季艷菊王林川（.惠州工程技術(shù)學(xué)?！V東惠州　56000；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院　廣州　50642）

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番鴨三種細(xì)小病毒野毒株試驗(yàn)感染雛鴨的臨床癥狀及解剖病理變化差異研究

季艷菊1王林川2＊
（1.惠州工程技術(shù)學(xué)校廣東惠州516000；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院廣州510642）

摘要番鴨“三周病”、細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”和小鵝瘟是雛番鴨常見的三種細(xì)小病毒病，對番鴨養(yǎng)殖業(yè)危害較為嚴(yán)重。本文對從廣東惠州及周邊地區(qū)病死番鴨中分離鑒定的1株番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”病毒、1株小鵝瘟病毒和1株番鴨“三周病”病毒分別感染健康雛番鴨，將發(fā)病的臨床癥狀、病理學(xué)變化進(jìn)行對比，從而為基層獸醫(yī)工作者提供三種番鴨細(xì)小病毒病臨床鑒別、初步診斷更加直觀的依據(jù)。

關(guān)鍵詞番鴨細(xì)小病毒試驗(yàn)感染臨床癥狀解剖病理變化差異

Clinical symptoms and anatomical pathology difference of muscovy ducklings experimentally infected by three wild parvovirus

Ji Yanju1 Wang Linchuan2*
(1.Huizhou Engineering and Technology School,Huizhou Guangdong 516000; 2.South China Agricultural University,Guangzhou 510642)

Abstract Muscovy "three weeks" disease,parvovirus type "white spot disease" and gosling plague are three common muscovy ducklings parvovirusis,which led to serious harm and much economic loss in muscovy duck industry.In this paper,a muscovy duck parvovirus type "white spot disease" virus,a gosling plague virus and a muscovy "three weeks" disease virus were isolated and identified from dead muscovy duck in Guangdong Huizhou and the surrounding area.The virus to infect healthy young muscovy ducks,respectively.The onset of clinical symptoms and pathological changes were compared in order to provide more intuitive basis of clinical differential diagnosis of three muscovy duck parvovirusis for initial grassroots veterinary workers.

Key words Parvovirus of muscovy duck experimental infection clinical symptoms anatomical pathology difference

番鴨“三周病”，是由雛番鴨細(xì)小病毒引起幼齡番鴨發(fā)病的一種新的番鴨疫病。該病曾被認(rèn)為小鵝瘟，1980年我國研究發(fā)現(xiàn)屬于細(xì)小病毒科、細(xì)小病毒屬的一個(gè)新成員[1]。番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”于2003年華南農(nóng)業(yè)大學(xué)禽病教研室研究發(fā)現(xiàn)由鴨細(xì)小病毒單獨(dú)引起，并屬于新型的番鴨細(xì)小病毒[2-4]。小鵝瘟主要感染雛鵝，近十多年，臨床研究發(fā)現(xiàn)雛番鴨也感染小鵝瘟[5]。番鴨“三周病”、小鵝瘟、番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”病原均屬于細(xì)小病毒。

目前，該三種番鴨細(xì)小病毒病，在臨床上常有發(fā)生，是嚴(yán)重危害番鴨飼養(yǎng)業(yè)的傳染病。其發(fā)病日齡相差不大，發(fā)病率及病死率較高，常在同一地區(qū)流行，并且時(shí)有存在混合感染，其剖檢變化常易混淆，造成臨床上初步鑒別診斷難度很大。本文以從養(yǎng)殖一線分離并鑒定過的三種番鴨細(xì)小病毒分別人工試驗(yàn)感染健康雛番鴨，對臨床癥狀及病理變化進(jìn)行差異分析，以便于基層獸醫(yī)工作者更加明確地對三種番鴨細(xì)小病毒病進(jìn)行臨床鑒別及初步診斷。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1病原均從廣東惠州及周邊地區(qū)病死番鴨分離純化及PCR鑒定后保存[6-8]。番鴨“三周病”、細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”和小鵝瘟的分離野毒暫分別命名為MDPV1501、MDWNV1501、GPV1501。

1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1日齡雛番鴨購自博羅某番鴨孵化場，種番鴨均未免疫過“白點(diǎn)病”、小鵝瘟及番鴨“三周病”疫苗。

1.2.3試劑PBS緩沖液（pH 7.3）：NaCl 8.0 g，KCl 0.2 g，Na2HPO4·12H2O 2.9 g，KH2PO40.2 g加雙蒸水至1 000 mL，高壓滅菌，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4器械1 mL一次性注射器、剪刀、鑷子等。

1.2方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)將1日齡健康雛番鴨20羽分為A、B、C、D四組，每組5羽分別放于不同籠中飼養(yǎng)，置于不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)室，做好有效的生物安全隔離，定期環(huán)境消毒。

1.2.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的攻毒將分離純化并鑒定的番鴨“三周病”野毒MDPV1501、細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”野毒MDWNV1501和小鵝瘟GPV1501野毒，用一次性注射器經(jīng)腿外側(cè)肌肉注射分別接種到A、B、C三組1日齡健康雛番鴨中，0.5 mL/羽（均為野毒接種番鴨胚，致死胚后收集的尿囊液），同時(shí)D組5羽設(shè)為空白對照組，注射PBS 0.5 mL/羽。

1.2.3攻毒后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的觀察記錄攻毒后，對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物持續(xù)觀察30 d，記錄臨床發(fā)病癥狀情況，并對死亡鴨當(dāng)天及時(shí)解剖，觀察病理變化情況。

2　試驗(yàn)結(jié)果

2.1臨床發(fā)病癥狀

2.1.1番鴨“三周病”野毒試驗(yàn)感染臨床發(fā)病癥狀攻毒后第3 d，有4羽出現(xiàn)食欲不振、精神萎頓、羽毛松亂；第4 d，5羽均出現(xiàn)張口呼吸困難、排白色或淡綠色水樣糞便，同時(shí)飲欲增加；第5 d，3羽死亡；至第7 d全部死亡。

2.1.2番鴨小鵝瘟野毒試驗(yàn)感染臨床發(fā)病癥狀攻毒后第3 d，有3羽出現(xiàn)食欲不振、精神萎頓；第4 d，5羽均出現(xiàn)張口呼吸、排黃白色或淡黃綠色水樣糞便，同時(shí)飲欲增加；第5 d，2羽死亡；至第7 d全部死亡，死亡鴨喙和蹼均發(fā)紺。

2.1.3番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”野毒試驗(yàn)感染臨床發(fā)病癥狀攻毒后第4 d，有2羽出現(xiàn)精神萎頓、羽毛松亂，擠堆，不食或少食；第5 d，3羽均出現(xiàn)排綠色或白色水樣糞便，飲欲增加；第7 d，3羽死亡；至第30 d死亡4羽。

2.2剖檢病理變化對攻毒番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”、“三周病”和小鵝瘟的死亡番鴨進(jìn)行剖檢，三種細(xì)小病毒感染死亡后的剖檢病理變化情況如下（以下為普遍的組織病變）。

2.2.1番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”剖檢病理變化肝臟均出現(xiàn)明顯的針尖狀大小的白色壞死點(diǎn)；脾臟呈現(xiàn)紫黑色，也伴有針尖狀大小的白色壞死點(diǎn)；腸道均有明顯的白色壞死小灶。見圖1-圖2。

2.2.2番鴨“三周病”剖檢病理變化腸道出現(xiàn)卡他性炎癥，并有不同程度的充血、出血，尤其以十二指腸和直腸明顯；肝臟稍微腫大、出血；胰臟充血、出血。見圖3-圖5。

2.2.3番鴨小鵝瘟剖檢病理變化腸道病變較為明顯，腸道黏膜不同程度充血、出血；腸道外觀腫脹，特別小腸中、后段整片腸黏膜壞死脫落，與纖維素性滲出物凝固形成特征性栓子或假膜，包裹在腸內(nèi)容物表面，形似臘腸，質(zhì)地較為堅(jiān)硬，堵塞腸腔。腎臟出血，略腫大；肝臟略腫大，輕微出血。見圖6-圖8。

3　討論

3.1臨床發(fā)病癥狀差異通過對動(dòng)物攻毒試驗(yàn)臨床癥狀結(jié)果分析，發(fā)現(xiàn)番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”、番鴨“三周病”及番鴨小鵝瘟的發(fā)病日齡很相似，攻毒3～4 d后發(fā)病，臨床潛伏期相近，4日齡左右都可出現(xiàn)臨床癥狀，而且都表現(xiàn)為以腹瀉和喘氣為特征的急性傳染病，發(fā)病越早，死亡率越高，1周齡以內(nèi)發(fā)病的雛鴨呈急性型，患鴨表現(xiàn)出不食、張口呼吸、排水樣糞便時(shí)，很快便衰竭而死，感染三種病后，病死率均很高。

因此，雛番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”、“三周病”及小鵝瘟三種細(xì)小病毒病，在臨床發(fā)病表現(xiàn)的外在癥狀上很相似，單純從臨床表現(xiàn)癥狀和發(fā)病特點(diǎn)不易區(qū)分。

3.2解剖病理變化差異通過對攻毒后死亡番鴨解剖病理變化結(jié)果分析，發(fā)現(xiàn)番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”、番鴨“三周病”及番鴨小鵝瘟均有嚴(yán)重的腸道炎癥和病變。不同在于：“白點(diǎn)病”為腸道均有明顯的白色壞死小灶；“三周病”腸道表現(xiàn)為不同程度的充血、出血，尤其以十二指腸和直腸明顯；小鵝瘟則表現(xiàn)腸道外觀腫脹，特別小腸中、后段整片腸黏膜壞死脫落，與纖維素性滲出物凝固形成特征性栓子或假膜，包裹在腸內(nèi)容物表面，形似臘腸，質(zhì)地較為堅(jiān)硬，堵塞腸腔，與雛鵝小鵝瘟具有特征性的剖檢變化即臘腸狀栓子（臘腸糞的變化）相似。另外，細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”還有不同于其他兩種細(xì)小病毒病的特征病變：肝臟均出現(xiàn)明顯的針尖狀大小的白色壞死點(diǎn)，脾臟呈現(xiàn)紫黑色，并伴有針尖狀大的白色壞死點(diǎn)。對于番鴨“三周病”和番鴨小鵝瘟，特征病變都出現(xiàn)在腸道，但區(qū)別在于前者尤以十二指腸和直腸明顯充血、出血為特征；后者以腸道外觀腫脹，特別小腸中、后段整片腸形成臘腸狀栓子為特征。

因此，雛番鴨細(xì)小病毒型“白點(diǎn)病”、“三周病”及小鵝瘟，在解剖病理變化上，雖然均出現(xiàn)腸道病變，但各病變間有差異有區(qū)別，有特征性的病變。

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通信作者：＊王林川（1965-），男，江西人。教授、博士。研究方向：畜禽疫病病原及其防控研究。

作者簡介：季艷菊（1980-），女，山東菏澤人。講師、在讀在職獸醫(yī)專業(yè)博士。研究方向：動(dòng)物疫病研究。weiran809@163.com。

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1003-4331（2016）02-0004-04