郭金喜，菅麗君，王霞

（新疆維吾爾自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院）

嬰幼兒配方乳粉中維生素B12的測(cè)量不確定度評(píng)定

郭金喜，菅麗君，王霞

（新疆維吾爾自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院）

在任何檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)結(jié)果都不是一個(gè)定數(shù)，人員、設(shè)備、時(shí)間不同，數(shù)據(jù)也有一定的變化。食品檢驗(yàn)也不例外，檢驗(yàn)數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確可靠，以前用相對(duì)偏差表示，隨著科學(xué)的發(fā)展，對(duì)數(shù)據(jù)有更高的要求，那就是不確定度。本文通過(guò)GB 5413.14-2010 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測(cè)定》測(cè)定乳粉中維生素B12含量不確定度的計(jì)算方法為例，根據(jù)實(shí)際情況，用德國(guó)拜法生產(chǎn)維生素B12的成品試劑盒對(duì)嬰幼兒配方乳粉中維生素B12進(jìn)行卵育，利用酶標(biāo)儀測(cè)定維生素B12含量的測(cè)量不確定度。建立酶標(biāo)法測(cè)定含量的數(shù)學(xué)模型，分析測(cè)量不確定度的來(lái)源并對(duì)各分量進(jìn)行量化分析和評(píng)估，合成標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量不確定度，給出擴(kuò)展測(cè)量不確定度報(bào)告。結(jié)果酶標(biāo)法測(cè)定維生素B12含量的擴(kuò)展測(cè)量不確定度為1.0%，測(cè)量結(jié)果表示為（98.4±1.0）%，k=2。結(jié)論分析產(chǎn)生不確定度的主要來(lái)源，為有效地控制該含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確性提供可靠的理論依據(jù)。

維生素B12；不確定度；嬰幼兒配方乳粉

1、測(cè)量問(wèn)題

與一般的測(cè)量相比較，樣品中VB12測(cè)量采用微生物方法檢測(cè)的特點(diǎn)導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果的發(fā)散往往較大。用常規(guī)的直接根據(jù)平均值得到標(biāo)準(zhǔn)偏差的方法顯得有些不合理。

通常的做法是取對(duì)數(shù)以后再用常規(guī)的貝塞爾方法進(jìn)行計(jì)算。

2、數(shù)學(xué)模型

由于測(cè)量結(jié)果發(fā)散極大，其他不確定度來(lái)源均忽略不計(jì)。本實(shí)驗(yàn)僅考慮由測(cè)量結(jié)果發(fā)散引入的不確定度分量。數(shù)學(xué)模型寫(xiě)為：y=x。

3、測(cè)量不確定度評(píng)定

實(shí)驗(yàn)方法描述：

以無(wú)菌操作稱取1.00g樣品，置于裝有40mL無(wú)菌水中，制成樣品基礎(chǔ)液。

根據(jù)待檢樣品VB12，選擇1；100的稀釋度。接種150微升樣品同時(shí)接種150微升培養(yǎng)基進(jìn)入檢測(cè)試劑盒每個(gè)孔中，連續(xù)接種10個(gè)孔。同時(shí)根據(jù)實(shí)際和說(shuō)明書(shū)制作VB12檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。將接種的檢測(cè)試劑盒置于37℃培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)48h，期間將檢測(cè)試劑盒正反輕輕拍打混勻一次。同一樣品重復(fù)測(cè)量10次 ，取稀釋度1:100平板酵母菌數(shù)作為測(cè)量結(jié)果。見(jiàn)表1。

表格 1 測(cè)量結(jié)果

3.1 不確定度計(jì)算

測(cè)量結(jié)果xi。見(jiàn)表2第2列。

表格 2 重復(fù)測(cè)量的計(jì)算過(guò)程

3.2 取對(duì)數(shù)lgxi,得出對(duì)數(shù)lgxi平均值為：1g X =0.6161

3.4 求殘差平方和(logxi-log)2。

見(jiàn)表2第5列，得到殘差平方和為

3.5 合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度

3.6 擴(kuò)展不確定度

由于置信概率P=95%，自由度ν=10-1,由t分布表可得k95=1.812。

3.7 取反對(duì)數(shù)，由lgx坐標(biāo)回到x坐標(biāo)

3.8 不確定度報(bào)告

嬰幼兒配方奶粉乳粉中VB12不確定度在2.92和5.82之間。

4、計(jì)算探討

通過(guò)這次分析：吸光度對(duì)結(jié)果影響最大，測(cè)量次數(shù)是關(guān)鍵，次數(shù)越多，不確定度越小。其次是樣品的重量，稱量值大，不確定度越小，所以樣品稱量時(shí)盡可能的大些。在不確定度的評(píng)定中，根據(jù)數(shù)學(xué)模型，首先要找出不確定度的因素，要考慮實(shí)驗(yàn)中所涉及的所有儀器、器材、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品等，分別計(jì)算出各個(gè)單體的不確定度，再合成總不確定度，最后通過(guò)計(jì)算得出結(jié)論。

1.葉德培.趙峰等,測(cè)量不確定度評(píng)定與表示.JJF1059—2012。國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布;

2. 倪育才.實(shí)用測(cè)量不確定度評(píng)定，中國(guó)計(jì)量出版社2007.7.

Evaluation of uncertainty in measurement of vitamin B12 in infant formula milk powder

GUO Jin-xi，Jian Li-jun，WANG Xia

In any test, the test results are not a fixed number, personnel, equipment, time is different, there are some changes in the data. Food inspection is no exception, Check whether the data is accurate and reliable, Previously expressed by relative deviation, With the development of Science, Have higher requirements for data, That is the degree of uncertainty. This article through GB 5413.14-2010《National food safety standards Determination of vitamin B12 in infant food and dairy products》Determination of vitamin B12 in milk powder content calculation method for the uncertainty as an example, The vitamin, infant formula milk powder in B12 eggs developed by German worship finished Kit Method for the production of vitamin B12, Determination of the uncertainty of vitamin B12 content by using the enzyme marker. A mathematical model for the determination of the content of enzyme labeled method was established. Synthetic standard uncertainty of measurement, Extended measurement uncertainty Report. Results the measurement uncertainty of the determination of vitamin B12 by enzyme method was 10%. Measurement results are expressed as（98.4±1.0）%，k=2. Conclusion the main sources of uncertainty are analyzed, To provide a reliable theoretical basis for the effective control of the accuracy of the method；

Vitamin B12；Uncertainty degree；nfant formula milk powder