD280比值。比值為1.80～2.00，說明純度符合要求；低于1.80說明存在蛋白質(zhì)污染，需要重新提取RNA。使用M-MLV First Strand cDNA Synthesis Kit試劑盒（Omega公司）反轉(zhuǎn)錄cDNA。選用GAPDH作為內(nèi)參指標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)化目的基因結(jié)果，校正不同樣本間RNA純度和逆轉(zhuǎn)錄效率的差異。最后取2×RT2 SYBR Green Mastermix 10 μL、RNase-Free Water 4 μL、上下游引物各1 μL、cDNA 4 μL配成20 μL體系，每例樣品均設(shè)4個(gè)平行重復(fù)孔。簡(jiǎn)單離心后置于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（美國(guó)BIO-RAD）中，并設(shè)定程序：95℃ 10 min，1次；95℃ 15 s，60℃ 1 min，循環(huán)40次，進(jìn)行擴(kuò)增。所有步驟均按照相關(guān)說明書嚴(yán)格執(zhí)行。引物由迪納興科公司設(shè)計(jì)合成，引物序列見表2。

1.6 SYBR Green PCR結(jié)果處理

由于Ct值指從基線到指數(shù)增長(zhǎng)的拐點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的循環(huán)次數(shù)，是指數(shù)關(guān)系，而不是線性關(guān)系，不能用t檢驗(yàn)或者方差分析等的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。因而將原始Ct值轉(zhuǎn)換為2-Ct，從而達(dá)到線性關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)采用Ct值法（2-ΔΔCt）對(duì)SYBR Green PCR結(jié)果進(jìn)行相對(duì)定量分析。2-ΔΔCt表示實(shí)驗(yàn)組目的基因表達(dá)相對(duì)于對(duì)照組變化的倍數(shù)。計(jì)算公式：ΔΔCt=（Ct目的基因-Ct內(nèi)參基因）研究組-（Ct目的基因-Ct內(nèi)參基因）對(duì)照組[7]。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組胎盤組織中OPN蛋白表達(dá)情況

OPN蛋白在侵入胎盤組和對(duì)照組胎盤組織中均有表達(dá)，其免疫反應(yīng)陽性產(chǎn)物為棕褐色顆粒狀或點(diǎn)狀，主要定位于胎盤絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿和胞膜中，絨毛間質(zhì)和毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中也有大量表達(dá)。侵入性胎盤組OPN蛋白表達(dá)較對(duì)照組細(xì)胞數(shù)量多，著色深。高倍鏡下觀察胎盤植入組胎盤組織中OPN蛋白表達(dá)與胎盤粘連組并無明顯差異，見圖1（封三）。OPN在胎盤粘連組、胎盤植入組和對(duì)照組胎盤組織中表達(dá)的陽性率分別為73.07%、75.00%、35.29%。胎盤粘連組、胎盤植入組標(biāo)本中OPN蛋白陽性表達(dá)率均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。而胎盤植入組與胎盤粘連組標(biāo)本中OPN蛋白陽性表達(dá)率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見表3。

2.2 SYBR Green PCR檢測(cè)結(jié)果

OPN mRNA在在兩組胎盤組織中均有表達(dá)，經(jīng)2-ΔΔCt法分析后可知：胎盤粘連組中OPN mRNA表達(dá)較對(duì)照組上調(diào)1.36倍，而胎盤植入組OPN mRNA表達(dá)較對(duì)照組上調(diào)了1.21倍。

3 討論

OPN是一種分泌型磷酸化糖蛋白，分子量為25～75 kU，含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp，RGD）特殊結(jié)構(gòu)域。RGD特殊結(jié)構(gòu)域是OPN發(fā)揮多種生物學(xué)功能的重要結(jié)構(gòu)，可以與整合素受體αvβ3結(jié)合[8]，從而發(fā)揮細(xì)胞間黏附、細(xì)胞遷移以及細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用。OPN廣泛存在于多種組織、體液和細(xì)胞中，包括骨、軟骨、血液、尿液、乳汁、白細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等[9]。OPN在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[10-11]、免疫調(diào)節(jié)[12]以及損傷修復(fù)[13]中的作用已經(jīng)得到公認(rèn)。劉能輝等[14]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，OPN在圍植入期小鼠子宮內(nèi)膜中有表達(dá)，且隨孕齡增加而表達(dá)增強(qiáng)。殷莉等[15]通過免疫組化和RT-PCR方法研究發(fā)現(xiàn)OPN mRNA和蛋白在婦女種植期子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)明顯升高，在早孕蛻膜和絨毛組織中表達(dá)進(jìn)一步升高，推測(cè)OPN可能與種植窗開放和胚胎著床有關(guān)。Von Wolff等[16]的研究發(fā)現(xiàn)，OPN mRNA在妊娠6～9周的蛻膜組織也有表達(dá)，是分泌期的1.5倍。推測(cè)OPN與妊娠密切相關(guān)，可能參與受精、胚胎著床、胎盤形成、母胎界面黏附、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及母胎免疫調(diào)節(jié)等生殖的全過程[17]。

正常的妊娠的建立需要胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞黏附、侵入并固定在蛻膜樣變的子宮內(nèi)膜上。滋養(yǎng)細(xì)胞屬于上皮細(xì)胞，是胎盤的主要細(xì)胞，具有侵襲功能，這種功能與腫瘤細(xì)胞極為相似而又不同。滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲行為受時(shí)間和空間的嚴(yán)格限制，這是滋養(yǎng)細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的主要區(qū)別[18]。滋養(yǎng)細(xì)胞的分化和侵襲能力決定胎盤能否正常發(fā)育。而胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲行為受到細(xì)胞因子、細(xì)胞外基質(zhì)蛋白以及黏附分子的共同調(diào)控作用，相互制約平衡，一旦平衡被打破，就可能造成滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲不足或者過度侵襲，從而發(fā)生各種病理妊娠[19]。Batorfi等[20]研究證實(shí)葡萄胎中OPN蛋白和mRNA水平的表達(dá)均明顯降低。薛涵等[21]研究發(fā)現(xiàn)稽留流產(chǎn)患者絨毛和蛻膜組織中OPN表達(dá)低于正常人流組。秦晨等[22]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)自然流產(chǎn)組小鼠絨毛和蛻膜組織中OPN的表達(dá)明顯低于正常妊娠組織。夏俊霞等[23]研究證實(shí)，OPN在子癇前期患者胎盤組織中低表達(dá)，滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力下調(diào)，導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞淺浸潤(rùn)，子宮螺旋動(dòng)脈重鑄失敗，胎盤淺著床。推測(cè)OPN在胎盤組織中的低表達(dá)可能導(dǎo)致葡萄胎、流產(chǎn)、子癇前期等疾病。

本研究結(jié)果顯示，OPN在正常妊娠和侵入性胎盤組織中均有不同程度表達(dá)。OPN主要定位于胎盤絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿和胞膜中，間質(zhì)和毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中也有表達(dá)。OPN蛋白在粘連性胎盤、植入性胎盤胎盤組織中表達(dá)的陽性率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；胎盤植入組OPN蛋白陽性表達(dá)率與胎盤粘連組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。胎盤粘連組OPN mRNA較對(duì)照組上調(diào)了1.36倍，而胎盤植入組OPN mRNA較對(duì)照組上調(diào)了1.21倍。據(jù)此推測(cè)，OPN在侵入性胎盤組織中高表達(dá)，滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力上調(diào)，導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲過度，胎盤侵入甚至穿透子宮肌層，從而導(dǎo)致侵入性胎盤的發(fā)生。但是OPN具體是如何作用使滋養(yǎng)侵襲力上調(diào)導(dǎo)致侵入性胎盤發(fā)生的機(jī)制尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。本研究中植入性和胎盤粘連組織中OPN表達(dá)差異并無顯著性，可能為樣本數(shù)量較少所致，有待擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。本研究為侵入性胎盤的發(fā)生機(jī)制提供參考依據(jù)，臨床上能否以O(shè)PN為突破點(diǎn)，預(yù)測(cè)和預(yù)防侵入性胎盤疾病的發(fā)生，仍需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Ryan GL，Quinn TJ，Syrop CH，et al. Placenta accrete postpartum [J]. Obstet Gynecol，2002，100（5 Pt 2）：1069-1072.

[2] 戴鐘英.胎盤植入的命名、發(fā)生率及病因[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2008，24（12）：705-707.

[3] 劉艷，趙琳，羅遠(yuǎn)材，等.前置胎盤、胎盤粘連及胎盤植入的臨床病理分析[J].中國(guó)婦幼保健，2015，30（11）：1660-1663.

[4] Kim S，Shin T. Immunohistochemical study of osteopontin in boartestis [J]. J Vet Sci，2007，8（2）：107-110.

[5] Gielchinsky Y，Rojansky N，F(xiàn)asouliotis SJ，et al. Placenta accrete-summary of 10 years：a survey of 310 cases [J]. Placen，2002，28（2）：210-214.

[6] Laicuori H，Kaaja R，Koistine H，et al. Leptin during and after preeclampsia or normal pregnancy：its relation to serum insulin and insulin sensitivity [J]. Metabolism，2000， 49（2）：259-263.

[7] 顏露春.TLR-4，HBD-2及TNF-α在子癇前期胎盤組織中的表達(dá)及相關(guān)性研究[D].南寧：廣西醫(yī)科大學(xué)，2010.

[8] Ahmed M，Kundu GC. Osteopontin selectively regulates p70S6K/mTOR phosphorylation leading to NF-kappaB dependent AP-1-mediated 1 CAM-1 expression in breast cancer cells [J]. Mol Cancer，2010，9：101.

[9] 徐琛，李紅霞.骨橋蛋白表達(dá)與卵巢癌紫杉醇耐藥相關(guān)性臨床研究[J].中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志，2015，（6）：531-533.

[10] Bandiera E，Zanotti L，F(xiàn)abricio AS，et al. Cancer antigen 125，human epididymis 4，kallikrein 6，osteopontin and soluble mesothelin-related peptide immunecomplexed with immunoglobulin M in epithelial ovarian cancer diagnosis [J]. Clin Chem Lab Med，2013，51（9）：1815-1824.

[11] Rafal M，Sebastian S，Dariusz S，et al. Role of osteopontin in differential diagnosis of ovarian tumors [J]. Obstet Gynaecol，2013，39（11）：1518-1525.

[12] Liang KH，Yeh CT. OPN sesame [J]. Hepatobiliary Surg Nutr，2014，3（3）：112-114.

[13] Dabiri G，Heiner D，F(xiàn)alanga V. The emerging use of bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the treatment of human chronic wounds [J]. Expert Opin Emerg Drugs，2013，18（4）：405-419.

[14] 劉能輝，周昌菊.骨橋蛋白（OPN）在圍植入期小鼠子宮內(nèi)膜中的表達(dá)[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（25）：18-23.

[15] 殷莉，鐘剛.骨橋蛋白在人子宮內(nèi)膜、早孕蛻膜和絨毛中的表達(dá)及意義[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2007，16（9）：670-675.

[16] Von Wolff M，Bohlmann MK，F(xiàn)iedler C，et al. Osteopontin is upregulated in human decidual stromal cells [J]. Fertil Steril，2004，81（Suppl 1）：741-748.

[17] Briese J，Oberndorfer M，Patschenik C，et al. Osteopontin is colocalized with the adhesion molecule CEACAM1 in the extravillous trophoblast of the human placenta and enhances invasion of CEACAM1-expressing placental cells [J]. J Clin Endocrinol Metab，2005，90（9）：5407-5413.

[18] Patan S. Vasculogenesisand angiogenesis [J]. Cancer Treat Res，2004，（117）：3-32.

[19] 劉艷.侵入性胎盤的發(fā)病原因及病理學(xué)、分子生物學(xué)特征[J].山東醫(yī)藥，2015，55（35）：100-102.

[20] Batorfi J，F(xiàn)ulop V，Kim JH，et al. Osteopontin is down-regulated in hudatidiformmole [J]. Gynecol Oncol，2003，89（1）：134-139.

[21] 薛菡，陳梅.骨橋蛋白在稽留流產(chǎn)疾病中的表達(dá)[J].廣東微量元素科學(xué)，2015，22（9）：26-29.

[22] 秦晨.survivin和OPN在自然流產(chǎn)孕鼠模型胎盤組織中的表達(dá)[J].中國(guó)優(yōu)生優(yōu)育，2013，19（6）：453-455.

[23] 夏俊霞，喬福元，蘇放明，等.整合素αvβ3在子癇前期患者胎盤組織中的表達(dá)及意義[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2011，40（3）：310-314.

（收稿日期：2015-12-10 本文編輯：任 念）